微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)【基礎(chǔ)強(qiáng)化題組】1．測(cè)定微生物數(shù)量的方法不包括()A．稀釋涂布平板法B．顯微鏡直接計(jì)數(shù)C．平板劃線法D．濾膜法2．研究人員通過對(duì)大腸桿菌進(jìn)行基因改造，可以使其不僅能以傳統(tǒng)生物能源技術(shù)中使用的蔗糖為原料，還能以廣泛存在于植物纖維中的半纖維素為原料，分解產(chǎn)生燃料物質(zhì)。若要將這種大腸桿菌分離出來(lái)，應(yīng)將它們接種在()A．不含氮源的培養(yǎng)基上B．含有蛋白胨的固體培養(yǎng)基上C．只含半纖維素而無(wú)其他碳源的選擇培養(yǎng)基上D．不含營(yíng)養(yǎng)要素的培養(yǎng)基上3.用紙片擴(kuò)散法測(cè)定某病原菌對(duì)各種抗生素敏感性的實(shí)驗(yàn)，是在某病原菌均勻分布的平板上，鋪設(shè)含有不同種抗生素的紙片后進(jìn)行培養(yǎng)。圖示為培養(yǎng)的結(jié)果，其中抑菌圈是在紙片周圍出現(xiàn)的透明區(qū)域。下列分析正確的是()A．在圖示固體培養(yǎng)基上可用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種病原菌B．未出現(xiàn)抑菌圈可能是病原菌與抗生素接觸后發(fā)生抗性變異C．形成的抑菌圈較小的原因可能是微生物對(duì)藥物較敏感D．不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響4．測(cè)定土壤中細(xì)菌數(shù)量一般選用104、105和106倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)，而測(cè)定真菌的數(shù)量一般選用102、103和104倍稀釋，其原因是()A．細(xì)菌個(gè)體小，真菌個(gè)體大B．細(xì)菌易稀釋，真菌不易稀釋C．細(xì)菌在土壤中的數(shù)量比真菌多D．隨機(jī)的，沒有原因5．下列關(guān)于產(chǎn)纖維素酶菌分離及運(yùn)用的敘述，不合理的是()A．篩選培養(yǎng)基中應(yīng)含有大量的葡萄糖或蔗糖B．可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌C．在分離平板上長(zhǎng)出的菌落需進(jìn)一步確定其產(chǎn)纖維素酶的能力D．用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈可提高其飼用價(jià)值6．用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行純培養(yǎng)的步驟，正確的是()A．樣品稀釋→涂布法分離→培養(yǎng)成單菌落B．樣品稀釋→培養(yǎng)成單菌落→劃線或涂布法分離C．樣品稀釋→劃線或涂布→分離→培養(yǎng)成單菌落D．樣品稀釋→劃線→涂布→分離→培養(yǎng)成單菌落7．下圖為從土壤中分離純化尿素分解菌的過程。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．①②③④培養(yǎng)基都應(yīng)以尿素為唯一氮源B．圖中所用培養(yǎng)基滅菌常用的方法是濕熱滅菌C．①～③過程是梯度稀釋，稀釋溶劑是無(wú)菌水D．可用酚紅染料鑒定，菌落周圍是否出現(xiàn)紅色圈8．若某一稀釋度下，平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)為90個(gè)，涂布平板時(shí)所用的稀釋液體積為0.1mL，稀釋液的稀釋倍數(shù)為105，則每克樣品中的活菌數(shù)約為()A．9×108個(gè)B．9×107個(gè)C．9×105個(gè)D．9×106個(gè)9．某生物興趣小組，進(jìn)行土壤中尿素分解菌的分離和計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問題。(1)實(shí)驗(yàn)原理：尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，但它并不能直接被農(nóng)作物吸收，需要轉(zhuǎn)變成NH3，才能被吸收，這個(gè)轉(zhuǎn)變依賴于土壤中能產(chǎn)生________的微生物的作用。(2)實(shí)驗(yàn)步驟：①配制培養(yǎng)基(成分：葡萄糖、Na2HPO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、尿素、Y、H2O、瓊脂)，并制作無(wú)菌平板。②設(shè)置________________組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作。③將各組平板置于恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。a．為了更好地鑒別出此類微生物，在培養(yǎng)基配方中加入了Y，Y是________________。b．為了對(duì)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)，需要用____________法進(jìn)行接種。具體情況如圖所示。c.恒溫培養(yǎng)48小時(shí)后，在稀釋倍數(shù)為105下，平板上的菌落數(shù)目在30～300之間，小組成員進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，應(yīng)注意統(tǒng)計(jì)周圍為________菌落。統(tǒng)計(jì)三個(gè)平板上的菌落數(shù)目，分別為68、73、87，則每克土樣中尿素分解菌的活菌數(shù)約為________。(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析：興趣小組的同學(xué)在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，除了上述統(tǒng)計(jì)的菌落外，還發(fā)現(xiàn)有些菌落周圍的培養(yǎng)基沒有變化，試分析這些菌落產(chǎn)生的可能原因(答出一點(diǎn)即可)。________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________?！揪C合應(yīng)用題組】(學(xué)業(yè)水平四)10．漆酶屬于木質(zhì)降解酶類，在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．生活污水中含有大量微生物，是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品B．篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物，通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落C．在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，再通過劃線進(jìn)一步純化D．在適宜溫度下，接種后的斜面培養(yǎng)基上菌落長(zhǎng)成后，可在低溫下臨時(shí)保存菌株11．有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過程如圖甲、乙所示。下列說法正確的是()A．該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基可以用苯磺隆、蔗糖等作為碳源B．本實(shí)驗(yàn)的目的是探究能降解苯磺隆的物質(zhì)是否為該菌種所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)C．在微生物的接種實(shí)驗(yàn)中，用95%的酒精對(duì)實(shí)驗(yàn)者的雙手和超凈工作臺(tái)進(jìn)行消毒D．該實(shí)驗(yàn)中，采集的土壤樣品經(jīng)高溫滅菌后，可以用于制取土壤稀釋液12．(不定項(xiàng)選擇)篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，若細(xì)菌能分解淀粉，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，會(huì)出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈(如圖)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表。菌種菌落直徑：C/mm透明圈直徑：H/mmH/C細(xì)菌Ⅰ5.111.22.2細(xì)菌Ⅱ8.113.01.6有關(guān)本實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是()A．培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B．篩選分解淀粉的細(xì)菌時(shí)，菌液應(yīng)稀釋后涂布C．以上兩種細(xì)菌均不能將淀粉酶分泌至細(xì)胞外D．H/C值反映了兩種細(xì)菌分解淀粉能力的差異13．(不定項(xiàng)選擇)聚羥基脂肪酸酯(PHA)是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯，它具有類似于合成塑料的理化特性，且廢棄后易被生物降解，可用于制造無(wú)污染的“綠色塑料”?？茖W(xué)家從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種的流程圖如下。下列說法正確的是()①取湖水→②eq\a\vs4\al(\o(\s\up7(接種在培),\s\do5(養(yǎng)基上)))→③培養(yǎng)→④eq\a\vs4\al(挑取單菌,落并分別,擴(kuò)大培養(yǎng))→⑤eq\a\vs4\al(檢測(cè)菌的,數(shù)目和PHA,的產(chǎn)量)→⑥eq\a\vs4\al(獲得目,標(biāo)菌株)A.步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含合成塑料的選擇培養(yǎng)基上B．步驟③需要將接種后的培養(yǎng)基放入恒溫箱中倒置培養(yǎng)C．步驟④所用到的培養(yǎng)基應(yīng)加入瓊脂，以便挑取單菌落獲得純化菌株D．挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落并分別測(cè)定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量14．乳鏈菌肽是由乳酸乳球菌分泌的一種由34個(gè)氨基酸組成的小肽，對(duì)許多革蘭氏陽(yáng)性菌，尤其是對(duì)引起食品腐敗的細(xì)菌具有強(qiáng)烈的抑制作用，是一種高效無(wú)毒的天然食品防腐劑。研究人員從新鮮牛奶中獲得多株產(chǎn)乳鏈菌肽的菌株，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：(1)篩選菌株：將含有殺菌物質(zhì)的濾紙片放到滴有細(xì)菌培養(yǎng)液的固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)，殺菌物質(zhì)殺死細(xì)菌后會(huì)在濾紙片周圍形成抑菌圈。將革蘭氏陽(yáng)性菌涂布于平板上，將滅菌的大小相同的濾紙片均勻地?cái)[放在培養(yǎng)基表面，在其上分別滴加等量備選菌株培養(yǎng)液的上清液，對(duì)比觀察____________________，選取抑制作用最強(qiáng)的菌株。(2)純化菌株：eq\x(\a\al(A.制備,培養(yǎng)基))→eq\x(\a\al(B.,滅菌))→eq\x(\a\al(C.擴(kuò)大,培養(yǎng)))→eq\x(\a\al(D.劃線分,離和培養(yǎng)))→eq\x(\a\al(E.菌種臨,時(shí)保存))A過程配制時(shí)除了加入特定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以外，還要加入一定量的氯化鈉，以維持________。B過程常用的方法是________________________________________________________________________，該過程中溫度是121℃，壓力______，滅菌15min。D過程與C過程相比，培養(yǎng)基中增加的物質(zhì)是______________。E過程需將純化的菌株用________(用具)接種于________培養(yǎng)基中4℃保存。(3)為了解乳鏈菌肽對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌的作用方式是抑制細(xì)菌生長(zhǎng)、溶菌性殺死細(xì)菌(細(xì)胞破裂)還是非溶菌性殺死細(xì)菌，科研人員活將乳鏈菌肽加入革蘭氏陽(yáng)性菌菌液中，隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，檢測(cè)革蘭氏陽(yáng)性菌的活菌數(shù)、除去菌體的上清液中核酸含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌活菌的計(jì)數(shù)方法為________。以上實(shí)驗(yàn)表明乳鏈菌肽對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌的作用方式為________。(4)口服乳鏈菌肽，不會(huì)改變?nèi)梭w腸道中的正常菌群，也不會(huì)進(jìn)入內(nèi)環(huán)境，推測(cè)可能的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。15．隨著個(gè)人承擔(dān)傳染病防控社會(huì)責(zé)任的意識(shí)的不斷加強(qiáng)，很多人外出能自覺地戴口罩。某同學(xué)對(duì)戴一段時(shí)間后的滅菌口罩上的微生物進(jìn)行檢測(cè)，以了解其污染情況。請(qǐng)回答下列問題：(1)從戴一段時(shí)間后的口罩上剪取總量5cm2樣品，剪碎后加入滅菌生理鹽水中，定容至100mL，充分混勻，得到樣液A。待樣液A自然沉降后，取上清液稀釋103倍得到樣液B。取4個(gè)經(jīng)________(填“干熱”或“灼燒”)滅菌處理的培養(yǎng)皿，向其中3個(gè)培養(yǎng)皿中分別加入1mL樣液B，再將冷卻到45～50℃的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿。隨即轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使樣液B與培養(yǎng)基充分混勻，待________后，將平板倒置，置于培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h。第4個(gè)培養(yǎng)皿添加________________(填“樣液”、“培養(yǎng)基”或“樣液和培養(yǎng)基”)作為對(duì)照。(2)一段時(shí)間后，3個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)分別為50、40和45，可計(jì)算出1cm2口罩樣品中菌體數(shù)量為________。統(tǒng)計(jì)計(jì)算出的量往往________(填“大于”、“等于”或“小于”)口罩中菌體的實(shí)際數(shù)量，原因可能是在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的時(shí)間過短，________________________。(3)若要對(duì)口罩中的金黃色葡萄球菌進(jìn)行選擇性分離培養(yǎng)，可將樣液B用________________________法接種到甘露醇高鹽瓊脂培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基中的高濃度氯化鈉用于____________________。16．綠水青山就是金山銀山，污水治理是生態(tài)文明建設(shè)的一項(xiàng)重要任務(wù)，利用微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇(PVA)是存在于化工污水中的一種難以降解的大分子有機(jī)物，PVA分解菌能產(chǎn)生PVA酶分解PVA，PVA與碘作用時(shí)能產(chǎn)生藍(lán)綠色復(fù)合物，當(dāng)PVA被分解時(shí)藍(lán)綠色復(fù)合物消失，形成白色透明斑，請(qǐng)回答下列問題：成分MgSO4蛋白質(zhì)X物質(zhì)水瓊脂用量5g10g7g1000mL20g(1)表中是篩選出能高效分解PVA的細(xì)菌的培養(yǎng)基配方，表中X物質(zhì)最可能為________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)若圖中污水取樣是從聚乙烯醇(PVA)污染的水體中采集，通過圖示過程分離出分解聚乙烯醇(PVA)的菌落，則進(jìn)行過程1的作用是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)若將100mL含有PVA分解菌的土壤樣品溶液稀釋104倍后，取0.1mL稀釋液均勻涂布在選擇培養(yǎng)基表面，測(cè)得菌落數(shù)的平均值為160個(gè)，空白對(duì)照組平板上未出現(xiàn)菌落，則100mL原菌液中有PVA分解菌____________個(gè)，該接種方法是______________，通過該方法測(cè)量的菌落數(shù)值與實(shí)際值相比一般會(huì)____________(填“偏大”“偏小”或“相等”)。(4)要鑒定分離出的細(xì)菌是否為PVA分解菌，培養(yǎng)PVA分解菌的培養(yǎng)基中除了加入必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還需要加入____________用于鑒別PVA分解菌。若用上述培養(yǎng)基比較不同菌株降解PVA能力的大小，請(qǐng)用簡(jiǎn)潔的語(yǔ)言寫出設(shè)計(jì)思路：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)答案1．解析：稀釋涂布平板法常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)的結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和，兩者均可以測(cè)定微生物的數(shù)量，A正確，B正確；平板劃線法不能用于計(jì)數(shù)，只能用來(lái)分離純化微生物，C錯(cuò)誤；當(dāng)樣品中微生物濃度較低時(shí)，可采用濾膜法，如測(cè)定飲用水中大腸桿菌的數(shù)量，D正確。答案：C2．解析：分析題干可知，改造后的大腸桿菌“能以廣泛存在于植物纖維中的半纖維素為原料，分解產(chǎn)生燃料物質(zhì)”，因此若要將這種大腸桿菌分離出來(lái)，應(yīng)將它們接種在只含半纖維素而無(wú)其他碳源的選擇培養(yǎng)基上。答案：C3．解析：圖示固體培養(yǎng)基上采用的接種方法應(yīng)是稀釋涂布平板法，A錯(cuò)誤；病原菌發(fā)生抗性變異在與抗生素接觸之前，B錯(cuò)誤；微生物對(duì)藥物較敏感形成的抑菌圈應(yīng)較大，C錯(cuò)誤；紙片所含的藥物吸取平板中的水分溶解后，便不斷向紙片周圍區(qū)域擴(kuò)散，不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響，D正確。答案：D4．解析：土壤中的微生物大約70%～90%是細(xì)菌，真菌的數(shù)量要比細(xì)菌少；樣品的稀釋度越高，在平板上生成的菌落數(shù)目就越少；在實(shí)際操作中，通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)為30～300的適于計(jì)數(shù)的平板，所以細(xì)菌的稀釋倍數(shù)要高于真菌的稀釋倍數(shù)。答案：C5．解析：應(yīng)該用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌，A錯(cuò)誤；木材、秸稈中富含纖維素，故可以從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌，B正確；用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌后，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，以確定得到的是纖維素分解菌，并了解其產(chǎn)纖維素酶的能力，C正確；用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈，可以把纖維素分解成葡萄糖，提高飼用價(jià)值，D正確。答案：A6．解析：稀釋涂布平板法包括樣品稀釋、涂布及培養(yǎng)三個(gè)基本步驟，A正確。答案：A7．解析：尿素分解菌可以合成脲酶將尿素分解，因此要分離純化尿素分解菌，培養(yǎng)基都應(yīng)以尿素為唯一氮源，A正確；對(duì)培養(yǎng)基滅菌常用的方法是濕熱滅菌法，B正確；①～③過程是選擇培養(yǎng)，該過程用來(lái)選擇培養(yǎng)尿素分解菌，因此培養(yǎng)基應(yīng)該是以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，而不是無(wú)菌水，C錯(cuò)誤；分解尿素的菌能將尿素分解成NH3，使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)，pH升高，酚紅指示劑會(huì)變紅，因此可用酚紅染料鑒定尿素分解菌，觀察菌落周圍是否出現(xiàn)紅色圈，D正確。答案：C8．解析：每克樣品中的菌落數(shù)＝(90÷0.1)×105＝9×107(個(gè))，即每克樣品中的活菌數(shù)約為9×107個(gè)。答案：B9．解析：(1)尿素分解菌能產(chǎn)生脲酶將尿素分解成NH3，土壤中的尿素只有被分解成NH3后才能被植物吸收利用，因此可用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基來(lái)分離尿素分解菌。(2)②為檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否受到雜菌污染，需要設(shè)置空白對(duì)照組。③a.細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成了NH3，NH3會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，因此可以通過檢查培養(yǎng)基的pH變化來(lái)鑒別尿素分解菌的存在，在培養(yǎng)基配方中加入的Y可以是酚紅指示劑。b.分析圖示實(shí)驗(yàn)過程可知，該實(shí)驗(yàn)采用了稀釋涂布平板法進(jìn)行接種，用于計(jì)數(shù)土壤稀釋液中尿素分解菌的數(shù)量。c.當(dāng)尿素分解菌產(chǎn)生的脲酶將尿素分解為NH3后，培養(yǎng)基pH升高，酚紅指示劑會(huì)變紅，因此應(yīng)注意統(tǒng)計(jì)周圍為紅色的菌落。在稀釋倍數(shù)為105下，三個(gè)平板的菌落數(shù)目分別為68、73、87個(gè)，因此每克土樣中尿素分解菌的活菌數(shù)約為(68＋73＋87)÷3÷0.1×105＝7.6×107(個(gè))。(3)有些菌落周圍的培養(yǎng)基沒有變化，說明這些細(xì)菌不能產(chǎn)生脲酶，不能利用尿素作為氮源，而氮源為微生物生長(zhǎng)所必需的，因此可推測(cè)可能存在固氮微生物，它們能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，而不能將培養(yǎng)基中的尿素分解成氨(不與指示劑作用)，所以有些菌落產(chǎn)生而菌落周圍的培養(yǎng)基沒有變化。答案：(1)脲酶(2)②空白對(duì)照③a.酚紅指示劑b．稀釋涂布平板c．紅色的7.6×107個(gè)(3)可能存在固氮微生物，它們能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，而不能將培養(yǎng)基中的尿素分解成氨(不與指示劑作用)，所以有些菌落產(chǎn)生而菌落周圍的培養(yǎng)基沒有變化10．解析：生活污水中含有大量微生物，但不一定含有產(chǎn)漆酶的菌株，A錯(cuò)誤；篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物，只有產(chǎn)漆酶的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，進(jìn)而通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落，B正確；由圖可知，在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，再通過劃線進(jìn)一步純化，C正確；在適宜溫度下，接種后的斜面培養(yǎng)基上菌落長(zhǎng)成后，可在低溫下臨時(shí)保存菌株，D正確。答案：A11．解析：選擇培養(yǎng)基只允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)要抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)，因而必須以苯磺隆為唯一碳源只讓目的菌生存繁殖，A錯(cuò)誤；圖乙上清液中加入的蛋白酶溶液是用于水解上清液中的某蛋白質(zhì)的，由此可判定實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖翘骄磕康木欠裢ㄟ^分泌某種蛋白質(zhì)來(lái)降解苯磺隆，B正確；在微生物接種時(shí)，需用70%的酒精對(duì)實(shí)驗(yàn)者的雙手和超凈工作臺(tái)進(jìn)行消毒，C錯(cuò)誤；在分離土壤中目的菌的實(shí)驗(yàn)中，采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后，土樣中的微生物被殺死，再制取土壤稀釋液接種并培養(yǎng)，不會(huì)得到菌落，D錯(cuò)誤。答案：B12．解析：微生物培養(yǎng)基含有四類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源，A正確；常用稀釋涂布平板法篩選淀粉分解菌，涂布前需將菌液稀釋，B正確；淀粉分解菌可分解淀粉，導(dǎo)致菌落周圍的淀粉被分解，不能與碘液反應(yīng)生成藍(lán)色，故而出現(xiàn)透明圈，透明圈直徑與菌落直徑的比值越大，說明細(xì)菌分解淀粉能力越強(qiáng)，D正確；由題圖可知，細(xì)菌Ⅰ和Ⅱ形成的菌落周圍都出現(xiàn)了透明圈，說明兩種細(xì)菌都能將淀粉酶分泌至細(xì)胞外，C錯(cuò)誤。答案：ABD13．解析：PHA是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯，要篩選嗜鹽細(xì)菌，步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含鹽量較高的選擇培養(yǎng)基上，A錯(cuò)誤；步驟③為防止皿蓋上的冷凝水滴入培養(yǎng)基，需要將接種后的培養(yǎng)基放入恒溫箱中倒置培養(yǎng)，B正確；步驟④擴(kuò)大培養(yǎng)應(yīng)選用液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基中不應(yīng)加入瓊脂，C錯(cuò)誤；要挑選高產(chǎn)聚羥基脂肪酸酯(PHA)的嗜鹽菌，挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落并分別測(cè)定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量，最后進(jìn)行比較，D正確。答案：BD14．解析：(1)由于含有殺菌物質(zhì)的濾紙片放到滴有細(xì)菌培養(yǎng)液的固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)，殺菌物質(zhì)殺死細(xì)菌后會(huì)在濾紙片周圍形成抑菌圈。抑菌圈越大說明殺菌物質(zhì)的殺菌能力越大。所以將革蘭氏陽(yáng)性菌涂布于平板上，將滅菌的大小相同的濾紙片均勻地?cái)[放在培養(yǎng)基表面，在其上分別滴加等量備選菌株培養(yǎng)液的上清液，對(duì)比觀察抑菌圈的大小，選取抑制作用最強(qiáng)的菌株。(2)A過程配制時(shí)除了加入特定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以外，還要加入一定量的氯化鈉，以維持滲透壓；B過程常用的方法是濕熱滅菌法。這是培養(yǎng)基滅菌常用的方法，溫度是121℃，壓力為100kPa；D過程所需的是固體培養(yǎng)基，而C過程所需的是液體培養(yǎng)基，因此D過程培養(yǎng)基中增加的物質(zhì)是凝固劑，主要是瓊脂。E過程需將純化的菌株接種于固體斜面培養(yǎng)基中4℃保存，接種工具是接種環(huán)。(3)對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌活菌的計(jì)數(shù)方法為稀釋涂布平板法；由圖可知，對(duì)照組的種群數(shù)量變化呈S形。由于曲線3活菌數(shù)降為零，說明是殺死細(xì)菌；除去菌體的上清液中核酸含量沒有明顯變化，說明不是溶菌。(4)乳鏈菌肽作為天然防腐劑，它是由34個(gè)氨基酸組成的多肽，口服使用的優(yōu)點(diǎn)是不會(huì)改變?nèi)梭w腸道內(nèi)正常菌群，也不會(huì)進(jìn)入內(nèi)環(huán)境，推測(cè)其原因可能是食用后被消化道中蛋白酶所降解而被人體消化。答案：(1)抑菌圈的大小(2)滲透壓濕熱滅菌法100kPa凝固劑，主要是瓊脂接種環(huán)固體斜面(3)稀釋涂布平板法非溶菌性殺死細(xì)菌(4)食用后可能被消化道中蛋白酶所降解而被人體消化15．解析：(1)培養(yǎng)皿的滅菌方法有干熱滅菌，培養(yǎng)基的滅菌方法是濕熱滅菌。倒平板時(shí)，需等培養(yǎng)基凝固(完全冷卻)后，才能將平板倒置。根據(jù)題意分析，第4個(gè)培養(yǎng)基為對(duì)照組，只需要添加培養(yǎng)基即可，其他操作與實(shí)驗(yàn)組相同。一段時(shí)間后，對(duì)照組培養(yǎng)基上無(wú)菌落產(chǎn)生，說明實(shí)驗(yàn)組上長(zhǎng)出的菌落均來(lái)自樣液中的微生物。(2)3個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)均在30～300之間，說明操作中的稀釋倍數(shù)是合適的，其平均數(shù)是(50＋40＋45)/3＝45。考慮1ml樣液B是稀釋103倍的樣液A，樣液A共100mL，這些樣液A內(nèi)的菌數(shù)是45×103×100＝45×105，則1cm2口罩樣品中菌體數(shù)量為(45×105)/5＝