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1艾滋病(AIDS)2實(shí)驗(yàn)室檢查3免疫學(xué)檢測(cè)流式細(xì)胞儀測(cè)定4血清學(xué)檢測(cè)(1)HIV抗體的初篩試驗(yàn)——ELISA(酶聯(lián)免疫試驗(yàn))5血清學(xué)檢測(cè)(2)HIV抗體的確證試驗(yàn)——Westernblot(免疫印跡試驗(yàn))6血清學(xué)檢測(cè)(3)HIV抗原檢測(cè)——ELISA夾心法測(cè)定p24抗原敏感性很高(7~10pg/ml)特異性稍差(可有假陽(yáng)性)7分子生物學(xué)檢測(cè)(1)HIVRNA檢測(cè)—RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng))PCR:高溫變性(94℃)→低溫退火(55℃)→適溫延伸(72℃);經(jīng)25~30個(gè)循環(huán),成倍數(shù)擴(kuò)增熒光定量PCR:比常規(guī)PCR多一個(gè)寡聚核苷酸探針(帶一個(gè)熒光發(fā)光分子和一個(gè)熒光淬滅分子)應(yīng)用:PCR查PBMCs前病毒DNA;RT-PCR查血漿中的病毒RNA8分子生物學(xué)檢測(cè)(2)淋巴細(xì)胞HIVRNA檢測(cè)——Northern印跡雜交(Northernblot)
原理:RNA片段經(jīng)電泳分離,從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜,再用探針雜交9分子生物學(xué)檢測(cè)(3)HIV變異株檢測(cè)——Sanger測(cè)序法
原理:核酸擴(kuò)增時(shí),核苷酸在某一固定點(diǎn)開始,隨機(jī)在某一特定的堿基處終止,產(chǎn)生A、T、C、G四組不同長(zhǎng)度的一系列核苷酸,通過在尿素變性的PAGE膠上電泳,獲得DNA序列10病毒
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