能發(fā)熒光的熱帶斑馬魚(yú)普通熱帶斑馬魚(yú)是不發(fā)熒光的如何讓普通熱帶斑馬魚(yú)也發(fā)熒光?轉(zhuǎn)基因生物與轉(zhuǎn)基因食品基因工程：又叫做基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)。通俗的說(shuō)，就是按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來(lái)，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細(xì)胞里，定向地改造生物的遺傳性狀。原理：基因重組操作水平：DNA分子水平結(jié)果：定向地改造生物的遺傳性狀，獲得人類(lèi)所需要的品種。一、基因工程需要解決什么問(wèn)題？目的基因的獲得如何將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的表達(dá)第一步：獲取目的基因：三、基因工程基本步驟1、人工合成基因2、從某生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA中直接分離基因一、獲取目的基因1.基因的“剪刀”──限制性內(nèi)切酶（限制酶）一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列，并在特定的切割點(diǎn)上將DNA分子切斷。專一性（eg：EcoRI限制酶）GAGACTGATTGGCCTTAAGCTCGAGCTCTGACTAACCGGAATTCGAGCTC

GAGACTGATTGGCCTTAACTCTGACTAACCGG

GCTCGAGAATTCGAGCTC限制性內(nèi)切酶除了某些病毒以外，限制性內(nèi)切酶只在原核生物中發(fā)現(xiàn)識(shí)別位點(diǎn)和切割位點(diǎn)GATCCGGCCTAGGACCTTCCAGG黏性末端平末端目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞DNA分子大、難擴(kuò)散、難以通過(guò)細(xì)胞膜運(yùn)輸“特洛伊木馬”的啟發(fā)“木馬”：能比較容易穿過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞；能攜帶目的基因有助于目的基因在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)

常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)植物病毒3、基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體標(biāo)記基因，便于進(jìn)行檢測(cè)。運(yùn)載體必須同時(shí)滿足三個(gè)要求：①能與目的基因結(jié)合；②能進(jìn)入受體生物細(xì)胞并在受體生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并表達(dá)；③比較容易得到。用與提取目的基因相同的限制酶切割質(zhì)粒使之出現(xiàn)一個(gè)切口，將目的基因插入切口處，讓目的基因的黏性末端與切口上的黏性末端互補(bǔ)配對(duì)后，在連接酶的作用下連接形成重組DNA分子。第二步、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合

被同一種限制酶切斷的幾個(gè)DNA是否具有相同的黏性末端？基因的針線：DNA連接酶

G

AA

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CC

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G用同種限制酶切割目的基因質(zhì)?；虻尼樉€──DNA連接酶連接酶的作用是：將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末端連接起來(lái)，使之成為一個(gè)完整的DNA分子。重播導(dǎo)入擴(kuò)增第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞導(dǎo)入擴(kuò)增常用的受體細(xì)胞：菌類(lèi)和動(dòng)植物細(xì)胞Eg：可以分泌人胰島素的細(xì)菌第四步、目的基因的表達(dá)和檢測(cè)大量的受體細(xì)胞接受不多的目的基因。處理的受體細(xì)胞中真正攝入了目的基因的很少，必須將它從中檢測(cè)出來(lái)。將每個(gè)受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)形成菌落，檢測(cè)菌落中是否有目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。淘汰無(wú)表達(dá)產(chǎn)物的菌落，保留有表達(dá)產(chǎn)物的進(jìn)一步培養(yǎng)、研究。無(wú)表達(dá)產(chǎn)物無(wú)表達(dá)產(chǎn)物有表達(dá)產(chǎn)物無(wú)表達(dá)產(chǎn)物

第一課時(shí)知識(shí)點(diǎn)：基因工程的概念基因工程的基本步驟（四步驟）目的基因的運(yùn)載體有哪些？質(zhì)粒（存在于細(xì)菌和酵母菌中）、噬菌體、動(dòng)植物病毒基因的剪刀、針線分別是？

限制性核酸內(nèi)切酶（200多種）、DNA連接酶四、基因工程的應(yīng)用一、基因工程與作物育種抗蟲(chóng)害的玉米轉(zhuǎn)黃瓜抗青枯病基因的甜椒轉(zhuǎn)魚(yú)抗寒基因的番茄獲得高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的農(nóng)作物和具有抗逆性的作物新品種。gkstk精品課件抗蟲(chóng)的基因來(lái)自蘇云金桿菌。蘇云金桿菌形成的伴胞晶體是一種毒性很強(qiáng)的蛋白晶體，能使棉鈴蟲(chóng)等鱗翅口害蟲(chóng)癱瘓致死?？茖W(xué)家將編碼這個(gè)蛋白質(zhì)的基因?qū)俗魑铮棺魑镒陨砭哂械钟x(chóng)害的能力。生長(zhǎng)快、肉質(zhì)好的轉(zhuǎn)基因魚(yú)(中國(guó))乳汁中含有人生長(zhǎng)激素的轉(zhuǎn)基因牛(阿根廷)2、基因工程與藥物研制我國(guó)生產(chǎn)的部分基因

工程疫苗和藥物許多藥品的生產(chǎn)是從生物組織中提取的。受材料來(lái)源限制產(chǎn)量有限，其價(jià)格往往十分昂貴。微生物生長(zhǎng)迅速，容易控制，適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。若將生物合成相應(yīng)藥物成分的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞內(nèi)，讓它們產(chǎn)生相應(yīng)的藥物，不但能解決產(chǎn)量問(wèn)題，還能大大降低生產(chǎn)成本。胰島素從豬、牛等動(dòng)物的胰腺中提取，100Kg胰腺只能提取4-5g的胰島素，其產(chǎn)量之低和價(jià)格之高可想而知。將合成的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌，每2000L培養(yǎng)液就能產(chǎn)生100g胰島素！使其價(jià)格降低了30%-50%!3、環(huán)境保護(hù)

基因工程做成的“超級(jí)細(xì)菌”能吞食和分解多種污染環(huán)境的物質(zhì)。通常一種細(xì)菌只能分解石油中的一種烴類(lèi)，用基因工程培育成功的“超級(jí)細(xì)菌”卻能分解石油中的多種烴類(lèi)化合物。有的還能吞食轉(zhuǎn)化汞、鎘等重金屬，分解DDT等毒害物質(zhì)。轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的安全性你認(rèn)為應(yīng)該如何對(duì)待轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的安全性問(wèn)題？2.3轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的安全性轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉、耐貯藏番茄、抗病毒甜椒及基因工程疫苗等已獲得生產(chǎn)應(yīng)用安全證書(shū)。

練習(xí)：⒈要使目的基因與對(duì)應(yīng)的載體重組，所需的兩種酶是（）①限制酶②連接酶③解旋酶④還原酶Ａ．①②Ｂ．③④Ｃ．①④Ｄ．②③⒉實(shí)施基因工程的第一步的一種方法是把所需的基因從供體細(xì)胞內(nèi)分離出來(lái)，這要利用限制性內(nèi)切酶。一種限制性內(nèi)切酶能識(shí)別ＤＮＡ分子的ＧＡＡＴＴＣ順序，切點(diǎn)在Ｇ和Ａ之間，這是利用了酶的（）Ａ．高效性Ｂ．專一性Ｃ．多樣性Ｄ．催化活性易受外界影響ＡＢ⒊基因工程的正確操作步驟是（）

①使目的基因與運(yùn)載體結(jié)合

②將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞

③檢測(cè)目的基因的表達(dá)是否符合特定性狀要求

④提取目的基因

Ａ．③②④①Ｂ．②④①③

Ｃ．④①②③Ｄ．③④①②

⒋采用基因工程的方法培育抗蟲(chóng)棉，下列導(dǎo)入目的基因的作法正確的是（）（２００３理綜第７題）

①將毒素蛋白注射到棉受精卵中

②將編碼毒素蛋白的ＤＮＡ序列，注射到棉受精卵中

③將編碼毒素蛋白的ＤＮＡ序列，與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入細(xì)菌，用該細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞，在進(jìn)行組織培養(yǎng)

④將編碼毒素蛋白的ＤＮＡ序列，與細(xì)菌質(zhì)粒重組