生物藥物

來(lái)源:生物體或生物組織、細(xì)胞、體液等抗體類藥物抗生素類藥物生物藥物產(chǎn)品的純度要求很高，含量要達(dá)到95％甚至98％以上生物制藥工藝生物制藥工藝中，下游的分離純化尤為重要，分離手段及策略便是關(guān)鍵。要對(duì)潛在的工藝相關(guān)雜質(zhì)（如宿主細(xì)胞蛋白，宿主細(xì)胞DNA，細(xì)胞培養(yǎng)殘留物，下游工藝的殘留物等）進(jìn)行純化。Na+Na+Na+SO42-Cl-SO42-胡

斌基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物制藥1013905337@親和層析技術(shù)目錄1親和層析概念3操作方法2親和層析原理一、親和層析的概念親和層析（affinitychromatography，AC）：利用待分離的物質(zhì)（目的物）與其特異性配基之間特異性的親和力而進(jìn)行分離的一類特殊的層析技術(shù)。關(guān)鍵點(diǎn)：特異性配基、親和力親和力親和力：生物分子間存在很多特異性的相互作用，如抗原-抗體、酶-底物或抑制劑、激素-受體，它們之間都能夠?qū)Ｒ欢赡娴亟Y(jié)合。相關(guān)概念流動(dòng)相基質(zhì)(載體)配體(基)固定相親和層析的基本原理親和的一對(duì)分子中的一方以共價(jià)鍵形式與不溶性載體相連作為固定相吸附劑。+當(dāng)含有混合組分的目的物樣品（流動(dòng)相）通過(guò)此固定相時(shí)，只有和固定相分子有特異性親和力的物質(zhì)（目的物），才能被固定相吸附結(jié)合，其他沒有親和力的組分就隨流動(dòng)相流出。親和層析的基本原理親和層析的基本原理++洗脫親和層析的基本原理改變流動(dòng)相的成分，將結(jié)合的目的物洗脫下來(lái)。+二、親和層析操作流程親和層析一般可分為以下4個(gè)操作步驟：平衡樣品上柱和清洗洗脫01020304再生國(guó)產(chǎn)柱層析系統(tǒng)（一）平衡用平衡緩沖液充分平衡柱體，直至基線平穩(wěn)（二）樣品上柱和沖洗樣品上柱過(guò)程中，樣品流速每小時(shí)低于10mL/cm2。上樣體積為柱床體積的5%。樣品中的目的物與配體選擇性的吸附，雜質(zhì)不被吸附。用上樣緩沖液充分沖洗柱體，雜質(zhì)被沖洗下來(lái)，形成雜質(zhì)峰。（三）

洗脫選擇適當(dāng)洗脫條件，將吸附在配體上的目的物用洗脫緩沖液洗脫（解吸）下來(lái)，收集樣品。如果目的物中含有較高的離子或者較高的鹽濃度時(shí)，可采用透析的方法將之除去。（四）

再生用大量的洗脫液或較高濃度的鹽溶液洗滌柱體，再用平衡緩沖液重新平衡。如嚴(yán)重的不可逆吸附時(shí)，使用高鹽濃度的鹽溶液、尿素等變性劑或加入適當(dāng)?shù)姆菍Ｒ恍缘鞍酌?，使樹脂恢?fù)到初始狀態(tài)。親和層析分離過(guò)程示意圖視頻2小結(jié)本節(jié)課分別講述了，在生物制藥分離純化中，親和層析技術(shù)的概念、原理及操作流程。并以胰蛋白酶的純化為例講述了親和層析技術(shù)在