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血細胞直方圖三分群血液分析儀的檢測項目:

1、白細胞計數(shù)(WBC)2、淋巴細胞百分率(LYM%)3、單核細胞百分率(MXD%)4、中性粒細胞百分率(NEUT%)5、淋巴細胞計數(shù)絕對值(LYM#)6、單核細胞計數(shù)絕對值(MXD#)7、中性粒細胞計數(shù)絕對值(NEUT#)8、紅細胞計數(shù)(RBC)9、血紅蛋白濃度(HGB)10、紅細胞壓積(HCT)11、平均紅細胞體積(MCV)12、平均紅細胞血紅蛋白含量(MCH)13、平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)14、紅細胞分布寬度(RDW)15、血小板計數(shù)(PLT)16、平均血小板體積(MPV)17、血小板分布寬度(PDW)18、血小板比容(PCT)附加三個直方圖:白細胞、紅細胞、血小板直線方程圖標本的采集

1. 晨抽取空腹靜脈血使用含有EDTA-K2抗凝劑的真空采血管(BD公司紫色或泰爾茂公司

2ml紫色封皮),抽血后輕輕顛倒數(shù)次混勻,避免凝固,及時送檢。30-60分鐘取結果。2.不要求空腹,在患者左手無名指內側,取血約100-150微升血液,混勻檢測,20分鐘取結果。標本采集注意事項1.采指血避開水腫、凍瘡、發(fā)炎部位。

2.采血時不能用力擠壓,避免細胞破碎,造成檢測結果偏低。測定方法儀器法:顯微鏡計數(shù)法:血細胞計數(shù)原理(電阻法)根據(jù)血細胞相對非導電的性質,懸浮在電解質溶液中的血細胞顆粒,在通過計數(shù)小孔時可引起電阻的變化為基礎,對血細胞進行計數(shù)和體積的測定。將測定的某些數(shù)值經儀器設定的固定公式求出其余數(shù)據(jù)。白細胞

手工計數(shù)法·

用白細胞稀釋液將血液稀釋20倍,并將紅細胞破壞后,滴入計數(shù)池中,靜置3分鐘,在顯微鏡下計數(shù)一定范圍內的白細胞數(shù),經換算即可

求得每升血液中各種白細胞的總數(shù)。WBC生物參考區(qū)間成人新生兒(3.5~9.5)×109/L(15.0~20.0)×

109/L·

6個月至2歲(11.0~12.0)×109/L白細胞檢測的臨床意義·

增多:1生理性增多:初生兒、運動、疼痛、情緒變化、應激、妊娠、分娩。2病理性增多:急性感染、嚴重組織損傷、大量細胞破壞、急性大出血、急性中毒、腫瘤。白細胞減少的臨床意義病理性減少:某些感染、某些白血病、慢性理化損傷、自身免疫性疾病、脾功能亢進。RBC生物參考區(qū)間·

新生兒6.0-7.0×

1012/L成年男性:成年女性:4.30-5.80×

1012/L3.80-5.10×

1012/L紅細胞檢測的臨床意義增多:相對性增多:見于嚴重嘔吐、腹瀉、大量出汗、大面積燒傷等絕對性增多:可分繼發(fā)與原發(fā)1繼發(fā):紅細胞生成素代償性增加:因血氧飽和度減低,組織缺氧所引起生理性紅細胞生成素代償性增加,見于胎兒和新生兒,高原地區(qū)居民。病理性見于慢性心、肺疾患。紅細胞生成素非代償性增加:與某些腫瘤或腎臟疾患有關。2原發(fā):真性紅細胞增多癥,是一種多能造血干細胞受累所致的骨髓增殖性疾病,本病屬慢性和良性增生。但具有潛在惡性趨向。RBC減少生理性減少:見于嬰幼兒及妊娠婦女等病理性減少:見于各種貧血如紅細胞生成不足,紅細胞破壞過多及失血等。血小板計數(shù)手工計數(shù)法:

用一次性無菌采血針迅速刺破皮膚,深度約

2-3mm,以稍加擠液能流出為宜。擦去第一滴血,從穿刺處遠端向指尖方向輕輕擠壓,用

20μ一次性采血管吸取血液20μl,加到含有0.38ml血小板稀釋液的采血管中,顛倒混勻,充入計數(shù)池,靜置10分鐘后顯微鏡計數(shù)。血小板計數(shù)參考值·

(125-350)*109/L血小板計數(shù)的臨床意義·

減少:·

血小板減少(<125*109/L)見于:1血小板生成障礙:再生障礙性貧血、急性白血病、急性放射病等。2血小板破壞增多:原發(fā)性血小板減少性紫癜、脾功能亢進。3血小板消耗過多:DIC等。血小板計數(shù)的臨床意義·

增多:·

血小板增多(>400*109/L)見于1骨髓增生綜合征、慢粒、真性紅細胞增多癥等。2急性感染、急性失血、急性溶血等。3其他:脾切除術后。嗜酸性粒細胞直接計數(shù)·

用20μl一次性采血管吸取血液20μl,擦凈管外余血,加到含有0.38ml嗜酸性粒細胞稀釋液中,輕輕顛倒混勻,靜置20分鐘,充池顯微鏡計數(shù)。嗜酸性粒細胞參考值:·

0.02-0.52*109/L嗜酸性粒細胞直接計數(shù)的臨床意義·主要用于觀察傳染病、手術后、燒傷患者的預后及測定腎上腺皮質功能等。網織紅細胞計數(shù)用100μl一次性采血管采血約100-150μl,加入上述試管中,混勻編號。靜置15-20分鐘后,取1滴制成薄片。油鏡下使用Miller窺盤計數(shù)法,計數(shù)1000個紅細胞中網織紅細胞數(shù),以百分率報告。網織紅細胞計數(shù)參考值:·

成人:0.5-1.5%·

新生兒:3.0-6.0%網織紅細胞計數(shù)的臨床意義1判斷骨髓紅細胞造血情況

增加:表示骨髓造血功能旺盛,各型貧血均可增多,溶血性貧血尤為顯著,惡性貧血或缺鐵性貧血應用VitB12或鐵劑治療后顯著增加,表示有療效。減少:再生障礙性貧血

2觀察貧血療效:缺鐵貧、巨幼貧患者治療前,

Ret僅輕度增高(也可正?;驕p少),給鐵劑或維生素B12、葉酸、治療3-5天后,Ret開始上升,7-10天達到高峰,2周左右Ret開始下降,表明治療有效。3骨髓移植后監(jiān)測直線方程圖生成原理在上述數(shù)據(jù)的基礎上,儀器對不同

體積的細胞通過小孔時產生的電脈沖大小進行分群,將大小2~450fl的血細胞產生電脈沖細分入256個通道,每個通道為1.64fl。同一類細胞產生的電脈沖相同或相近歸屬為同一區(qū)域,從而顯示出各類細胞的體積直方圖。血球儀可在一分鐘之內對樣本同時進行紅細胞、白細胞、血小板三種細胞的直方圖繪制。3590160300450%白細胞三分類直方圖血球儀可在一分鐘之內對樣本同時進行紅細胞、白細胞、血小板三種細胞的直方圖繪制。一、白細胞直方圖血液分析儀器在35~450fl范圍內將白細胞分為3群。正常白細胞直方圖(圖1-1)的左側又高又

陡,跨越35~95fl定為淋巴細胞群(小細胞群),以成熟小淋巴細胞為主;最右側又低又寬,跨越160~450fl定為中性粒細胞群(大細胞群),以中性粒細胞為主;左右兩峰之間較平坦區(qū)定為單個核細胞區(qū)(中間細胞群),主要以單核細胞為主,也包含嗜酸、嗜堿性粒細胞及白血病細胞等。3590160300450正常白細胞三分類直方圖(1-1)小細胞群%大細胞群中間細胞群白細胞直方圖與臨床應用白細胞直方圖的變化,可評價血液中白細胞群體的變化,但這種變化的細胞圖并無特異性,某一類白細胞的增多或減低均可使直方圖產生相似的變化。因此,異常白細胞直方圖(如圖:1-4~1-16)只能提示白細胞分群之間比例變

化或可能出現(xiàn)異常白細胞,故必要時可用

顯微鏡復查血涂片(外周血細胞學分析)。中性粒細胞比例增高(淋巴細胞相對減低)中性粒細胞比例增高(淋巴細胞相對減低直方圖顯示淋巴細胞峰明顯縮小甚至缺如,中性粒細胞右側區(qū)域異常。常見于各種原因引起的中性粒細胞增多、淋巴細胞減低癥等。(圖1-4)。3590160300450中性粒細胞比例增高(淋巴細胞相對減低)(1-4)白

圖%

虛線為正常白細胞曲線中性粒細胞群中性粒細胞比例減低(淋巴細胞比例增高)中性粒細胞比例減低(淋巴細胞比例

增高),直方圖顯示淋巴細胞峰明顯增大,而中性粒細胞峰明顯縮小。多見于嬰幼兒、再生障礙性貧血、中性粒細胞缺乏癥、淋巴細胞增多癥、傳染性單核細胞增多癥、慢性淋巴細胞白血病等。(圖1-5)。3590160300450%中性粒細胞比例減低(淋巴細胞相對增高)白

圖 (1-5)淋巴細胞群虛線為正常白細胞曲線中性粒細胞群嗜酸性粒細胞、單核細胞增高直

圖嗜酸性粒細胞或單核細胞增高,直方圖在

98~132fl區(qū)域內的細胞峰明顯增高,并通常儀器出現(xiàn)不能判斷中間細胞區(qū)域值而報警,提示淋巴細胞與單個核細胞之間的區(qū)域異常、單個核細胞與中性粒細胞峰之間區(qū)域有異常,可能存在異型淋巴細胞、漿細胞、原始細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞等。根據(jù)患者臨床情況必要時行外周血細胞學分析進一步檢查。(圖1-6和1-7)。3590160300450%嗜酸性粒細胞增高白細胞直方圖(1-6)中性粒細胞群淋巴細胞群嗜酸性粒細胞群虛線為正常白細胞曲線3590160300450單核細胞增高白細胞直方圖(1-7)%淋巴細胞群單核細胞群中性粒細胞群虛線為正常白細胞曲線3590160300450中間細胞增高白細胞直方圖(1-6/7)%淋巴細胞群單核細胞群中性粒細胞群虛線為正常白細胞曲線急性白血病直方圖白血病細胞在某一區(qū)域出高大細胞峰,同時儀器報警。白細胞總數(shù)明顯增高,必須指出,不同類型的白血病可出現(xiàn)相似的直方圖,同一標本在不同的儀器分析,其直方圖也有所差異?;颊叱霈F(xiàn)白血病共性特征時須骨髓細胞學明確診斷。(圖1-8和1-9)3590160300450%急性非淋巴細胞白血病直方圖(1-8)原始、幼稚細胞增多(單一主峰)幼稚細胞主峰群虛線為正常白細胞曲線3590160300450%急性淋巴細胞白血病直方圖(1-9)原始、幼稚細胞增多(單一主峰)幼稚細胞主峰群虛線為正常白細胞曲線3590160300450%急性白血病直方圖(1-8/9)原始、幼稚細胞增多(單一主峰)幼稚細胞主峰群虛線為正常白細胞曲線圖1-8和圖1-9主體坡峰極為相似,單靠血十八項不能確定急性非淋巴細胞與急性淋巴細胞,必需進行骨髓細胞學分析明確診斷。慢性白血病直方圖治療前白細胞總數(shù)明顯增高,在單個

核細胞區(qū)和中性粒細胞區(qū)左側范圍有一高

大的細胞峰,圖形呈一平臺狀;(圖1-10)冶療后如療效佳,白細胞總數(shù)減低,直方圖可恢復正常;(圖1-11)若發(fā)生急變,直方圖可出現(xiàn)向急性白血病直方圖趨勢。(圖1-12)3590160300450慢性白血病冶療前白細胞直方圖(1-10)%

虛線為正常白細胞曲線平臺狀主峰群3590160300450慢性白血病冶療后好轉白細胞直方圖(1-11)%

虛線為正常白細胞曲線冶療前曲線治療后曲線3590160300450慢性白血病急變白細胞直方圖(1-12)治療后曲線%

虛線為正常白細胞曲線好轉后急變傾向異型淋巴細胞增高直方圖由于異型淋巴細胞體積比正常淋巴細胞偏大,儀器將其歸屬于中間細胞群,直方圖上表現(xiàn)為小細胞群與中間細胞群融合,呈駱峰形。此曲線并非具有特異性,應與單核細胞增

高直方圖區(qū)別,鑒別方法為外周血細胞學分析。(圖1-13)3590160300450異型淋巴細胞增多白細胞直方圖(1-13)%

虛線為正常白細胞曲線異型淋巴細胞群單核細胞群有核細胞干擾直方圖白細胞直方圖顯示淋巴細胞起點較高,分類值后均顯示警號。提示淋巴細胞左側區(qū)有異常,可能存在有核紅細胞、巨大血小板或乳糜顆粒等。(圖1-14~1-15)3590160300450%巨大血小板干擾白細胞直方圖(1-14)巨大血小板群虛線為正常白細胞曲線3590160300450%有核紅細胞干擾白細胞直方圖(1-15)有核紅細胞群虛線為正常白細胞曲線3590160300450有核紅細胞干擾白細胞直方圖(1-15)有核紅細胞群%虛線為正常白細胞曲線血小板聚集干擾直方圖血小板聚集易引起儀器堵塞;若其三五成群呈微小結構聚集,儀器將血小板團誤認為巨大血小板,白細胞直方圖顯示和巨大血小板干擾相似(圖1-16);通常血小板聚集使血小板計數(shù)會有不同程度地下降。儀器報警說明結果不可靠或管道堵塞,應重新取樣本復查。3590160300450血小板聚集干擾白細胞直方圖(1-16)血小板聚集干擾群%虛線為正常白細胞曲線二、紅細胞直方圖儀器在36~360fl范圍內分析紅細胞,橫坐標表示紅細胞體積,縱坐標表示不同體積紅細胞出現(xiàn)的頻率。正常紅細胞主要分布在50~200fl范圍內(圖1-2),直方圖上可見兩個細胞群體,從

50~125fl區(qū)域有一介幾乎兩側對稱、較狹窄的正態(tài)分布曲線,主峰右側約分布在125~200fl區(qū)域的細胞為大紅細胞和網織紅細胞。紅細胞體積大小發(fā)生變化,直方圖可出現(xiàn)左移、右移或出現(xiàn)雙峰現(xiàn)象。100200300400%正常紅細胞直方圖(2-1)兩側對稱、正態(tài)分布曲線100200300400%紅細胞左移、右移直方圖(2-3)紫紅色虛線為正常紅細胞直方圖藍色曲線為紅細胞左移直方圖黑色曲線為紅細胞右移直方圖紅細胞直方圖與參數(shù)關系紅細胞計數(shù)、血紅蛋白測定、紅細胞比容、紅細胞平均指數(shù)、紅細胞體積分布寬度都會影響直方圖的形態(tài);為此先行了解各參數(shù)之間的關系對紅細胞直方圖的判別有較大幫助。紅細胞直方圖主要對于臨床貧血患者有診斷價值。紅細胞平均指數(shù)包括:紅細胞平均容積(MCV):指每個紅細胞平均體積的大小,用飛升(fl)表示;紅細胞平均血紅蛋白含量(MCH):指每個紅細胞內平均所含血紅蛋白的量,以皮克表示(pg);紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC):指每升紅細胞中所含血紅蛋白濃度,用克每升表示(g/L)。紅細胞平均指數(shù)計算公式紅細胞平均容積(MCV)=每升血液中血細胞比容÷每升血液中紅細胞個數(shù)=HCT÷RBC紅細胞平均血紅蛋白含量(MCH)=每升血液中血紅蛋白含量÷每升血液中紅細胞個數(shù)=

HGB

÷

RBC紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)=每升血液中血紅蛋白含量÷每升血液中血細胞比容=

HGB÷HCT紅細胞體積分布寬度(RDW)RDW是一個較新的紅細胞參數(shù),由血液分

析儀根據(jù)紅細胞體積的直方圖導出,反映所測標本中紅細胞體積大小的異質程度,常用變異系數(shù)(CV)表示。它比血涂片上紅細胞形態(tài)大小不均的觀察更為客觀準確。RDW結果的判斷應結合臨床及紅細胞直方

圖的變化,同時分析其異常是否由于紅細胞碎片紅細胞聚集或雙相性細胞引起。紅細胞參數(shù)的意義紅細胞的三個平均指數(shù)都由紅細胞計數(shù)、血紅蛋白含量、紅細胞比容三者經固定公式計算得出。單獨某個參數(shù)對疾病無診斷意義,必須聯(lián)合多個參數(shù)才能有效鑒別。1983年Bessman提出用MCV和RDW兩項參數(shù)作為貧血的形態(tài)學分類指標。如今,我們使用MCV、RDW配合紅細胞直方圖,則更有助于判別貧血的病情和療效。紅細胞直方圖在貧血中的應用1、小細胞性貧血:指細胞體積較小,

MCV低于正常值。包括以下情況:①:RDW正常,紅細胞主峰左移,分布在55~100fl,頂峰在75fl處,基底較窄為典型均一性圖形,提示為小細胞低色素;常見于輕型珠蛋白生成障礙性貧血;(圖2-3)100200300400%輕型β-珠蛋白生成障礙性貧血直

方 圖(2-3)虛線為正常紅細胞曲線小細胞均一細胞群②:RDW輕度增高:紅細胞主峰左移,分布在55~100fl,頂峰在65fl處。提示為小細胞低色素細胞不均一性,常見缺鐵性貧血;(圖2-4)臨床用鐵劑治療有效后,直方圖有明顯變化,可出現(xiàn)雙峰圖形。(圖2-5)100200300400%缺鐵性貧血經鐵劑治療后直

方 圖(2-5)治療前曲線虛線為正常紅細胞曲線治療有效后曲線(雙峰)③:RDW明顯增高:紅細胞直方圖顯示兩個細胞峰,小細胞峰明顯左移,峰頂位于50fl處,較大細胞峰位于90fl,基底較寬;提示為小細胞低色素和不均一性。見于鐵粒幼細胞性貧血(圖2-6)。在骨髓細胞學細胞鐵染色片中可見環(huán)形鐵粒幼細胞,百分比>15%為確診依據(jù)。缺鐵性貧血治療有效時,也可出現(xiàn)類似圖形(圖2-5)。100200300400%鐵粒幼細胞性貧血直方圖(2-6)虛線為正常紅細胞曲線雙主峰曲線2、大細胞性貧血:指MCV超過正常范圍,紅細胞體積較大。包括以下情況:①RDW正常:紅細胞主峰明顯右移,主要分布在75~130fl,頂峰位于100fl處,提示為大細胞性,體積較一致。見于溶血性貧血、白血病前期、再生障礙性貧血。(圖2-7)100200300400%再生障礙性貧血直方圖(2-7)虛線為正常紅細胞曲線大細胞群,主峰在100fl②RDW輕度增高:紅細胞峰明顯右移,基底增寬,主峰在

75~150fl,峰頂約在105fl處,提示為大細胞不均一性。見于因葉酸、維生素B12缺乏引起的巨幼細胞性貧血。(圖2-8)100200300400巨幼細胞性貧血直方圖(2-8)虛線為正常紅細胞曲線曲線右移,主峰頂在105fl處%③RDW明顯增高:紅細胞峰明顯右移,出現(xiàn)兩峰,以100fl處細胞峰為主。提示大細胞不均一性,常見于巨幼細胞性貧血葉酸、維生素B12治療初期。(圖2-8)巨幼細胞性貧血經維生素B12、葉酸治療后可出現(xiàn)向正態(tài)轉變曲線。(圖2-9)100200300400巨幼細胞性貧血治療有效直方圖(2-8)治療有效初期雙峰曲線虛線為正常紅細胞曲線%治療前期曲線100200300400巨幼細胞性貧血治療有效直方圖(2-9)虛線為正常紅細胞曲線治療有效向正態(tài)曲線轉變%治療前期曲線3、正細胞性貧血直方圖示正常分布,細胞大小較一致,血十八項中紅細胞與血紅蛋白成比例降低,

RDW可正常,也可輕度增高。常見于慢性病、骨髓纖維化、骨髓發(fā)育不良、急性失血等。(圖2-

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