S中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標T化妝品微生物檢驗方法大腸埃希氏菌檢驗9發(fā) 1實中華人民共和國海關(guān)總署發(fā)布T 本文件按標準化工作導則第1部分標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由中華人民共和國海關(guān)總署提出并歸口。本文件起草單位中華人民共和國廣州海關(guān)中華人民共和國深圳海關(guān)中華人民共和國廈門海關(guān)、中華人民共和國煙臺海關(guān)。本文件主要起草人凌莉涂曉波彭小莉黃成棟董潔袁慕云冼鈺茵劉婧文陳碧玲廖榮軍、陳夢琪席靜段效輝。ⅠT化妝品微生物檢驗方法大腸埃希氏菌檢驗范圍本文件描述了化妝品中大腸埃希氏菌的定性檢驗方法。本文件適用于化妝品中大腸埃希氏菌的檢驗。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中注日期的引用文件僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件?；瘖y品微生物檢驗制樣規(guī)術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義方法提要本方法利用大腸埃希氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶的活性能分解葡萄糖醛酸苷在胰蛋白胨膽葡萄糖醛酸苷瓊脂平板上形成藍綠色菌落對其進行定性檢驗。注:本方法不適用于少部分葡萄糖醛酸苷酶陰性的大腸埃希氏菌設(shè)備和材料除微生物實驗室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外其他設(shè)備和材料如下恒溫培養(yǎng)箱61恒溫裝置8℃±2℃冰箱2~8℃均質(zhì)器或乳液分散機轉(zhuǎn)速n以上電子天平感量無菌錐形瓶0mL或mL無菌吸管0具1mL刻度無菌均質(zhì)袋或均質(zhì)杯無菌接種環(huán)直徑約3mm)質(zhì)控菌株大腸埃希氏菌2或5或等效菌株作為陽性對照弗氏檸檬酸1T46或等效菌株作為陰性對照培養(yǎng)基和試劑大豆酪蛋白卵磷脂吐溫液體培養(yǎng)基胰蛋白胨膽鹽葡萄糖醛酸苷瓊脂檢驗程序化妝品中大腸埃希氏菌檢驗程序化妝品中大腸埃希氏菌的檢驗程序見圖1圖1化妝品中大腸埃希氏菌檢驗程樣品前處理和稀釋待測的樣品應(yīng)在室溫下保存不要溫育冷藏和冷凍樣品。樣品的制樣處理的規(guī)定執(zhí)行。增菌培養(yǎng)0分離培養(yǎng)用無菌接種環(huán)挑取一環(huán)增菌培養(yǎng)液劃線接種TBX平板培養(yǎng)基倒置于361培養(yǎng)箱培養(yǎng)結(jié)果報告TBX平板培養(yǎng)基上有藍綠色菌落報告每克毫升樣品中檢出大腸埃希氏菌。否則報告每克毫升樣品中未檢出大腸埃希氏菌。2T附錄規(guī)范性主要培養(yǎng)基和試大豆酪蛋白卵磷脂吐溫液體培養(yǎng)基成分酪蛋白大豆蛋白氯化磷酸氫二葡萄卵磷吐溫蒸餾制法先將卵磷脂在少量蒸餾水中加溫溶解后再與其他成分混合加熱溶解每瓶0mL于℃高壓滅菌15。注意振蕩使沉淀于底層的吐溫80充分混合冷卻至25℃左右使用。滅菌后的培養(yǎng)基胰蛋白胨膽鹽葡萄糖醛酸苷瓊脂成分胰蛋白 3號膽 吲葡萄糖醛酸苷 0瓊 蒸餾 制法在5%的乙醇中加入51L的氫氧化鈉溶液然后加入G的環(huán)己胺氫溴酸鹽并混勻與其他成分一并加入蒸餾水?；蛘邔的鈉鹽與其他成分一并加入蒸餾水