臨床微生物標(biāo)本

采集與送檢第1頁主要內(nèi)容1、標(biāo)本采集意義和標(biāo)準(zhǔn)2、標(biāo)本運(yùn)輸與拒收標(biāo)準(zhǔn)3、各種標(biāo)本采集血液、骨髓標(biāo)本尿液糞便痰及上呼吸道標(biāo)本穿刺液標(biāo)本（腦脊液、膽汁、胸腹水等）膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本生殖道標(biāo)本第2頁

標(biāo)本采集是指采集患者體內(nèi)一小部分血液、體液、排泄物、分泌物以及組織細(xì)胞等標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)，以反應(yīng)機(jī)體正常生理現(xiàn)象和病理改變。

標(biāo)本采集第3頁

標(biāo)本采集60%以上試驗(yàn)誤差發(fā)生在分析前！標(biāo)本采集正確是否與檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性有親密關(guān)系!所以，我們應(yīng)掌握正確標(biāo)本采集方法。第4頁正確微生物標(biāo)本采集和運(yùn)輸是準(zhǔn)確病原學(xué)診療前提第5頁掌握正確標(biāo)本采集方法

為確保標(biāo)本質(zhì)量，取得陽性結(jié)果，應(yīng)掌握正確標(biāo)本采集方法、采集量和采集時(shí)間并應(yīng)及時(shí)送檢，特殊標(biāo)本還需注明采集時(shí)間。第6頁基本標(biāo)準(zhǔn)1.及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢驗(yàn)2.在抗菌藥品使用前采集標(biāo)本3.采樣時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作4.采樣后馬上送檢5.混有正常菌群標(biāo)本，不可置肉湯培養(yǎng)6.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑。7.送檢標(biāo)本應(yīng)注明起源和檢驗(yàn)?zāi)繕?biāo)第7頁標(biāo)本運(yùn)輸標(biāo)準(zhǔn)1、所有標(biāo)本都必須馬上送往試驗(yàn)室，最好在2h內(nèi),保留時(shí)間不應(yīng)超出24h.2、最佳臨床標(biāo)本送檢首先取決于所獲取標(biāo)本量.量少標(biāo)本應(yīng)在采集后15-30min內(nèi)送檢.3、對(duì)環(huán)境敏感微生物如志賀菌、奈瑟氏菌和流感嗜血桿菌（對(duì)低溫敏感）應(yīng)馬上處理，禁止冷藏脊髓液和生殖道、眼部、內(nèi)耳道標(biāo)本。第8頁標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)無標(biāo)簽、無檢驗(yàn)單不檢測(cè)，并與送檢醫(yī)生和護(hù)士聯(lián)絡(luò)。送檢延誤不接收，提醒送檢者，要求重新采集。送檢容器不妥或滲漏不接收，通知送檢者，要求重新采集。標(biāo)本不符合要求不接收，聯(lián)絡(luò)送檢者，指出不符合要求之處，要求重新采集符合試驗(yàn)要求標(biāo)本.第9頁臨床微生物檢驗(yàn)常見標(biāo)本血液、骨髓標(biāo)本尿液糞便痰及上呼吸道標(biāo)本穿刺液標(biāo)本（腦脊液、膽汁、胸腹水等）膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本生殖道標(biāo)本第10頁一、血培養(yǎng)標(biāo)本采集第11頁血培養(yǎng)送檢指征病人出現(xiàn)以下臨床表現(xiàn)，或同時(shí)具備以下幾個(gè)臨床表現(xiàn)時(shí)應(yīng)采集血培養(yǎng)。1、發(fā)燒（≥38℃）或低溫（≤36℃）2、寒戰(zhàn)3、白細(xì)胞增多（＞10×109/L，尤其有“核左移”時(shí)）4、粒細(xì)胞降低（成熟多形核白細(xì)胞＜1×109/L）5、血小板降低6、皮膚、粘膜出血7、昏迷8、多器官衰竭9、血壓降低10、呼吸加緊11、特殊情況：可疑新生兒敗血癥時(shí)，除發(fā)燒或低溫外，極少培養(yǎng)出細(xì)菌，應(yīng)增加尿液和腦脊液培養(yǎng)。第12頁血培養(yǎng)采集須知應(yīng)在抗生素應(yīng)用前或停藥一周后采集標(biāo)本，如不能停用抗生素，應(yīng)于下次抗生素應(yīng)用前采集！對(duì)懷疑菌血癥、真菌血癥患者，在考慮使用抗菌藥品之前，應(yīng)馬上采集血培養(yǎng)標(biāo)本。必須同時(shí)或間隔短時(shí)間內(nèi)采集２套以上血培養(yǎng)標(biāo)本。第13頁血培養(yǎng)采集容器法國梅里埃企業(yè)血培養(yǎng)儀配套血培養(yǎng)瓶或安圖企業(yè)血培養(yǎng)瓶第14頁血培養(yǎng)標(biāo)本采集方法1、皮膚消毒2、培養(yǎng)瓶消毒：(1)用75％酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子。(2)酒精作用60s。(3)在血液注入血培養(yǎng)瓶之前，用無菌紗布或棉簽去除橡皮塞子表面剩下酒精，然后注入血液。3、血液注入血培養(yǎng)瓶中，輕輕顛倒混勻，以防血液凝固。第15頁血培養(yǎng)采集次數(shù)成年患者：推薦同時(shí)采集２－３套（不一樣部位）血培養(yǎng)標(biāo)本（即雙瓶雙臂同時(shí)采集血培養(yǎng)標(biāo)本）。嬰幼兒患者：推薦同時(shí)采集２次（不一樣部位）血培養(yǎng)標(biāo)本。原因：血培養(yǎng)做1套檢出率為65%。做2套和3套檢出率檢出率分別為80%和90%。單瓶血培養(yǎng)檢出率不高，而且結(jié)果極難臨床解釋。在采取血培養(yǎng)后2至5天內(nèi)，無需重復(fù)采取血培養(yǎng)。兩個(gè)例外：細(xì)菌性心內(nèi)膜炎和金黃色葡萄球菌菌血癥。第16頁血培養(yǎng)采血量成年患者：推薦采血量每瓶不少于5ml。嬰幼兒患者：兒童3-5ml，嬰兒為1-2ml，推薦采血量每瓶不少于2ml。（少于病人總血容量1%）第17頁注意事項(xiàng)1、嚴(yán)禁在輸液、輸血針頭處抽取標(biāo)本，以免影響檢驗(yàn)結(jié)果。（最好在對(duì)側(cè)采集）2、若同時(shí)抽取幾個(gè)項(xiàng)目標(biāo)血標(biāo)本，普通注入容器次序?yàn)椋貉囵B(yǎng)瓶→抗凝管→干燥試管.動(dòng)作要快速準(zhǔn)確，防止溶血。注入標(biāo)本后血培養(yǎng)瓶務(wù)必馬上送至檢驗(yàn)科細(xì)菌室3、每次領(lǐng)培養(yǎng)瓶不宜過多，以防過期，未使用培養(yǎng)瓶亦應(yīng)室溫保留（15-30℃），切勿放冰箱保留。第18頁骨髓標(biāo)本微生物學(xué)檢驗(yàn)

采集部位：骨髓穿刺法從髂骨采集標(biāo)本。

采集時(shí)間：在用藥前、發(fā)燒早期或高熱期

當(dāng)骨髓炎時(shí)或長久使用抗菌藥品患者，抽取骨髓培養(yǎng)陽性率遠(yuǎn)高于血液培養(yǎng)

第19頁

二、尿液標(biāo)本采集

第20頁尿液標(biāo)本送檢指征1有經(jīng)典尿路感染癥狀；2肉眼膿尿或血尿；3尿常規(guī)檢驗(yàn)表現(xiàn)為白細(xì)胞和/或亞硝酸鹽陽性；4不明原因發(fā)燒，無其它局部癥狀；5留置導(dǎo)尿管病人出現(xiàn)發(fā)燒；6膀胱排空功效受損；7泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前。第21頁尿液標(biāo)本采集容器無菌試管或無菌尿液標(biāo)本留取容器第22頁尿液標(biāo)本采集方法1、清潔中段尿標(biāo)本，囑咐患者睡前少飲水，清晨起床后用肥皂水清洗會(huì)陰部，女性應(yīng)用手分開大陰唇，男性應(yīng)翻上包皮，仔細(xì)清洗，再用清水沖洗尿道口周圍，開始排尿，將前段尿排去，插入性接取中段尿約10ml于無菌容器中，馬上送檢，于一小時(shí)內(nèi)接種。該方法簡(jiǎn)單、易行，是最慣用尿培養(yǎng)標(biāo)本搜集方法，但很輕易受到會(huì)陰部細(xì)菌污染，應(yīng)由醫(yī)護(hù)人員采集或在醫(yī)護(hù)人員指導(dǎo)下由患者正確留取。第23頁尿液標(biāo)本采集方法2、恥骨上膀胱穿刺：使用無菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮穿入膀胱吸收尿液，是評(píng)定膀胱內(nèi)細(xì)菌感染“金標(biāo)準(zhǔn)”方法，但有一定痛苦，病人難以接收。主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難嬰兒尿標(biāo)本采集

第24頁尿液標(biāo)本采集方法3、直接導(dǎo)尿：按常規(guī)方法對(duì)會(huì)陰部進(jìn)行清洗消毒后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液。可降低尿液標(biāo)本污染，準(zhǔn)確地反應(yīng)膀胱感染情況。但有可能將下尿道細(xì)菌引入膀胱，造成繼發(fā)感染，普通不提倡使用。

第25頁尿液標(biāo)本采集方法4、小兒搜集包：對(duì)于無控制能力小兒可應(yīng)用搜集包搜集尿液，這種裝置因?yàn)闃O難防止會(huì)陰部菌群污染產(chǎn)生假陽性，所以只有在檢驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí)才有意義。假如檢驗(yàn)結(jié)果為陽性，應(yīng)結(jié)合臨床進(jìn)行分析，必要時(shí)可使用恥骨上膀胱穿刺或?qū)蚍羧∧蛞哼M(jìn)行復(fù)查。

第26頁尿液標(biāo)本采集方法5、留置導(dǎo)尿管搜集尿液：利用留置導(dǎo)尿管采集標(biāo)本時(shí)，應(yīng)先消毒導(dǎo)尿管外部，按無菌操作方法用注射器穿刺導(dǎo)尿管吸收尿液，操作時(shí)應(yīng)預(yù)防混入消毒劑，不能從搜集袋中采集尿液。長久留置導(dǎo)尿患者，應(yīng)在更換新尿管時(shí)留取尿標(biāo)本。

第27頁注意事項(xiàng)

嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，因?yàn)槟蛞簶?biāo)本采集和培養(yǎng)中最大問題是污染雜菌

通常應(yīng)取晨起第一次尿液送檢

多數(shù)藥品均經(jīng)過尿液排泄，所以采集尿液應(yīng)在用藥前進(jìn)行

第28頁三、糞便標(biāo)本采集

第29頁糞便標(biāo)本送檢指征1急性腹瀉：大便次數(shù)顯著增多，腹痛，里急后重，往往伴有發(fā)燒，大便性狀為粘液便或膿血便。2慢性腹瀉：大便次數(shù)多，多為稀便，伴有全身乏力等癥狀。3無痛性大量水樣便或米泔樣稀便。4先吐后瀉：惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。有集體發(fā)病史，多為細(xì)菌性食物中毒所致。5抗生素治療后腹瀉：常發(fā)生于長久抗生素治療后，糊狀便，排便次數(shù)增加。6高熱驚厥：通常為中毒性痢疾，多見于嬰幼兒和小兒。第30頁糞便標(biāo)本采集容器一次性無菌便盒

第31頁糞便標(biāo)本采集時(shí)間1．采樣標(biāo)準(zhǔn)

腹瀉病人應(yīng)在急性期采集（3天以內(nèi)），以提升檢出率，亦最好在用藥之前。2．沙門菌感染

腸熱癥在2周以后；胃腸炎病人在急性期，早期采集新鮮糞便

第32頁糞便標(biāo)本采集方法

自然排便采集法

自然排便后，挑取其膿血、粘液部分2-3g，液狀糞便取絮狀物2-3ml，盛于滅菌容器內(nèi)或保留液中送檢

直腸拭子方法

如不易取得糞便時(shí)，或排泄困難患者及嬰兒，可用直腸拭子采取，即以無菌棉拭子用生理鹽水濕潤后，插入肛門內(nèi)4-5cm（幼兒2-3cm）輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)取出，插入無菌試管內(nèi)送檢。第33頁注意事項(xiàng)

雖糞便含有各種雜菌，但應(yīng)盡可能采取無菌容器（一次性無菌平皿）。

為提升檢出率，要采集新鮮糞便作培養(yǎng)，且應(yīng)挑取其膿血、粘液部分。

第34頁四、痰及上呼吸道標(biāo)本采集

第35頁痰標(biāo)本送檢指征1咳嗽、咳痰：痰液可為膿性、血性、鐵銹色或紅棕色膠胨樣痰。

2咯血：肺結(jié)核病人常痰中帶血。

3呼吸困難4發(fā)燒5胸痛：當(dāng)炎癥病變累及壁層胸膜時(shí)，會(huì)發(fā)生胸痛。*肺部感染患者有25～50％可能發(fā)生菌血癥，應(yīng)同時(shí)作血培養(yǎng)。第36頁上呼吸道標(biāo)本送檢指征1病毒性普通感冒伴有顯著咽痛時(shí)，懷疑為咽部鏈球菌感染，應(yīng)做細(xì)菌培養(yǎng)。2細(xì)菌性咽－扁桃體炎：顯著咽痛、畏寒、發(fā)燒，體溫可達(dá)39℃以上。3上呼吸道感染易并發(fā)鼻竇炎、中耳炎、氣管－支氣管炎，需送對(duì)應(yīng)部位分泌物或痰液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。第37頁痰標(biāo)本和上呼吸道標(biāo)本采集容器一次性無菌留痰盒咽拭子或鼻咽拭子第38頁痰及上呼吸道標(biāo)本采集時(shí)間痰：普通以晨痰為好；支氣管擴(kuò)張癥患者，清晨起床后進(jìn)行體位引流，可采集大量痰標(biāo)本。咽拭標(biāo)本：時(shí)間上雖無嚴(yán)格限制，但應(yīng)于抗菌藥品治療前為好。咽部又是呼吸和食物通路，所以亦以晨起后采集為宜

第39頁痰標(biāo)本采集方法：

自然咳痰法：患者清晨起床后，先用漱口水漱口，再以開水或生理鹽水漱口，以降低口腔常居菌群污染，然后用力自氣管深部咳出第一口痰于無菌痰懷內(nèi)送檢

小兒取痰法：用壓舌板向后壓舌，用棉拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時(shí)，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上，送檢

第40頁上呼吸道標(biāo)本（咽拭子）采集方法：

采集上呼吸道標(biāo)本通常采取無菌棉拭子。采集前患者應(yīng)用開水或生理鹽水重復(fù)漱口，由檢驗(yàn)者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，將棉拭子經(jīng)過舌根到咽后壁或腭垂后側(cè)，涂抹數(shù)次，但拭子要防止接觸口腔和舌粘膜

第41頁注意事項(xiàng)1．

采集標(biāo)本以清晨為佳，以降低口腔正常菌群污染，采集前先用漱口液充分漱口。2．

做結(jié)核分枝桿菌和真菌培養(yǎng)標(biāo)本若不能及時(shí)送檢，應(yīng)放4℃冰箱保留，以免雜菌生長。3．

作結(jié)核分枝桿菌檢驗(yàn)，痰量要多或留取24小時(shí)痰液，以提升陽性檢出率。第42頁五、穿刺液標(biāo)本第43頁穿刺液標(biāo)本

采集時(shí)間：當(dāng)懷疑感染存在，應(yīng)盡早采集標(biāo)本，普通在患者使用抗菌藥品之前或停頓用藥后1-2日采集

采集容器：無菌容器采集方法：采取無菌方法用注射器抽取體內(nèi)可疑感染部位液體，注入無菌試管馬上送檢

第44頁注意事項(xiàng)：

如果用于檢測(cè)細(xì)菌，搜集腦脊液后，最好能在常溫下15-30分鐘內(nèi)接種培養(yǎng)皿。腦脊液標(biāo)本不可置冰箱保留，不然會(huì)使病原菌死亡，尤其是腦膜炎奈瑟菌（能產(chǎn)生自溶素快速自溶）、肺炎鏈球菌和嗜血桿菌。第45頁注意事項(xiàng)：如果只采集了一管腦脊液，應(yīng)先送細(xì)菌室做細(xì)菌培養(yǎng)，再做腦脊液生化、常規(guī)等檢驗(yàn)穿刺時(shí)應(yīng)嚴(yán)格無菌操作

作腦脊液培養(yǎng)時(shí)，提議同時(shí)作血培養(yǎng)

第46頁注意事項(xiàng)：為了預(yù)防穿刺液凝固，最好在無菌試管中預(yù)先加入滅菌肝素，再注入穿刺液盡可能采集更多液體，最少1ml第47頁六、膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本

第48頁膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本采集開放性膿腫和膿性分泌物

先以無菌鹽水沖洗潰瘍表面，用2支無菌棉拭子拭取潰瘍深處分泌物后插入無菌試管送檢。一支為涂片檢驗(yàn)用，另一支作培養(yǎng)用

大面積燒傷創(chuàng)面分泌物

用無菌棉拭子取多部位創(chuàng)面膿液或分泌物，置無菌試管內(nèi)送檢

封閉性膿腫

消毒局部皮膚或粘膜表面后，用注射器抽取，將膿液注入無菌試管內(nèi)送檢

第49頁注意事項(xiàng)：

不能馬上送檢標(biāo)本，應(yīng)放4℃保留；培養(yǎng)淋球菌、腦膜炎奈瑟菌標(biāo)本除外

用藥前采集標(biāo)本，嚴(yán)格無菌采樣

第50頁七、生殖道標(biāo)本第51頁生殖道標(biāo)本檢驗(yàn)生殖道標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、結(jié)核菌培養(yǎng)；解脲支原體、沙眼衣原體、淋菌培養(yǎng)；淋菌涂片；細(xì)菌性陰道病相關(guān)檢測(cè)、真菌涂片

第52頁生殖道標(biāo)本送檢指征1皮膚黏膜損害：原發(fā)損害可有斑疹、丘疹、結(jié)節(jié)、水皰、囊腫、糜爛、潰瘍等。繼發(fā)損害由原發(fā)損害演變而來，有萎縮或斑痕等，患者可出現(xiàn)疼痛或瘙癢癥狀。2全身癥狀：多數(shù)無全身癥狀。偶有發(fā)燒、乏力、食欲不振等。3男性生殖系統(tǒng)表現(xiàn)4女性生殖系統(tǒng)表現(xiàn)5疑為以下疾病時(shí)需送檢標(biāo)本：前庭大腺膿腫、外陰陰道念珠菌病、細(xì)菌性陰道病、急性子宮頸炎、急性盆腔炎、急性尿道炎、急性膀胱炎、羊膜腔感染、產(chǎn)褥期感染。第53頁生殖道標(biāo)本采集容器無菌試管、男性拭子、女性拭子

第54頁生殖道標(biāo)本采集方法1尿道分泌物①男性：清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦拭，采取從尿道口溢出膿性分泌物或用無菌男性拭子插入尿道內(nèi)2～4厘米取出分泌物。如無膿液溢出，可從陰莖腹面向龜頭方向按摩，促使分泌物溢出。②女性：清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦拭，然后從陰道內(nèi)診壓迫尿道，或從尿道后面向前按摩，使分泌物溢出。無肉眼可見膿液，可用滅菌拭子輕輕深入前尿道內(nèi)，旋轉(zhuǎn)拭子，采集標(biāo)本。第55頁生殖道標(biāo)本采集方法2巴氏腺、尿道旁腺：清洗或局部消毒，然后壓迫腺體，使分泌物溢出。3陰道分泌物：用窺器擴(kuò)張陰道，用滅菌女性拭子采取陰道口內(nèi)4厘米內(nèi)側(cè)壁或后穹隆處罰泌物培養(yǎng)或涂片鏡檢。4宮頸分泌物：用窺器擴(kuò)張陰道，先用無菌棉球擦取宮頸口分泌物；用女性拭子插入宮頸管2厘米采取分泌物，轉(zhuǎn)動(dòng)并停留10～20秒鐘，讓拭子充分吸附分泌物，或