主干知識(shí)·歸納整合整體認(rèn)知加深知識(shí)理解醋酸菌巴氏消毒法碳源、氮源、水、細(xì)胞的全能性膜的流動(dòng)性細(xì)胞核的全能性獲能桑葚胚、囊胚將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割DNA連接酶基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因濕熱滅菌法無(wú)機(jī)鹽等稀釋涂布平板法細(xì)胞增殖遺點(diǎn)必查01疑點(diǎn)必清02難點(diǎn)必明03遺點(diǎn)必查012．(選擇性必修3P12探究·實(shí)踐)微生物的接種方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者可用于活菌計(jì)數(shù)。1．(選擇性必修3P7正文)醋酸菌是好氧細(xì)菌，當(dāng)O2、糖源都充足時(shí)能通過(guò)復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)將糖分解為乙酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)則直接將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛變?yōu)橐宜?。多?shù)醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為30～35℃。3．(選擇性必修3P18正文)用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí)，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。4．(選擇性必修3P45正文)動(dòng)物組織經(jīng)胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。5．(選擇性必修3P48～49

圖2－16)單克隆抗體制備過(guò)程中涉及兩次篩選，第一次是利用選擇培養(yǎng)基，篩選出雜交瘤細(xì)胞；第二次是克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，目的是篩選出足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。6．(選擇性必修3P54相關(guān)信息)目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。也有人采用梯度離心、紫外線短時(shí)間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒(méi)有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下去核或使其中的DNA變性。7．(選擇性必修3P58相關(guān)信息)常以觀察到兩個(gè)極體或者雌、雄原核作為受精的標(biāo)志。8．(選擇性必修3P62正文)在進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚。分割囊胚階段的胚胎時(shí)，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。9．(選擇性必修3P80正文)啟動(dòng)子位于基因的上游，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位；終止子位于基因的下游，使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停下來(lái)。10．(選擇性必修3P81資料卡)農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)含有Ti質(zhì)粒，當(dāng)它侵染植物細(xì)胞后，能將Ti質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞，并且將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上。02疑點(diǎn)必清×(2)在制作果酒、果醋時(shí)，適當(dāng)加大接種量可以提高發(fā)酵速率、抑制雜菌生長(zhǎng)繁殖。

(

)1．判斷有關(guān)發(fā)酵工程應(yīng)用說(shuō)法的正誤√(3)發(fā)酵工程與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)最大的區(qū)別是前者可以用微生物進(jìn)行發(fā)酵。

(

)(4)對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)能采用稀釋涂布平板法，也能用平板劃線法。

(

)(5)分解尿素的細(xì)菌在分解尿素時(shí)，可以將尿素轉(zhuǎn)化為氨，使得培養(yǎng)基的酸堿度降低。

(

)(6)剛果紅可以與纖維素形成透明復(fù)合物，所以可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。

(

)××××(1)醋酸菌在無(wú)氧條件下利用乙醇產(chǎn)生乙酸。

(

)(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需將動(dòng)物細(xì)胞放于含95%氧氣和5%CO2的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 (

)(7)胚胎分割過(guò)程中，可取滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析，鑒定性別。

(

)2．判斷有關(guān)動(dòng)植物細(xì)胞工程和胚胎工程說(shuō)法的正誤×(2)用纖維素酶和果膠酶水解法獲得的植物原生質(zhì)體失去了全能性。(

)(3)植物體細(xì)胞雜交所獲得的雜種植株的變異類型屬于染色體變異。(

)(5)體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一類能懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)增殖，另一類需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長(zhǎng)增殖。

(

)(6)多種B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合篩選后，還需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，才能獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。

(

)×√×√√√(1)愈傷組織是外植體通過(guò)脫分化和再分化后形成的。

(

)3．判斷有關(guān)基因工程和蛋白質(zhì)工程說(shuō)法的正誤(3)啟動(dòng)子是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部分，有了它才能驅(qū)動(dòng)DNA的復(fù)制過(guò)程。

(

)(4)轉(zhuǎn)化是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程。

(

)(5)生殖性克隆人破壞了人類基因多樣性的天然屬性，不利于人類的生存和進(jìn)化。

(

)××√√√(1)限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子中特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的氫鍵斷開。

(

)03難點(diǎn)必明1．平板劃線法在做第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？提示：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。2．某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成了一片，最可能的原因是什么？

提示：最可能的原因是菌液濃度過(guò)高或劃線時(shí)在劃下一區(qū)域前未將接種環(huán)灼燒滅菌。3．平板劃線法不能用于測(cè)定活菌的數(shù)量的原因是什么？提示：由于在所劃的線中，一般只有最后一次劃線的末端才會(huì)形成只由一個(gè)活菌形成的菌落，而其他一些菌落往往由兩個(gè)活菌或多個(gè)細(xì)胞連接在一起，而在計(jì)數(shù)時(shí)一個(gè)菌落對(duì)應(yīng)著一個(gè)活菌，這樣在劃線所得的平板中，菌落數(shù)目遠(yuǎn)低于活菌的實(shí)際數(shù)值，所以不能用平板劃線法測(cè)定活菌數(shù)量。4．在傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作過(guò)程中，為什么發(fā)酵食品的品質(zhì)往往不穩(wěn)定？提示：沒(méi)有接種菌種，而是利用了天然存在的菌種，菌種差異、雜菌情況不明和發(fā)酵過(guò)程的控制缺乏標(biāo)準(zhǔn)等，往往會(huì)造成發(fā)酵食品的品質(zhì)不一。5．作物脫毒時(shí)應(yīng)選取哪些部位的組織進(jìn)行組織培養(yǎng)？原因是什么？提示：一般選取根尖或莖尖的分生區(qū)。植物分生區(qū)的病毒極少，甚至無(wú)病毒，用分生區(qū)細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)，能得到大量的脫毒苗。6．對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，為什么要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割？提示：若分割時(shí)不能將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，會(huì)出現(xiàn)含內(nèi)細(xì)胞團(tuán)多的部分正常發(fā)育的能力強(qiáng)，少的部分發(fā)育受阻或發(fā)育不良，甚至不能發(fā)育等問(wèn)題。7．構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，目的基因和載體分別使用兩種限制酶切割，這樣做的優(yōu)點(diǎn)是什么？提示：用兩種不同的限制酶進(jìn)行切割能夠使目的基因和載體定向連接，避免目的基因和載體分別發(fā)生自身環(huán)化以及目的基因與載體的反向連接，提高連接的有效性。8．生產(chǎn)乳腺生物反應(yīng)器構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)有什么特別要求？為什么？提示：必須把藥用蛋白基因與乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件重組在一起。因?yàn)橹挥羞B接了乳腺中特異表達(dá)的