《生物化學(xué)》實驗教學(xué)大綱（供本科臨床醫(yī)學(xué)、口腔醫(yī)學(xué)等專業(yè)使用）Ⅰ前言生物化學(xué)實驗教學(xué)以學(xué)生在實驗室實踐為主,發(fā)揮學(xué)生的主體作用，教師只做必要的實驗原理和注意事項的講解，并注意引導(dǎo)學(xué)生拓展所學(xué)的內(nèi)容，通過實驗內(nèi)容的學(xué)習(xí)了解生物化學(xué)技術(shù)的原理和操作要點，提高學(xué)生的實踐能力和創(chuàng)新能力，目的在于培養(yǎng)學(xué)生的動手能力和解決實際問題的能力。本大綱適用于本科臨床醫(yī)學(xué)、口腔醫(yī)學(xué)、法醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)、麻醉學(xué)、食品質(zhì)量與安全、醫(yī)學(xué)影像學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、臨床藥學(xué)專業(yè)使用?，F(xiàn)將大綱使用中有關(guān)問題說明如下:一為了使教師和學(xué)生更好地掌握教材,大綱每一章節(jié)均由教學(xué)目的、教學(xué)要求和教學(xué)內(nèi)容三部分組成。教學(xué)目的注明教學(xué)目標(biāo)，教學(xué)要求分掌握、熟悉和了解三個級別,教學(xué)內(nèi)容與教學(xué)要求級別相對應(yīng),并統(tǒng)一標(biāo)示(核心內(nèi)容即知識點以下劃實線，重點內(nèi)容以下劃虛線，一般內(nèi)容不標(biāo)示)便于學(xué)生重點學(xué)習(xí)。二教師在保證大綱核心內(nèi)容的前提下,可根據(jù)不同教學(xué)手段,講授重點內(nèi)容和介紹一般內(nèi)容，有的內(nèi)容可留給學(xué)生自學(xué)。三總教學(xué)參考學(xué)時為32學(xué)時。四教材：《生物化學(xué)與分子生物學(xué)實驗教程》，第四軍醫(yī)大學(xué)出版社，陸紅玲，1版，2010年。Ⅱ正文實驗一生物化學(xué)實驗技術(shù)簡介一教學(xué)目的通過本次實驗的學(xué)習(xí)，掌握實驗室須知，實驗報告的書寫格式和要求；掌握分光光度計操作，玻璃儀器的使用和清洗。二教學(xué)要求（一）掌握實驗室須知，實驗報告的書寫格式和要求。（二）掌握分光光度計操作，玻璃器皿的正確使用和清洗。（三）熟悉實驗基本技術(shù)：分光光度法、層析法、離心法、電泳法等。（四）了解生化實驗樣品制備。三教學(xué)內(nèi)容（一）觀看生化實驗基本技術(shù)錄像片40分鐘。（二）實驗室規(guī)則，實驗報告的書寫格式和要求。（三）介紹生化實驗樣品制備。（四）分光光度計操作。（五）玻璃儀器的正確使用和清洗。實驗二蛋白質(zhì)定量分析：BCA法一教學(xué)目的在學(xué)習(xí)BCA法測定蛋白質(zhì)的原理及操作的基礎(chǔ)上，進一步復(fù)習(xí)分光光度法測定的實驗原理及熟練掌握操作技能，了解蛋白質(zhì)的含量測定的多種方法。二教學(xué)要求（一）掌握BCA法測定蛋白質(zhì)的基本原理：利用堿性條件下蛋白質(zhì)將二價銅離子還原為一價銅離子，后者使二辛可酸（BCA）還原為穩(wěn)定的紫藍(lán)色復(fù)合物的特點進行蛋白質(zhì)含量測定。掌握分光光度法在實驗中的應(yīng)用及實驗結(jié)果的計算。（二）熟悉BCA法的操作步驟及注意事項。（三）了解利用蛋白質(zhì)理化性質(zhì)進行蛋白質(zhì)含量測定的多種方法。三教學(xué)內(nèi)容（一）BCA法測定蛋白質(zhì)的原理及注意事項。（二）利用蛋白質(zhì)理化性質(zhì)進行蛋白質(zhì)含量測定的多種方法。（三）實驗操作：將待測樣品與BCA工作液混勻后保溫，用分光光度計進行比色。（四）通過用牛血清蛋白制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中蛋白質(zhì)含量。實驗三血清γ-球蛋白的提純一教學(xué)目的學(xué)習(xí)綜合利用鹽析、凝膠層析、透析等多種實驗技術(shù)對蛋白質(zhì)進行分離純化的方法。

二教學(xué)要求（一）掌握鹽析、凝膠層析、透析法分離純化蛋白質(zhì)的基本原理。（二）熟悉實驗操作及注意事項，蛋白質(zhì)及NH4＋定性檢測的幾種方法。三教學(xué)內(nèi)容（一）鹽析、凝膠層析、透析法分離純化蛋白質(zhì)的基本原理、實驗操作及注意事項。（二）實驗操作：運用分段鹽析法分離、提取γ-球蛋白；凝膠層析法將γ-球蛋白與NH4＋分離，以純化γ-球蛋白；透析法將清蛋白與NH4＋分離，以濃縮、純化清蛋白。（三）應(yīng)用雙縮脲試劑或磺柳酸試劑對分離提取液進行蛋白質(zhì)的定性檢測，應(yīng)用納氏試劑對液體中的NH4＋進行定性檢測，判定分離純化結(jié)果。實驗四質(zhì)粒DNA的提取一教學(xué)目的學(xué)習(xí)質(zhì)粒DNA提取的基礎(chǔ)上，掌握質(zhì)?；咎攸c，掌握離心機、移液槍的工作原理及正確使用。

二教學(xué)要求（一）掌握質(zhì)?；咎攸c，掌握離心機、移液槍的工作原理及正確使用。（二）熟悉試劑盒提取質(zhì)粒的操作步驟及注意事項。（三）熟悉核酸濃度測定。(四)了解質(zhì)粒提取實際應(yīng)用。三教學(xué)內(nèi)容（一）實驗原理：質(zhì)?；咎攸c，質(zhì)粒提取的基本方法，試劑盒提取質(zhì)粒的原理，實驗中各種試劑的作用；實驗注意事項。（二）實驗操作：試劑盒提取質(zhì)粒，質(zhì)粒DNA濃度測定。（三）離心機、移液槍的正確使用。實驗五瓊脂糖凝膠電泳一教學(xué)目的在學(xué)習(xí)瓊脂糖凝膠電泳法分離、鑒定DNA基礎(chǔ)上，掌握核酸分離、純化常用方法之——電泳的實驗原理，加深對核酸基本性質(zhì)的理解。二教學(xué)要求（一）掌握電泳的實驗基本原理及瓊脂糖凝膠電泳分離、鑒定DNA原理。（二）熟悉瓊脂糖凝膠電泳的操作、注意事項；熟悉凝膠成像儀觀察電泳結(jié)果。（三）了解電泳分類。三教學(xué)內(nèi)容（一）常用電泳的實驗基本原理及瓊脂糖凝膠電泳分離、純化DNA原理，操作注意事項。（二）凝膠成像儀觀察電泳結(jié)果。（三）實驗操作：制備凝膠、點樣、電泳，凝膠成像儀觀察電泳結(jié)果。實驗六血糖測定（葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法）及腎上腺素對血糖濃度的影響一教學(xué)目的學(xué)習(xí)葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法測定血糖濃度的基礎(chǔ)上，掌握血糖的正常參考值，掌握腎上腺素對血糖濃度的影響，熟悉尿糖的半定量檢測。

二教學(xué)要求（一）掌握血糖的正常參考值，復(fù)習(xí)血糖的來源與去路；掌握腎上腺素對血糖濃度的影響機理。（二）熟悉葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法測定血糖的操作步驟及注意事項。（三）熟悉葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法測定血糖的原理，血清的制備，血糖濃度及血糖增高率的計算，尿糖的原因及尿糖半定量檢測的原理及方法。(四)了解動物耳緣靜脈取血法，血糖調(diào)節(jié)的幾種因素及血糖測定的臨床意義。三教學(xué)內(nèi)容（一）實驗原理：血糖的正常參考值，血糖的來源與去路，血糖調(diào)節(jié)的幾種因素，腎上腺素對血糖濃度的影響機理，血糖測定的臨床意義，葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法測定血糖的原理；尿糖的原因及尿糖半定量檢測的原理。（二）實驗操作：血糖測定及腎上腺素對血糖濃度的影響（收集注射腎上腺素前后耳緣靜脈血，制備血清，葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法測定血糖濃度）；尿糖半定量檢測。（三）計算血糖濃度及血糖增高率。實驗七金氏法測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性一教學(xué)目的學(xué)習(xí)運用比色法測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性，了解轉(zhuǎn)氨酶的作用及臨床意義。

二教學(xué)要求（一）掌握實驗原理中與理論課相關(guān)的知識：轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)、轉(zhuǎn)氨酶的作用、存在部位的特點及臨床意義、影響酶活性測定的因素。（二）掌握金氏法測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的原理。（三）熟悉實驗操作及注意事項，進一步掌握標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制以及酶活性單位的計算。三教學(xué)內(nèi)容（一）實驗原理：谷丙轉(zhuǎn)氨酶催化丙氨酸脫氨基生成丙酮酸，后者可在堿性條件下與2,4-二硝基苯肼結(jié)合而顯色，通過比色分析即可測定谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性。（二）實驗操作步驟及注意事項。（三）根據(jù)實驗結(jié)果計算各管酶活性單位，在繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找樣品中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性。實驗八牛血清白蛋白的分離純化與鑒定一教學(xué)目的利用所學(xué)理論知識及實驗方法設(shè)計實驗，從牛血清中分離純化及鑒定牛血清白蛋白。

二教學(xué)要求（一）掌握實驗設(shè)計的基本過程和方法，培養(yǎng)分析問題、解決問題的能力。（二）熟悉常用實驗儀器及玻璃器皿的正確使用。三教學(xué)內(nèi)容（一）學(xué)生靈活運用已學(xué)過的知識，進行實驗設(shè)計。（二）根據(jù)設(shè)計的實驗，進行規(guī)范操作及正確使用常用實驗儀器及玻璃器皿。（三）完成實驗報告。Ⅲ教學(xué)組織與方法一實施機構(gòu)：由基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)教研室執(zhí)行。二組織內(nèi)容：集體教學(xué)備課、教案講義審核、教學(xué)方法研究、教學(xué)手段應(yīng)用。三教學(xué)方法：1實驗教學(xué)：集體備課，布置實驗內(nèi)容，課堂講解和演示，學(xué)生獨立操作。2教學(xué)點：在生物化學(xué)實驗室教學(xué)，承擔(dān)教師由生物化學(xué)教研室委派。3輔導(dǎo)形式：課堂巡視和指導(dǎo)、討論、復(fù)習(xí)等結(jié)合。四考核辦法：實驗成績占總評成績的30%；實驗平時成績占實驗總成績的70%，實驗考核占實驗總成績30%。實驗考核不合格者不能參加理論課考試。Ⅳ教學(xué)時數(shù)分配表實驗內(nèi)容教學(xué)時數(shù)實驗類型實驗一生物化學(xué)實驗技術(shù)簡介4綜合型實驗二