2024屆湖南省衡陽一中高考生物必刷試卷注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號填寫清楚，將條形碼準確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列敘述正確的是A．藍藻、黑藻都屬于自養(yǎng)型的原核生物B．細胞生物的遺傳物質(zhì)是DNA或RNAC．活細胞都能產(chǎn)生ATP，也都會消耗ATPD．同一個體的不同體細胞中，核酸相同，蛋白質(zhì)不完全相同2．某種昆蟲長翅(A)對殘翅(a)、直翅(B)對彎翅(b)、有刺剛毛(D)對無刺剛毛(d)為顯性，控制這三對性狀的基因位于常染色體上。如圖表示某一個體的基因組成，若不考慮交叉互換，以下判斷正確的是A．圖中A與B互為等位基因，A與D互為非等位基因B．該個體的一個初級精母細胞所產(chǎn)生的精細胞基因型有四種C．控制翅長與翅形的兩對等位基因遺傳時遵循自由組合定律D．若該個體與隱性個體測交，后代基因型比例為l：1：1：13．下列有關(guān)人體細胞內(nèi)ATP的敘述，錯誤的是A．一個ATP分子中含有兩個高能磷酸鍵B．人體細胞合成ATP時都需要氧氣的參與C．內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體合成免疫球蛋白時需要消耗ATPD．正常細胞中ATP與ADP的比值在一定范圍內(nèi)變化4．圖甲為利用酵母菌釀制葡萄酒的實驗裝置，在其他條件相同且適宜的情況下，測得一段時間內(nèi)裝置中相關(guān)物質(zhì)含量的變化如曲線乙所示，下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述不正確的是（）A．圖乙中曲線①、②可分別表示裝置甲中O2濃度、酒精濃度的變化B．用裝置甲進行果醋發(fā)酵時，需同時打開閥a、bC．果酒、果醋和腐乳制作所需的適宜溫度均為30℃D．果酒、果醋和腐乳制作所用的菌種不全是原核生物5．下列關(guān)于細胞結(jié)構(gòu)和功能的敘述，正確的是A．生長素從頂芽運輸至側(cè)芽的過程主要由線粒體供能B．吞噬細胞攝取、處理抗原與溶酶體中的溶菌酶有關(guān)C．高等植物成熟篩管細胞在衰老過程中染色質(zhì)要收縮D．低等植物細胞分裂末期細胞板的形成與中心體有關(guān)6．植物細胞有絲分裂過程中，一對姐妹染色單體（a、b）的切面變化及運行如圖所示，①→②→③表示a、b位置的依次變化路徑，下列有關(guān)敘述正確的是（）A．a(chǎn)、b上的基因總是完全相同B．①時，最便于觀察和研究染色體C．②→③，染色體數(shù)目加倍，這是紡錘絲牽拉的結(jié)果D．②時的染色體大小與①時不相同二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）白細胞介素是人體重要的淋巴因子，具有免疫調(diào)節(jié)、抑制腫瘤等多種功能。近年來科學家將藥用蛋白轉(zhuǎn)向植物生產(chǎn)，如圖是將人的白細胞介素基因?qū)腭R鈴薯中，培養(yǎng)生產(chǎn)白細胞介素的過程。（tsr為一種抗生素—硫鏈絲菌素的抗性基因）（1）提取人的白細胞介素基因適宜選用的限制酶是___________，不能使用限制酶SmaI的原因是___________。（2）除圖示方法外，也可從利用___________法構(gòu)建的cDNA文庫中獲取目的基因。獲得目的基因后可采用PCR技術(shù)大量擴增，需提供Taq酶和___________等。（3）將目的基因?qū)腭R鈴薯細胞常采用___________法，其原理是將目的基因?qū)隩i質(zhì)粒上的___________。（4）為篩選出含目的基因的馬鈴薯細胞，需要在培養(yǎng)基中添加___________。最終為了檢測目的基因是否在馬鈴薯中表達，可通過____________方法進行分子水平的檢測。8．（10分）科學家發(fā)現(xiàn)，單獨培養(yǎng)的大鼠神經(jīng)元能形成自突觸（見圖甲）。用電極刺激這些自突觸神經(jīng)元的胞體可引起興奮，其電位變化結(jié)果如圖乙所示。請回答下列問題：（1）_____________________是神經(jīng)元產(chǎn)生和維持-68mV膜電位的主要原因。（2）胞體受刺激后，電位變化出現(xiàn)第一個峰值的原因是_________________使興奮部位膜內(nèi)側(cè)陽離子濃度高于膜外側(cè)。此時產(chǎn)生的興奮沿神經(jīng)纖維傳導(dǎo)至軸突側(cè)支的突觸小體，引起突觸小體內(nèi)的突觸小泡將神經(jīng)遞質(zhì)釋放到突觸間隙，神經(jīng)遞質(zhì)與胞體膜（突觸后膜）上_____________結(jié)合，引發(fā)新的神經(jīng)沖動，產(chǎn)生第二個峰值。（3）谷氨酸也是一種神經(jīng)遞質(zhì)，與突觸后膜受體結(jié)合后，能使帶正電的離子進入神經(jīng)元，導(dǎo)致其興奮。利用谷氨酸受體抑制劑（結(jié)合上述實驗），證明大鼠自突觸神經(jīng)元的神經(jīng)遞質(zhì)是谷氨酸。寫出實驗設(shè)計思路并預(yù)測實驗結(jié)果。實驗思路：____________________________________________________預(yù)測結(jié)果：____________________________________________________9．（10分）從2019年9月開始，澳大利亞大火已經(jīng)燒毀了超過數(shù)千萬畝的土地，大約五億只動物在這場火災(zāi)中喪生。（1）生態(tài)學家估計澳大利亞大火向空中釋放了1．5億噸二氧化碳，這些二氧化碳通過碳循環(huán)被吸收可能需要一個世紀或更長時間。物質(zhì)循環(huán)是指構(gòu)成生物體的____________?；馂?zāi)產(chǎn)生的有害氣體可通過大氣彌散到世界各地，這說明物質(zhì)循環(huán)具有____________性。（2）考拉是澳大利亞獨有的動物，火災(zāi)中考拉的大量死亡會降低生物多樣性中的____________多樣性。生物多樣性降低會帶來嚴重的生態(tài)災(zāi)難，這從側(cè)面反映了生物多樣性的____________價值。（1）有報道說，當?shù)亍盎瘊棥保ㄈ鐕[鳶等）縱火加劇了火災(zāi)災(zāi)情?！盎瘊棥笔侨馐承悦颓荩矚g在著火的森林里活動覓食，它們會銜著著火的樹枝將其運送到到尚未燃燒的森林里。試從種間關(guān)系的角度分析“火鷹”縱火的目的：________________________。10．（10分）癌細胞表面蛋白“PDL-1”與T細胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后，可抑制T細胞活性并啟動其凋亡，導(dǎo)致腫瘤細胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進行克隆、表達及生物學活性鑒定，為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板；設(shè)計含有不同的限制酶切點的α和β序列為引物，通過____________________技術(shù)擴增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建表達載體。該表達載體的組成，除了目的基因、標記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴增重組DNA。（4）將擴增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達外源基因的原代293T細胞。一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，檢測細胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學活性和功能，則可裂解293T細胞，提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細胞，其目的是_________________________。11．（15分）果蠅的眼形有棒眼與圓眼之分，受基因A/a控制；翅形有長翅與殘翅之分，受基因B/b控制。某科研小組用一對表現(xiàn)型都為圓眼長翅的雌雄果蠅進行雜交實驗前，先對其中一只果蠅進行了某種處理，隨后進行多次實驗，結(jié)果如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）基因A/a和基因B/b的遺傳______（選填符合或不符合）自由組合定律，其原因是___________________________________________________________________________________________。（2）發(fā)現(xiàn)上述實驗結(jié)果與理論分析不吻合，其原因可能是基因型為_________的_________（選填雌或雄）配子失活，導(dǎo)致子代部分雌雄個體不能產(chǎn)生。若要獲得更明確的結(jié)論，請利用上圖中的果蠅為實驗材料，設(shè)計實驗驗證。（要求寫出實驗思路，并預(yù)測實驗結(jié)果）_____________________（3）F1圓眼長翅雌果蠅中純合子所占比例為_________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解題分析】

A、藍藻、黑藻都能進行光合作用，均屬于自養(yǎng)型生物，但藍藻為原核生物，黑藻為真核生物，A錯誤；B、細胞生物的遺傳物質(zhì)都是DNA，B錯誤；C、ATP水解釋放的能量用于生物體的各項生命活動，ATP的形成途徑是光合作用和呼吸作用，可見，活細胞都能產(chǎn)生ATP，也都會消耗ATP，C正確；D、同一個體的不同體細胞中，DNA相同，由于在細胞分化過程中，基因的選擇性表達，所以RNA和蛋白質(zhì)不完全相同，D錯誤。故選C。2、D【解題分析】

依題文可知，等位基因是指同源染色體同一位置控制相對性狀的一對基因，一對等位基因減數(shù)分裂時遵循基因分離定律，以此相關(guān)知識做出判斷。【題目詳解】A、圖中A與B沒有在同源染色體的同一位置，不屬于等位基因，A錯誤；B、由于是該個體的一個初級精母細胞所產(chǎn)生的精細胞，所以精細胞有4個，其基因型有二種，B錯誤；C、控制翅長與翅形的兩對等位基因在一對同源染色體上，所以其遺傳時遵循分離定律，C錯誤；D、若該個體與隱性個體測交，由于該個體產(chǎn)生4種比例相等的配子，所以后代基因型比例為l：1：1：1，D正確。故選D。3、B【解題分析】

A、在一個ATP分子中含有兩個高能磷酸鍵，A正確；B、人體細胞合成ATP時不一定需要氧氣的參與，如有氧呼吸第一、第二階段均不需要氧氣的參與，B錯誤；C、核糖體合成免疫球蛋白時需要消耗ATP，C正確；D、正常細胞中ATP與ADP的含量相對穩(wěn)定，比值在一定范圍內(nèi)變化，D正確。故選B。4、C【解題分析】

題圖分析：圖甲為利用酵母菌釀制葡萄酒的實驗裝置，其中充氣口a是在連接充氣泵進行充氣用的；排氣口b是在酒精發(fā)酵時用來排出CO2的；出料口是用來取樣的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接，其目的是防止空氣中微生物的污染。圖乙表示圖甲發(fā)酵裝置中相關(guān)物質(zhì)含量的變化。①物質(zhì)隨發(fā)酵時間延長逐漸下降，②物質(zhì)隨發(fā)酵時間延長逐漸上升。【題目詳解】A、酵母菌開始進行有氧呼吸，不斷消耗氧氣，因此曲線①表示裝置甲中O2濃度的變化，酵母菌發(fā)酵過程中不斷產(chǎn)生酒精，因此曲線②表示裝置甲中酒精濃度的變化，A正確；B、果醋發(fā)酵時需要氧氣，因此用裝置甲進行果醋發(fā)酵時，需同時打開閥a、b，B正確；C、果酒、果醋和腐乳的制作所需的適宜溫度分別是18~25℃，30～35℃，15~18℃，C錯誤；D、果酒、腐乳制作所用的菌種分別是酵母菌、毛霉，都是真核生物，果醋制作所用的菌種是醋酸菌，是原核生物，D正確。故選C。5、A【解題分析】

1、植物細胞中生長素的運輸方式有：橫向運輸、極性運輸和非極性運輸，三種運輸方式都需要消耗能量，主要由線粒體提供；2、吞噬細胞通過胞吞作用攝取抗原，需要消耗能量；3、沒有成形細胞核的細胞有：成熟篩管細胞、哺乳動物成熟的紅細胞等?！绢}目詳解】A、生長素從頂芽運輸?shù)絺?cè)芽是極性運輸，需要消耗能量，主要由線粒體提供，A正確；B、吞噬細胞將抗原攝入細胞內(nèi)，與細胞膜的流動性有關(guān)，對于攝入細胞的抗原可利用溶酶體中的溶菌酶處理，B錯誤；C、高等植物的篩管細胞在成熟過程中，細胞核已退化、消失，衰老過程中無細胞核的變化，C錯誤；D、低等植物細胞分裂末期細胞板的形成于高爾基體有關(guān)，D錯誤。故選A。6、D【解題分析】

有絲分裂中期和后期的特點中期：這時染色體繼續(xù)凝聚變短更為清晰地排列在紡錘體的中央，各染色體的著絲粒都排列在細胞中央的一個平面上，這個平面垂直于紡錘體的中軸，與地球赤道的位置相似，中期的染色體縮短到最小的程度，最便于觀察和研究，可以通過數(shù)著絲粒的數(shù)目來確認染色體的數(shù)目；后期：染色體的著絲粒已經(jīng)分為兩個，所以中期以后各染色體的兩個單體實際上已經(jīng)轉(zhuǎn)變?yōu)閮蓚€獨立的染色體了，染色體的數(shù)目增加了一倍，后期這些分離的染色體以相同的速率分別被紡錘絲拉向兩極，兩極之間的距離也加大了，這時袁原來的一套染色體已經(jīng)變成了完全相同的兩套?！绢}目詳解】A、由于基因突變的存在，a、b上的基因并非總是完全相同，A錯誤；B、②時表示染色體位于赤道板上，此時染色體形態(tài)固定，數(shù)目清晰，最便于觀察和研究染色體，B錯誤；C、②→③，染色單體分離，染色體數(shù)目加倍，該過程不是紡錘絲牽拉的結(jié)果，是著絲點一分為二的結(jié)果，C錯誤；D、②時的染色體高度螺旋化，縮短變粗，故②時的染色體大小與①時不相同，D正確。故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、PstⅠ和HindⅢ限制酶SmaⅠ酶切位點位于白細胞介素基因中部，使用它會造成目的基因斷裂反轉(zhuǎn)錄引物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化T-DNA硫鏈絲菌素抗原—抗體雜交【解題分析】

分析題圖，圖示表示人的白細胞介素基因表達載體的構(gòu)建過程，載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點，所以切割載體和目的基因時用限制酶PstⅠ和HindⅢ，再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組載體。獲取目的基因的方法包括從基因文庫中獲取、cDNA文庫法、供體細胞的DNA中直接分離基因（鳥槍法）。農(nóng)桿菌通過侵染植物傷口進入細胞后，可將Ti質(zhì)粒的T-DNA插入到植物基因組中。【題目詳解】（1）載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點，使用限制酶SmaI則會破壞目的基因；（2）目的基因的獲取可以采用cDNA文庫法（即逆轉(zhuǎn)錄法），指以某生物成熟mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄而成的cDNA序列的重組DNA群體，采用PCR技術(shù)大量擴增，需提供Taq酶和引物等；（3）將目的基因?qū)胫参锛毎２捎棉r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，利用的是Ti質(zhì)粒上的T-DNA；（4）構(gòu)建好的表達載體含有硫鏈絲菌素的抗性基因，因此可以在培養(yǎng)基中添加硫鏈絲菌素進行篩選，為檢測目的基因是否順利表達，可以通過抗原-抗體雜交技術(shù)。【題目點撥】解答本題的關(guān)鍵是分析題圖中的限制酶切割位點，明確目的基因和質(zhì)粒都有PstⅠ和HindⅢ的切割位點，從而可以用于構(gòu)建基因表達載體，其他的酶切位點則會破壞目的基因或抗性基因。8、K+外流Na+內(nèi)流特異性受體將單獨培養(yǎng)的大鼠自突觸神經(jīng)元隨機分為A組合B組，用谷氨酸受體抑制劑處理A組神經(jīng)元，B組神經(jīng)元不做處理，用電極刺激兩組自突觸神經(jīng)元胞體，測量其電位變化A組神經(jīng)元的第二次電位變化明顯小于B組的（或A組神經(jīng)元不出現(xiàn)第二次點位變化）【解題分析】

興奮傳導(dǎo)和傳遞的過程1．靜息時，神經(jīng)細胞膜對鉀離子的通透性大，鉀離子大量外流，形成內(nèi)負外正的靜息電位；受到刺激后，神經(jīng)細胞膜的通透性發(fā)生改變，對鈉離子的通透性增大，鈉離子內(nèi)流，形成內(nèi)正外負的動作電位。興奮部位和非興奮部位形成電位差，產(chǎn)生局部電流，興奮就以電信號的形式傳遞下去。2．興奮在神經(jīng)元之間需要通過突觸結(jié)構(gòu)進行傳遞，突觸包括突觸前膜、突觸間隙、突觸后膜，其具體的傳遞過程為：興奮以電流的形式傳導(dǎo)到軸突末梢時，突觸小泡釋放遞質(zhì)（化學信號），遞質(zhì)作用于突觸后膜，引起突觸后膜產(chǎn)生膜電位（電信號），從而將興奮傳遞到下一個神經(jīng)元。【題目詳解】（1）圖中-68mV電位是神經(jīng)細胞的靜息電位，K+外流是神經(jīng)元靜息電位的產(chǎn)生和維持的主要原因。此時膜內(nèi)的Na+濃度比膜外的低。（2）胞體受刺激后，Na+內(nèi)流，使細胞膜內(nèi)側(cè)陽離子的濃度高于膜外側(cè)，形成動作電位，與相鄰部位形成電位差，從而形成局部電流。局部電流又刺激相近未興奮部位發(fā)生同樣的電位變化，依次將興奮沿著神經(jīng)纖維傳導(dǎo)下去。興奮傳至軸突側(cè)支的突觸小體，突觸小體內(nèi)的突觸小泡將神經(jīng)遞質(zhì)釋放到突觸間隙，神經(jīng)遞質(zhì)與胞體膜（突觸后膜）上的特異性受體結(jié)合，引發(fā)新的神經(jīng)沖動，產(chǎn)生第二個峰值。（3）題意顯示，谷氨酸是一種興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，正常情況下能使突觸后膜產(chǎn)生興奮。加入谷氨酸受體抑制劑后，谷氨酸無法與突觸后膜受體結(jié)合，導(dǎo)致突觸后膜不產(chǎn)生興奮。據(jù)此設(shè)計實驗如下：將單獨培養(yǎng)的大鼠自突觸神經(jīng)元隨機分為A組合B組，用谷氨酸受體抑制劑處理A組神經(jīng)元，B組神經(jīng)元不做處理，用電極刺激兩組自突觸神經(jīng)元胞體，測量其電位變化。實驗結(jié)果為：B組神經(jīng)元的電位變化如圖乙，而A組神經(jīng)元的電位變化為第二次電位變化明顯變小，甚至不出現(xiàn)第二次電位變化?！绢}目點撥】熟知興奮的傳導(dǎo)和傳遞過程是解答本題的關(guān)鍵！正確解讀題中的相關(guān)信息并能利用信息合理分析問題是解答本題的另一關(guān)鍵！9、（C、H、O、N、P等）元素不斷進行著從無機環(huán)境到生物群落，又從生物群落到無機環(huán)境的循環(huán)過程。全球遺傳（基因）間接“火鷹”縱火可以將小動物從森林中驅(qū)趕出來，便于“火鷹”捕食【解題分析】

1.組成生物體的C、H、O、N、P、S等元素，都不斷進行著從無機環(huán)境到生物群落，有從生物群落到無機環(huán)境的循環(huán)過程，這就是生態(tài)系統(tǒng)中的物質(zhì)循環(huán)。

2.物質(zhì)循環(huán)和能量流動是生態(tài)系統(tǒng)的主要功能，二者是同時進行，彼此相互依存，不可分割的，能量的固定、儲存、轉(zhuǎn)移和釋放都離不開物質(zhì)的合成和分解的等過程，物質(zhì)作為能量的載體，是能量沿食物鏈（網(wǎng)）流動；能量作為動力，使物質(zhì)能夠不斷地在生物群落和無機環(huán)境之間循環(huán)往返。【題目詳解】（1）物質(zhì)循環(huán)是指構(gòu)成生物體的（C、H、O、N、P等）元素不斷進行著從無機環(huán)境到生物群落，又從生物群落到無機環(huán)境的循環(huán)過程。物質(zhì)循環(huán)是全球性運動，具有反復(fù)循環(huán)的特點，火災(zāi)產(chǎn)生的有害氣體可通過大氣彌散到世界各地，這說明物質(zhì)循環(huán)具有全球性。（2）個體致死后導(dǎo)致其基因喪失，種群基因頻率改變，火災(zāi)中考拉的大量死亡會降低生物多樣性中的遺傳（基因）多樣性。生物多樣性的間接價值指其生態(tài)功能，具有蓄洪防旱、保持水土、調(diào)節(jié)氣候的作用，生物多樣性降低會帶來嚴重的生態(tài)災(zāi)難，這從側(cè)面反映了生物多樣性的間接價值。（1）根據(jù)題干信息可知：“火鷹”是肉食性猛禽，喜歡在著火的森林里活動覓食，它們會銜著著火的樹枝將其運送到到尚未燃燒的森林里，從種間關(guān)系的角度分析，推測“火鷹”縱火的目的是通過縱火可以將小動物從森林中驅(qū)趕出來，便于“火鷹”捕食?！绢}目點撥】本題結(jié)合澳大利亞大火的社會熱點，考查生態(tài)系統(tǒng)物質(zhì)循環(huán)的相關(guān)知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題的能力。10、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復(fù)制原點卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解題分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！绢}目詳解】（1）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（cDNA）。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA；由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理，所以用該cDNA進行PCR技術(shù)擴增短時間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。（2）分析圖1中堿基序列，α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列，β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列，與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建基因表達載體。基因表達載體的組成包括目的基因、標記基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點等。（3）根據(jù)第（2）題可知，基因表達載體上的標記基因是卡那霉素抗性基因，因此一定溫度下，與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。（4）基因表達的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，可以檢測細胞膜表面是否具有PD-1基因表達的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學活性和功能，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)，即從裂解293T細胞中，提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。為了增加實驗的可信度，還需要設(shè)置對照實驗，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細胞，因為不含PD-1基因，所以“PD-1與PDL-1信號通路”不會阻斷?！绢}目點撥】題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合所學的知識在新的情景材料下分析運用。11、符合F1棒眼只出現(xiàn)在雄性，為伴性遺傳，基因在性染色體上；長翅和殘翅在雌雄中的比例都為2：1，比例相同，與性別無關(guān)，基因在常染色體上，所以符合自由組合定律BXA雌實驗思路：讓P圓眼長翅雌果蠅