生物學(xué)與免疫學(xué)檢驗系列實驗第1頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月志賀菌屬與沙門菌屬志賀菌屬(Shigella)：

人類細(xì)菌性痢疾最為常見的病原菌通稱痢疾桿菌（dysenterybacteria）沙門菌屬(Salmonella)：

引起腸熱癥----傷寒、副傷寒食物中毒敗血癥第2頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月志賀菌有菌毛不分解乳糖無鞭毛（動力—）分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣不產(chǎn)生H2S沙門菌有菌毛不分解乳糖周身鞭毛（動力+）分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣（傷寒桿菌不產(chǎn)氣）大多產(chǎn)生H2S生物學(xué)性狀第3頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月O-Ag：

LPS成分；耐熱：100℃數(shù)小時不破壞0.1%石碳酸不破壞TI-AgIgMH-Ag：鞭毛蛋白質(zhì)；不耐熱；0.1%石碳酸不破壞TD-AgIgGVi-Ag：

毒力抗原（Virulence）位于菌體表面抵抗吞噬阻止O-Ag與相應(yīng)Ab的體內(nèi)外結(jié)合Vi-Ag抗原性弱，可作為帶菌者的檢測傷寒桿菌的抗原構(gòu)造第4頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月致病部位：

大腸不侵入血流致病物質(zhì)：侵襲力：菌毛粘附上皮細(xì)胞侵襲

侵入結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞，繁殖、擴散，形態(tài)感染病灶內(nèi)毒素外毒素致病部位；小腸侵入血流，引起菌血癥

致病物質(zhì)：侵襲力鞭毛穿越小腸粘膜，達(dá)皮下組織Vi抗原抵抗吞噬細(xì)胞的殺傷內(nèi)毒素致病性志賀菌沙門菌第5頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月致病過程：志賀菌—痢疾

糞—口傳播（傳染源：病人/帶菌者）

潛伏期10-200個細(xì)菌即使人感染

1-3天突破人體防御能力

①胃酸②正常菌群拮抗作用③局部免疫作用（SIgA）

大腸部位侵入侵襲力（菌毛）

粘膜上皮細(xì)胞（其中生長繁殖，形成感染灶）第6頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月

釋放內(nèi)毒素、外毒素

壞死、脫落粘膜組織局部刺激進(jìn)入血流粘液、1、腸功能紊亂發(fā)熱、WBC細(xì)菌、痙攣、腹痛脫水、酸中毒炎性細(xì)胞、大便次數(shù)增多微循環(huán)衰竭血液里急后重中毒性腦炎2、腸壁通透性增DIC促進(jìn)毒素吸收死亡率高膿血便腹瀉中毒性菌痢致病過程：志賀菌—痢疾第7頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月

傷寒桿菌（隨食物）

未被胃酸殺滅潛伏期小腸上部（以菌毛吸附在粘膜表面）

穿過組織間隙（鞭毛）

腸壁固有層淋巴組織，由Mφ吞噬

Vi抗原抵抗殺傷，繼續(xù)生長繁殖

淋巴液、腸系膜淋巴組織

血液

第一期菌血癥致病過程：傷寒桿菌—傷寒第8頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月初期血液

第一期菌血癥（病程出現(xiàn)乏力、頭痛①血液、骨髓第1W）全身酸痛等前期癥狀細(xì)菌培養(yǎng)

骨髓、肝、脾、膽、腎等臟器

陽性率高

被其中吞噬細(xì)菌在其昂②IgM抗OAb

細(xì)胞吞噬中大量繁殖出現(xiàn)

釋放極期（病程肝腎各臟器第2、3W）

膽囊再膽汁次

腸道尿液血液

第二期菌血癥第9頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月腸道尿液血液第二期菌血癥刺激已致敏的釋放大量①血液、糞便、腸壁淋巴組織內(nèi)毒素化尿液，細(xì)菌培養(yǎng)可呈陽性發(fā)生Ⅳ變態(tài)反應(yīng)加重全身中毒癥狀②血清中：導(dǎo)致壞死、潰瘍IgGIgM糞便排出細(xì)菌尿液排出細(xì)菌血液有細(xì)菌

持續(xù)高熱、肝脾腫大、全身中毒癥狀顯著，第10頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月恢復(fù)期（第3W

1、特異性抗體升高，作用于細(xì)胞外細(xì)菌以后）

2、特異性細(xì)胞免疫加強，TD細(xì)胞釋放淋巴因子，激活Mφ，使其活性增強，有效殺滅Mφ內(nèi)的傷寒桿菌。（TC細(xì)胞殺傷細(xì)菌感染的靶細(xì)胞？）

3、抗傷寒桿菌O-Ag的抗體（IgM）：抗傷寒桿菌H-Ag的抗體（IgG）：帶菌者

恢復(fù)期帶菌者：恢復(fù)后3周----3月長期帶菌者：》3月

傷寒的痊愈指針：

膽囊、膽汁，細(xì)菌（L型細(xì)菌）培養(yǎng)陰性第11頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)菌性痢疾腸道癥狀：有

不侵入血流全身中毒癥狀：中毒性痢疾血象WBC膿血粘液便，

糞便是唯一的標(biāo)本以局部體液免疫

---SIgA為主所致疾病——臨床癥狀的差異傷寒腸道癥狀：有

侵入血流引起菌血癥全身中毒癥狀：有尚影響肝、腎、脾、膽等器官。血象WBC？

嗜酸性粒細(xì)胞除糞便外，血液、骨髓、尿液、膽汁均可分離到細(xì)菌。以細(xì)胞免疫為主，病后獲牢固免疫力第12頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物學(xué)檢查法：傷寒桿菌沙門菌的分離與鑒定標(biāo)本因病程不同采取不同標(biāo)本：

靜脈血骨髓糞便和尿液第1周第1~3周第2周以后分離培養(yǎng)

增菌增菌離心沉淀

SS平板挑取可疑菌落鑒定KIA；MIU；血清學(xué)試驗第13頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月因病程不同采取不同標(biāo)本第14頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月原理：已知傷寒桿菌O-Ag傷寒桿菌H-Ag+病人血清

甲型副傷寒桿菌H-Ag乙型副傷寒桿菌H-Ag

——定量凝集——相應(yīng)Ab的含量血清學(xué)試驗——Widaltest第15頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月血清學(xué)試驗——Widaltest結(jié)果判定：正?？贵w水平O凝集價＜1∶80；H凝集價＜1∶160O-AbH-Ab傷寒早期皮O-AbH-Ab傷寒急性期O-AbH-Ab傷寒恢復(fù)期

O-AbH-Ab

A：傷寒愈后期B：曾患傷寒桿菌C：預(yù)防接種疫苗D：L型細(xì)菌感染輔助診斷：A：O凝集價≥1∶80；H凝集價≥1∶160B：2次檢測凝集價遞增≥4倍或以上第16頁，課件共19頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗內(nèi)容及其安排

11.總體內(nèi)容講解2.傷寒桿菌感染模型建立l

實驗分組：1只小鼠/人l

感染模型建立：灌胃接種傷寒桿菌培養(yǎng)液

2感染小鼠標(biāo)本采集與接種1.血液標(biāo)本：l

接種增菌培養(yǎng)基l

分離血清，置-20度保存（肥達(dá)試驗用）2.糞便標(biāo)本：接種分離培養(yǎng)基（SS平板）

3