新城疫防治技術(shù)規(guī)范

新城疫(NewcastleDisease,ND),是由副粘病毒科副粘病毒亞

科腮腺炎病毒屬的禽副粘病毒I型引起的高度接觸性禽類烈性傳染

病。世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為必須報告的動物疫病，我國

將其列為一類動物疫病。

為預(yù)防、控制和撲滅新城疫，依據(jù)《中華人民共和國動物防疫法》、

《重大動物疫情應(yīng)急條例》、《國家突發(fā)重大動物疫情應(yīng)急預(yù)案》及有

關(guān)的法律法規(guī)，制定本規(guī)范。

1適用范圍

本規(guī)范規(guī)定了新城疫的診斷、疫情報告、疫情處理、預(yù)防措施、

控制和消滅標準。

本規(guī)范適用于中華人民共和國境內(nèi)的一切從事禽類飼養(yǎng)、經(jīng)營和

禽類產(chǎn)品生產(chǎn)、經(jīng)營，以及從事動物防疫活動的單位和個人。

2診斷

依據(jù)本病流行病學(xué)特點、臨床癥狀、病理變化、實驗室檢驗等可

做出診斷，必要時由國家指定實驗室進行毒力鑒定。

2.1流行特點

雞、火雞、鶻鶉、鴿子、鴨、鵝等多種家禽及野禽均易感，各種

日齡的禽類均可感染。非免疫易感禽群感染時，發(fā)病率、死亡率可高

達90%以上；免疫效果不好的禽群感染時癥狀不典型，發(fā)病率、死亡

率較低。

本病傳播途徑主要是消化道和呼吸道。傳染源主要為感染禽及其

糞便和口、鼻、眼的分泌物。被污染的水、飼料、器械、器具和帶毒

的野生飛禽、昆蟲及有關(guān)人員等均可成為主要的傳播媒介。

2.2臨床癥狀

2.2.1本規(guī)范規(guī)定本病的潛伏期為21天。

臨床癥狀差異較大，嚴重程度主要取決于感染毒株的毒力、免疫

狀態(tài)、感染途徑、品種、日齡、其它病原混合感染情況及環(huán)境因素等。

根據(jù)病毒感染禽所表現(xiàn)臨床癥狀的不同，可將新城疫病毒分為5種致

病型：

嗜內(nèi)臟速發(fā)型(Viscerotropicvelogenic)：以消化道出血性病

變?yōu)橹饕卣?，死亡率高?/p>

嗜神經(jīng)速發(fā)型(NeurogenicVelogenic)：以呼吸道和神經(jīng)癥狀為

主要特征，死亡率高；

中發(fā)型(Mesogenic)：以呼吸道和神經(jīng)癥狀為主要特征，死亡率

低；

緩發(fā)型(Lentogenicorrespiratory)：以輕度或亞臨床性呼吸

道感染為主要特征；

無癥狀腸道型(Asymptomaticenteric)：以亞臨床性腸道感染為

主要特征。

2.2.2典型癥狀

2.2.2.1發(fā)病急、死亡率高；

2.2.2.2體溫升高、極度精神沉郁、呼吸困難、食欲下降；

2.2.2.3糞便稀薄，呈黃綠色或黃白色；

2.2.2.4發(fā)病后期可出現(xiàn)各種神經(jīng)癥狀，多表現(xiàn)為扭頸、翅膀

麻痹等。

2.2.2.5在免疫禽群表現(xiàn)為產(chǎn)蛋下降。

2.3病理學(xué)診斷

2.3.1剖檢病變

2.3.1.1全身黏膜和漿膜出血，以呼吸道和消化道最為嚴重；

2.3.1.2腺胃黏膜水腫，乳頭和乳頭間有出血點；

2.3.1.3盲腸扁桃體腫大、出血、壞死；

2.3.1.4十二指腸和直腸黏膜出血，有的可見纖維素性壞死病

變；

2.3.1.5腦膜充血和出血；鼻道、喉、氣管黏膜充血，偶有出

血，肺可見淤血和水腫。

2.3.2組織學(xué)病變

2.3.2.1多種臟器的血管充血、出血，消化道黏膜血管充血、

出血，喉氣管、支氣管黏膜纖毛脫落，血管充血、出血，有大量淋巴

細胞浸潤；

2.3.2.2中樞神經(jīng)系統(tǒng)可見非化膿性腦炎，神經(jīng)元變性，血管

周圍有淋巴細胞和膠質(zhì)細胞浸潤形成的血管套。

2.4實驗室診斷

實驗室病原學(xué)診斷必須在相應(yīng)級別的生物安全實驗室進行。

2.4.1病原學(xué)診斷

病毒分離與鑒定（見GB16550、附件1）

2.4.1.1雞胚死亡時間（MDT）低于90h；

2.4.1.2采用腦內(nèi)接種致病指數(shù)測定（ICPI）,ICPI達到0.7以

上者；

2.4.1.3F蛋白裂解位點序列測定試驗，分離毒株F1蛋白N末

端117位為苯丙酸氨酸（F）,F2蛋白C末端有多個堿性氨基酸的；

2.4.1.4靜脈接種致病指數(shù)測定（IVPI）試驗，IVPI值為2.0

以上的。

2.4.2血清學(xué)診斷

微量紅細胞凝集抑制試驗（HI）（參見GB16550）。

2.5結(jié)果判定

2.5.1疑似新城疫

符合2.1和臨床癥狀2.2.2.1,且至少有臨床癥狀2.2.2.2.

2.2.2.3,2.2.2.4、2.2.2.5或/和剖檢病變2.3.21、2.3.1.2、

2.3.1.3,2.3.1.4、2.3.1.5或/和組織學(xué)病變2.3.2.1、2.3.2.2

之一的，且能排除高致病性禽流感和中毒性疾病的。

2.5.2確診

非免疫禽符合結(jié)果判定2.5.1,且符合血清學(xué)診斷2.4.2的；或

符合病原學(xué)診斷2.4.1.1、2.4.1.2、2.4.1.3、2.4.1.4之一的；

免疫禽符合結(jié)果2.5.1,且符合病原學(xué)診斷2.4.1.1、2.4.1.2.

2.4.1.3、2.4.1.4之一的。

3疫情報告

3.1任何單位和個人發(fā)現(xiàn)患有本病或疑似本病的禽類，都應(yīng)當

立即向當?shù)貏游锓酪弑O(jiān)督機構(gòu)報告。

3.2當?shù)貏游锓酪弑O(jiān)督機構(gòu)接到疫情報告后，按國家動物疫情

報告管理的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。

4疫情處理

根據(jù)流行病學(xué)、臨床癥狀、剖檢病變，結(jié)合血清學(xué)檢測做出的臨

床診斷結(jié)果可作為疫情處理的依據(jù)。

4.1發(fā)現(xiàn)可疑新城疫疫情時，畜主應(yīng)立即將病禽（場）隔離，

并限制其移動。動物防疫監(jiān)督機構(gòu)要及時派員到現(xiàn)場進行調(diào)查核實,

診斷為疑似新城疫時，立即采取隔離、消毒、限制移動等臨時性措施。

同時要及時將病料送省級動物防疫監(jiān)督機構(gòu)實驗室確診。

4.2當確診新城疫疫情后，當?shù)乜h級以上人民政府獸醫(yī)主管部

門應(yīng)當立即劃定疫點、疫區(qū)、受威脅區(qū)，并采取相應(yīng)措施；同時，及

時報請同級人民政府對疫區(qū)實行封鎖，逐級上報至國務(wù)院獸醫(yī)主管部

門，并通報毗鄰地區(qū)。國務(wù)院獸醫(yī)行政管理部門根據(jù)確診結(jié)果，確認

新城疫疫情。

4.2.1劃定疫點、疫區(qū)、受威脅區(qū)

由所在地縣級以上（含縣級）獸醫(yī)主管部門劃定疫點、疫區(qū)、受

威脅區(qū)。

疫點：指患病禽類所在的地點。一般是指患病禽類所在的禽場（戶）

或其它有關(guān)屠宰、經(jīng)營單位；如為農(nóng)村散養(yǎng)，應(yīng)將自然村劃為疫點。

疫區(qū)：指以疫點邊緣外延3公里范圍內(nèi)區(qū)域。疫區(qū)劃分時，應(yīng)注

意考慮當?shù)氐娘曫B(yǎng)環(huán)境和天然屏障（如河流、山脈等）。

受威脅區(qū)：指疫區(qū)邊緣外延5公里范圍內(nèi)的區(qū)域。

4.2.2封鎖

由縣級以上獸醫(yī)主管部門報請同級人民政府決定對疫區(qū)實行封

鎖；人民政府在接到封鎖報告后，應(yīng)立即做出決定，發(fā)布封鎖令。

4.2.3疫點、疫區(qū)、受威脅區(qū)采取的措施

疫點：撲殺所有的病禽和同群禽只，并對所有病死禽、被撲殺禽

及其禽類產(chǎn)品按照GB16548規(guī)定進行無害化處理；對禽類排泄物、被

污染或可能污染飼料和墊料、污水等均需進行無害化處理；對被污染

的物品、交通工具、用具、禽舍、場地進行嚴格徹底消毒；限制人員

出入，嚴禁禽、車輛進出，嚴禁禽類產(chǎn)品及可能污染的物品運出。

疫區(qū)：對疫區(qū)進行封鎖，在疫區(qū)周圍設(shè)置警示標志，在出入疫區(qū)

的交通路口設(shè)置動物檢疫消毒站（臨時動物防疫監(jiān)督檢查站），對出入

的人員和車輛進行消毒；對易感禽只實施緊急強制免疫，確保達到免

疫保護水平；關(guān)閉活禽及禽類產(chǎn)品交易市場，禁止易感活禽進出和易

感禽類產(chǎn)品運出；對禽類排泄物、被污染飼料、墊料、污水等按國家

規(guī)定標準進行無害化處理；對被污染的物品、交通工具、用具、禽舍、

場地進行嚴格徹底消毒。

受威脅區(qū)：對易感禽只（未免禽只或免疫未達到免疫保護水平的

禽只）實施緊急強制免疫，確保達到免疫保護水平；對禽類實行疫情

監(jiān)測和免疫效果監(jiān)測。

4.2.4緊急監(jiān)測

對疫區(qū)、受威脅區(qū)內(nèi)的禽群必須進行臨床檢查和血清學(xué)監(jiān)測。

4.2.5疫源分析與追蹤調(diào)查

根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果，分析疫源及其可能擴散、流行的情況。

對可能存在的傳染源，以及在疫情潛伏期和發(fā)病期間售（運）出的禽類

及其產(chǎn)品、可疑污染物（包括糞便、墊料、飼料等）等應(yīng)當立即開展

追蹤調(diào)查，一經(jīng)查明立即按照GB16548規(guī)定進行無害化處理。

4.2.6封鎖令的解除

疫區(qū)內(nèi)沒有新的病例發(fā)生，疫點內(nèi)所有病死禽、被撲殺的同群禽

及其禽類產(chǎn)品按規(guī)定處理21天后，對有關(guān)場所和物品進行徹底消毒,

經(jīng)動物防疫監(jiān)督機構(gòu)審驗合格后，由當?shù)孬F醫(yī)主管部門提出申請，由

原發(fā)布封鎖令的人民政府發(fā)布解除封鎖令。

4.2.7處理記錄

對處理疫情的全過程必須做好詳細的記錄（包括文字、圖片和影

像等），并完整建檔。

5預(yù)防

以免疫為主，采取“撲殺與免疫相結(jié)合”的綜合性防治措施。

5.1飼養(yǎng)管理與環(huán)境控制

飼養(yǎng)、生產(chǎn)、經(jīng)營等場所必須符合《動物防疫條件審核管理辦法》

（農(nóng)業(yè)部［2002115號令）規(guī)定的動物防疫條件，并加強種禽調(diào)運檢

疫管理。飼養(yǎng)場實行全進全出飼養(yǎng)方式，控制人員、車輛和相關(guān)物品

出入，嚴格執(zhí)行清潔和消毒程序。

養(yǎng)禽場要設(shè)有防止外來禽鳥進入的設(shè)施，并有健全的滅鼠設(shè)施和

措施。

5.2消毒

各飼養(yǎng)場、屠宰廠（場）、動物防疫監(jiān)督檢查站等要建立嚴格的

衛(wèi)生（消毒）管理制度。禽舍、禽場環(huán)境、用具、飲水等應(yīng)進行定期

嚴格消毒；養(yǎng)禽場出入口處應(yīng)設(shè)置消毒池，內(nèi)置有效消毒劑。

5.3免疫

國家對新城疫實施全面免疫政策。免疫按農(nóng)業(yè)部制定的免疫方案

規(guī)定的程序進行。

所用疫苗必須是經(jīng)國務(wù)院獸醫(yī)主管部門批準使用的新城疫疫苗。

5.4監(jiān)測

5.4.1由縣級以上動物防疫監(jiān)督機構(gòu)組織實施。

5.4.2監(jiān)測方法

未免疫區(qū)域：流行病學(xué)調(diào)查、血清學(xué)監(jiān)測，結(jié)合病原學(xué)監(jiān)測。

已免疫區(qū)域：以病原學(xué)監(jiān)測為主，結(jié)合血清學(xué)監(jiān)測。

5.4.3監(jiān)測對象：雞、火雞、鵝、鶴鶉、鴿、鴨等易感禽類。

5.4.4監(jiān)測范圍和比例

5.4.4.1對所有原種、曾祖代、祖代和父母代養(yǎng)禽場，及商品

代養(yǎng)禽場每年要進行兩次監(jiān)測；散養(yǎng)禽不定期抽檢。

5.4.4.2血清學(xué)監(jiān)測：原種、曾祖代、祖代和父母代種禽場的

監(jiān)測，每批次按照0.1%的比例采樣；有出口任務(wù)的規(guī)模養(yǎng)殖場，每

批次按照0.5%比例進行監(jiān)測；商品代養(yǎng)禽場，每批次（群）按照0.05%

的比例進行監(jiān)測。每批次（群）監(jiān)測數(shù)量不得少于20份。

飼養(yǎng)場（戶）可參照上述比例進行檢測。

5.4.4.3病原學(xué)監(jiān)測：每群采10只以上禽的氣管和泄殖腔棉

拭子，放在同一容器內(nèi)，混合為一個樣品進行檢測。

5.4.4.3監(jiān)測預(yù)警

各級動物防疫監(jiān)督機構(gòu)對監(jiān)測結(jié)果及相關(guān)信息進行風險分析，做

好預(yù)警預(yù)報。

5.4.4.5監(jiān)測結(jié)果處理

監(jiān)測結(jié)果要及時匯總，由省級動物防疫監(jiān)督機構(gòu)定期上報中國動

物疫病預(yù)防控制中心。

5.5檢疫

5.5.1按照GB16550執(zhí)行。

5.5.2國內(nèi)異地引入種禽及精液、種蛋時，應(yīng)取得原產(chǎn)地動物

防疫監(jiān)督機構(gòu)的檢疫合格證明。到達引入地后，種禽必須隔離飼養(yǎng)

21天以上，并由當?shù)貏游锓酪弑O(jiān)督機構(gòu)進行檢測，合格后方可混群

飼養(yǎng)。

從國外引入種禽及精液、種蛋時，按國家有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。

6控制和消滅標準

6.1免疫無新城疫區(qū)

6.1.1該區(qū)域首先要達到國家無規(guī)定疫病區(qū)基本條件。

6.1.2有定期和快速（詳實）的動物疫情報告記錄。

6.1.3該區(qū)域在過去3年內(nèi)未發(fā)生過新城疫。

6.1.4該區(qū)域和緩沖帶實施強制免疫，免疫密度100%,所用疫

苗必須符合國家獸醫(yī)主管部門規(guī)定的弱毒疫苗（ICPI小于或等于0.4）

或滅活疫苗。

6.1.5該區(qū)域和緩沖帶須具有運行有效的監(jiān)測體系，過去3年

內(nèi)實施疫病和免疫效果監(jiān)測，未檢出ICPI大于0.4的病原，免疫效

果確實。

6.1.6若免疫無疫區(qū)內(nèi)發(fā)生新城疫時，在具備有效的疫情監(jiān)測

條件下，對最后一例病禽撲殺后6個月，方可重新申請免疫無新城疫

區(qū)。

6.1.7所有的報告、記錄等材料詳實、準確和齊全。

6.2非免疫無新城疫區(qū)

6.2.1該區(qū)域首先要達到國家無規(guī)定疫病區(qū)基本條件。

6.2.2有定期和快速（詳實）的動物疫情報告記錄。

6.2.3在過去3年內(nèi)沒有發(fā)生過新城疫，并且在過去6個月內(nèi)，

沒有進行過免疫接種；另外，該地區(qū)在停止免疫接種后，沒有引進免

疫接種過的禽類。

6.2.4在該區(qū)具有有效的監(jiān)測體系和監(jiān)測帶，過去3年內(nèi)實施

疫病監(jiān)測，未檢出ICPI大于0.4的病原或新城疫HI試驗滴度小于

3

20

6.2.5當發(fā)生疫情后，重新達到無疫區(qū)須做到：采取撲殺措施

及血清學(xué)監(jiān)測情況下最后一例病例被撲殺3個月后，或采取撲殺措施、

血清學(xué)監(jiān)測及緊急免疫情況下最后一只免疫禽被屠宰后6個月后重

新執(zhí)行（認定），并達到6.2.3、6.2.4的規(guī)定。

6.2.6所有的報告、記錄等材料詳實、準確和齊全。

附件1

新城疫病原分離與鑒定

當臨床診斷有新城疫發(fā)生時，應(yīng)從發(fā)病禽或死亡禽采集病料，進

行病原分離、鑒定和毒力測定。

1樣品的采集、保存及運輸

1.1樣品采集

1.1.1采集原則。采集樣品時，必須嚴格按照無菌程序操作。

采自于不同發(fā)病禽或死亡禽的病料應(yīng)分別保存和標記。每群至少采集

5只發(fā)病禽或死亡禽的樣品。

1.1.2樣品內(nèi)容

發(fā)病禽：采集氣管拭子和泄殖腔拭子（或糞便）；

死亡禽：以腦為主；也可采集脾、肺、氣囊等組織。

1.2樣品保存

1.2.1樣品置于樣品保存液（0.01MPBS溶液，含抗生素且pH

為7.0?7.4）中，抗生素視樣品種類和情況而定。對組織和氣管拭

子保存液應(yīng)含青霉素（1000IU/mL）,鏈霉素（Img/mL）,或卡那霉素

（50ug/mL）、制霉菌素（lOOOIU/mL）；對泄殖腔拭子（或糞便）保存

液的抗菌素濃度應(yīng)提高5倍。

1.2.2采集的樣品應(yīng)盡快處理，如果沒有處理條件，樣品可在

4℃保存4天；若超過4天，需置-20（保存。

1.3樣品運輸

所有樣品必須置于密閉容器，并貼有詳細標簽，以最快捷的方式

送檢（如：航空快遞等）。如果在24小時內(nèi)無法送達，則應(yīng)用干冰致

冷送檢。

1.4樣品采集、保存及運輸按照《高致病性動物病原微生物菌

（毒）種或者樣本運輸包裝規(guī)范》（農(nóng)業(yè)部公告第503號）執(zhí)行。

2病毒分離與鑒定

2.1病毒分離與鑒定：按照GB16550附錄A3.3、A4.1、A4.2

進行。

2.2病原毒力測定

2.2.1最小病毒致死量引起雞胚死亡平均時間（MDT）測定試驗

按照GB16550附錄A4.3進行；

依據(jù)MDT可將NDV分離株分為強毒力型（死亡時間W60小時）;

中等毒力型（60小時〈死亡時間W90小時；溫和型（死亡時間＞90

小時）。

2.2.2腦內(nèi)致病指數(shù)（ICPI）測定試驗

收獲接種過病毒的SPF雞胚的尿囊液，測定其血凝價＞2、將含

毒尿囊液用等滲滅菌生理鹽水作10倍稀釋（切忌使用抗生素），將此

稀釋病毒液以0.05mL/羽腦內(nèi)接種出殼24?40小時的SPF雛雞10

只，2只同樣雛雞0.05mL/羽接種稀釋液作對照（對照雞不應(yīng)發(fā)病，也

不計入試驗雞）。每24小時觀察一次，共觀察8天。每次觀察應(yīng)給雞

打分，正常雞記作0,病雞記作1,死雞記為2（死亡雞在其死后的

每日觀察結(jié)果都記為2）。

集「1值=每只雞在8天內(nèi)所有分值之和/（10只雞義8天），如指

數(shù)為2.0,說明所有雞24小時內(nèi)死亡；指數(shù)為0.0,說明8天觀察期

內(nèi)沒有雞表現(xiàn)臨床癥狀。

當ICPI達到0.7或0.7以上者可判為新城疫中強毒感染。

2.2.3F蛋白裂解位點序列測定試驗

NDV糖蛋白的裂解活性是決定NDV病原性的基本條件,F基因裂解

位點的核甘酸序列分析，發(fā)現(xiàn)在112?117位點處，強毒株為

112Arg-Arg-Gln-Lys（或Arg）-Arg-PHell7;弱毒株為112Gly-Arg（或

Lys）-Gln-Gly-Arg-Leul17這是NDV致病的分子基礎(chǔ)。個別鴿源變

異株（PPMV-l）112Gly-Arg-Gin-Lys-Arg-PHell7,但ICPI值卻較高。

因此，在H5、116位為一對堿性氨基酸和117位為苯丙氨酸（PHe）

和113位為堿性氨基酸是強毒株特有結(jié)構(gòu)。根據(jù)對NDVF基因112-H7

位的核甘酸序列即可判定其是否為強毒株。（Arg-精氨酸；Gly-甘氨

酸；Gin-谷氨酰胺；Leu-亮氨酸；Lys-賴氨酸）。

分離毒株F1蛋白N末端117位為苯丙氨酸（F）,F2蛋白C末端

有多個堿性氨基酸的可判為新城疫感染?！倍鄠€堿性氨基酸”是指H3

至116位至少有3個精氨酸或賴氨酸（氨基酸殘基是從后F0蛋白基

因的N末端開始計數(shù)的，113至116對應(yīng)于裂解位點的-4至-1位）。

2.2.4靜脈致病指數(shù)（IVPI）測定試驗

收獲接種病毒的SPF雞胚的感染性尿囊液，測定其血凝價＞2",

將含毒尿囊液用等滲滅菌生理鹽水作10倍稀釋（切忌使用抗生素），

將此