新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治1ppt課件新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治

肆虐人類數(shù)千年的各類傳染病，隨著人類社會(huì)和科學(xué)的進(jìn)步，經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，有許多傳染病在一定程度上得到了有效控制，有的甚至被消滅或即將消滅，如：天花或脊髓灰質(zhì)炎、小兒破傷風(fēng)等。但好景不長。20世紀(jì)70年代后，因種種原因的影響，全球傳染病發(fā)病率再度回升，流行、爆發(fā)事件不斷，表現(xiàn)為：

①一批得到控制的傳染病死灰復(fù)燃—結(jié)核、霍亂、白喉、瘧疾等。

②又發(fā)現(xiàn)了數(shù)十種新的、甚至危害更大的病種。2ppt課件

所以在《1996年世界衛(wèi)生報(bào)告》中WHO

驚呼：“我們正處于一場傳染性疾病全球危機(jī)的邊緣，沒有一個(gè)國家可以躲避這場危機(jī)?！敝劣谶@場新傳染病所產(chǎn)生的嚴(yán)重后果，已是有目共睹，不可等閑視之。如：當(dāng)前流行的SARS，就是典型的例子。因此作為一名21世紀(jì)的醫(yī)學(xué)生，對新傳染病的知識(shí)應(yīng)有所了解。在學(xué)習(xí)與工作中不斷地認(rèn)識(shí)、探索對新發(fā)現(xiàn)地傳染病的更好地、針對性地防治方法。更好地履行作為一名醫(yī)生的天職。因此，借此機(jī)會(huì)與大家談?wù)劗?dāng)前對新發(fā)現(xiàn)的傳染病的發(fā)現(xiàn)和防治策略。3ppt課件1.新傳染病的出現(xiàn)及對策

歷史上，傳染病人類健康與生命的大敵。結(jié)果：傳染病千百萬人死亡，造成巨大的災(zāi)難。人類與傳染病斗爭20世紀(jì)中期取得巨大成績,

突出例子消滅天花脊灰、小兒破傷風(fēng)即將被消滅許多傳染病被控制:霍亂、結(jié)核許多人和醫(yī)學(xué)專家認(rèn)為：醫(yī)學(xué)已永遠(yuǎn)解決了傳染病問題。種種原因的影響：20世紀(jì)70年代全球新、舊傳染的雙重威脅。4ppt課件1.1.二十世紀(jì)70年代以來新出現(xiàn)及發(fā)現(xiàn)的傳染病

據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球新發(fā)現(xiàn)的傳染病有30多種，在我國存在或潛在的有20多種，是我們應(yīng)重視與警惕的。

表1

近30

年來新發(fā)現(xiàn)的主要病原體及所致疾病年份病原體所致疾病

1975細(xì)小病毒B19

5號(hào)病,慢性溶貧中的再障危象

1976隱孢子蟲隱孢子蟲病,急性小腸結(jié)腸炎

1977埃博拉病毒埃博拉出血熱

1977嗜肺軍團(tuán)菌軍團(tuán)病

1977漢灘病毒腎綜合征出血熱

1977空腸彎曲桿菌空腸彎曲菌腸炎

1977丁型肝炎病毒丁型肝炎

1980人嗜T淋巴細(xì)胞病毒Ⅰ型T細(xì)胞淋巴瘤白血病

1981金黃色葡萄球菌毒素中毒性休克綜合征5ppt課件年份病原體所致疾病1982大腸桿菌O157:H7

出血性結(jié)腸炎1982伯氏疏螺旋體萊姆病1982人嗜T淋巴細(xì)胞病毒Ⅱ型毛細(xì)胞白血病1983人免疫缺陷病毒(HIV)

艾滋病1983幽門螺旋桿菌消化性潰瘍病1986環(huán)孢子球蟲環(huán)形孢子蟲病1988人皰疹病毒6型(HHV-6)

突發(fā)性玫瑰疹1989查菲氏歐利希氏體人歐利希氏體病1989丙型肝炎病毒丙型肝炎1990戊型肝炎病毒戊型肝炎1992巴爾道氏體貓抓病,桿菌性血管瘤病1993O139群霍亂弧菌O139霍亂1994漢灘病毒分離株漢灘病毒肺綜合征6ppt課件年份病原體所致疾病1995庚型肝炎病毒庚型肝炎1996瘋牛病病原-朊病毒瘋牛病2002變異冠狀病毒SARS2003猴痘病毒

猴天花按新傳染病存在的歷史可分為三類:

第一類疾病本身已為人所知，但未被認(rèn)為是傳染病，近30年因發(fā)現(xiàn)病原體才被認(rèn)為是傳染病，如：T細(xì)胞淋巴瘤白血病、消化性潰瘍病、突發(fā)性玫瑰疹等。

第二類疾病在人間早已或可能存在，近30年才被發(fā)現(xiàn)和認(rèn)識(shí)，如：萊姆病、丙型、戊型肝炎等。7ppt課件

第三類疾病以往在人間不存在，確實(shí)是人類新出現(xiàn)的傳染病，如：艾滋病、O139霍亂等。

上述一、二類傳染病，尤其是第二類，在人間早已或可能早已存在但未被及時(shí)發(fā)現(xiàn)的重要原因之一是：這些傳染病在過去并沒有像現(xiàn)在這樣在人間大量的發(fā)生和流行，以致沒有受到人們的重視和注意。這些也可以視為新出現(xiàn)的傳染病。1.2.新傳染病發(fā)生的機(jī)理及影響因素1.2.1.新傳染病發(fā)生的機(jī)理

新傳染病出現(xiàn)的原因有二個(gè)：

①新的病原體被引入人群；8ppt課件

新病原體的來源：

a.人類已知傳染病病原體的變異株

O139型霍亂弧菌可能為埃爾托霍亂弧菌O基因突變的結(jié)果，或是非O1群霍亂弧菌獲得了毒力基因。

b.來源于環(huán)境中，特別是動(dòng)物中的病原體。漢灘病毒、伯氏疏螺旋體、歐利希氏體等新傳染病的病原體都是來自野生動(dòng)物。

②新的病原體能在新的人類宿主中確立及進(jìn)一步傳播。大多數(shù)新傳染病的發(fā)生過程：病原體人類疾病局限地區(qū)和孤立人群新地區(qū)與新人群巨大危害。9ppt課件1.2.2.影響新傳染病發(fā)生的因素

由機(jī)理可知，凡有助于使病原體引入人群或使之能在人群中確立并傳播的因素皆能影響新傳染病的發(fā)生。主要有六類因素：表2

影響新傳染病發(fā)生的因素因素特殊因素疾病例證

生態(tài)及農(nóng)業(yè)發(fā)展，水生態(tài)系統(tǒng)變化，砍伐森萊姆病(美國和歐洲，植樹造林)，漢灘環(huán)境變化林/植樹造林，洪水、干旱氣候變化。病毒肺綜合征(美國，93年氣候異常)。人口特征社會(huì)條件，人口增長和移民，戰(zhàn)爭、貧HIV的出現(xiàn)和傳播。與行為困，城市衰退，性行為，靜脈用藥。國際旅行和人及貨物的世界性交流，空中旅行。AIDS的擴(kuò)散，鼠源性漢灘病毒與O137商業(yè)活動(dòng)型霍亂的擴(kuò)散。技術(shù)和工業(yè)食物供應(yīng)全球化，食品包裝和加工的改溶血性尿毒綜合征(漢堡包中牛肉被E.

變，輸血及組織和器官移植，抗生素的coliO137:H7污染)，輸血相關(guān)性肝炎

廣泛使用。(丙肝、庚肝)。微生物變異由于環(huán)境的選擇造成微生物變異?；魜y弧菌O139的出現(xiàn)。公共衛(wèi)生措媒介控制，飲水凈化及消毒措施的失效隱孢子蟲病(美國，93年水廠過濾裝置施的失效失效)。10ppt課件1.3.如何面對新出現(xiàn)的傳染病1.3.1.充分認(rèn)識(shí)新傳染病的危害，提高防治新傳染病的自覺性新傳染病的危害世人皆知,典型例子有:

艾滋病-----正在全球流行.

SARS----正在我國流行。

92年發(fā)現(xiàn)的O139新型霍亂-----使南亞數(shù)十萬人發(fā)病,呈世界流行態(tài)勢.

埃博拉出血熱-----非洲局部,極高死亡率、世人驚恐.

萊姆病-----五大洲數(shù)十個(gè)國家發(fā)現(xiàn)，感染嚴(yán)11ppt課件重可致殘。總之，新傳染病對人類危害程度差異大，傳播廣，致死率高，易變?yōu)槁裕A(yù)后差，無效防治手段。所以，應(yīng)充分認(rèn)識(shí)提高警惕，采取積極對策，加大防治力度。

1.3.2.加強(qiáng)疾病監(jiān)測工作，提高監(jiān)測傳染病出現(xiàn)的能力

疾病監(jiān)測-----即連續(xù)不斷的監(jiān)視疾病發(fā)生發(fā)展動(dòng)態(tài)，并將有關(guān)信息告知衛(wèi)生行政部門公眾，以便及時(shí)采取措施。12ppt課件

實(shí)踐證明，任何一個(gè)國家和地區(qū)防御傳染病的一個(gè)重要武器就是其疾病監(jiān)測體系。如果疾病監(jiān)測系統(tǒng)能及時(shí)發(fā)現(xiàn)人群中新出現(xiàn)的癥狀和疾病將是極有意義的成績。因此，為能及時(shí)監(jiān)視和調(diào)查新出現(xiàn)的疾病和病原體，以及影響它們的因素，必須建立和健全各級(jí)、各類疾病監(jiān)測系統(tǒng)。并從人員設(shè)備、技術(shù)能力等方面予以保障，以提高監(jiān)測新傳染病出現(xiàn)的能力。1.3.3.加強(qiáng)新傳染病的應(yīng)用研究，將流行病學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)室研究相結(jié)合，以完善和優(yōu)化防治措施。13ppt課件

包括內(nèi)容：①改進(jìn)實(shí)驗(yàn)和流行病學(xué)研究技術(shù)，以快速鑒定新病原體和疾??；

②加快診斷試劑的研制、核準(zhǔn)和開發(fā)應(yīng)用；

③擴(kuò)大流行病學(xué)研究，闡明新傳染病的流行環(huán)節(jié)、特征和因素；

④加強(qiáng)疫苗研制，開展疫苗效果和免疫費(fèi)用-效益評(píng)價(jià)等等。1.3.4.制定預(yù)防和控制新傳染病的戰(zhàn)略，并確保實(shí)施。措施應(yīng)有：①促進(jìn)有關(guān)公共衛(wèi)生信息交流；14ppt課件

②加強(qiáng)公共衛(wèi)生設(shè)施以支持疾病監(jiān)測和防治計(jì)劃的實(shí)施；

③建立保障預(yù)防戰(zhàn)略實(shí)施所需的機(jī)制與協(xié)作等。2.發(fā)現(xiàn)新傳染病的策略和方法

面對層出不窮的新傳染病，及時(shí)發(fā)現(xiàn)，及時(shí)識(shí)別是進(jìn)行深入研究和做好防治工作的前提。回顧歷史，許多新傳染病的發(fā)現(xiàn)雖然細(xì)節(jié)不同，但識(shí)別原則及策略均相似。然而，隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步其策略方法也在不斷提高和發(fā)展。2.1.識(shí)別和確認(rèn)新傳染病的基本原則2.1.1.注意傳染病基本特征15ppt課件

確定一種新傳染病，必須符合傳染病基本特征。傳染病定義：傳染病是由病原微生物引起的能在人、動(dòng)物與動(dòng)物或動(dòng)物與人之間相互傳染的疾病。基本特征：

①傳染病的致病因子是活的病原微生物，任何傳染病都是由特異的病原體所引起。病原體種類：細(xì)菌、病毒、立克次氏體、螺旋體、真菌、原蟲等。病原體在長期的進(jìn)化過程中適應(yīng)了定居于16ppt課件人或其他宿主的一定組織或器官。

環(huán)境條件所以，病原體宿主發(fā)病帶菌(毒)

理論上，任何傳染病都應(yīng)能確定其病原體。事實(shí)上，應(yīng)用現(xiàn)代技術(shù)與方法，人類已知的傳染病也大都明確了其病原體。同時(shí)闡明傳染病病原體的新技術(shù)與方法也獲得了巨大進(jìn)展。

②傳染病能在宿主之間直接地或通過媒介物互相傳播，即有傳染性。17ppt課件

實(shí)際上，傳染病的傳播就是病原體更換宿主的過程，即病原體自感染的機(jī)體通過適當(dāng)?shù)耐窘?jīng)進(jìn)入另一易感者體內(nèi)造成感染的過程。其必須條件有三個(gè)：傳染源、傳播途徑、易感者。以上條件需同時(shí)存在、相互連接傳染病傳播。所以傳染病具有許多不同于非傳染病的流行病學(xué)特征，據(jù)此特征人們可以識(shí)別一種疾病是否傳染病。2.1.2.新傳染病的確定18ppt課件

新發(fā)現(xiàn)傳染病的定義：以前的醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)中從未以像現(xiàn)在的形式描述過的傳染病。實(shí)際上可分為兩類：

一類是，作為疾病本身無論過去是否存在，但未被識(shí)別，近30年才被發(fā)現(xiàn)并被確認(rèn)為傳染?。涣硪活?，疾病本身過去已被認(rèn)識(shí)，但未被認(rèn)為是傳染病，近30年來因發(fā)現(xiàn)其病原體才被認(rèn)為是傳染病。所以，據(jù)傳染病基本特征、結(jié)合人類確認(rèn)傳染病的歷史，確認(rèn)一種疾病是否新傳染病19ppt課件應(yīng)遵循以下基本原則：

①對于所觀察到的疾病能確認(rèn)為系一新的疾病實(shí)體，并能證實(shí)其具有傳染性，即可認(rèn)為是一新的傳染病。

在特異病原體被發(fā)現(xiàn)前，可據(jù)傳染性來確定。即先認(rèn)識(shí)傳染病，再發(fā)現(xiàn)病原體—天花、鼠疫、霍亂、結(jié)核、甲肝、乙肝等。近30年新發(fā)現(xiàn)的傳染病中有：丙肝、戊肝、萊姆病、軍團(tuán)病、人歐利希氏體病等。此外，腎綜合征出血熱也算，這是因?yàn)槠洳≡w是近30年才發(fā)現(xiàn)確定的，但該病實(shí)際上20ppt課件已有幾十年歷史。

②由于任何傳染病皆由其特異病原體所引起，因此,對于確認(rèn)為新傳染病的疾病應(yīng)能并應(yīng)當(dāng)確定其特異病原體。此一條雖不是確定傳染病先決條件，但卻是傳染病定性的終審一環(huán)。只有發(fā)現(xiàn)了病原體，才算完成對傳染病的定性認(rèn)識(shí)，也才能進(jìn)一步研究傳染病的特征和防治。

③對于已知的非傳染病，當(dāng)發(fā)現(xiàn)其系由某特異病原體(已知的或新發(fā)現(xiàn)的)所引起，并證明其有傳染性時(shí)，即可確定該病為新傳染病。21ppt課件

近30年發(fā)現(xiàn)的新傳染病中，就有部分原認(rèn)為是非傳染病。如：消化性潰瘍病，后發(fā)現(xiàn)其特異病原體——幽門螺旋桿菌，并證明其能傳播之后才確定為傳染病的。該病過去未被認(rèn)為是傳染病，原因是：其傳染性較不明顯，難以以傳染性來確定。2.1.3.確定傳染病病原體的原則

19世紀(jì)80年代,郭霍氏提出了確定某一微生物為某種疾病病原體的原則:

①通過分離和純化培養(yǎng)可以證明病原體在22ppt課件每個(gè)病例上都存在;

②在其他疾病的病人體內(nèi)沒有發(fā)現(xiàn)該病原體;

③該病原體一旦被分離出后,必須能在動(dòng)物中復(fù)制這種疾病;

④在所產(chǎn)生的實(shí)驗(yàn)疾病中必須能重新找到該病原體.。郭霍氏原則對于許多傳染病病原體的確認(rèn)是適宜的，但不完善,尤其是對那些無適宜敏感動(dòng)物模型即在體外難于分離培養(yǎng)的病原體來說,很難或不可能滿足上述原則。23ppt課件

因?yàn)槿魏渭膊《际怯赡撤N或某些病因引起，而流行病學(xué)活動(dòng)的主要任務(wù)之一就是探索病因。為此在郭霍氏原則基礎(chǔ)上，流行病學(xué)家發(fā)展提高了推斷疾病病因或因果關(guān)系的原則，主要有因果聯(lián)系的特異性、一致性、時(shí)間性、合理性、聯(lián)系強(qiáng)度、劑量反應(yīng)或生物學(xué)梯度以及實(shí)驗(yàn)根據(jù)等。現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，為探索和鑒定新的微生物提供了新的有較手段，特別是那些在目前不能或難以通過體外分離培養(yǎng)的傳染病病原體的發(fā)現(xiàn)，而核酸分離及分析技術(shù)是24ppt課件唯一可應(yīng)用的方法。目前應(yīng)用的技術(shù)有：免疫cDNA文庫篩選法

RDA技術(shù)兼并引物PCR技術(shù)隨機(jī)肽庫篩選技術(shù)技術(shù)特點(diǎn)：具體操作各不一樣，設(shè)法分離到病原體基因的部分核酸片段是其共同點(diǎn)，分析其序列后，以標(biāo)準(zhǔn)的基因游走技術(shù)獲得病原體的全基因序列。25ppt課件2.2.發(fā)現(xiàn)新傳染病的策略

從新傳染病的發(fā)現(xiàn)史，可知每種新傳染病的發(fā)現(xiàn)都是由臨床醫(yī)生、微生物學(xué)家、免疫學(xué)家及流行病學(xué)家等學(xué)科人員從不同角度共同工作的結(jié)果。其普遍規(guī)律性的東西對指導(dǎo)更快、更好地發(fā)現(xiàn)新傳染病疾病原體意義重大。2.2.1.

依靠臨床醫(yī)生及疾病監(jiān)測系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)疾病生的異?，F(xiàn)象及原因不明疾病的發(fā)生情況，并針對其建立專門的疾病監(jiān)測系統(tǒng)，并開展流行病學(xué)調(diào)查研究，是發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)新傳染病的最重要26ppt課件的途徑

機(jī)體患病看醫(yī)生原因不明現(xiàn)象,醫(yī)生應(yīng)提高警惕，細(xì)心追蹤觀察、及時(shí)報(bào)告。在此過程中，醫(yī)生應(yīng)樹立發(fā)現(xiàn)新傳染病的意識(shí)；對診斷不明的疾病有刨根問底的精神及良好的業(yè)務(wù)素質(zhì)；注意留存病人的標(biāo)本。完善及富有成效的疾病監(jiān)測系統(tǒng)對于發(fā)現(xiàn)新傳染病至關(guān)重要：一方面，通過已有的疾病監(jiān)測系統(tǒng)可及時(shí)地發(fā)現(xiàn)和收集到疾病發(fā)生的異常情況。27ppt課件

二是針對新認(rèn)識(shí)的疾病或疾病異常情況，通過建立專門的監(jiān)測系統(tǒng)，能較系統(tǒng)的收集到疾病發(fā)生情況信息。同時(shí)開展流行病學(xué)調(diào)查研究，以闡明疾病的流行特點(diǎn)、傳播環(huán)節(jié)、以確定是否為新傳染病。疾病監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查在發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)傳染病方面有獨(dú)特的優(yōu)勢。許多新傳染病的發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)都利用了這一手段，如：艾滋病、萊姆病、軍團(tuán)病、歐利希氏體病等。2.2.2.

現(xiàn)場流行病學(xué)研究與實(shí)驗(yàn)室研究相結(jié)合是28ppt課件發(fā)現(xiàn)、確定新傳染病病原體及闡明流行病學(xué)規(guī)律的關(guān)鍵

流行病學(xué)是探討病因的科學(xué)，就傳染病而言，流行病學(xué)調(diào)查可以或可能確定傳染病發(fā)生的危險(xiǎn)因素,但不可能查出最終的致病因子——病原體。必須借助的學(xué)科：微生物學(xué)、免疫學(xué)、分子生物學(xué)等實(shí)驗(yàn)研究手段來尋找病原體。反之，通過實(shí)驗(yàn)研究從病人或其他來源標(biāo)本找到的病原體，則必須通過流行病學(xué)研究來確定二者之間的因果關(guān)系。29ppt課件

因此，流調(diào)與實(shí)驗(yàn)結(jié)合可以互相補(bǔ)充不足，共同提高。

2.2.3.

傳統(tǒng)微生物學(xué)技術(shù)與現(xiàn)代分子生物學(xué)方法相結(jié)合是發(fā)現(xiàn)新傳染病病原體的有效手段傳統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)病原體的方法：動(dòng)物、培養(yǎng)基、細(xì)胞等從病人標(biāo)本中分離培養(yǎng)出病原體，然后再應(yīng)用微生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)及分子生物學(xué)等技術(shù)進(jìn)行鑒定，并研究該病原體與疾病的關(guān)系。過去對傳染病病原體的發(fā)現(xiàn)，近30年對新傳染病病原體的發(fā)現(xiàn),大多是采用的這種方法。30ppt課件

但有一些傳染病，由于病原體的特性或其他原因很難或不可能以傳統(tǒng)方法來發(fā)現(xiàn)病原體。如:20世紀(jì)70年代中期,非甲非乙型肝炎已被人們認(rèn)識(shí)，據(jù)流調(diào)特點(diǎn)又認(rèn)識(shí)到，有以血液傳播為主的非甲非乙型肝炎和經(jīng)消化道傳播的非甲非乙型肝炎二種。世界各地研究人員應(yīng)用傳統(tǒng)方法一直在找二種肝炎的病原體。因在人體中滴度很低等原因，一直未能分離出血液傳播為主的非甲非乙型肝炎，而消化道傳播的非甲非乙型肝炎又難以體外培養(yǎng)。31ppt課件80年代現(xiàn)代分子生物學(xué)理論和技術(shù)的飛躍發(fā)展為確定病原體提供了新的策略和方法。即：從病人標(biāo)本中直接提取病原體的基因進(jìn)行體外克隆和表達(dá)，獲取可能的病原因子核酸及編碼蛋白，然后進(jìn)行確定其病原特異性。美國學(xué)者Choo等首先采用這種策略研究輸血后非甲非乙型肝炎的病原體。步驟：病人血清黑猩猩感染的黑猩猩血清提取RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA克隆到gt11表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建cDNA表達(dá)文庫進(jìn)行體外表達(dá)32ppt課件用輸血后非甲非乙型肝炎病人恢復(fù)期血清篩選。結(jié)果：最終從100萬個(gè)克隆子中篩選出一個(gè)陽性克隆，并以此部分為基礎(chǔ)，采用基因游走技術(shù)測定了丙型肝炎病毒的全基因系列。

90年Retes等用同樣的方法克隆測定了腸道傳播的非甲非乙型肝炎病原的全基因序列，完成了對戊型肝炎病毒的發(fā)現(xiàn)和確定。

HCV、HEV發(fā)現(xiàn)和鑒定的策略、方法，是傳染病病原學(xué)研究中的一個(gè)里程碑，為新傳染病病原體的發(fā)現(xiàn)和鑒定提供了新策略和途徑。33ppt課件2.3發(fā)現(xiàn)和確定新病原體的分子生物學(xué)技術(shù)2.3.1.免疫cDNA文庫篩選法原理：傳染病人標(biāo)本提取病原體核酸克隆到質(zhì)?；蚴删w載體中構(gòu)建可表達(dá)外源核酸編碼的蛋白的cDNA文庫然后用病人血清抗體與cDNA文庫表達(dá)的蛋白反應(yīng)篩選陽性克隆對陽性克隆子中插入的外源核酸作序列分析采用基因游走技術(shù)等方法克隆測定其全基因系列。2.3.2.RDA(representationaldifferenanalysis)技術(shù)是一種PCR與減數(shù)雜交相結(jié)合的技術(shù)。34ppt課件

原理：用PCR技術(shù)從病人組織標(biāo)本中提出基因片段（健康人體中不存在）提外擴(kuò)增及減數(shù)雜交擴(kuò)增出可能的病原因子的基因片段實(shí)驗(yàn)鑒定以此基因再測得全基因序列。此法特點(diǎn)：要求條件高、困難多能從小量標(biāo)本中高效富集目的基因，對未知病原體的研究是一種有效實(shí)用的方法。2.3.3.兼并引物PCR法(cosensussequencebasedPCR)

與RDA技術(shù)不同，其原理：35ppt課件

需先了解所要研究的病原與其他相類似生物的種類進(jìn)化關(guān)系據(jù)類似生物的基因序列以較為保守的序列設(shè)計(jì)PCR引物對標(biāo)本PCR擴(kuò)增分析擴(kuò)增片段序列以此為基礎(chǔ)研究可能病原體的基因結(jié)構(gòu)。此方法對于細(xì)菌及病毒性病原體較為適用2.3.4.隨機(jī)肽庫篩選法是近年發(fā)展起來的一種新生物技術(shù)——蛋白質(zhì)/多肽呈遞技術(shù)?；驹砑傲鞒蹋豪秒S機(jī)肽庫單克隆抗體進(jìn)行相應(yīng)蛋白質(zhì)的抗原表位分析應(yīng)用多克隆抗體或36ppt課件病人血清抗體對隨機(jī)肽庫進(jìn)行篩選研究抗原表位對原因不明的傳染病,借助于隨機(jī)肽庫技術(shù)用已知的病人血清抗體有可能篩選出未知病原體蛋白的抗原表位從而建立檢測這種未知病原體傳染病的診斷方法。待確定典型病例標(biāo)本后，結(jié)合上述方法進(jìn)行研究確定病原體。3.

幾種新傳染病在我國的發(fā)現(xiàn)與研究3.1.我國萊姆病的發(fā)現(xiàn)與研究萊姆病(Lymedisease)是1975年在美國康涅狄克州萊姆鎮(zhèn)地區(qū)首先被發(fā)現(xiàn)和認(rèn)識(shí)的一種蜱傳37ppt課件螺旋體病。病原：伯氏疏螺旋體染病方式：硬蜱叮咬染病為主。受損器官：皮膚,心臟,神經(jīng)及關(guān)節(jié)等器官。臨床特征：皮膚損害(慢性游走性紅斑)、伴流感樣表現(xiàn)—早期。心臟、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀為主—中期。關(guān)節(jié)、精神癥狀為主—晚期多種多樣的臨床表現(xiàn)。發(fā)病范圍:五大洲數(shù)十個(gè)國家已發(fā)現(xiàn)有本病或自然疫源地存在。且發(fā)病率、感染率高,危害38ppt課件嚴(yán)重。3.1.1.萊姆病在我國的發(fā)現(xiàn)

1985年夏，艾承緒等在黑龍江林縣進(jìn)行森林腦炎流行病學(xué)調(diào)查時(shí)，在林區(qū)居民中觀察到疑似早期萊姆病臨床表現(xiàn)—皮膚慢性游走性紅斑。為證實(shí)是否萊姆病，1986年夏，研究小組進(jìn)行了如下調(diào)查：

①對某林場居民逐戶調(diào)查,發(fā)現(xiàn)有慢性游走性紅斑、面神經(jīng)麻痹、腦膜炎等神經(jīng)系統(tǒng)異常，急慢性關(guān)節(jié)炎等疑似萊姆病臨床表現(xiàn)的病人共計(jì)302例,罹患率19.2%,病人全部或大多有受蜱叮39ppt課件咬史，皮膚慢性游走性紅斑發(fā)病時(shí)間分布與居民蜱叮咬率的時(shí)間分布相一致。

②

以萊姆病螺旋體國際標(biāo)準(zhǔn)株B31制備抗原片，用間接免疫熒光技術(shù)(IFA)檢測21例面神經(jīng)麻痹病人血清或腦脊液，8例抗體陽性。

③以一例面神經(jīng)麻痹病人血清作抗體,采用IFA檢測98只全溝硬蜱的中腸涂片,陽性率43%；

④以蜱懸液接種小鼠，8天后活殺取小鼠肝、脾、腎等組織涂片,進(jìn)行IFA檢測,觀察到螺旋體;40ppt課件

⑤以BSK培養(yǎng)基從21份神經(jīng)系統(tǒng)異常病人的血清或腦脊液分離培養(yǎng)出3株螺旋體，經(jīng)多克隆及單克隆伯氏螺旋體抗體鑒定,證實(shí)為萊姆病螺旋體。以上工作從臨床、流行病學(xué)及病原學(xué)等方面發(fā)現(xiàn)和證實(shí)了萊姆病在我國的存在，從而大大的推進(jìn)了全國萊姆病的調(diào)查研究工作。3.1.2.對我國萊姆病的進(jìn)一步研究

在國家的資助下開展了全國萊姆病的進(jìn)一步調(diào)查研究工作：41ppt課件

①我國萊姆病地理分布初步研究，從血清學(xué)和病原學(xué)證實(shí)黑龍江、新疆、吉林、內(nèi)蒙、西藏、浙江、河南等地林區(qū)有本病疫源地和感染存在。

②對黑龍江及新疆的萊姆病自然疫源地深入選點(diǎn)調(diào)查，闡明了各疫源地的媒介種類、構(gòu)成，宿主種類、構(gòu)成，人群的感染率和發(fā)病率，以及媒介、宿主及人群之間的相互作用等。

③對我國萊姆病螺旋體進(jìn)行了較詳細(xì)的病原學(xué)研究，包括：培養(yǎng)特性及培養(yǎng)基的改進(jìn)，形態(tài)及超微結(jié)構(gòu)觀察,單克隆抗體研制和ELISA42ppt課件方法的建立，實(shí)驗(yàn)感染動(dòng)物模型，結(jié)構(gòu)蛋白及抗原蛋白分析等，明確了我國萊姆病類型及特征。3.2.我國戊型肝炎的較早證實(shí)發(fā)現(xiàn)與研究戊型肝炎又稱流行性非甲非乙型肝炎或腸道傳播的非甲非乙型肝炎，1980年始認(rèn)識(shí)該病。本病常因飲用被污染的水及食物而爆發(fā)流行，青壯年發(fā)病率及孕婦死亡率較高。

1990年該病病毒基因克隆成功，促使該43ppt課件病的研究取的迅速進(jìn)展。3.2.1.我國戊型肝炎的較早發(fā)現(xiàn)與證實(shí)

80年代中期，國內(nèi)尚無戊型肝炎發(fā)生的報(bào)告，國家就開始資助旨在發(fā)現(xiàn)和證實(shí)我國戊型肝炎的研究。當(dāng)時(shí)該病無特異診斷方法，只得據(jù)流行病學(xué)特征結(jié)合排除甲、乙型肝炎的方法來進(jìn)行。為此，在全國十幾個(gè)地區(qū)共同協(xié)作，收集肝炎爆發(fā)流行疫情信息，赴現(xiàn)場進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，采集標(biāo)本，在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行排除甲44ppt課件、乙型肝炎感染標(biāo)記的檢測，從而證實(shí)了數(shù)起戊型肝炎或疑似戊型肝炎的疫情。如：①對新疆托克遜縣南胡村82年發(fā)生的一起以成人為主的肝炎爆發(fā)疫情的回顧性調(diào)查。結(jié)果提示肝炎爆發(fā)疫情極可能為戊型肝炎所致。

②對85年6月發(fā)生在山東文登縣小寨村的一次聚餐而引起的肝炎爆發(fā)疫情進(jìn)行了調(diào)查，病人均為成人血檢測均無甲、乙型肝炎急性感染標(biāo)記，據(jù)此認(rèn)為是戊型肝炎。數(shù)年后經(jīng)特異性診斷試劑檢測抗-HEV全為陽性.45ppt課件3.2.2.對我國戊型肝炎的深入研究

86年以后，在我國新疆等地曾連續(xù)多年發(fā)生戊型肝炎的流行，對疫區(qū)進(jìn)行的流行病學(xué)，并在實(shí)驗(yàn)室用現(xiàn)場采集的標(biāo)本開展血清學(xué)及病原學(xué)研究，取得的主要成績?nèi)缦拢?/p>

①基本闡明了戊型肝炎的流行病學(xué)特征，特別報(bào)告了HEV感染無年齡差異，HE發(fā)病呈明顯年齡差別的現(xiàn)象。

②以病人潛伏期或急性期早期糞便感染恒河猴及傳代成功，表明恒河猴是HEV較理46ppt課件想的實(shí)驗(yàn)感染動(dòng)物模型。

③用人肝Hep-G2細(xì)胞從HE病人和實(shí)驗(yàn)感染猴糞便分離培養(yǎng)出數(shù)株RNA病毒，經(jīng)鑒定為HEV。47ppt課件3.3.我國丙型肝炎的研究3.3.1.關(guān)于HCV感染的流行病學(xué)3.3.2.關(guān)于HCV感染的免疫應(yīng)答規(guī)律48ppt課件4.幾種幾種新傳染病的發(fā)現(xiàn)與防治4.1.埃博拉出血熱的發(fā)現(xiàn)與防治埃博拉出血熱(EBOHF)病例1976年6-7月首次發(fā)現(xiàn)于非洲扎伊爾的西南部和蘇丹南部。當(dāng)時(shí)不了解其起因，發(fā)病突然，病死率很高，受到WHO的重視，并派調(diào)查組到流行地區(qū)進(jìn)行了流行病學(xué)、血清學(xué)和病原學(xué)調(diào)查。結(jié)論：爆發(fā)流行、高病死率出血性疾病，傳染性強(qiáng)。將病人急性期血和組織標(biāo)本，接種于非49ppt課件洲綠腎細(xì)胞猴(Vero),3天后細(xì)胞明顯病變。電鏡、血清學(xué)及免疫熒光檢測證實(shí)為一種新病毒(屬絲狀病毒)，是引起扎伊爾和蘇丹兩地出血性疾病的病原體。因該病毒是從埃博拉小河附近村莊的一位病人首次分離到，而原始來源不清，故被比利時(shí)和英國的科學(xué)家命名為埃博拉病毒（Ebolavirus）。4.1.1.病原學(xué)50ppt課件4.2.漢灘病毒肺綜合征

1993年5月在美國西南部爆發(fā)了一種以呼吸衰竭、休克、病死率高為主要特征的發(fā)熱性疾病。檢查結(jié)果未發(fā)現(xiàn)這種疾病與當(dāng)時(shí)已知的所有病原體有關(guān)，但病人血清與漢灘病毒存在交叉反應(yīng)。隨病例增加，研究人員排除了除草劑、新流感等其他可能病因，免疫組化、RT-PCR分析，發(fā)現(xiàn)該病與一種未認(rèn)識(shí)的漢灘病毒有關(guān)。51ppt課件因嚙齒動(dòng)物是漢灘病毒的主要宿主，所以，在病人室外捕獲大量嚙齒動(dòng)物，其中鹿鼠將近一半，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)該鼠是一種新的漢灘病毒的主要宿主。病例對照研究證實(shí)：該疾病與鼠類密切相關(guān)。

1993年11月，終于從病人住處捕獲的鼠組織中成功分離到病毒，并證實(shí)該病毒為一種新的漢灘病毒，故該病被命名為：漢灘病毒肺綜合征（Hantaviruspulmonarysyndrome,HPS).52ppt課件一、病原學(xué)

HPS的病原體基因組RNA與其他漢灘病毒相同。RT-PCR分析表明，其核酸序列與已知的漢灘病毒至少相差30%，說明HPS病毒是漢灘病毒屬的新成員。該病毒的變異比較大，同一病毒，不同地區(qū)毒株基因組差異可高達(dá)14%，目前已分離到的毒株有：①FourComersvirus(FCV)或