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文檔簡介
北京市第四中學(xué)2023屆高三假期自主綜合能力測試(一)生物試題考生請注意:1.答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內(nèi),不得在試卷上作任何標(biāo)記。2.第一部分選擇題每小題選出答案后,需將答案寫在試卷指定的括號內(nèi),第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3.考生必須保證答題卡的整潔??荚嚱Y(jié)束后,請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.科學(xué)家發(fā)現(xiàn),當(dāng)神經(jīng)元興奮時(shí)神經(jīng)細(xì)胞上的Ca2+通道開放,Ca2+進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)引起細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高。囊泡上的突觸結(jié)合蛋白是游離Ca2+的受體,Ca2+和突觸結(jié)合蛋白結(jié)合后,使囊泡融合蛋白與突觸前膜上某種物質(zhì)結(jié)合形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu),這樣囊泡和突觸前膜融合,使神經(jīng)遞質(zhì)釋放到突觸間隙(圖)。下列有關(guān)敘述正確的是()A.乙酰膽堿與突觸后膜受體的結(jié)合過程主要由①提供能量B.突觸前膜所在神經(jīng)元特有的基因決定了囊泡和突觸前膜的融合位置C.②興奮時(shí),膜內(nèi)電位由負(fù)電位變?yōu)檎娢唬㈦娦盘栟D(zhuǎn)化為化學(xué)信號D.若突觸前膜上的Ca2+通道被抑制,刺激突觸前神經(jīng)元,會(huì)使③的膜電位發(fā)生變化。2.人體細(xì)胞無氧呼吸會(huì)產(chǎn)生乳酸。研究發(fā)現(xiàn),乳酸不僅人體重要的代謝中間產(chǎn)物和能量載體,還可作為癌細(xì)胞的營養(yǎng)來源。下列相關(guān)敘述正確的是A.人體無氧呼吸產(chǎn)生乳酸的場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體B.劇烈運(yùn)動(dòng)后血液中乳酸增多,但對血漿pH的變化不大C.無氧呼吸時(shí),乳酸是重要的能量載體,細(xì)胞不產(chǎn)生ATPD.癌細(xì)胞的能量僅來自乳酸,與正常細(xì)胞相比代謝減緩3.關(guān)于細(xì)胞代謝的敘述,錯(cuò)誤的是A.無氧呼吸能產(chǎn)生ATP,但沒有[H]的生成過程B.有氧呼吸過程中生成的[H]可在線粒體內(nèi)氧化生成水C.某些微生物可利用氧化無機(jī)物產(chǎn)生的能量合成有機(jī)物D.光合作用光反應(yīng)階段產(chǎn)生的[H]可在葉綠體基質(zhì)中作為還原劑4.制備單克隆抗體過程中,下列與雜交瘤細(xì)胞的獲取相關(guān)敘述中正確的是()A.利用了細(xì)胞增殖、細(xì)胞膜流動(dòng)性和基因重組等原理B.可利用振動(dòng)、電刺激等物理方法直接誘導(dǎo)細(xì)胞融合C.可利用細(xì)胞中染色體的數(shù)目和形態(tài)篩選雜交瘤細(xì)胞D.利用選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細(xì)胞可直接生產(chǎn)單抗5.選擇正確的實(shí)驗(yàn)試劑是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。下列實(shí)驗(yàn)中所選試劑效果最好的是()A.探究酵母菌呼吸作用的方式——BTB(溴麝香草酚藍(lán))溶液B.觀察洋蔥表皮細(xì)胞質(zhì)壁分離——1.5g/mL的蔗糖溶液C.葉綠體色素的分離——無水乙醇D.觀察細(xì)胞有絲分裂中染色體的行為——甲基綠染液6.野生型金黃色葡萄球菌對青霉素敏感,將它接種到青霉素濃度為0.1單位/cm3的培養(yǎng)基上,大多數(shù)菌株死亡,極少數(shù)菌株能存活下來。存活下來的菌株經(jīng)過不斷選育,最后可以獲得能生長在青霉素濃度為250單位/cm3的培養(yǎng)基上的細(xì)菌品系。據(jù)此分析,下列有關(guān)說法正確的是A.抗青霉素的金黃色葡萄球菌增殖過程中能將抗青霉素的性狀直接傳遞給后代B.在此過程中,青霉素起到了定向誘導(dǎo)金黃色葡萄球菌變異的作用C.在此過程中,金黃色葡萄球菌種群的基因頻率發(fā)生了定向改變D.能在含青霉素的培養(yǎng)基上生長的細(xì)菌品系發(fā)生的變異是染色體變異7.已知控制果蠅翅型的基因位于2號染色體上,科研人員用適宜劑量的化學(xué)誘變劑EMS飼喂雄性果蠅(純合正常翅),并與正常雌蠅(純合正常翅)雜交,在子一代發(fā)現(xiàn)了具有卷翅的果蠅,以下說法錯(cuò)誤的是()A.卷翅性狀的出現(xiàn)是顯性基因突變的結(jié)果B.控制這對性狀的基因的遺傳遵循自由組合定律C.用EMS化學(xué)誘變劑飼喂果蠅不能定向產(chǎn)生卷翅突變體D.若控制翅型基因用A、a表示,則子一代中卷翅果蠅基因型為Aa8.(10分)土壤中分解尿素的細(xì)菌能分泌脲酶將尿素分解成NH3,玉米根細(xì)胞從土壤中吸收NH4+用于植株生長。下列敘述正確的是()A.該菌中的高爾基體參與脲酶的加工和運(yùn)輸B.玉米根細(xì)胞從土壤中吸收NH4+不需要載體蛋白參與C.NH4+中的N可作為玉米細(xì)胞中蛋白質(zhì)、糖類等的構(gòu)成元素D.分解尿素的細(xì)菌中具有裸露的環(huán)狀DNA分子二、非選擇題9.(10分)關(guān)于生命活動(dòng)的調(diào)節(jié),請回答問題:(1)研究表明,高等動(dòng)物性激素的分泌機(jī)制類似于人體甲狀腺激素的分泌。在生產(chǎn)實(shí)踐中,若要促進(jìn)雌性動(dòng)物排卵,往往不直接注射雌性激素,這是因?yàn)檫^多的雌性激素會(huì)抑制_____________(填腺體名稱)的活動(dòng),導(dǎo)致___________激素分泌量減少,從而引起性腺萎縮,這種調(diào)節(jié)機(jī)制稱為_____________調(diào)節(jié)。(2)人體膽汁的分泌是神經(jīng)-體液共同調(diào)節(jié)的結(jié)果。當(dāng)消化道感受器受到食物刺激后會(huì)產(chǎn)生興奮,這時(shí)神經(jīng)纖維膜外電位發(fā)生的變化是________,興奮最終會(huì)傳遞到膽囊,使其收縮,引起膽汁分泌。在這個(gè)調(diào)節(jié)中,膽囊既是___________的一部分,又是靶器官。10.(14分)HIV是艾滋病的病原體,由蛋白質(zhì)和RNA組成。準(zhǔn)確的檢測出HIV是及時(shí)治療艾滋病的前提,目前在醫(yī)學(xué)上采用的檢測方法有蛋白質(zhì)檢測和核酸檢測。請回答下列問題:(1)提取HIV的RNA,通過____________過程獲得_____________,用于PCR擴(kuò)增。PCR技術(shù)需用到的關(guān)鍵酶是_______________。利用擴(kuò)增產(chǎn)物獲取HIV的S蛋白基因,構(gòu)建基因表達(dá)載體后導(dǎo)入受體細(xì)胞,從受體細(xì)胞中分離出S蛋白并純化,用于檢測疑似病例血清中的________________(填“抗原”或“抗體”),該檢測的原理是________________________。(3)核酸檢測采用逆轉(zhuǎn)錄熒光PCR技術(shù)(RT-PCR技術(shù)),其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是研制特異性基因探針。檢測HIV采用的是______________(填“人”或“HIV”)的帶熒光的一段特異性的___________________作為探針。(4)疑似患者體內(nèi)取樣提取RNA,逆轉(zhuǎn)錄后以病毒的__________________為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,同時(shí)加入特異性探針,若在擴(kuò)增中探針能與待測DNA雜交,就表明待測個(gè)體攜帶HIV。該檢測的原理是________________________________。11.(14分)錦鯉皰疹病毒是一種雙鏈DNA病毒。下圖為TaqMan熒光探針技術(shù)的原理示意圖,探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí)該探針被Taq酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴(kuò)增1個(gè)DNA分子,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。請回答下列問題:(1)在基因工程中,目前獲取目的基因的常用方法除了利用PCR技術(shù)擴(kuò)增外,還有___________和_________兩種類型。(2)引物的化學(xué)本質(zhì)是_________,其與模板DNA的結(jié)合具有_________性。(3)通常情況下,探針中的GC含量比引物中的略高,這有利于保證退火時(shí)_________與模板DNA結(jié)合。(4)用TaqMan熒光探針技術(shù)檢測錦鯉皰疹病毒時(shí),在反應(yīng)體系中要加相應(yīng)的病毒遺傳物質(zhì)、引物、探針和_________、_________酶等,其中酶發(fā)揮的具體作用是延伸DNA鏈和_________。(5)若最初該反應(yīng)體系中只有一個(gè)病毒DNA分子,經(jīng)n次循環(huán)后,需要消耗TaqMan熒光探針_________個(gè)。12.菠菜為單性花,一般雌雄異株,XY型性別決定方式?;卮鹣铝袉栴}:(1)已知菠菜的抗霜和不抗霜(由基因A、a控制)、圓葉和尖葉(由基因B、b控制)為兩對相對性狀。用抗霜圓葉植株作為父本,不抗霜圓葉植株作為母本進(jìn)行雜交,子代雄株中表現(xiàn)型及比例為不抗霜圓葉:不抗霜尖葉=3:1,雌株中表現(xiàn)型及比例為抗霜圓葉:抗霜尖葉=3:1,則親本的基因型為________。(2)育種時(shí)在雜種一代中新發(fā)現(xiàn)抗霉病雌、雄植株各幾株,相互交配子代出現(xiàn)性狀分離,說明該性狀的出現(xiàn)是______(填“顯性基因突變”或“隱性基因突變”)的結(jié)果,子代不抗霉病個(gè)體的比例最可能是______。(3)菠菜對菠菜溫和病毒(STV)的抗性即抗病毒病為單基因控制的顯性性狀?,F(xiàn)有各種純合子及雜合子個(gè)體供選擇使用,為探究有關(guān)基因位于常染色體還是性染色體,可選用具有相對性狀的純種個(gè)體同時(shí)進(jìn)行___兩組實(shí)驗(yàn),即使兩組實(shí)驗(yàn)結(jié)果無差異,也不能確定基因的位置,應(yīng)進(jìn)一步選用_____與_____雜交,根據(jù)子代植株是否具有抗病性來判斷與性別的關(guān)系進(jìn)行確定。對植株抗性可用______侵染菠菜進(jìn)行鑒定。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解題分析】
神經(jīng)元之間接觸的部位,由一個(gè)神經(jīng)元的軸突末端膨大部位--突觸小體與另一個(gè)神經(jīng)元的細(xì)胞體或樹突相接觸而形成;突觸包括突觸前膜、突觸間隙和突觸后膜三部分;神經(jīng)遞質(zhì)存在于突觸小體的突觸小泡中,由突觸前膜以胞吐的形式釋放到突觸間隙,作用于突觸后膜,興奮在突觸處傳遞的形式是電信號→化學(xué)信號→電信號?!绢}目詳解】A、乙酰膽堿和受體的結(jié)合不需要能量,A錯(cuò)誤;B、神經(jīng)元內(nèi)的基因和其他細(xì)胞的基因相同,所以決定囊泡和突觸前膜融合位置的基因并不是突觸前膜所在神經(jīng)元特有的基因,B錯(cuò)誤;C、②是突觸前膜,興奮時(shí)膜內(nèi)電位由負(fù)電位變?yōu)檎娢唬龠M(jìn)遞質(zhì)的釋放,并在此將電信號轉(zhuǎn)化為化學(xué)信號,C正確;D、若突觸前膜上的Ca2+通道被抑制,Ca2+不能內(nèi)流,使乙酰膽堿不能正常釋放,阻礙了興奮的傳遞,不能使突觸后膜③的電位發(fā)生變化,D錯(cuò)誤。故選C?!绢}目點(diǎn)撥】本題需要考生掌握興奮在神經(jīng)元之間的傳遞過程,結(jié)合題干中“Ca2+”的作用進(jìn)行解答。2、B【解題分析】
人體無氧呼吸發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì),產(chǎn)物是乳酸,由于血漿中含有緩沖物質(zhì),可以調(diào)節(jié)血漿的pH,因此盡管血液中乳酸的含量較多,但對血漿pH的影響不大?!绢}目詳解】A.人體無氧呼吸產(chǎn)生乳酸的場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì),A錯(cuò)誤;B.劇烈運(yùn)動(dòng)后血液中乳酸增多,但血漿中的NaHCO3等緩沖物質(zhì)的調(diào)節(jié)作用使血漿pH依舊會(huì)保持相對穩(wěn)定,B正確;C.無氧呼吸第一階段將葡萄糖分解產(chǎn)生丙酮酸、[H]和少量的ATP,C錯(cuò)誤;D.癌細(xì)胞與正常細(xì)胞相比,細(xì)胞代謝更加旺盛,D錯(cuò)誤。3、A【解題分析】有氧呼吸和無氧呼吸有一個(gè)共同點(diǎn):第一階段都能將葡萄糖分解成丙酮酸和[H],故A項(xiàng)錯(cuò)。有氧呼吸第一和第二階段都能產(chǎn)生[H],2個(gè)階段產(chǎn)生的[H]都參與第三階段與氧的結(jié)合,而第二和第三階段均在線粒體中進(jìn)行,故B對。對于C項(xiàng),各位應(yīng)記住一些特例,比如在講化能合成作用時(shí),就講到了硝化細(xì)菌能利用氨氣氧化釋放的化學(xué)能將無機(jī)物合成有機(jī)物。D項(xiàng)也對,因?yàn)楣夂献饔玫墓夥磻?yīng)階段為其暗反應(yīng)階段提供[H]和ATP,暗反應(yīng)發(fā)生在葉綠體基質(zhì)?!究键c(diǎn)定位】本題主要考查光合作用和呼吸作用的過程及化能合成作用等基礎(chǔ)知識(shí),意在考查學(xué)生對重要基礎(chǔ)知識(shí)的掌握是否熟練,屬基礎(chǔ)題。4、B【解題分析】
單克隆抗體的制備過程是:對小動(dòng)物注射抗原,從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞,將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞,克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞(體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)),最后獲取單克隆抗體?!绢}目詳解】A、單克隆抗體的制備過程利用了細(xì)胞增殖、細(xì)胞膜流動(dòng)性等原理,沒有用到基因重組,A錯(cuò)誤;B、誘導(dǎo)骨髓瘤細(xì)胞與效應(yīng)B細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞的物理方法有振動(dòng)、電刺激等,B正確;C、雜交瘤細(xì)胞的篩選需要使用特定的篩選培養(yǎng)基,觀察細(xì)胞染色體數(shù)目和形態(tài)只能判斷細(xì)胞是否融合,故不能通過觀察染色體的數(shù)目和形態(tài)篩選雜交瘤細(xì)胞,C錯(cuò)誤;D、利用選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細(xì)胞,還需要進(jìn)行專一抗體檢測和克隆化培養(yǎng)后才能用于生產(chǎn)單克隆抗體,D錯(cuò)誤。故選B?!绢}目點(diǎn)撥】本題主要考查單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí),目的是考查學(xué)生對制備過程各環(huán)節(jié)的識(shí)記、理解和應(yīng)用,明確制備過程中的注意事項(xiàng)和關(guān)鍵手段。5、B【解題分析】
本題考查葉綠體中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)、觀察細(xì)胞質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)、觀察植物細(xì)胞的有絲分裂的實(shí)驗(yàn)、探究酵母菌細(xì)胞呼吸方式的實(shí)驗(yàn)。綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn),提取色素時(shí)需要加入無水乙醇(溶解色素)、石英砂(使研磨更充分)和碳酸鈣(防止色素被破壞);分離色素時(shí)采用紙層析法,原理是色素在層析液中的溶解度不同,隨著層析液擴(kuò)散的速度不同。觀察洋蔥表皮細(xì)胞質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)中,所取試劑的濃度要適宜,不能過高,這樣會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞失水過多而死,也不能過低,這樣會(huì)使實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯。染色體易被龍膽紫、醋酸洋紅等堿性染料染成深色?!绢}目詳解】A、探究酵母菌的呼吸方式實(shí)驗(yàn)中,可用BTB(溴麝香草酚藍(lán))溶液檢測二氧化碳,溶液由藍(lán)變綠再變黃,但酵母菌有氧呼吸和無氧呼吸都能產(chǎn)生二氧化碳,A錯(cuò)誤;
B、觀察洋蔥表皮細(xì)胞質(zhì)壁分離使用1.3g/mL的蔗糖溶液,使用1.5g/mL的蔗糖溶液導(dǎo)致細(xì)胞液與外界溶液的濃度差更大,出現(xiàn)質(zhì)壁分離現(xiàn)象更明顯,B正確;
C、葉綠體色素是有機(jī)物,色素的分離使用的是層析液,C錯(cuò)誤;
D、觀察細(xì)胞的有絲分裂中染色體行為——龍膽紫或醋酸洋紅等堿性染料,D錯(cuò)誤。
故選B。6、C【解題分析】
現(xiàn)代生物進(jìn)化理論認(rèn)為:變異是不定向的,可遺傳變異為生物進(jìn)化提供原材料,自然選擇通過定向改變種群的基因頻率而使生物朝著一定的方向進(jìn)化,生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)是種群基因頻率的改變?!绢}目詳解】A、在生物的繁殖過程中,個(gè)體并不是把性狀直接傳遞給后代,而是通過基因傳遞給后代,A錯(cuò)誤;|
B、變異是不定向的,在此過程中青霉素起定向選擇作用,B錯(cuò)誤;
C、在青霉素的選擇作用下,具有抗青霉素基因的個(gè)體有更多的機(jī)會(huì)生存并繁殖后代,不具有抗青霉素基因的個(gè)體逐漸被淘汰,因此青霉素使葡萄球菌的抗青霉素基因的基因頻率逐漸升高,C正確;
D、葡萄球菌是原核生物,細(xì)胞內(nèi)沒有染色體,故葡萄球菌沒有染色體變異的發(fā)生,D錯(cuò)誤。
故選C?!绢}目點(diǎn)撥】本題易錯(cuò)點(diǎn)在于青霉素的作用:不是誘導(dǎo)葡萄球菌發(fā)生變異的作用,而是對葡萄球菌起選擇作用。7、B【解題分析】
根據(jù)題意,科研人員用適宜劑量的化學(xué)誘變劑EMS飼喂雄性果蠅(純合正常翅),并與正常雌蠅(純合正常翅)雜交,子一代出現(xiàn)卷翅,故推測卷翅的出現(xiàn)是突變的結(jié)果,而基因突變具有低頻性、不定向性、普遍性、多害少利性、隨機(jī)性等特點(diǎn),據(jù)此分?!绢}目詳解】A、用化學(xué)誘變劑EMS飼喂雄性果蠅(純合正常翅),并與正常雌蠅(純合正常翅)雜交,子一代出現(xiàn)卷翅,可知是基因突變的結(jié)果,若正常翅是隱性,則雜交后子代仍為正常翅,故正常翅性狀是顯性,卷翅性狀的出現(xiàn)是顯性基因突變的結(jié)果,A正確;B、卷翅與正常翅是一對相對性狀,受一對等位基因控制,符合基因的分離定律,B錯(cuò)誤;C、基因突變具有不定向性,因此用EMS化學(xué)誘變劑飼喂果蠅導(dǎo)致產(chǎn)生卷翅突變體的過程是不定向的,C正確;D、若控制翅型基因用A、a表示,據(jù)選項(xiàng)A可知,正常翅性狀是顯性,用化學(xué)誘變劑EMS飼喂雄性果蠅(純合正常翅),并與正常雌蠅(純合正常翅)雜交,在子一代發(fā)現(xiàn)了具有卷翅的果蠅,設(shè)aa為正常翅,親本雄果蠅突變?yōu)锳a,則F1中卷翅為Aa,D正確。故選B。8、D【解題分析】
玉米根細(xì)胞屬于真核細(xì)胞,尿素分解菌屬于原核生物,具有原核細(xì)胞所有的特征?!绢}目詳解】A、尿素分解菌屬于原核生物,無高爾基體,A錯(cuò)誤;B、玉米根細(xì)胞從土壤中吸收NH4+屬于主動(dòng)運(yùn)輸,需要載體蛋白的參與,B錯(cuò)誤;C、糖類的組成元素只有C、H、O,不含N元素,NH4+中的N可作為玉米細(xì)胞中蛋白質(zhì)等的構(gòu)成元素,C錯(cuò)誤;D、尿素分解菌中具有裸露的環(huán)狀DNA分子,D正確。故選D。二、非選擇題9、垂體和下丘腦促性腺激素和促性腺激素釋放(負(fù))反饋由正電位變?yōu)樨?fù)電位效應(yīng)器【解題分析】
性激素的分泌調(diào)節(jié)過程是:下丘腦可以分泌促性腺激素釋放激素作用于垂體,促進(jìn)垂體分泌促性腺激素作用于性腺,促進(jìn)性腺分泌性激素增加,血液中性激素增加后通過負(fù)反饋調(diào)節(jié)影響下丘腦和垂體的分泌,使二者分泌的相關(guān)激素減少,該過程存在著分級調(diào)節(jié)和反饋調(diào)節(jié)?!绢}目詳解】(1)由于雌性激素的分泌存在負(fù)反饋調(diào)節(jié),當(dāng)雌性激素含量過多時(shí),會(huì)反饋抑制下丘腦和垂體的分泌活動(dòng),從而使促性腺激素釋放激素和促性腺激素的分泌量減少。由于垂體分泌的促性腺激素能促進(jìn)性腺的發(fā)育和性激素的釋放,當(dāng)促性腺激素分泌量減少時(shí),會(huì)導(dǎo)致性腺萎縮,上述調(diào)節(jié)機(jī)制為負(fù)反饋調(diào)節(jié)。(2)感受器接受刺激產(chǎn)生興奮后,神經(jīng)細(xì)胞膜電位變?yōu)橥庳?fù)內(nèi)正的動(dòng)作電位,即膜外由正電位變?yōu)樨?fù)電位,興奮以電信號的形式在神經(jīng)纖維上傳導(dǎo),最終會(huì)傳遞到膽囊,使其收縮,引起膽汁分泌。在這個(gè)調(diào)節(jié)中,膽囊既是反射弧中效應(yīng)器的一部分,又是激素作用的靶器官?!绢}目點(diǎn)撥】本題考查性激素的分泌過程和神經(jīng)-體液調(diào)節(jié)的關(guān)系,意在考查考生對所學(xué)知識(shí)的理解和應(yīng)用能力。10、逆轉(zhuǎn)錄cDNA熱穩(wěn)定性DNA聚合酶抗體抗原-抗體分子雜交HIVDNA序列一段特異性DNA序列DNA分子雜交【解題分析】
目的基因是否在轉(zhuǎn)基因生物體內(nèi)存在的檢測方法是采用DNA分子雜交技術(shù),即將轉(zhuǎn)基因生物的基因天組DNA提取出來,在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作標(biāo)記,以此作為探針,使探針與基因組DNA雜交,如果顯示出雜交帶,就表明目的基因已插入染色體DNA中。其次,還需要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,這是檢測目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一步。檢測方法同樣是采用分子雜交技術(shù),與上述方法不同之處是從轉(zhuǎn)基因生物中提取的是mRNA,同樣用標(biāo)記的目的基因作探針,與mRNA雜交,如果顯示出雜交帶,則表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了mRNA。最后,檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。檢測的方法與上述方法有所不同,是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原一抗體雜交,若有雜交帶出現(xiàn),表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品。除了上述的分子檢測外,有時(shí)還需要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。例如,一個(gè)抗蟲或抗病的目的基因?qū)胫参锛?xì)胞后,是否賦予了植物抗蟲或抗病特性,需要做抗蟲或抗病的接種實(shí)驗(yàn)?!绢}目詳解】(1)HIV病毒的遺傳物質(zhì)是RNA,若要進(jìn)行其遺傳物質(zhì)的擴(kuò)增,需要首先提取HIV的RNA,通過逆轉(zhuǎn)錄過程獲得cDNA,用于PCR擴(kuò)增。PCR技術(shù)需要通過高溫使氫鍵斷裂獲得DNA單鏈,故在擴(kuò)增過程中需用到熱穩(wěn)定性高的DNA聚合酶。然后,利用擴(kuò)增產(chǎn)物獲取HIV的S蛋白基因,構(gòu)建基因表達(dá)載體后導(dǎo)入受體細(xì)胞,從受體細(xì)胞中分離出S蛋白并純化,可用于檢測疑似病例血清中的抗體,從而完成病人的檢測,該檢測的原理是抗原--抗體分子雜交。(3)核酸檢測采用逆轉(zhuǎn)錄熒光PCR技術(shù)(RT-PCR技術(shù)),其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是研制特異性基因探針。探針通常是目的基因及添加上熒光標(biāo)記做成的,故此,檢測HIV采用的是HIV的帶熒光的一段特異性的DNA序列作為探針。(4)疑似患者體內(nèi)取樣提取RNA,逆轉(zhuǎn)錄后以病毒的一段特異性DNA序列為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,在病毒引物的作用下,若逆轉(zhuǎn)錄出的DNA中有該病毒的相關(guān)DNA,則可以擴(kuò)增出病毒的DNA,這時(shí)加入病毒的特異性探針,若在擴(kuò)增中探針能與待測DNA雜交,就表明待測個(gè)體攜帶HIV。上述檢測方法的原理是DNA分子雜交?!绢}目點(diǎn)撥】能夠結(jié)合目的基因檢測與鑒定的原理理解本題中關(guān)于病毒的核酸檢測和蛋白質(zhì)檢測的原理是解答本題的關(guān)鍵!理解病毒擴(kuò)增的原理是解答本題的另一關(guān)鍵,注意相關(guān)探針都是病毒的基因序列。11、從基因文庫中獲取人工合成DNA單鏈特異探針先于引物4種脫氧核苷酸(或Mg2+)Taq將探針?biāo)?n-1【解題分析】
PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1)原理:DNA雙鏈復(fù)制(2)過程:第一步:加熱至90~95℃DNA解鏈;第二步:冷卻到55~60℃,引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈;第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成?!绢}目詳解】(1)在基因工程中,目前獲取目的基因的常用方法有:利用PCR技術(shù)擴(kuò)增、從基因文庫中獲取、人工合成。(2)引物的化學(xué)本質(zhì)是DNA單鏈,其與模板DNA的結(jié)合具有特異性。(3)通常情況下,探針中的GC含量比引物中的略高,這有利于保證退火時(shí)探針先于引物與模板DNA結(jié)合。(4)PCR擴(kuò)增所需的條件包括:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶),結(jié)合圖中信息可知,用TaqMan熒光探針技術(shù)檢測錦鯉皰疹病毒時(shí),在反應(yīng)體系中要加相應(yīng)的病毒遺傳物質(zhì)、引物、探針和4種脫氧核苷酸、Taq酶等;由圖可知,酶發(fā)揮的具體作用是延伸DNA鏈
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