關于蛋白質組學與分析技術課程內容：蛋白質組學主要講授內容第一章蛋白質組學概念一、蛋白質組學概念二、蛋白質組學研究與分析技術特點三、蛋白質組學研究目的和意義四、蛋白質組學研究技術簡介五、蛋白質組學與分析技術課參考書第2頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第二章蛋白質分離和提取的技術與方法一、蛋白質的分離技術二、蛋白質樣品的制備原則三、從生物樣品中抽提蛋白質時需要考慮的幾個因素四、影響蛋白質純化的因素五、蛋白純化技術六、蛋白質的濃縮技術七、蛋白質組學與分析技術課參考書第3頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第三章蛋白質電泳分析技術一、蛋白電泳類型二、2-DE電泳的蛋白樣品制備技術三、2-DE電泳技術三、2-DE分離后的蛋白檢測四、蛋白質電泳圖像分析五、雙向凝膠電泳面臨的問題第4頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第四章蛋白質層析分析技術與方法一、吸附層析（AdsorptionChromatography）二、離子交換層析(IonExchangeChromatography，IEC)三、凝膠過濾層析(gelfiltrationchromatograpHy)四、親和層析(affinitychromatograpHy)五、聚焦層析(focusingchromatography)六、蛋白質的分析制備七、高效液相層析與質譜分析第5頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第五章高效液相色譜和質譜聯用儀在蛋白質組學中的應用一、高效液相色譜發(fā)展歷史二、高效液相色譜的儀器組成、應用及特點三、樣品的預處理技術四、高效液相色譜法的固定相和流動相的選擇五、液相色譜法的蛋白質分離六、高效液相色譜的定性分析七、高效液相色譜在蛋白質研究中的應用八、質譜（MassSpectrometry，MS）第6頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第六章PCR技術在蛋白質組學中的應用

一、PCR的發(fā)展概況二、PCR技術的基本原理三、PCR的反應動力學四、PCR擴增產物五、PCR循環(huán)的主要參數六、PCR相關技術第7頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第七章基因文庫與cDNA文庫在蛋白質中的應用

一、基因文庫二、基因文庫的分析方法與技術三、cDNA文庫四、cDNA文庫的分析方法與技術第8頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第八章基因芯片技術在蛋白質組學中的應用

一、基因芯片技術及應用二、基因芯片操作流程圖三、基因芯片操作實例第9頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第九章酵母雙雜交技術在蛋白質組學中的應用

一、酵母雙雜交的基本原理二、酵母雙雜交系統(tǒng)的應用三、酵母雙雜交體系的實驗程序四、酵母雙雜交系統(tǒng)的優(yōu)缺點五、酵母雙雜交技術應用的趨勢及展望第10頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第十章基因敲除和RNA干擾技術在蛋白質組學中應用

一、基因敲除的原理二、基因敲除技術的分析與應用三、RNA干擾原理四、RNA干擾技術的分析與應用第11頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第十一章蛋白質表達系統(tǒng)的建立及應用

一、各種蛋白質表達系統(tǒng)及其特點二、在大腸桿菌中表達蛋白三、問題探討四、蛋白質在植物中的表達第12頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第十二章蛋白質結構與功能解析一、蛋白質結構與功能分析二、蛋白質結構研究的歷史回顧三、蛋白質結構與功能研究的國內外現狀四、蛋白質單晶的培養(yǎng)五、生物大分子結構的測定六、蛋白質結構研究的最新方法第13頁,共56頁，2024年2月25日，星期天參考書1、《蛋白質組學導論》[美]D.C.利布萊爾.科學出版社2、《蛋白質化學與蛋白質組學》.夏其昌，曾嶸.科學出版社3、《蛋白質結構分析：制備、鑒定與微量測定.》[德]RM坎普.科學出版社4、蛋白質與蛋白質組學實驗指南》（影印版）.[澳]R.J.辛普森5、《蛋白質組學》[中]錢小紅賀福初.科學出版社6、《蛋白質組學原理》[英]特懷曼.化學工業(yè)出版社7、《藥物研究中的蛋白質組學》[美]哈馬馳科學出版社8、《植物基因組學與蛋白質組學》[英]卡利斯化學工業(yè)出版社9、《基因組學、蛋白質組學與疫苗》[意]格蘭迪10、《藥物蛋白質組學》[中]郭葆玉人民衛(wèi)生出版社11、《基因組研究手冊基因組學、蛋白質組學、代謝組學、信息生物學、倫理學和法律問題》[加拿大]森森科學出版社12、《蛋白質與蛋白質組學：生命科學新視野2》[英]索倫森科學出版社13、《BayesianInferenceforGeneExpressionandProteomics基因表達與蛋白質組學貝氏分析》MarinaVannucci14、《蛋白質生物農藥》[中]邱德文等.科學出版社第14頁,共56頁，2024年2月25日，星期天考試方式課程論文：20%，根據所學蛋白質組學的概念和蛋白質組學在農業(yè)生產上的應用與蛋白質組學的現代分析技術和研究方法結合個人的科學研究或設想提出一個蛋白質組學分析技術的科學研究技術路線和主要研究內容。平時成績：20%（課堂回答及出勤）期末考試（筆試）：60%第15頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第一章蛋白質組學的概念蛋白質組學是研究與基因對應的蛋白質組的學科，蛋白質組（proteome）一詞，源于蛋白質（protein）與基因組（genome）兩個詞的雜合，意指“一種基因組所表達的全套蛋白質”,即包括一種細胞乃至一種生物所表達的全部蛋白質。蛋白質組學（proteomics）：MarcWilkins20世紀90年代早期提出的，有“基因組學”（genomics）和蛋白質（protein）組合而成。蛋白質組學的研究是生命科學進入后基因時代的特征。第16頁,共56頁，2024年2月25日，星期天90年代初期開始實施的人類基因組計劃，在經過各國科學家近20年的努力下，已經取得了巨大的成就。完成了人類基因的測序及二十余種模式生物（從大腸桿菌、釀酒酵母到線蟲）基因組全序列的測定工作?；虻谋磉_方式錯綜復雜，同樣的一個基因在不同條件、不同時期可能會起到完全不同的作用。關于這些方面的問題，基因組學是無法回答的。所以，科學家們進一步提出了后基因組計劃，蛋白質組（proteome）研究是其中一個很重要的內容。

第17頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組學是后基因組時代功能基因組學研究的新興學科和熱點領域。目前，蛋白質組學已從早期用雙向電泳和凝膠蛋白鑒定進行蛋白質表達譜研究擴展到蛋白質研究的幾乎所有方面，如蛋白質相互作用、翻譯后修飾、蛋白質結構和蛋白質胞內移位等，可以理解為大規(guī)模研究蛋白質相關問題的學科。第18頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質的特征蛋白質是生命的物質基礎，沒有蛋白質就沒有生命。它是與生命及與各種形式的生命活動緊密聯系在一起的物質。蛋白質占人體重量的16%-20%。蛋白質是生物體中廣泛存在的一類生物大分子，由核酸編碼的α氨基酸之間通過α氨基和α羧基形成的肽鍵連接而成的肽鏈，經翻譯后加工而生成的具有特定立體結構的、有活性的大分子。第19頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質一級結構蛋白質氨基酸序列為蛋白質的一級結構，蛋白質多肽鏈中氨基酸的排列順序，以及二硫鍵的位置。TLYMSPDYAATTLEGLFHThr-Leu-Tyr-Met-Ser-Pro-Asp-Tyr-Ala-Ala-Thr-Thr-Leu-Glu-Gly-Leu-Phe-His蘇氨酸－亮氨酸－酪氨酸－甲硫氨酸－絲氨酸－脯氨酸－天冬氨酸－酪氨酸－丙氨酸－丙氨酸－蘇氨酸－蘇氨酸－亮氨酸－谷氨酸－甘氨酸－亮氨酸－苯丙氨酸－組氨酸第20頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質的二級結構二級結構：蛋白質分子局區(qū)域內，多肽鏈沿一定方向盤繞和折疊的方式，主要為Beta折疊和Alpha螺旋結構第21頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質的三級結構三級結構：蛋白質的二級結構基礎上借助各種次級鍵卷曲折疊成特定的球狀分子結構的空間構象。第22頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質的四級結構四級結構：多亞基蛋白質分子中各個具有三級結構的多肽鏈，以適當的方式聚合所形成的蛋白質的三維結構。第23頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組對應于基因組的所有蛋白質構成的整體，不是局限于一個或幾個蛋白質。同一基因組在不同細胞、不同組織中的表達情況各不相同。在空間和時間上動態(tài)變化著的整體。第24頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組學（Proteomics）指應用各種技術手段來研究蛋白質組的一門新興科學；其目的是從整體的角度分析細胞內動態(tài)變化的蛋白質組成成分、表達水平與修飾狀態(tài)，了解蛋白質之間的相互作用與聯系，揭示蛋白質功能與細胞生命活動規(guī)律。第25頁,共56頁，2024年2月25日，星期天功能蛋白質組學（functionalproteomics）功能蛋白質組：細胞在一定階段或與某一生理現象相關的所有蛋白質。介于對個別蛋白質的傳統(tǒng)蛋白質化學研究和以全部蛋白質為研究對象的蛋白質組學之間。從局部入手研究蛋白質組的各個功能亞群體；將多個亞群體組合起來，逐步描繪出接近于生命細胞的“全部蛋白質”的蛋白質組圖譜。第26頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組學強調的是針對蛋白質的一個整體思路，蛋白質組學自其出現起，就有兩種研究策略。一種可稱為“窮盡法”或“竭澤法”，即采用高通量的蛋白質組學研究技術，力圖查清生物體內一切蛋白質，這種大規(guī)模系統(tǒng)性的策略較為符合蛋白質組學的本質。另一種策略是“差異法”（也稱為“功能法”）它著重于尋找和篩選任何有意義的因素引起的不同樣本之間的差異蛋白質譜，試圖揭示細胞對此因素的反應途徑、進程與本質，同時獲得對某些關鍵蛋白的認識和功能分析。這種方法更趨向于把蛋白質組學作為研究生命現象的手段和方法，技術上具有更高的可實現性，是目前蛋白質組學在應用上最具前景的領域。第27頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組學的研究內容主要有兩個方面結構蛋白質組學和功能蛋白質組學；結構蛋白質組學主要是蛋白質表達模式的研究，包括蛋白質氨基酸序列分析及空間結構的解析，蛋白質表達模式的研究室蛋白質組學研究的基礎內容，主要研究特定條件下某一細胞或組織的所有蛋白質的表征問題；功能蛋白質組學主要是蛋白質功能模式的研究，包括蛋白質的功能和蛋白質間的相互作用。蛋白質的功能模式的研究是蛋白質組學研究的最終目標，目前主要集中在蛋白質組相互作用網絡關系的研究，它是要揭示蛋白質組成員間的相互作用、相互協(xié)調的關系，并深層次了解蛋白質的結構與功能的相互關系，以及基因的結構與蛋白質的結構和功能的關系。第28頁,共56頁，2024年2月25日，星期天978Cell136,March6,2009第29頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組學與分析技術特點

蛋白質組學的發(fā)展既是技術所推動的也是受技術限制的。蛋白質組學研究成功與否，很大程度上取決于其技術方法水平的高低。蛋白質研究技術遠比基因技術復雜和困難。不僅氨基酸殘基種類遠多于核苷酸殘基（20/4）,而且蛋白質有著復雜的翻譯后修飾，如磷酸化和糖基化等，給分離和分析蛋白質帶來很多困難。此外，通過表達載體進行蛋白質的體外擴增和純化也并非易事，從而難以制備大量的蛋白質。蛋白質組學的興起對技術有了新的需求和挑戰(zhàn)。蛋白質組的研究實質上是在細胞水平上對蛋白質進行大規(guī)模的平行分離和分析，往往要同時處理成千上萬種蛋白質。因此，發(fā)展高通量、高靈敏度、高準確性的研究技術平臺是現在乃至相當一段時間內蛋白質組學研究中的主要任務。

第30頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組學與分析技術特點內容多：蛋白質組作圖、蛋白質組成分鑒定、蛋白質組數據庫構建、新型蛋白質發(fā)掘、蛋白質差異顯示、同工體比較、基因產物識別、基因功能鑒定、基因調控機制分析、細胞周期、細胞分化與發(fā)育、腫瘤發(fā)生與發(fā)展、環(huán)境反應與調控、物種進化、新型藥物靶分子、人體病理介導分子、病原菌毒性成分、植物信號識別、植物誘導抗性、免疫增產激發(fā)子、抗蟲蛋白晶體、植物病害毒素、植物致病相關蛋白等等。分析技術面廣：氨基酸組分、序列測定；SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳；毛細管電泳；高效液相色譜；質譜；液質聯儀；毛細管電泳-質譜聯用；雙向凝膠電泳；蛋白質芯片；蛋白質生物信息學；蛋白質結構與功能；園二色譜；X光衍射；高能輻射；蛋白質雜交技術；蛋白質酶學技術。第31頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組學與分析技術特點分析技術面廣：氨基酸組分、序列測定；SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳；毛細管電泳；高效液相色譜；質譜；液質聯儀；毛細管電泳-質譜聯用；雙向凝膠電泳；蛋白質芯片；蛋白質生物信息學；蛋白質結構與功能；園二色譜；X光衍射；高能輻射；蛋白質雜交技術；蛋白質酶學技術。第32頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組學研究的最終目標

闡明生命細胞進行代謝、信號傳導和調控網絡的組織結構和動力學，并理解這些網絡如何在病理中失去功能，又如何通過干預如藥物和基因改變它們的功能。幾乎所有的生理和病理過程，以及藥物和環(huán)境因子的作用都依賴于蛋白質，并引起蛋白質的變化。反之，對蛋白質組變化的分析也能提供對上述過程或結果的重要信息。蛋白質組的研究不僅為生命活動規(guī)律提供物質基礎，探索生命奧秘也為某些疾病發(fā)生發(fā)展機理的闡明和解決途徑提供理論根據。

第33頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組學研究的意義

隨著大量DNA序列數據的不斷涌現，人們意識到僅僅靠基因組的序列來試圖闡明生命現象是遠遠不夠的。蛋白質本身的存在形式和活動規(guī)律，如翻譯后修飾、蛋白質間相互作用以及蛋白質結構等問題，必須要依賴于對蛋白質組學的研究來解決。蛋白質組學使我們從綜合和總體的角度，在分子水平上來研究和把握生命現象，這對于理解生命現象的本質，對于生命科學的每一個分支都將起到強有力的推動作用。任何一種疾病在表現出可察覺的癥狀之前，就已經有一些蛋白質發(fā)生了變化。因此尋找各種疾病的關鍵蛋白和標志蛋白，對于疾病的診斷、病理的研究和藥物的篩選都具有重要意義。

第34頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組學前景展望

隨著技術和方法的不斷創(chuàng)新與發(fā)展，蛋白質組學研究將在揭示諸如生長、發(fā)育和代謝調控等生命活動規(guī)律上有所突破，最終也將成為人類重大疾病機制闡明和診斷、防治中的有力武器。病原體基因組和蛋白質組的研究，將為開發(fā)新的抗菌素提供理論依據。在惡性腫瘤方面，它從蛋白質整體的水平上研究惡性腫瘤的發(fā)病機制，從而使攻克癌癥這一難關成為可能。在農業(yè)上，育種也將從現在的通過個別基因的轉移改進個別性能，使整體性能達到改善。在新藥的開發(fā)上，它作為好的指導思想，可以加快藥物專一作用靶點的探測速度，增加新藥臨床試驗通過率。目前已有數十種蛋白質芯片系統(tǒng)問世，為蛋白質組學研究提供了強有力的手段。

第35頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組學技術本身在今后數年仍將快速發(fā)展，而且會向更高的自動化方向發(fā)展。蛋白質組學將推動對農作物抗病蟲性、抗逆性、藥物分子機制和人類疾病本質的認識，協(xié)助解決復雜農作物病蟲害、獸醫(yī)、動植物免疫和人類疾病包括腫瘤的預防、診斷、治療和農作物病蟲害的預側預報等問題發(fā)揮更重要的作用。第36頁,共56頁，2024年2月25日，星期天1.蛋白質作為人類食物主要營養(yǎng)成分存在于不同的農作物中；2.蛋白質在植物生活中具有不同生物學功能（細胞調亡和細胞器）；3.蛋白質作為酶在植物生長代謝中起作重要的作用；4.蛋白質作為生物信號傳導的受體對外界信號在植物生活中進行傳導；5.植物中某些蛋白具有抗病蟲的生物功能；6.蛋白質及多肽能誘導植物抗逆性，促進植物生長和提高作物品質；蛋白質組學與農業(yè)的科學實踐第37頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組學研究技術

蛋白質組研究中的樣品制備蛋白質組研究中的樣品分離和分析：雙向凝膠電泳的方法將各種蛋白質區(qū)分開來是一種很有效的手段；質譜技術是目前蛋白質組研究中發(fā)展最快，也最具活力和潛力的技術。它通過測定蛋白質的質量來判別蛋白質的種類。第38頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組研究的新技術

做過雙向凝膠電泳的人一定會抱怨它的繁瑣、不穩(wěn)定和低靈敏度等缺點。發(fā)展可替代或補充雙向凝膠電泳的新方法已成為蛋白質組研究技術最主要的目標。目前，二維色譜(2D-LC)、二維毛細管電泳(2D-CE)、液相色譜－毛細管電泳(LC-CE)等新型分離技術都有補充和取代雙向凝膠電泳之勢。另一種策略則是以質譜技術為核心，開發(fā)質譜鳥槍法(Shot-gun)、毛細管電泳-質譜聯用(CE-MS)等新策略直接鑒定全蛋白質組混合酶解產物。隨著對大規(guī)模蛋白質相互作用研究的重視，發(fā)展高通量和高精度的蛋白質相互作用檢測技術也被科學家所關注。此外，蛋白質芯片的發(fā)展也十分迅速，并已經在臨床診斷中得到應用。

第39頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組生物信息學

生物信息學的發(fā)展已給蛋白質組研究提供了更方便有效的計算機分析軟件；特別值得注意的是蛋白質質譜鑒定軟件和算法發(fā)展迅速，如SWISS-PROT、Rockefeller大學、UCSF等都有自主的搜索軟件和數據管理系統(tǒng)。最近發(fā)展的質譜數據直接搜尋基因組數據庫使得質譜數據可直接進行基因注釋、判斷復雜的拼接方式。隨著基因組學的迅速推進，會給蛋白質組研究提供更多更全的數據庫。第40頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組學發(fā)展趨勢

近年來蛋白質組研究技術已被應用到各種生命科學領域，如細胞生物學、神經生物學等。覆蓋了原核微生物、真核微生物、植物和動物等范圍，涉及到各種重要的生物學現象，如信號轉導、細胞分化、蛋白質折疊等等。

蛋白質組學將成為尋找疾病分子標記和藥物靶標最有效的方法之一。在對癌癥、早老性癡呆等人類重大疾病的臨床診斷和治療方面蛋白質組技術也有十分誘人的前景，目前國際上許多大型藥物公司正投入大量的人力和物力進行蛋白質組學方面的應用性研究。

蛋白質組學的研究方法將出現多種技術并存，各有優(yōu)勢和局限的特點，而難以象基因組研究一樣形成比較一致的方法。除了發(fā)展新方法外，更強調各種方法間的整合和互補，以適應不同蛋白質的不同特征。另外，蛋白質組學與其它學科的交叉也將日益顯著和重要，這種交叉是新技術新方法的活水之源，特別是，蛋白質組學與其它大規(guī)?？茖W如基因組學，生物信息學等領域的交叉，所呈現出的系統(tǒng)生物學（SystemBiology）研究模式，將成為未來生命科學最令人激動的新前沿。第41頁,共56頁，2024年2月25日，星期天研究蛋白質相互作用的技術平臺

酵母雙雜交系統(tǒng)的發(fā)展和應用

利用酵母雙雜交發(fā)現新的蛋白質和蛋白質的新功能利用酵母雙雜交在細胞體內研究抗原和抗體的相互作用利用酵母雙雜交篩選藥物的作用位點以及藥物對蛋白質之間相互作用的影響利用酵母雙雜交建立基因組蛋白連鎖圖（GenomeProteinLinkageMap）第42頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組、蛋白質組學及研究技術路線

蛋白質鑒定：可以利用一維電泳和二維電泳并結合Western等技術，利用蛋白質芯片和抗體芯片及免疫共沉淀等技術對蛋白質進行鑒定研究。翻譯后修飾：很多mRNA表達產生的蛋白質要經歷翻譯后修飾如磷酸化，糖基化，酶原激活等。翻譯后修飾是蛋白質調節(jié)功能的重要方式，因此對蛋白質翻譯后修飾的研究對闡明蛋白質的功能具有重要作用。蛋白質功能確定：如分析酶活性和確定酶底物，細胞因子的生物分析/配基-受體結合分析?？梢岳没蚯贸头戳x技術分析基因表達產物-蛋白質的功能。另外對蛋白質表達出來后在細胞內的定位研究也在一定程度上有助于蛋白質功能的了解。Clontech的熒光蛋白表達系統(tǒng)就是研究蛋白質在細胞內定位的一個很好的工具。對人類而言，蛋白質組學的研究最終要服務于人類的健康，主要指促進分子醫(yī)學的發(fā)展。如尋找藥物的靶分子。很多藥物本身就是蛋白質，而很多藥物的靶分子也是蛋白質。藥物也可以干預蛋白質-蛋白質相互作用。第43頁,共56頁，2024年2月25日，星期天蛋白質組學研究與科學論文蛋白質的提取、分離、純化、功能鑒定到獲得該蛋白的基因克?。ㄍ瓿纱T士論文）已知蛋白質克隆、純化表達與功能驗證及相關機理研究（Sci因子在2-3之間）新蛋白、新功能、新基因蛋白質結構與功能研究、功能驗證與作用機理（SCi因子3-5）。蛋白質受體、信號傳導、蛋白質相互作用及受體鑒定及功能驗證和分子機理（Sci因子6-10）。第44頁,共56頁，2024年2月25日，星期天Pred:CCCHHCCCEEEECCCCCCCCCCCCCHHHHHHHCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC

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AA:TINTKGHVCVPLPWQQLEAVFATNPTLTMQRDTIQ富G(5215.5%),少C(10.3%)巻曲較多，與熱穩(wěn)定有直接關系。二級結構預測第45頁,共56頁，2024年2月25日，星期天

Activator1MLIYKDILTGDEIISDSYNLQEIDGVVYEADCTKINV-GGESFDTGANActivator48ASAEEQEEGAEDNVETKIDVVYSFRLNETGFDKKGYLTYLKGYMKAVKEAActivator98LKSKGADEATIKDFETKASGYAKKIISNFKDYEFFTGESMNPDGMIVLLNActivator148YREDGVTPYVTVWKHGLEEMKV

TCTP1TCTP2TCTP1：暴露在蛋白的表面，親水性強，結構無固定規(guī)則----為可能的活性位點TCTP2：無規(guī)則卷曲，固定在在兩個折疊之間結構與功能研究第46頁,共56頁，2024年2月25日，星期天酵母雙雜交的基本原理

酵母雙雜交系統(tǒng)的建立是基于對真核生物轉錄起始調控的認識。轉錄起始需要轉錄激活因子的參與，而真核生物轉錄激活因子大多是由結構上分離、功能上獨立的兩個結構域組成，即DNA結合結構域(DNAbindingdomain,簡稱為DNA-BD)和轉錄激活結構域(transcriptionactivatin