第二節(jié)抗原抗體反響抗原抗體反響的化學(xué)本質(zhì)抗原抗體反響的特點(diǎn)影響抗原抗體反響的因素整理課件抗原抗體反響的化學(xué)本質(zhì)結(jié)構(gòu)根底抗原抗體的結(jié)合力反響過(guò)程整理課件整理課件整理課件抗原和抗體的結(jié)合是互補(bǔ)性的特異性結(jié)合不形成牢固的共價(jià)鍵，通過(guò)非共價(jià)鍵結(jié)合這種弱的結(jié)合力涉及幾種分子間的作用力

一、抗原抗體結(jié)合力一、抗原抗體結(jié)合力*1．靜電引力*2．范德華引力*3．氫鍵結(jié)合力*4．疏水作用力整理課件靜電引力〔庫(kù)倫引力〕〔electrostaticforces〕〔coulombicforces〕

概念：抗原和抗體分子帶有相反電荷的氨基和羧基基團(tuán)之間相互的引力。

引力的大小與兩個(gè)相互作用基團(tuán)間的距離的平方成反比；平均鍵能約為

20.9kJ/mo1。整理課件范德華引力〔VanderWaalsforces〕概念：抗原和抗體相互接近時(shí)，由于分子的極化作用而出現(xiàn)的引力。

結(jié)合力的大小與兩個(gè)相互作用基團(tuán)的極化程度的乘積成正比、與它們之間距離的7次方成反比，鍵能約為4.2～12.5kJ／mol。

這種引力的能量小于靜電引力。具有特異性。整理課件

概念：供氫體上的氫原子與受氫體原子間的引力。氫鍵結(jié)合力(hydregenbondforces)

供氫體：羧基、氨基和羥基受氫體：羧基氧、羧基碳和肽鍵氧等能的大小取決于氫鍵的方向：氫鍵具有高度的方向性。氫鍵結(jié)合力與供氫體和受氫體之間距離的6次方成反比，鍵能約20.9kJ/mol。整理課件疏水作用力〔疏水鍵〕

概念：兩個(gè)疏水基團(tuán)在水溶液中相互接觸時(shí)，由于對(duì)水分子排斥而趨向聚集的力。抗原決定簇與抗體上的結(jié)合點(diǎn)靠近，互相間正、負(fù)極性消失，親水層立即失去。此力在抗原抗體反響中的結(jié)合是很重要的。提供的作用力最大，約占總結(jié)合力的50％。整理課件

抗原抗體結(jié)合力示意圖抗原抗體氫鍵結(jié)合力

ONONHH靜電引力--++范得華力-++-+--+疏水作用力排斥的水整理課件二、抗原抗體親和性〔affinity〕*親和性是抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合點(diǎn)與對(duì)應(yīng)的抗原決定簇之間的相適應(yīng)性而存在著的引力，這是抗原與抗體之間固有的結(jié)合力。*親和力〔avidity)是指反響系統(tǒng)中復(fù)雜抗原與相應(yīng)抗體之間的結(jié)合能力。親和力與親和性、抗體的結(jié)合價(jià)和抗原的有效決定簇?cái)?shù)目相關(guān)。親和力越大，抗原抗體結(jié)合越牢固。整理課件

親和常數(shù)親和常數(shù)K=

K值大的抗體與抗原牢固結(jié)合，不易解離，說(shuō)明該抗體有高親和力。抗體與抗原結(jié)合是可逆的反響，在平衡時(shí)其整理課件血清學(xué)反響條件下，抗原抗體均帶負(fù)電荷，使極化的水分子在其周圍形成水化層，成為親水膠體。

三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體當(dāng)抗原與抗體結(jié)合后，外表電荷減少，水化層變薄；而且由于抗原抗體復(fù)合物形成后，與水接觸的外表積減少，由親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體。在電解質(zhì)作用下，各疏水膠體之間靠攏，形成可見(jiàn)的抗原抗體復(fù)合物。整理課件

親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體示意圖親水膠體疏水膠體轉(zhuǎn)化NaCl可見(jiàn)反響整理課件抗原抗體反響的特點(diǎn)*1.特異性*2.比例性*3.可逆性

整理課件一、特異性〔specificity〕*概念：抗原分子，只能與由它刺激所產(chǎn)生的抗體結(jié)合而起反響的專一性能。一、特異性*決定因素：由抗原決定簇和抗體分子超變區(qū)之間空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性決定的。

抗體分子N端可變區(qū)形成3nm×1.5nm×0.7nm的槽溝，只有與其空間結(jié)構(gòu)互補(bǔ)的抗原決定簇才能如楔狀嵌入。*交叉反響(crossreaction)兩種不同的抗原物質(zhì)具有局部相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原決定簇，那么可與彼此相應(yīng)的抗體反響。整理課件特異性示意圖整理課件*最適比(optimalratio)或等價(jià)點(diǎn)(equivzlencepoint)最迅速出現(xiàn)沉淀時(shí)的抗原抗體的濃度比或量比。二、比例性〔proportionality〕等價(jià)帶(equivalencezone)抗原與抗體分子比例適宜的范圍。帶現(xiàn)象：Ag與Ab比例不適而不出現(xiàn)可見(jiàn)反響。*前帶(prozone)抗體過(guò)量時(shí)。*后帶(postzone)抗原過(guò)量時(shí)。整理課件比例性示意圖抗體過(guò)量比例適宜抗原的量抗原過(guò)量抗體沉淀的量前帶等價(jià)帶后帶整理課件三、可逆性〔reversibility)概念：是指抗原與抗體結(jié)合成復(fù)合物后，在一定條件下可解離為游離抗原與抗體的特性。

解離后抗原抗體仍保持原有特性。一定條件：低pH、高濃度鹽等。常用于解離抗原抗體復(fù)合物的物質(zhì)有：

3mol/L硫氰化鉀、pH2.40.1mol/L甘氨酸、

7mol/L尿素等。整理課件抗體混有SPAg抗體-SPAg抗體-SPAg別離劑一、抗原抗體結(jié)合二、別離抗體

可逆性示意圖抗體整理課件抗原抗體反響影響因素一、反響物自身因素*抗原：1.理化特性2.Ag決定簇?cái)?shù)量3.Ag決定簇種類*抗體：1.來(lái)源2.特異性與親和力3.濃度整理課件二、環(huán)境條件：*電解質(zhì)：0.85%NaCl*酸堿度：pH6～9*溫度：15～40℃整理課件第三節(jié)抗原抗體反響類型1.沉淀反響2.凝集反響3.補(bǔ)體參與的反響4.中和反響5.免疫標(biāo)記整理課件表

抗原抗體反響的根本類型表反響類型實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測(cè)方法敏感度沉淀反響液相沉淀試驗(yàn)觀察沉淀、檢測(cè)濁度+，++++瓊脂凝膠擴(kuò)散觀察掃描沉淀線或環(huán)+凝膠電泳技術(shù)或峰或弧++補(bǔ)體參與反響補(bǔ)體溶血試驗(yàn)以裸眼或光電比色儀++補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)觀察測(cè)定溶血現(xiàn)象+++免疫標(biāo)記技術(shù)熒光免疫技術(shù)檢測(cè)熒光現(xiàn)象++++放射免疫技術(shù)檢測(cè)放射性++++酶標(biāo)免疫技術(shù)檢測(cè)酶底物顯色++++發(fā)光免疫技術(shù)測(cè)定發(fā)光強(qiáng)度++++生物素-親合素技術(shù)結(jié)合其它標(biāo)記技術(shù)++++金標(biāo)免疫技術(shù)檢測(cè)金顆粒沉淀++++凝集反響直接凝集試驗(yàn)用裸眼、放大鏡或顯+間接凝集試驗(yàn)微鏡觀察紅細(xì)胞或膠++凝集抑制試驗(yàn)乳等顆粒和各種凝集+++