現(xiàn)代生物技術(shù)專題宣城中學(xué)閆立2021-12-4結(jié)合圖片來說一說什么是基因工程？基因工程是指按照人們的愿望，進(jìn)展嚴(yán)厲的設(shè)計(jì)，并經(jīng)過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而發(fā)明出更符合人們需求的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子程度上進(jìn)展設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫做DNA重組技術(shù)或基因拼接技術(shù)?；蚬こ膛嘤瓜x棉的簡(jiǎn)要過程：普通棉花(無抗蟲特性)蘇云金芽孢桿菌提取抗蟲基因棉花細(xì)胞(含抗蟲基因)棉花植株(有抗蟲特性)重組DNA導(dǎo)入拼接上述培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟是什么？普通棉花不具有抗蟲性，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)蘇云金芽孢桿菌可以產(chǎn)生一種毒蛋白，對(duì)棉鈴蟲有一定的殺傷作用。試設(shè)計(jì)一個(gè)簡(jiǎn)單的方案，使棉花對(duì)棉鈴蟲也有抵抗作用.一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀〞思索：1、怎樣從蘇云金芽孢桿菌體內(nèi)提取毒蛋白基因？2、這類酶主要在哪些生物中可以找得到？為什么主要存在于這一類生物？3、這一類酶有什么作用？ATGC黏性末端黏性末端黏性末端：被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個(gè)伸出的核苷酸，他們之間正好互補(bǔ)配對(duì)，這樣的切口叫黏性末端。一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀〞大多數(shù)限制酶的識(shí)別序列由6個(gè)核苷酸組成，例如，EcoRΙ、SmaΙ，也有少數(shù)有4、5或8個(gè)核苷酸組成。GAATTCCTTAAG中軸線CTTAAGAATTCG大腸桿菌的一種限制酶〔EcoRⅠ)能識(shí)別GAATTC序列，SmaI識(shí)別CCCGGG序列:

CCCGGGGGGCCCCCCGGGGGGCCC黏性末端平末端一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀〞當(dāng)限制酶從識(shí)別序列的中心軸線處切開時(shí)，產(chǎn)生的是平末端。當(dāng)限制酶從識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)切開時(shí)，產(chǎn)生的是黏性末端。一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀〞一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀〞主要是從原核生物中分別純化出來的一類酶。1、來源：4000種2、種類：3、作用：識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。(6個(gè),4、5、8個(gè))構(gòu)成兩種末端黏性末端平末端4、結(jié)果：要想獲得某個(gè)目的基因必需求用限制酶切幾個(gè)切口？可產(chǎn)生幾個(gè)黏性末端？一個(gè)目的基因有幾個(gè)黏性末端？要切兩個(gè)切口，產(chǎn)生四個(gè)黏性末端，兩個(gè)。假設(shè)把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割，會(huì)怎樣呢？會(huì)產(chǎn)生一樣的黏性末端。是不是把兩者的黏性末端黏合起來，這樣就真的合成重組的DNA分子了?思索題：磷酸二酯鍵DNA銜接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合〞起來，即把梯子兩邊扶手的斷口銜接起來，這樣一個(gè)重組的DNA分子就構(gòu)成了。二、DNA銜接酶——“分子縫合針〞GAATTCCTTAAG即脫氧核糖、磷酸基之間的銜接GPAP思索：DNA銜接酶作用是什么？是不是把兩者的黏性末端黏合起來，這樣就真的合成了重組的DNA分子?DNA銜接酶和DNA聚合酶的區(qū)別是什么？

1、種類：2、作用部位：E·coliDNA銜接酶〔黏性末端〕T4DNA銜接酶〔黏性末端和平末端〕磷酸二酯鍵DNA銜接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合〞起來，即把梯子兩邊扶手的斷口銜接起來，這樣一個(gè)重組的DNA分子就構(gòu)成了。二、DNA銜接酶——“分子縫合針〞GAATTCCTTAAG即脫氧核糖、磷酸基之間的銜接GPAP三、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車〞思索討論：1、怎樣把毒蛋白基因裝載到分子運(yùn)輸車上？2、毒蛋白基因進(jìn)入棉花細(xì)胞后，分子運(yùn)輸車怎樣保證它能穩(wěn)定的存在？3、毒蛋白基因能否進(jìn)入棉花細(xì)胞我們?cè)鯓硬鸥捎X察？4、分子運(yùn)輸車進(jìn)入到棉花細(xì)胞后能否對(duì)棉花本身的平安呵斥要挾？三、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車〞能自