棉花花總黃酮物質(zhì)基礎(chǔ)及抗阿爾茨海默病相關(guān)生物活性研究的中期報(bào)告中期報(bào)告一、研究背景阿爾茨海默?。ˋlzheimer'sdisease，AD）是一種以認(rèn)知功能障礙為主要特征的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，臨床表現(xiàn)為逐漸進(jìn)行的記憶喪失、行為和性格改變、認(rèn)知能力損害和社會(huì)功能障礙等，最終導(dǎo)致患者完全失去工作和社交能力，嚴(yán)重影響患者及家庭生活質(zhì)量。目前認(rèn)為AD的發(fā)病原因暫無明確，但廣泛研究表明AD與神經(jīng)元凋亡、神經(jīng)膠質(zhì)炎癥反應(yīng)和神經(jīng)元纖維纏結(jié)等病理生理機(jī)制有關(guān)。植物化學(xué)物質(zhì)因其豐富的結(jié)構(gòu)多樣性和生物活性受到廣泛關(guān)注，近年來，越來越多的藥用植物被發(fā)現(xiàn)具有抗AD的生物活性。我國的傳統(tǒng)中藥廣泛應(yīng)用于AD的治療，其中荔枝花、枸杞、大蒜等均具有一定的抗AD活性。棉花花（HibiscusmutabilisL.）是一種常見的觀賞植物，不僅具有美麗的花朵，而且不同于其他草本植物，它的花朵可以分解并吸收大氣中的有害氣體，因此廣泛用于園林綠化。同時(shí)，棉花花在傳統(tǒng)中藥學(xué)中也被用于治療熱病、感冒、高血壓、糖尿病等疾病，具有一定的藥用價(jià)值。目前，研究表明棉花花具有保護(hù)神經(jīng)元、改善認(rèn)知功能、抗氧化等多種生物活性。但對棉花花抗AD活性主要與哪些生物活性成分相關(guān)還未進(jìn)行深入研究。二、研究目的本研究旨在探究棉花花中抗AD活性物質(zhì)的富集和提取技術(shù)，進(jìn)一步篩選出具有抗AD活性的物質(zhì)，并對其生物活性進(jìn)行研究。三、研究內(nèi)容1.棉花花中抗AD活性物質(zhì)的富集和提取通過對棉花花不同部位的有效成分進(jìn)行提取和富集，篩選出抗AD活性物質(zhì)。利用超聲波萃取技術(shù)提取棉花花多酚類和黃酮類化合物，并利用高速離心、純化技術(shù)純化目標(biāo)物，以期獲取高效、優(yōu)質(zhì)的提取物。2.生物活性測定采用原代培養(yǎng)細(xì)胞模型、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型等進(jìn)行細(xì)胞活性和動(dòng)物藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)。利用MTT法、流式細(xì)胞術(shù)等研究抗氧化、細(xì)胞保護(hù)作用，采用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)等行為學(xué)測試方法，檢測物質(zhì)對認(rèn)知能力的影響和改善作用。同時(shí)，采用AD模型小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，研究其對防治AD的作用。四、研究進(jìn)展1.物質(zhì)提取和富集采用超聲波萃取技術(shù)，提取了棉花花中黃酮類和多酚類化合物，并純化目標(biāo)物質(zhì)。獲得了一系列不同黃酮類和多酚類化合物的高純度提取物，其中大黃素、蘆丁和花青素等化合物含量較高。2.細(xì)胞保護(hù)和抗氧化實(shí)驗(yàn)通過MTT法和流式細(xì)胞術(shù)等方法進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)棉花花提取物能夠抑制H2O2對PC12細(xì)胞的損傷，提高細(xì)胞存活率；同時(shí)，其對過氧化物酶（SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）等抗氧化酶的活性有一定的促進(jìn)作用。3.認(rèn)知改善實(shí)驗(yàn)采用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)進(jìn)行研究，結(jié)果表明，棉花花提取物在一定濃度范圍內(nèi)可以顯著減少AD小鼠在水迷宮中尋找隱藏臺階的時(shí)間和錯(cuò)誤次數(shù)，降低其認(rèn)知功能障礙程度。五、研究意義本研究能篩選出棉花花中具有抗AD活性的物質(zhì)，有望開發(fā)新型的針對AD的藥物，從而為AD的防治提供新思路和新方法。我們對不同黃酮類和多酚類化合物的抗A