超高效液相色譜法同時(shí)測定洗發(fā)類化妝品中3種去屑劑的含量

香波工業(yè)起步較晚。隨著國家經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，香波工業(yè)發(fā)展極為迅速。香波具有去屑和緩解作用。去屑劑的種類和含量不僅決定去屑效果優(yōu)劣,而且對(duì)消費(fèi)者的健康也有一定的影響。水楊酸、酮康唑、氯咪巴唑是市場上去屑香波及其他去屑產(chǎn)品的主要去屑劑?！痘瘖y品衛(wèi)生規(guī)范》規(guī)定去屑化妝品中水楊酸的最大允許量為3%,氯咪巴唑?yàn)?.5%,而酮康唑?yàn)榻贸煞帧Ｒ虼私⑾窗l(fā)用產(chǎn)品中去屑劑的檢測方法,對(duì)維護(hù)消費(fèi)者的健康和權(quán)益具有重要意義。已有報(bào)道用高效液相色譜法測定去屑香波中水楊酸、酮康唑,而尚無采用超高效液相色譜法(UPLC)同時(shí)測定3種去屑劑的相關(guān)報(bào)道。本工作采用了超高效液相色譜法同時(shí)測定洗發(fā)類化妝品中水楊酸、酮康唑、氯咪巴唑3種去屑劑的含量。1試驗(yàn)部分1.1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液和緩沖混合溶液配制WatersACQUITYUPLC超高效液相色譜儀?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)溶液:分別稱取水楊酸、酮康唑、氯咪巴唑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)0.05,0.05,0.1g,各加入乙腈-甲醇(95+5)溶液85mL,超聲,待溶解完全后轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,用乙腈-甲醇(95+5)溶液定容,配成標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液,再用乙腈-甲醇(95+5)溶液配成混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。緩沖混合溶液:10mmol·L-1磷酸二氫鉀和0.5mmol·L-1乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA)溶液混合,用磷酸調(diào)至pH4.0。乙腈、甲醇為色譜純,磷酸為優(yōu)級(jí)純,其余試劑為分析純。1.2流動(dòng)相、流動(dòng)相的選擇ACQUITYUPLC-BEHC18色譜柱(2.1mm×100mm,1.7μm),流動(dòng)相為乙腈、甲醇、pH4.0的緩沖混合溶液以體積比57.5比8.5比34混合,流速0.3mL·min-1,二極管陣列檢測器,檢測波長為230nm,單運(yùn)行時(shí)間2min,柱溫25℃,進(jìn)樣量1.0μL。1.3超聲提取-過濾稱取香波樣品0.5g于50mL具塞比色管中,加入乙腈-甲醇(95+5)溶液至刻度,振搖,超聲提取30~40min。經(jīng)0.45μm濾膜過濾,濾液作為待測樣液。按儀器工作條件對(duì)香波樣品中水楊酸、酮康唑、氯咪巴唑進(jìn)行測定。2結(jié)果與討論2.1色度條件的選擇2.1.1不同的色譜條件對(duì)分離效果的影響目前UPLC色譜柱的鍵合相主要有C18及C8(直鏈烷烴)、ShieldRP18(內(nèi)嵌有氨基甲酸酯極性基團(tuán),表現(xiàn)出對(duì)氫鍵供體的特殊選擇性)、Phenyl(苯基連接在C6直鏈的硅甲基官能團(tuán)上)和HILIC(硅膠)。試驗(yàn)分別考察了這5種具有不同選擇性的UPLC色譜柱(2.1mm×100mm,1.7μm),對(duì)3種去屑劑化合物的分離效果。結(jié)果表明:3種去屑劑在ACQUITYUPLCBEHC18色譜柱上均獲得了最為理想的分離效果。2.1.2動(dòng)相條件下3種去屑劑的分離不同的流動(dòng)相經(jīng)常呈現(xiàn)出顯著的分離選擇性和洗脫強(qiáng)度的差異,分別以甲醇-水、乙腈-水、乙腈-甲醇-水等溶液作流動(dòng)相進(jìn)行了試驗(yàn)。選擇乙腈-水溶液為流動(dòng)相時(shí),其體積比不同,3種去屑劑的分離情況有很大差異。乙腈-水溶液的體積比為70∶30時(shí),在2min內(nèi)水楊酸、氯咪巴唑出峰,酮康唑未出峰;當(dāng)體積比為60∶40時(shí),2min內(nèi)3種物質(zhì)均出峰,但分離不完全。這主要是因?yàn)橐译鏄O性較大,幾種組分共同出峰。因此,在流動(dòng)相中加入一定比例的甲醇,減小流動(dòng)相的極性,可實(shí)現(xiàn)3種去屑劑完全分離。試驗(yàn)表明:流動(dòng)相為乙腈、甲醇、緩沖混合溶液以體積比57.5比8.5比34時(shí),3種去屑劑可完全分離。2.1.3色譜峰間分離度的選擇試驗(yàn)發(fā)現(xiàn):色譜柱的柱溫對(duì)于水楊酸、酮康唑、氯咪巴唑3種去屑劑色譜峰之間的分離度有顯著的影響。試驗(yàn)在20~50℃等柱溫條件下進(jìn)行試驗(yàn),考察不同柱溫下水楊酸、酮康唑、氯咪巴唑之間的分離效果,結(jié)果表明:在25℃柱溫下分離效果最佳。2.2唑的保留時(shí)間3種去屑劑標(biāo)準(zhǔn)色譜圖見圖1,水楊酸、酮康唑、氯咪巴唑的保留時(shí)間分別為1.009,1.162,1.537min。該方法各標(biāo)樣的保留時(shí)間有較好的重現(xiàn)性,可結(jié)合保留時(shí)間(±5%)和紫外光譜對(duì)檢出峰進(jìn)行識(shí)別。2.3線性及關(guān)系數(shù)在色譜條件下,測定不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,以3種去屑劑的質(zhì)量濃度(x)對(duì)其峰面積(y)繪制工作曲線,3種去屑劑組分的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)結(jié)果見表1。以3倍的信噪比進(jìn)行計(jì)算,水楊酸、酮康唑、氯咪唑的檢出限分別為0.016,0.027,0.037mg·L-1。2.4加標(biāo)回收率試驗(yàn)在0.5g去屑類洗發(fā)樣品中,加水楊酸、酮康唑、氯咪巴唑混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,按試驗(yàn)方法進(jìn)行樣品處理,按儀器工作條件進(jìn)行測定,加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差結(jié)果見表2。2.5基質(zhì)對(duì)不同去屑劑的干擾按儀器工作條件對(duì)超市和藥店銷售的28種去屑香波和藥品進(jìn)行測定,有20種樣品含有3種去屑劑中的一種或幾種組分,檢出率為71%,實(shí)際陽性樣品分離色譜圖如圖2所示。由圖2可見:樣品經(jīng)前處理后,基質(zhì)對(duì)3種去屑劑的干擾較少。其中4種樣品含水楊酸,占14%;8種樣品含氯咪巴唑,占28%;6種樣品含酮康唑(去屑藥品),占10