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文檔簡介
普通高中課程標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗教科書選修3現(xiàn)代生物科技專題
簡介人民教育出版社生物室
包春瑩baocy@QQ:48444305/bcying2010年3月選修模塊設(shè)計的指導(dǎo)思想“選修模塊是為了滿足學(xué)生多樣化發(fā)展的需要而設(shè)計的,有助于拓展學(xué)生的生物科技視野、增進(jìn)學(xué)生對生物科技與社會關(guān)系的理解、提高學(xué)生的實(shí)踐和探究能力?!保ㄕn標(biāo)中“課程設(shè)計思路”)選修1生物技術(shù)實(shí)踐選修模塊選修2生物科學(xué)與社會選修3現(xiàn)代生物科技專題
本模塊設(shè)計的指導(dǎo)思想
讓學(xué)生進(jìn)一步了解現(xiàn)代生物科學(xué)和技術(shù)中一些重要領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)、發(fā)展趨勢和應(yīng)用前景,以開拓視野,增強(qiáng)科技意識,為學(xué)生進(jìn)一步學(xué)習(xí)現(xiàn)代生物科學(xué)類專業(yè)奠定基礎(chǔ)。一、本模塊的內(nèi)容范圍
基因工程克隆技術(shù)(改為細(xì)胞工程,內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)不變)胚胎工程生物技術(shù)的安全性和倫理問題生態(tài)工程現(xiàn)代生物科技專題科學(xué)技術(shù)現(xiàn)代基因工程克隆技術(shù)胚胎工程生態(tài)工程基本概念和基本原理技術(shù)流程、操作和應(yīng)用倫理問題生物技術(shù)的安全性與倫理問題社會交流、討論、辯論具體內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)——基因工程概述基因工程的誕生簡述基因工程的原理及技術(shù)舉例說出基因工程的應(yīng)用簡述蛋白質(zhì)工程具體內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)——克隆技術(shù)簡述植物的組織培養(yǎng)簡述動物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆舉例說出細(xì)胞融合與單克隆抗體具體內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)——胚胎工程簡述動物胚胎發(fā)育的基本過程簡述胚胎工程的理論基礎(chǔ)舉例說出胚胎干細(xì)胞的移植舉例說出胚胎工程的應(yīng)用具體內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)——生物技術(shù)的安全性和倫理問題關(guān)注轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題舉例說出生物武器對人類的威脅討論生物技術(shù)中的倫理問題
生態(tài)工程關(guān)注生態(tài)工程的建設(shè)簡述生態(tài)工程的原理舉例說出生態(tài)工程的實(shí)例二、本模塊的特點(diǎn)具體內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)的特點(diǎn)(課標(biāo)P28)共17項,其中簡述8項,舉例說出6項,關(guān)注2項,討論1項。知識性目標(biāo)以了解水平為主;情感性目標(biāo)以經(jīng)歷(感受:參與、交流)和反應(yīng)(認(rèn)同:表示感受、態(tài)度和價值判斷)水平為主;技能性目標(biāo)體現(xiàn)在活動建議中,主要是參觀、調(diào)查、資料收集、撰寫專題綜述報告等。二、本模塊的特點(diǎn)與選修2相比以專題形式介紹現(xiàn)代生物科學(xué)和技術(shù)中一些重要領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)、發(fā)展趨勢與應(yīng)用前景(不是全面介紹生物科技在社會中的應(yīng)用);生物科技的原理和過程介紹較為詳細(xì);同樣需要學(xué)生關(guān)注生物科技對社會產(chǎn)生的各種影響。三、教材的設(shè)計思路和呈現(xiàn)方式以學(xué)習(xí)專題方式呈現(xiàn),各個專題相對獨(dú)立,但又相互聯(lián)系。本模塊知識內(nèi)容的構(gòu)建順序:從微觀到宏觀的順序(分子水平、細(xì)胞水平、個體水平、群體水平)。從基因文庫中獲取目的基因的基本原理生態(tài)工程所遵循的基本原理:物質(zhì)循環(huán)再生原理物種多樣性原理協(xié)調(diào)與平衡原理整體性原理系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理牛體外受精胚胎工廠化生產(chǎn)流程圖技術(shù)流程圖可以幫助學(xué)生認(rèn)識到這門技術(shù)不是紙上談兵,是已經(jīng)成為現(xiàn)實(shí)的技術(shù)體細(xì)胞核移植過程流程圖(幫助理解原理)胚胎移植繁育良種奶牛的技術(shù)流程圖熱點(diǎn)討論1、2、3克隆人設(shè)計試管嬰兒基因“身份證”背景資料爭論焦點(diǎn)討論科學(xué)、理性地看待這些問題,做到趨利避害呈現(xiàn)方式概述本領(lǐng)域的發(fā)展歷程。標(biāo)題、章題圖、引言思考與探究生產(chǎn)或生活中的問題圖文介紹原理和方法討論問題—對策—案例論壇或熱點(diǎn)問題討論科技探索之路進(jìn)展追蹤專題小結(jié)書海導(dǎo)航網(wǎng)站鏈接實(shí)踐活動拓展視野內(nèi)容主體、引導(dǎo)閱讀、分析和討論。聯(lián)系實(shí)際,深入社會;課外閱讀,拓展視野。
收集資料,撰寫報告??偨Y(jié)梳理,課外延伸。本節(jié)作業(yè),深入思考。標(biāo)題、章題圖、引言思考與探究生產(chǎn)或生活中的問題圖文介紹原理和方法討論論壇或熱點(diǎn)問題討論問題—對策—案例科技探索之路進(jìn)展追蹤專題小結(jié)書海導(dǎo)航網(wǎng)站鏈接實(shí)踐活動拓展視野內(nèi)容主體、引導(dǎo)閱讀、分析和討論。聯(lián)系實(shí)際,深入社會;課外閱讀,拓展視野。
收集資料,撰寫報告??偨Y(jié)梳理,課外延伸。本節(jié)作業(yè),深入思考。編寫的設(shè)計思路和呈現(xiàn)方式本模塊的編寫模式
序——致同學(xué)們專題封科技探索之路正文設(shè)計思路和呈現(xiàn)方式——知識的建構(gòu)、能力的培養(yǎng)與情感、態(tài)度、價值觀的形成給出定義創(chuàng)設(shè)情景,引出專題典型事例、典型圖片,吸引學(xué)生的注意力,激發(fā)學(xué)習(xí)興趣專題引言、題圖和文字科技探索之路《基礎(chǔ)理論和技術(shù)的發(fā)展催生了基因工程》《細(xì)胞工程的發(fā)展歷程》《胚胎工程的建立》《生物技術(shù)引發(fā)的社會爭論》《生態(tài)工程的興起》編寫科技探索之路的目的是:概述本領(lǐng)域的發(fā)展歷程,激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。介紹一些背景資料或呈現(xiàn)一些不同的觀點(diǎn),以激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)的興趣。加深學(xué)生對科學(xué)史和科學(xué)本質(zhì)的理解和認(rèn)識,增強(qiáng)學(xué)生對科學(xué)、技術(shù)與社會關(guān)系的理解。
科技探索之路
編年史的方法展示基因工程的發(fā)展歷程:有利于學(xué)生認(rèn)識基因工程的發(fā)展歷程;有利于形成科學(xué)和技術(shù)是相互促進(jìn),不斷發(fā)展的觀點(diǎn);有利于學(xué)生形成生物技術(shù)的發(fā)展離不開眾多科學(xué)家的共同努力的觀點(diǎn);編寫設(shè)計思路和呈現(xiàn)方式本模塊的編寫模式
正文設(shè)計思路和呈現(xiàn)方式——知識的建構(gòu)、能力的培養(yǎng)與情感、態(tài)度、價值觀的形成
從科學(xué)與技術(shù)互動的觀念出發(fā)建構(gòu)知識以討論等多種方式發(fā)展探究能力和思維能力通過活動體驗,領(lǐng)悟方法,加深對科學(xué)原理的理解
關(guān)注科學(xué)技術(shù)的社會應(yīng)用,增強(qiáng)社會責(zé)任感主要兩種形式
論壇形式(第1節(jié))
轉(zhuǎn)基因生物與食物安全
轉(zhuǎn)基因生物與生物安全
轉(zhuǎn)基因生物與環(huán)境安全
熱點(diǎn)問題討論形式(第2節(jié))
有朝一日克隆人真的來了,我們該怎么辦?
你支持設(shè)計試管嬰兒嗎?
你要一張基因“身份證”嗎?編寫模式編寫模式先是生態(tài)工程原理(第1節(jié)),然后是實(shí)例(第2節(jié))實(shí)例:問題—對策—案例四、本模塊的教學(xué)建議由于課程內(nèi)容多屬于生物科學(xué)前沿領(lǐng)域,進(jìn)展迅速,教學(xué)過程中需要及時補(bǔ)充最新進(jìn)展的資料。鑒于課標(biāo)中要求大多是了解水平,教學(xué)中仍要避免講得過深過專。重視現(xiàn)代生物科技的基本概念和原理的教學(xué),避免變成泛泛的科普,或資料的搜集瀏覽。圍繞生物科技與社會的關(guān)系,切實(shí)組織好資料搜集分析、討論和辯論等活動。充分利用當(dāng)?shù)氐幕畹恼n程資源和信息技術(shù)。指導(dǎo)學(xué)習(xí)撰寫綜述報告(1~2篇;分期分批進(jìn)行;進(jìn)一步拓展和延伸;有明確主題,對主題意義和價值的簡述,層次清楚的內(nèi)容、結(jié)論、討論,資料文獻(xiàn)的來源。教師要對報告評價)。五、教材內(nèi)容答疑1、有少數(shù)限制酶的識別序列由5個核苷酸組成,這樣的限制酶是如何切割DNA片段的?
(教材第5頁)這種類型的限制酶是不可能識別嚴(yán)格意義上的回文結(jié)構(gòu)序列的,即其識別序列并不唯一,識別序列中間的那個核苷酸通常并不要求是某種特定的核苷酸。例如:限制酶HinfI的識別序列為GANTC,中間的核苷酸N可以是A、T、C、G中的任何一個,即該限制酶有四種識別序列;又如SfiI限制酶的識別序列為GGCCNNNNNCCGG,共13個核苷酸,中間的五個核苷酸NNNNN也沒有特定的要求,該酶可以識別并切割多種DNA分子。某種特定核苷酸序列:
不是唯一的
一旦酶切位點(diǎn)被破壞,限制酶就不再識別了
限制酶能識別特定的DNA序列并進(jìn)行剪切,不同的限制酶可以對不同的核酸序列進(jìn)行剪切。現(xiàn)以3種不同的限制酶a、b、c對6.2kb大小的線性DNA進(jìn)行剪切,用凝膠電泳分離各核酸片段,實(shí)驗結(jié)果如右圖所示。那么3種不同的限制酶在此DNA片段上的相應(yīng)切點(diǎn)位置是:(
D)質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體,它存在于許多細(xì)菌體內(nèi)。某質(zhì)粒上的標(biāo)記基因如下圖所示,通過標(biāo)記基因可以推知目的基因是否轉(zhuǎn)移成功。目的基因插入的位置不同,細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長情況也不同,下表是目的基因插入位置(插入點(diǎn)有a、b、c)與細(xì)菌的生長情況。推測①②③三種重組后的目的基因插入點(diǎn),正確的一組是:()細(xì)菌在含青霉素培養(yǎng)基上生長情況細(xì)菌在含四環(huán)素培養(yǎng)基上生長情況①能生長能生長②能生長不能生長③不能生長能生長A.①是c,②是b,③是a;B.①是a和b,②是a,③是b;C.①是a和b,②是b,③是a;D.①是c,②是a,③是b。2、關(guān)于目的基因的獲取從基因文庫中獲取目的基因利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因人工合成老師們的疑問:這三種方法不是并列的?3、PCR原料中為什么用dNTP?(教材第10頁)dNTP包括dCTP、dATP、dGTP和dTTP同ATP用單磷酸腺苷和二磷酸腺苷是不行的4、關(guān)于PCR循環(huán)參數(shù)的確定變性時間是如何確定的?
在選擇的變性溫度下,DNA分子越長,兩條鏈完全分開所需的時間也越長。如果變性溫度過低或時間太短,模板DNA中往往只有富含AT的區(qū)域被變性。
在PCR的第一個循環(huán)中,有時常把變性時間設(shè)計為5min,來增加大分子模板DNA徹底變性的概率,又稱此為預(yù)變性。
當(dāng)模板DNA的G+C含量超過55%時,需要更高的變性溫度,來源于古細(xì)菌的DNA聚合酶比TaqDNA聚合酶更能耐受高溫,因此更適合用來擴(kuò)增富含GC的DNA模板。
4、關(guān)于PCR循環(huán)參數(shù)的確定復(fù)性溫度的確定有什么考慮?
復(fù)性過程(即退火)采用的溫度至關(guān)重要。如果復(fù)性溫度太高,寡核苷酸引物不能與模板很好地復(fù)性,擴(kuò)增效率將會非常低。如果復(fù)性溫度太低,引物將產(chǎn)生非特異性復(fù)性,從而導(dǎo)致非特異性的DNA片段的擴(kuò)增。
4、關(guān)于PCR循環(huán)參數(shù)的確定延伸的時間是如何確定的?
TaqDNA聚合酶在最適反應(yīng)溫度(72~78℃)下聚合速率約為2000bp/min。根據(jù)多數(shù)研究者的經(jīng)驗,確定了一個規(guī)則,即:靶基因的每1000bp的擴(kuò)增產(chǎn)物的延伸時間被設(shè)計為1min,以此類推。
對于PCR的最后一個循環(huán),許多研究者常把延伸時間增加為以前循環(huán)的延伸時間的3倍以上,以使所有擴(kuò)增產(chǎn)物完成延伸,這又稱為后延伸。4、關(guān)于PCR循環(huán)參數(shù)的確定循環(huán)數(shù)目一般都為30,這個數(shù)值是怎么來的?
PCR擴(kuò)增所需的循環(huán)數(shù)目決定于反應(yīng)體系中起始的模板拷貝數(shù)以及引物延伸和擴(kuò)增的速率。
一旦PCR反應(yīng)進(jìn)入幾何級數(shù)增長期,反應(yīng)會一直持續(xù)下去,直至某一成分成為限制因素。從這一點(diǎn)上來說,擴(kuò)增產(chǎn)物中絕大多數(shù)應(yīng)該是特異性的擴(kuò)增產(chǎn)物,而非特異性的擴(kuò)增產(chǎn)物低到難以檢測的程度。用TaqDNA聚合酶在一個含有105個拷貝的靶序列的反應(yīng)體系中進(jìn)行30個循環(huán)后往往可以做到上述的理想情況。
5、目的基因的檢測與鑒定
——分子雜交技術(shù)(教材第14頁)探針標(biāo)記種類放射性同位素、熒光、生物素(一種維生素)檢測基因工程是否成功檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入了目的基因:DNA分子雜交技術(shù)(Southern雜交)檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA:Northern雜交(探針是DNA)或Eastern雜交(探針是RNA)檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì):用免疫組織化學(xué)技術(shù)或Western雜交,原理都是抗原和抗體反應(yīng)6、大腸桿菌能生產(chǎn)糖干擾素嗎?
(教材第15頁)干擾素是哺乳動物細(xì)胞在誘導(dǎo)物的誘導(dǎo)下產(chǎn)生的一種特異糖蛋白;科學(xué)家用通過基因工程用大腸桿菌生產(chǎn)出來的干擾素是沒有糖鏈的,但同樣能夠抑制病毒在細(xì)胞內(nèi)的增殖,加強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用和對癌細(xì)胞的殺傷作用;真核細(xì)胞表達(dá)的干擾素需要糖鏈來穩(wěn)定結(jié)構(gòu)、幫助溶解,并通過轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)分泌到細(xì)胞外,進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng),以發(fā)揮其抗病毒抗腫瘤的生物功效;
2002年,科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)在一種名為Campylobacterjejuni的細(xì)菌里存在生產(chǎn)糖蛋白的基因簇,即pgl基因簇,此基因編碼的蛋白能夠起糖基轉(zhuǎn)移酶的作用,科學(xué)家用基因工程方法將這套基因克隆至大腸桿菌共表達(dá),使得大腸桿菌也能夠生產(chǎn)相應(yīng)的糖蛋白。
7、基因診斷目前四大類疾病可以通過基因進(jìn)行診斷由單個基因突變引起的疾病常見病和多發(fā)?。ǘ嗍嵌鄠€基因引起的,如糖尿病、心臟病等)癌癥(抑癌基因或癌基因異常)感染性疾?。⊿ARS、禽流感等外源性基因)現(xiàn)狀:目前已經(jīng)對1000中單基因病、幾十種染色體病和近百種代謝缺陷癥能用此種方法進(jìn)行明確診斷目標(biāo):開發(fā)簡便、高效的多種疾病同步檢測技術(shù)基因診斷常用技術(shù)(DNA診斷技術(shù))核酸分子雜交技術(shù),其中最主要的是限制性內(nèi)切酶譜分析法內(nèi)切酶:從核酸鏈中間水解二酯鍵,將核酸鏈切斷,多數(shù)需要識別特殊的位點(diǎn)外切酶:作用于單鏈或雙鏈,從核酸的一端開始,一個接一個地將核苷酸水解下來或切成短鏈,無特異性。PCR技術(shù)基因測序基因芯片:簡便、高效檢查多種疾病的基因突變,建立高通量、自動化和快速檢測基因突變的平臺(不僅可檢驗基因突變與否,還可檢驗基因表達(dá)的高低)8、基因治療糾正或替代引發(fā)疾病基因的技術(shù)(從根源上解決問題)途徑插入正?;蛐迯?fù)突變基因關(guān)閉引發(fā)疾病的基因基因治療進(jìn)展緩慢的原因基因治療有效時間短,需多次治療重復(fù)將外源載體導(dǎo)入體內(nèi),可引發(fā)免疫排斥反應(yīng)經(jīng)改造的病毒載體仍有一定毒性,非病毒載體效率低基因療法最適合治療單基因疾病,多基因疾病困難9、原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)(教材45頁)從機(jī)體上獲取的組織,通過酶或機(jī)械方法分散成單個細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),在首次傳代前的培養(yǎng)一般稱為原代培養(yǎng)(初代培養(yǎng))。原代培養(yǎng)的最大優(yōu)點(diǎn)是:組織細(xì)胞剛脫離機(jī)體,生物性狀尚未發(fā)生較大變化,在一定程度上能夠反映體內(nèi)的狀態(tài)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞在生長、繁殖一定時間后,由于空間不足或細(xì)胞密度過大導(dǎo)致營養(yǎng)枯竭,會影響細(xì)胞的生長,因此需要進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),即傳代或稱為傳代培養(yǎng)(繼帶培養(yǎng)),也就是將細(xì)胞按1:2~1:4的比例傳代。但嚴(yán)格說來,不論在進(jìn)行傳代時稀釋與否,將細(xì)胞從一個培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到另一個培養(yǎng)瓶即稱為傳代培養(yǎng)。關(guān)于傳代培養(yǎng)在進(jìn)行傳代時,如果是懸浮細(xì)胞,只需簡單稀釋即可,若需完全更換培養(yǎng)液只需低速離心沉淀,再懸浮于合適的培養(yǎng)液中即可。一般細(xì)胞每毫升接種數(shù)量為5×104~8×105個,傳代密度太低,細(xì)胞容易死亡,表現(xiàn)出細(xì)胞在達(dá)到增長前有較長的滯留期。在培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)液會由于pH下降而呈現(xiàn)黃色,表明細(xì)胞已經(jīng)達(dá)到最大密度需要換液或進(jìn)行傳代培養(yǎng)。如果是單層貼壁的細(xì)胞,等長滿培養(yǎng)瓶表面,即可進(jìn)行傳代,多數(shù)細(xì)胞需用胰蛋白酶處理將細(xì)胞從生長物表面分離下來,以促進(jìn)傳代培養(yǎng)。胰蛋白酶會消化細(xì)胞嗎?胰蛋白酶除了可以消化細(xì)胞間的蛋白質(zhì)外,長時間作用也會消化細(xì)胞膜蛋白,對細(xì)胞有損傷作用;作用時間太短,細(xì)胞不容易脫落,因此必須控制好作用時間。實(shí)際應(yīng)用中的處理:做預(yù)實(shí)驗,摸清效果最好時胰蛋白酶的用量和作用時間。10、傳代代數(shù)與細(xì)胞的世代傳代代數(shù)與細(xì)胞的世代(增殖代數(shù))并不是同一個概念。在細(xì)胞培養(yǎng)時,所說的“第10代細(xì)胞”,僅指該細(xì)胞已經(jīng)傳代10次;細(xì)胞傳一代后,一般能倍增3~6次,經(jīng)過三個階段,即潛伏期、指數(shù)生長期和平臺期。當(dāng)細(xì)胞達(dá)到平臺期時,需要進(jìn)行傳代培養(yǎng),否則細(xì)胞會中毒,發(fā)生形態(tài)改變,甚至死亡。11、CO2培養(yǎng)箱(教材46頁)細(xì)胞培養(yǎng)中所用的培養(yǎng)箱一般稱為CO2培養(yǎng)箱,它的氣體環(huán)境是95%的空氣和5%的CO2。CO2的作用:CO2既是細(xì)胞代謝產(chǎn)物,也是細(xì)胞所需成分,它主要與維持培養(yǎng)液的pH有直接關(guān)系。動物細(xì)胞多數(shù)需要微堿性環(huán)境,pH為7.2~7.4,以不超出6.8~7.6為宜。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,隨著CO2釋放量的增多,培養(yǎng)基會變酸,因此常加入NaHCO3(與CO2溶于水后所形成的H2CO3構(gòu)成一個緩沖對)來調(diào)節(jié)pH。NaHCO3具有釋放CO2的傾向,加入CO2可以抑制這個反應(yīng)的進(jìn)行。培養(yǎng)箱中CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中NaHCO3濃度相平衡,如果培養(yǎng)箱中CO2濃度設(shè)定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量應(yīng)為1.97g/L;如果CO2濃度維持在10%,則NaHCO3的加入量應(yīng)為3.95g/L。氣體環(huán)境改為95%氧氣和5%的CO2,行不行?顯然是不行的。氧氣是一種氧化劑,濃度太高,會損傷細(xì)胞的。在有些細(xì)胞培養(yǎng)中,還需要加入抗氧化劑如巰基乙醇等。12、細(xì)胞系和細(xì)胞株細(xì)胞系和細(xì)胞株,兩者曾一度混用,導(dǎo)致有些文獻(xiàn)中概念不清。下面所指的概念是現(xiàn)在國內(nèi)外比較通用的,也是絕大多數(shù)研究者接受的觀點(diǎn)。原代培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功即稱為細(xì)胞系(CellLine),因此細(xì)胞系可泛指一般可能傳代的細(xì)胞。其中能夠連續(xù)傳代的細(xì)胞叫做連續(xù)細(xì)胞系或無限細(xì)胞系,不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細(xì)胞系。大多數(shù)二倍體細(xì)胞為有限細(xì)胞系。通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株(CellStrain),也就是說,細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。13、在體細(xì)胞核移植中,為什么注入去核卵母細(xì)胞的是供體細(xì)胞而不是供體細(xì)胞的細(xì)胞核?(教材48頁)
體細(xì)胞核移植技術(shù)最初是用玻璃微型吸管將供體細(xì)胞的細(xì)胞核吸出,再注入到去核卵母細(xì)胞內(nèi),后來通過實(shí)驗的不斷摸索發(fā)展出了另外一種方法,即直接將供體細(xì)胞注入到去核卵母細(xì)胞透明帶內(nèi),然后用病毒介導(dǎo)或者電脈沖等方式使兩個細(xì)胞融合,因為這種方法操作簡便,對卵母細(xì)胞損傷較小,現(xiàn)在較為常用。
14、供體細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)是否也能表達(dá)出相應(yīng)性狀?
兩種來源的線粒體有三種可能的命運(yùn)供體來源的線粒體被降解,只剩下受體來源的線粒體;兩種來源的線粒體同時存在,核移植個體的線粒體呈異質(zhì)性;受體來源的線粒體被選擇性降解,供體來源的線粒體占主導(dǎo)。據(jù)研究發(fā)現(xiàn),線粒體呈異質(zhì)性的情況主要存在于核移植個體胚胎發(fā)育早期,大部分核移植個體后代中主要存留的是受體來源的線粒體,如多莉羊的線粒體中的DNA就來自于受體卵母細(xì)胞,只有少部分保留的是供體來源的線粒體。
目前,供體和受體來源的線粒體的命運(yùn)如何還沒有完全一致的規(guī)律,還有待于進(jìn)一步深入的研究。15、單克隆抗體的制備,專一性抗體檢驗陽性,為什么要兩次?(P53)經(jīng)過多次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞16、判斷卵子受精以觀察到兩個極體為標(biāo)志,卵母細(xì)胞減數(shù)分裂不是形成三個極體嗎?(教材63頁)在人類以及大部分哺乳動物中,第一極體很少再進(jìn)行第二次分裂,只有少部分哺乳動物的第一極體才會分裂形成兩個第二極體;即使分裂,在實(shí)際操作中也不容易三個都同時觀察到,但只要能看到兩個,就足以說明問題。17、關(guān)于原腸胚(教材66-67頁)教材P67提到內(nèi)胚層和外胚層原教材:三個胚層原腸胚發(fā)育到最后,出現(xiàn)三個胚層,但原腸
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