常用細菌生化反響試驗編輯課件糖醇類代謝試驗糖發(fā)酵試驗甲基紅試驗V-P試驗葡萄糖氧化／發(fā)酵試驗〔O/F試驗〕七葉苷水解試驗Β－半乳糖苷滲透酶試驗編輯課件糖發(fā)酵試驗原理多糖－→單糖－→丙酮酸－→酸性產(chǎn)物(或產(chǎn)酸產(chǎn)氣)－→pH↓－→指示劑呈酸性變色(假設(shè)產(chǎn)氣者有氣泡出現(xiàn))培養(yǎng)基：糖發(fā)酵管、半固體發(fā)酵管、微量發(fā)酵管試劑：酚紅、溴甲酚紫等結(jié)果:培養(yǎng)基呈酸性變色應(yīng)用：觀察細菌對糖度的分解情況，常用于腸道桿菌的鑒定編輯課件糖發(fā)酵試驗結(jié)果判斷反應(yīng)現(xiàn)象結(jié)果描述酸性變色、有氣泡分解××糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣酸性變色、無氣泡分解××糖產(chǎn)酸、不產(chǎn)氣培養(yǎng)基不變色不分解××糖編輯課件甲基紅試驗原理：細菌分解糖，產(chǎn)生丙酮酸，進一步生成大量混合酸，使培養(yǎng)基pH維持在4.4以下，參加甲基紅后，使甲基紅呈現(xiàn)紅色反響。此為甲基紅試驗陽性。培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水試劑：甲基紅試劑結(jié)果：參加試劑后，培養(yǎng)基呈現(xiàn)紅色：+培養(yǎng)基不變色：－應(yīng)用：是腸道桿菌常用的生化反響試驗，主要用于區(qū)別大腸肝菌和產(chǎn)氣腸桿菌編輯課件伏－普試驗〔V-P試驗〕原理：細菌發(fā)酵葡萄糖，產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸脫羧生成乙酰甲基甲醇，在堿性環(huán)境中乙酰甲基甲醇被氧化為二乙酰，二乙酰與蛋白胨中的精氨酸所含的胍基結(jié)合，生成紅色化合物。培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水結(jié)果：參加試劑后，培養(yǎng)基呈現(xiàn)紅色：+培養(yǎng)基不變色：－應(yīng)用：是腸道桿菌常用的生化反響試驗，主要用于區(qū)別大腸肝菌和產(chǎn)氣腸桿菌編輯課件葡萄糖丙酮酸大量混合酸pH降至4.4以下甲基紅試劑培養(yǎng)基變紅甲基紅試驗編輯課件葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇二乙酰V-P試劑培養(yǎng)基變紅V－P試驗脫酸編輯課件葡萄糖發(fā)酵形成丙酮酸后的不同代謝途徑葡萄糖丙酮酸大量混合酸pH降至4.4以下甲基紅試劑培養(yǎng)基變紅乙酰甲基甲醇二乙酰V-P試劑培養(yǎng)基變紅脫酸編輯課件蛋白質(zhì)類代謝試驗靛基質(zhì)試驗硫化氫試驗苯丙氨酸脫氨試驗?zāi)蛩孛冈囼灳庉嬚n件靛基質(zhì)試驗原理：細菌產(chǎn)生色氨酸酶，可分解蛋白胨中的色氨酸，生成靛基質(zhì)〔吲哚〕，靛基質(zhì)與試劑對二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰靛基質(zhì)。培養(yǎng)基：蛋白胨水試劑：靛基質(zhì)試劑〔含對二甲基氨基苯甲醛〕結(jié)果：參加試劑后，培養(yǎng)基出現(xiàn)紅色液面：+培養(yǎng)基液面為黃色：－應(yīng)用：用于腸道桿菌的鑒定編輯課件靛基質(zhì)試驗原理色氨酸酶色氨酸靛基質(zhì)〔吲哚〕玫瑰靛基質(zhì)〔玫瑰吲哚〕對二甲基氨基苯甲醛編輯課件硫化氫試驗原理：細菌分解蛋白質(zhì)中的含硫氨基酸，生成硫化氫，硫化氫與培養(yǎng)基中的鐵鹽或鉛鹽結(jié)合生成黑色絡(luò)合物。培養(yǎng)基：含硫酸亞鐵或醋酸鉛的培養(yǎng)基結(jié)果：培養(yǎng)基變黑

為陽性，不變黑為陰性應(yīng)用：常用于腸道桿菌的鑒定編輯課件苯丙氨酸脫氨實驗原理：細菌的具有的苯丙氨酸脫氨酶，可使培養(yǎng)基中的苯丙氨酸脫氨，形成苯丙酮酸，后者與三氯化鐵作用，形成綠色化合物。培養(yǎng)基：苯丙氨酸瓊脂試劑：10％三氯化鐵結(jié)果：參加試劑后培養(yǎng)基呈現(xiàn)綠色為陽性應(yīng)用：多用于腸道桿菌的鑒定編輯課件苯丙氨酸脫氨試驗原理苯丙氨酸苯丙氨酸脫氨酶苯丙酮酸10％三氯化鐵綠色化合物編輯課件尿素酶試驗原理：產(chǎn)生脲酶的細菌，能水解尿素生成氨和CO2，氨使培養(yǎng)基呈堿性變色。培養(yǎng)基：尿素培養(yǎng)基試劑：酚紅指示劑結(jié)果：培養(yǎng)基變紅：+培養(yǎng)基不變色－應(yīng)用：腸桿菌科屬間鑒定編輯課件尿素酶試驗原理尿素尿素酶氨+CO2培養(yǎng)基pH升高酚紅呈堿性變色編輯課件枸櫞酸鹽利用試驗原理：某些細菌能力利用培養(yǎng)基中的枸櫞酸鹽作為唯一的碳源，也能利用其中的銨鹽作為唯一碳源，細菌生長過程中分解枸櫞酸鹽產(chǎn)生碳酸鹽和分解銨鹽生成的氨，使培養(yǎng)基變堿，是指示劑呈堿性反響。培養(yǎng)基：枸鹽酸鹽培養(yǎng)基試劑：溴麝香草酚藍〔pH6.0以下呈黃色，pH7.6以上呈藍色〕結(jié)果：培養(yǎng)基變藍：+培養(yǎng)基不變色：－應(yīng)用：腸桿菌科屬間鑒別編輯課件枸櫞酸鹽利用試驗原理枸櫞酸鹽銨鹽碳酸鹽氨培養(yǎng)基pH下降溴麝香草酚藍呈堿性變色培養(yǎng)基變藍培養(yǎng)基編輯課件糖發(fā)酵試驗編輯課件甲基紅試驗編輯課件靛基質(zhì)試驗編輯課件血清學(xué)試驗血清學(xué)鑒定：用抗體鑒定未知的細菌或標(biāo)本中的抗原血清學(xué)診斷：用抗原檢測血清中的特異性抗體編輯課件血清學(xué)鑒定試劑〔診斷血清〕：含抗體檢測對象：特異性抗原方法：直接凝集試驗〔玻片法〕、莢膜腫脹試驗