1拷貝數(shù)變異

(copynumbervariation,CNV)1拷貝數(shù)變異

(copynumbervariation,2Genome-wideassociationstudies:potentialnextstepsonageneticjourney.——MarkI.McCarthy.Hum.Mol.Genet.2008,17(2):156–165.

基于SNP的GWAS只能解釋疾病一小部分的遺傳變異Extendinggenome-wideassociationstudiestocopy-numbervariation.——McCarroll,S.A.Hum.Mol.Genet.2008,17(2):135-142.更完善的GWAS拷貝數(shù)變異CNV2Genome-wideassociationstudi3提綱CNV由來CNV相關概念CNV分類CNV數(shù)據(jù)庫CNV遺傳學特點CNV形成及影響機制CNV檢測方法CNV&SNPCNV與疾?。[瘤）CNV的局限3提綱CNV由來4CNV由來——遺傳變異

染色體數(shù)目變異染色體結構變異SNPsDeletionsInsertionsVNTRsMicrosatellite

Minisatellite4CNV由來——遺傳變異染色體數(shù)目變異5CNV由來2004年，Iafrate和Sebat各自所在的研究小組首次在人類基因組中描述了拷貝數(shù)變異的存在．——IafrateAJ,etal.Detectionoflarge-scaleVariationinthehumangenome.NatGenet,2004.——SebatJ,etal.Large-scalecopynumberpolymorphisminthehumangenome.Science,2004.2006年，Redon等在HapMap計劃的270名正常健康供者中鑒定到1447個CNV區(qū)域，它們覆蓋了12%(300Mb)的人類基因組，與基因組變異和疾病致病/易感基因位點相關．這些結果提示，CNVs可能像SNPs一樣影響著基因的表達、表型的變異和適應，可以作為一種重要的疾病易感標志。——RedonR,etal.GlobalvariationincopyNumberinthehumangenome.Nature,2006.5CNV由來2004年，Iafrate和Sebat各自所在的6CNV相關概念CNV

與基因組參考序列相比，基因組中≥1kb的DNA片段插入、缺失和/或擴增，及其互相組合衍生出的復雜變異．CNVR(CNVregion)

如果一段染色體區(qū)域包含若干個源于不同個體的拷貝數(shù)變異，我們可以將這段染色體區(qū)域稱為拷貝數(shù)變異區(qū)域(CNVR)，也就是說，一個拷貝數(shù)變異區(qū)域就是一個有重疊部分的各個拷貝數(shù)變異的聯(lián)合。6CNV相關概念CNV7CNV分類缺失擴增同一位點并發(fā)的缺失與擴增多等位基因位點復雜難以描述的位點7CNV分類缺失8CNP(copynumberpolymorphisms)類似SNP,人群中等位基因頻率>1%的CNVs定義為基因組拷貝數(shù)多態(tài)，90%以上的CNVs屬于這一類型.CommonCNP>5%RareCNV<1%8CNP(copynumberpolymorphism9CNV&SNP多態(tài)性相似，在人群中均普遍存在。鑒定的CNVs中有近20％的區(qū)段和SNPs所在的DNA區(qū)段交疊，這表明兩種變異方式存在于基因組的相同部分。CNVs和SNPs之間存在一定的聯(lián)系.許多CNVs位于基因結構變異的復雜區(qū)域，一些CNVs與鄰近SNPs存在著連鎖不平衡，可通過檢驗SNPs基因型推測鄰近的CNVs。但另一些CNVs獨立分布于基因組內，不能直接通過探測SNPs而得到，尤其是在富含CNV的區(qū)域。定義不同。到目前為止，人基因組已發(fā)現(xiàn)的CNVs個數(shù)遠遠低于SNPs的個數(shù)，但覆蓋的染色體長度至少達到12%的全基因組，目前任何一種遺傳標志都無法比擬的。一些疾病更有可能是由于CNV所引起的。CCL3L1基因的CNVs一定程度上決定著對艾滋病病毒感染的抗性，而CCL基因在SNP圖譜上則找不到變異.9CNV&SNP多態(tài)性相似，在人群中均普遍存在。10CNV&SNP為了探究CNV和SNP對表型多樣性的貢獻率，Stranger等以210個無親緣相關的HapMapProject個體為研究材料,分析了14072個基因的47294個轉錄子的表達水平與SNP和CNV的關聯(lián)性。結果發(fā)現(xiàn)，SNP和CNV分別捕獲了基因表達的遺傳變異的83.6％和17.7％，兩種類型的變異很少重疊。因此認為，對各種復雜性狀進行分析時必須把兩種遺傳變異綜合起來進行考察。SNPs數(shù)據(jù)對發(fā)現(xiàn)潛在的CNVs有一定的指導作用。預測定義（≥3個SNP探針發(fā)生缺失或擴增）綜合

10CNV&SNP為了探究CNV和SNP對表型多樣性的貢11CNV數(shù)據(jù)庫根據(jù)基因組變異數(shù)據(jù)庫(databaseofgenomicvariants,DGV,http://projects.tcag.ca/variation/)統(tǒng)計，截至2008年11月10日，基于NCBIbuild36參考基因組序列發(fā)現(xiàn)的CNVs共19792個，由此形成CNVR共6225個，覆蓋18.8%的人類基因組常染色質，涉及基因7265個．11CNV數(shù)據(jù)庫根據(jù)基因組變異數(shù)據(jù)庫(databaseof1212131314CNV人群遺傳學特點分布范圍廣大量存在于人類基因組中，包括健康個體及患者?？蛇z傳、相對穩(wěn)定

遵從孟德爾遺傳規(guī)律，而且它們在人群之間的傳遞相對穩(wěn)定，符合Hardy-Weinberg平衡定律．兩個不同個體之間的CNVs變化不足0.5%，而只有不到1%的CNVs無法通過同一等位基因的簡單遺傳方式來解釋．高度異質性不同人群之間可能共享大部分相同的CNVs，而部分CNPs在不同人群中以不同頻率分離并有顯著性差異，這一現(xiàn)象是進行CNV與復雜性狀關聯(lián)研究的基礎。14CNV人群遺傳學特點分布范圍廣15CNV產生機制染色體結構重排造成非等位基因同源重組（大）非同源末端連接轉座和反轉座與非βDNA結構相關，即DNA的結構有別于經典的右旋β雙螺旋結構，包括左旋z型DNA和十字型DNA。這些非βDNA結構促進染色體重排和CNVs形成。15CNV產生機制染色體結構重排造成非等位基因同源重組（大）16CNV影響機制CNV對表型的調控作用，Beckmann等認為可能主要通過以下幾種機制來實現(xiàn)：重復／缺失數(shù)目本身的劑量效應；CNV改變了基因的結構，對基因的表達產物產生影響；CNV的多態(tài)影響到基因的表達水平，進而影響到基因的外顯率；CNV具有長距離的調控作用，只要和基因同線，就可能對多個基因的表達產生影響。16CNV影響機制CNV對表型的調控作用，Beckmann17CNV檢測方法比較基因組雜交芯片(ArrayCGH)SNP芯片定量

PCR（QMPSF/MAPH/MLPA）熒光原位雜交（FISH）17CNV檢測方法比較基因組雜交芯片(ArrayCGH)18CNV全基因組關聯(lián)與傳統(tǒng)的基于SNP的GWAS具有互補性新型SNP芯片技術支持

Affymetrix和Illumina公司相繼推出了Genome-wideSNP6.0和Illumina1M芯片，除包括SNPs探針外，還有幾乎等量的拷貝數(shù)探針，減少了因探針分布不均衡的干擾，使全基因組平均分辨率達3kb，增加了CNVR邊界定位的精確性，更適用于全基因組關聯(lián)分析．CNV全基因組關聯(lián)分析流程同基于SNP的GWAS.18CNV全基因組關聯(lián)與傳統(tǒng)的基于SNP的GWAS具有互補性19CNV全基因組掃描方法19CNV全基因組掃描方法20CNV與疾病20CNV與疾病21Genecopynumbervariationandcommonhumandisease.

——Fanciullietal.ClinGenet.2009.21Genecopynumbervariationa22Agenome-widesurveyofcopynumbervariationsinHanChineseresidinginTaiwan.——C.-H.Linetal.Genomics94(2009)241–246.22Agenome-widesurveyofcopy23CNV與腫瘤據(jù)DGV的數(shù)據(jù)分析，近40%的腫瘤相關基因都存在CNV。23CNV與腫瘤據(jù)DGV的數(shù)據(jù)分析，近40%的腫瘤相關基因都24CNV與腫瘤1）預后研究GeneticpolymorphismsinGSTgenesandsurvivalofcolorectalcancerpatientstreatedwithchemotherapy.——Pharmacogenomics(2010)11(1),33–41.2）功能研究Copynumbervariationat1q21.1associatedwithneuroblastoma——Nature.2009June18;459(7249):987–991.3）miRNA研究Frequentdeletionsanddown-regulationofmiRNAgenesmiR15andmiR16at13q14inchroniclymphocyticleukemia．——ProcNatlAcadSciUSA，2002，99(24):15524-15529．一些CNV區(qū)域覆蓋非編碼的RNAs區(qū)域，包括miRNA.24CNV與腫瘤1）預后研究25CNV的局限CNVs的基因分型較復雜、不統(tǒng)一統(tǒng)計分析由于不同的樣本、不同的算法、使用不同的參考樣本組，而且CNVs判別標準也不盡相同，造成不同研究之間重合的CNVs僅