《生物產(chǎn)品的分析與檢驗技術(shù)》項目一：生物產(chǎn)品分析與檢驗基礎(chǔ)知識

生物技術(shù)及應(yīng)用專業(yè)教學(xué)資源庫主講人：張惠教學(xué)任務(wù)任務(wù)五、生物產(chǎn)品的分析方法（包括哪些？）任務(wù)六、檢驗結(jié)果的數(shù)據(jù)處理五、生物產(chǎn)品的分析方法物理分析法：根據(jù)物質(zhì)的一些物理常數(shù)（如密度、相對密度、旋光度等）與物質(zhì)的組成及含量之間的關(guān)系來分析；化學(xué)分析法：根據(jù)物質(zhì)的化學(xué)性質(zhì)進行分析，包括滴定分析與重量分析；儀器分析法：借助一些分析儀器（GC、HPLC等）

將已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液滴加到被測溶液中（或?qū)⒈粶y溶液滴加到標(biāo)準(zhǔn)溶液中），按化學(xué)計量關(guān)系定量反應(yīng)為止，后測體積，根據(jù)濃度與體積測定物質(zhì)的含量。滴定分析五、生物產(chǎn)品的分析方法幾個概念：1）化學(xué)計量點：液中滴定物質(zhì)的量與被測物質(zhì)的量按化學(xué)計量定量反應(yīng)完成；2）滴定終點：滴定過程中，指示劑發(fā)生顏色變化的轉(zhuǎn)變點稱為滴定終點；3）滴定誤差：滴定終點與化學(xué)計量點不一定剛好符合，由此所造成的分析誤差為滴定誤差；4）滴定液指已知準(zhǔn)確濃度的溶液，又稱標(biāo)準(zhǔn)溶液，可用來滴定被測物質(zhì)。五、生物產(chǎn)品的分析方法需注意（適合滴定分析必須具備一定條件）：（1）反應(yīng)必須按方程式定量地完成，要求在99.9%以上；（2）反應(yīng)能夠迅速地完成；（3）共存物質(zhì)不干擾主要反應(yīng)或可用適當(dāng)?shù)姆椒ㄏ涓蓴_；（4）有比較簡便的方法確定化學(xué)計量點。五、生物產(chǎn)品的分析方法滴定分析的誤差：A稱量誤差每一份試樣的稱量至少大于0.1g；B滴定誤差（1）滴定管、移液管和容量瓶的讀數(shù)；（2）標(biāo)準(zhǔn)溶液的的濃度應(yīng)控制在0.01~0.1mol/L,每一份試樣消耗標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積應(yīng)控制在20~30ml之間；C滴定誤差如指示劑不能準(zhǔn)確地在化學(xué)計量點時改變顏色。五、生物產(chǎn)品的分析方法（二）重量分析法它根據(jù)生成物的質(zhì)量來確定被測組分含量的方法，先用適當(dāng)?shù)姆椒▽⒈粶y組分與試樣中其他組分分離，轉(zhuǎn)化為一定的的稱量形式，然后稱重，由稱得的物質(zhì)的質(zhì)量計算該組分的含量。五、生物產(chǎn)品的分析方法（三）紫外-可見分光光度法分光光度法按所用的光的波譜區(qū)域不同可分為可見分光光度法(400~780nm)、紫外分光光度法(200~400nm)和紅外分光光度法(3000~30000nm)；

紫外-可見分光光度法是能過利用物質(zhì)對200~780nm光譜區(qū)域內(nèi)的電磁輻射具有選擇性吸收，對物質(zhì)進行定性和定量分析的方法；紫外-可見分光光度法紫外可見分光光度計五、生物產(chǎn)品的分析方法（四）原子吸收分光光度計

工作原理是將試液噴射成細霧，與燃氣混合后進入燃燒的火焰中，被測元素在火焰中轉(zhuǎn)化為原子蒸汽；

氣態(tài)的基態(tài)原子吸收從光源發(fā)射出的與被測元素吸收波長相同的特征譜線，使該譜線的的強度減弱。后經(jīng)放大器放大，由顯示系統(tǒng)顯示吸光度或光譜圖。原子吸收分光光度計原子吸收分光光度計原子吸收分光光度計定量分析的理論依據(jù)：基態(tài)原子蒸氣的吸光度與試液中待測元素的濃度及光程長度的乘積成正比。

A=K’cL其中：1）K’—與實驗條件有關(guān)的常數(shù)；2）c——基態(tài)原子的蒸氣濃度；3）L——光程長度；五、生物產(chǎn)品的分析方法（五）氣相色譜分析法氣相色譜(GC)是一種把混合物分離成單個組分的實驗技術(shù)，它常用來對樣品組分進行鑒定和定量測定。如果對未知樣品的組分全然不知時，可采用氣相色譜與紅外光譜聯(lián)用的方法進行測定。氣相色譜有很強的分離能力，而質(zhì)譜、紅外光譜可測定未知物的結(jié)構(gòu)。/portal_new/newweikeinfo/weikeinfo.html?weikeId=-7euaxenikjihd7fzdvdxq

（智慧職教——氣相色譜分析）五、生物產(chǎn)品的分析方法（六）高效液相色譜法高效液相法此用了氣相色譜的理論，流動相（液體）改為高壓輸送；色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜；同時柱后連有高靈敏度的檢測器，可對流出物進行連續(xù)檢測。高效液相（HPLC）具有分析速度快、分享效能高、自動化等特點。高效液相色譜儀/portal_new/sourcematerial/edit_seematerial.html?docid=e2t8adirwoxgdyxgfgmc4q（智慧職教—王若超,山東商業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院,高效液相色譜的使用）/portal_new/sourcematerial/edit_seematerial.html?docid=e2t8adirwoxgdyxgfgmc4q（智慧職教—牛曉東,重慶醫(yī)藥高等專科學(xué)校，高效液相色譜儀操作流程）六、數(shù)據(jù)分析與處理（一）誤差

1、誤差產(chǎn)生原因及分類1）系統(tǒng)誤差（1）方法誤差（2）儀器誤差（3）試劑誤差（4）個人誤差2）偶然誤差在分析過程中由于某些偶然的原因造成的誤差，也叫隨機誤差或不可定誤差。六、數(shù)據(jù)分析與處理誤差（Error)和準(zhǔn)確度(accuracy)誤差：測定值（用x表示）與真值(truevalue,用T表示）之差。準(zhǔn)確度：測定平均值與“真值”接近的程度，用相對誤差表示準(zhǔn)確度.相對誤差絕對誤差Ea

=

-Tx24例:滴定的體積誤差VEaEr20.00mL0.02mL0.1%2.00mL0.02mL1.0%六、數(shù)據(jù)分析與處理偏差與精密度：偏差即各次測定值與平均值之差；精密度即平行測定的結(jié)果互相靠近的程度；26數(shù)據(jù)的集中趨勢1.平均值例：測得c(NaOH)為

0.1012,0.1016,0.1014,0.1025(mol.L-1)

x=0.10172.標(biāo)準(zhǔn)差283.變異系數(shù)相對標(biāo)準(zhǔn)差(變異系數(shù))六、數(shù)據(jù)分析與處理結(jié)論：1.精密度好是準(zhǔn)確度好的前提;2.精密度好不一定準(zhǔn)確度高(系統(tǒng)誤差)。六、數(shù)據(jù)分析與處理誤差的減免:（1）選擇恰當(dāng)?shù)姆治龇椒ǎ?）減少測量誤差（3）增加平行測定次數(shù)（4）消除測量中的系統(tǒng)誤差①方法校正②校準(zhǔn)儀器③作對照試驗④做空白試驗是不是讓人讓人很惱火？哈311.數(shù)據(jù)分析案例1-方差分析利用SPSS做方差分析321.數(shù)據(jù)分析案例1-方差分析利用SPSS做方差分析332.