藥物特殊雜質(zhì)檢查—利用藥物和雜質(zhì)在吸附或分配性質(zhì)上的差異一、講授內(nèi)容色譜法知識(shí)點(diǎn)目錄薄層色譜法紙色譜法高效液相色譜法氣相色譜法色譜法利用吸附或分配性質(zhì)的差異藥物中的一些雜質(zhì)，如反應(yīng)中間體、副產(chǎn)物、分解產(chǎn)物等，和藥物的結(jié)構(gòu)相近，與某些試劑的反應(yīng)也相同或相似，必須分離后再檢查。由于色譜法可以利用藥物和雜質(zhì)吸附或分配性質(zhì)的差異，將它們分離、檢測(cè)，因而廣泛應(yīng)用于藥物的雜質(zhì)檢查中。色譜法薄層色譜法紙色譜法高效液相色譜法氣相色譜法薄層色譜法簡(jiǎn)便、快速，靈敏度也比較高，又不需要特殊設(shè)備，在雜質(zhì)檢查中應(yīng)用很多。常用的方法有如下幾種：1、薄層色譜法雜質(zhì)對(duì)照品法1適用于已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)對(duì)照品的情況。適用于雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不能確定，或無雜質(zhì)對(duì)照品的情況。要求供試品與所檢查雜質(zhì)對(duì)顯色劑所顯顏色應(yīng)相同，顯色靈敏度也相同或相近。對(duì)照藥物法3供試品自身對(duì)照法2當(dāng)無合適的雜質(zhì)對(duì)照品，尤其是供試品顯示的雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與主成分斑點(diǎn)顏色有差異，難以判斷限量時(shí)，可用與供試品相同的藥物作為對(duì)照品，此對(duì)照藥物中所含待檢雜質(zhì)需符合限量要求，且穩(wěn)定性好。薄層色譜法基本操作

常用于極性較大物質(zhì)的分離、分析，如地高辛中的有關(guān)雜質(zhì)的檢查。紙色譜法較薄層色譜法展開時(shí)間長(zhǎng)，斑點(diǎn)較擴(kuò)散，不能用于強(qiáng)酸等腐蝕性顯色劑，因而應(yīng)用不如薄層色譜法廣泛。2、紙色譜法不僅分離效能高，而且可以準(zhǔn)確地測(cè)定各組分的峰面積，在雜質(zhì)檢查中應(yīng)用日益增多，特別是已使用高效液相色譜法測(cè)定含量的藥物，可采用同一色譜條件進(jìn)行雜質(zhì)檢查。3、高效液相色譜法分離原理計(jì)算各雜質(zhì)峰面積的和占總峰面積的百分率，不能超過限度。公式：L%=∑Ai/(∑Ai+A主）×100%檢查中應(yīng)注意的問題：溶劑峰不應(yīng)計(jì)算在總峰面積內(nèi)；誤差大，通常只用于粗略考查供試品中的雜質(zhì)含量。

峰面積歸一化法1測(cè)定方法有以下幾種：當(dāng)雜質(zhì)峰面積與主成分峰面積相差懸殊時(shí)，可采用主成分自身對(duì)照法。

檢查時(shí)：將供試溶液稀釋成一定濃度作為對(duì)照溶液，分別取供試溶液和對(duì)照溶液進(jìn)樣分析，供試溶液中各雜質(zhì)峰面積及其總和與對(duì)照溶液主成分峰面積進(jìn)行比較，控制供試品中雜質(zhì)的限量。判斷：對(duì)照品液為供試品的稀釋液，進(jìn)樣測(cè)得A主供試品液進(jìn)樣測(cè)得∑Ai

其∑Ai＜A主即為合格.不加校正因子的主成分自身對(duì)照法2將供試溶液稀釋成與雜質(zhì)限度相當(dāng)濃度作為對(duì)照溶液，分別取供試溶液和對(duì)照溶液進(jìn)樣分析，供試液中各雜質(zhì)峰面積總和與校正因子相乘后與對(duì)照溶液主成分峰面積比較，計(jì)算供試品中雜質(zhì)的含量。加校正因子的主成分自身對(duì)照法3配內(nèi)標(biāo)溶液+雜質(zhì)對(duì)照溶液作為校正因子測(cè)定液，測(cè)定內(nèi)標(biāo)和雜質(zhì)的峰高或峰面積，計(jì)算校正因子。計(jì)算對(duì)照品+內(nèi)標(biāo)：進(jìn)樣求校正因子公式1：（f)=(As/Cs)/(AR/CR)供試品+內(nèi)標(biāo)：進(jìn)樣求CX公式2：雜質(zhì)濃度CX=f×AX/(AS/CS)內(nèi)標(biāo)法測(cè)定樣品中雜質(zhì)的總量限度4分別取供試溶液和對(duì)照溶液進(jìn)樣分析，測(cè)量對(duì)照溶液和供試溶液中待測(cè)成分的峰面積，按下式計(jì)算含量：CX=CR×

AX/AR

本法由于微量注射器不易精確控制進(jìn)樣量，應(yīng)采用定量環(huán)