驗(yàn)證文件類別：清潔驗(yàn)證方案編碼：QJ—YZ001R00頁(yè)碼：共17頁(yè)第1頁(yè)消毒劑消毒效果及使用周期驗(yàn)證方案目錄1.概述2.職責(zé)3.驗(yàn)證內(nèi)容3.1消毒方法及效果驗(yàn)證3.1.1臭氧消毒3.1.1.1概述3.1.1.2臭氧消毒原理3.1.1.3消毒時(shí)間確定3.1.1.4可接收標(biāo)準(zhǔn)3.1.1.53.1.1.6檢驗(yàn)方法3.1.1.7消毒效果評(píng)價(jià)3.1.2甲酚皂消毒劑消毒滅菌法3.1.2.1原理3.1.2.2取樣計(jì)劃3.1.2.3檢驗(yàn)方法3.1.2.4確定可接收程度標(biāo)準(zhǔn)3.1.3新潔爾滅消毒劑消毒滅菌法3.1.3.1原理3.1.3.2取樣計(jì)劃3.1.3.3檢驗(yàn)方法3.1.3.4確定可接收程度標(biāo)準(zhǔn)3.1.4消毒劑消毒頻次，消毒劑更換頻次驗(yàn)證3.1.4.1消毒劑消毒頻次驗(yàn)證3.1.4.1.1原理3.1.4.1.2沉降菌檢測(cè)取樣計(jì)劃3.1.4.1.3沉降菌檢測(cè)方法3.1.4.1.4表面細(xì)菌檢測(cè)取樣計(jì)劃3.1.4.1.5表面細(xì)菌檢測(cè)方法3.1.4.1.6確定可接收程度標(biāo)準(zhǔn)3.1.4.2消毒劑更換頻次驗(yàn)證3.1.4.2.1原理3.1.4.2.2沉降菌檢測(cè)取樣計(jì)劃3.1.4.2.3沉降菌檢測(cè)方法3.1.4.2.4表面細(xì)菌檢測(cè)取樣計(jì)劃3.1.4.2.5表面細(xì)菌檢測(cè)方法3.1.4.2.6確定可接收程度標(biāo)準(zhǔn)4.驗(yàn)證實(shí)施5.驗(yàn)證匯報(bào)1.概述。1.1背景。潔凈生產(chǎn)廠房用于D級(jí)口服固體制劑、外用制劑、丸劑生產(chǎn)。設(shè)備廠房于8月全方面完成安裝施工。依據(jù)GMP要求，結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際情況，決定于10月～6月對(duì)其清潔消毒效果進(jìn)行驗(yàn)證。1.2驗(yàn)證目標(biāo)。清潔消毒方案及效果是否達(dá)成標(biāo)準(zhǔn)要求。2.職責(zé)。2.1驗(yàn)證領(lǐng)導(dǎo)小組。驗(yàn)證方案同意，驗(yàn)證協(xié)調(diào)工作，驗(yàn)證數(shù)據(jù)及結(jié)果審核，驗(yàn)證匯報(bào)審批，發(fā)放驗(yàn)證證書(shū)。2.2生產(chǎn)部。制訂驗(yàn)證方案，并負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案實(shí)施，搜集各項(xiàng)驗(yàn)證試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)，報(bào)驗(yàn)證領(lǐng)導(dǎo)小組，起草潔凈區(qū)清潔消毒操作程序。2.3質(zhì)量部。驗(yàn)證方案審核，按驗(yàn)證方案要求取樣計(jì)劃和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行取樣和試驗(yàn)，并匯報(bào)檢驗(yàn)結(jié)果；審核驗(yàn)證中評(píng)價(jià)結(jié)論。2.4工程部。儀器校正、公用系統(tǒng)、設(shè)備監(jiān)護(hù)等項(xiàng)工作提供可靠服務(wù)。3.驗(yàn)證內(nèi)容。3.1消毒方法及效果驗(yàn)證。3.3.1.1.1概述：臭氧可消亡空氣中細(xì)菌和微生物。在常溫常壓下，分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，很快分解成氧和單個(gè)氧原子，單個(gè)氧原子含有很強(qiáng)氧化作用，可破壞細(xì)菌內(nèi)部氧化葡萄糖所必需酶，從而破壞其細(xì)胞膜，將細(xì)菌和微生物殺死。臭氧經(jīng)過(guò)高頻臭氧發(fā)生器來(lái)取得。3.1.1.2原理：將臭氧發(fā)生器通向組合式空調(diào)器內(nèi)，經(jīng)過(guò)和空氣接觸發(fā)生臭氧而隨空氣流動(dòng)進(jìn)入潔凈區(qū)，保持一定時(shí)間起到消毒目標(biāo)。3.1.1.3口服制劑、外用劑、丸劑HVAC系統(tǒng)分別設(shè)有臭氧消毒功效，來(lái)完成潔凈區(qū)空間消毒工作。使用時(shí)依據(jù)潔凈區(qū)消毒后微生物檢驗(yàn)情況，確定消毒時(shí)間及消毒周期。3.1.1.4可接收標(biāo)準(zhǔn)。項(xiàng)目可接收標(biāo)準(zhǔn)總菌落數(shù)≤10個(gè)/皿3.1.13.1.13.1.13.1.3.1.1.5.43.1外用劑潔凈區(qū)潔凈區(qū)域面積m2取樣點(diǎn)（個(gè)）稱量室92配液室302灌封室342洗烘瓶室402男二更92女二更92口服制劑潔凈區(qū)潔凈區(qū)域面積m2取樣點(diǎn)（個(gè)）粉碎室182稱量室92濕混制粒室362整?；旌鲜?72壓片室172膠囊填充室332包衣室102男二更92女二更923.1〇〇在房間部位均勻部署，一次和一次取樣位置不能反復(fù)。3.1.3.1.3.1.將已準(zhǔn)備好肉湯瓊脂培養(yǎng)皿置于取樣點(diǎn)，打開(kāi)培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基表面暴露0.5h，再蓋上蓋。根據(jù)《中國(guó)藥典》（二部）附錄ⅪJ微生物程度檢驗(yàn)法項(xiàng)下平皿菌落計(jì)數(shù)法檢測(cè)菌落數(shù)。檢驗(yàn)結(jié)果以算術(shù)平均值計(jì)算。并跟蹤檢驗(yàn)三個(gè)批次。檢驗(yàn)結(jié)果和可接收程度標(biāo)準(zhǔn)相比較，消毒效果達(dá)成預(yù)期標(biāo)準(zhǔn)而且照射時(shí)間最短時(shí)間即為所要選最好照射時(shí)間。結(jié)果計(jì)算：C1+C2A××室=----------2A××室：為××室平均菌落數(shù)。C1：為第一取樣點(diǎn)取樣菌落數(shù)。C2：為第二取樣點(diǎn)取樣菌落數(shù)。3.1.1.7取樣周期：每次消毒后連續(xù)取樣10天進(jìn)行檢測(cè)；累計(jì)進(jìn)行三次消毒和取樣。3.1.1.8結(jié)果判定：3.1.1.8.1消毒效果判定：依據(jù)已知臭氧消毒量、消毒時(shí)間，依據(jù)取樣檢測(cè)微生物結(jié)果，判定消毒效果是否符合標(biāo)準(zhǔn)。3.1.1.8.2消毒周期判定：依據(jù)已知臭氧消毒量、消毒時(shí)間，依據(jù)取樣檢測(cè)微生物結(jié)果，以微生物出現(xiàn)不合格或不合格邊緣線時(shí)間為基準(zhǔn)，縮短三天后時(shí)間既定為消毒周期。3.1.1.9消毒效果評(píng)價(jià)及周期確定：依據(jù)連續(xù)三個(gè)周期檢測(cè)結(jié)果，由質(zhì)量管理部做出臭氧消毒效果評(píng)價(jià)，并確定消毒周期及確定每次消毒時(shí)間。3.3.1甲酚皂溶液溶于水，呈堿性反應(yīng)，有除垢作用，并能破壞細(xì)菌細(xì)胞膜，造成細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)外滲或漏出，從而展現(xiàn)出抑菌或殺菌作用。其殺菌作用和濃度有著直接關(guān)系。所以經(jīng)過(guò)對(duì)甲酚皂消毒液濃度確實(shí)定并和要求可接收程度標(biāo)準(zhǔn)相比較，若在可接收程度標(biāo)準(zhǔn)范圍之內(nèi)，則可判定該消毒方法有效性及穩(wěn)定性。具體方法為：在潔凈區(qū)內(nèi)指定多個(gè)房間，然后設(shè)定3個(gè)濃度梯度，分別為1.5%、2.5%、3.5%，根據(jù)濃度梯度，配制好對(duì)應(yīng)濃度甲酚皂溶液。然后用不一樣濃度甲酚皂溶液擦拭潔凈區(qū)墻壁（指定位置），并在擦拭后對(duì)應(yīng)位置上分別取樣，做潔凈區(qū)房間表面污染試驗(yàn)。依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果和潔凈區(qū)最大許可微生物濃度程度標(biāo)準(zhǔn)來(lái)確定最好消毒濃度。3.13.13.1.23.13.13.130萬(wàn)級(jí)潔凈區(qū)（液體制劑車間）潔凈區(qū)域面積m2取樣點(diǎn)（個(gè)）稱量室92配液室302灌封室342洗烘瓶室402男二更92女二更9230萬(wàn)級(jí)潔凈區(qū)（固體制劑車間）潔凈區(qū)域面積m2取樣點(diǎn)（個(gè)）粉碎室182稱量室92制粒室362整?；旌鲜?72壓片室172膠囊填充室332包衣室102男二更92女二更923.1〇〇在地面上均勻部署。3.13.13.1用滅菌生理鹽水潤(rùn)濕滅菌脫脂棉按要求取樣面積充足擦拭取樣部位，然后放入裝有生理鹽水滅菌容器內(nèi)，充足振搖。根據(jù)《中國(guó)藥典》（二部）附錄ⅪJ微生物程度檢驗(yàn)法項(xiàng)下平皿菌落計(jì)數(shù)法檢測(cè)浸出液含菌量即可。并做空白試驗(yàn)。檢驗(yàn)結(jié)果以算術(shù)平均值計(jì)算。并跟蹤檢驗(yàn)三個(gè)批次。檢驗(yàn)結(jié)果和可接收程度標(biāo)準(zhǔn)相比較，消毒效果達(dá)成預(yù)期標(biāo)準(zhǔn)而且消毒濃度最低濃度即為所要選最好消毒濃度。結(jié)果計(jì)算：C1+C2A××室=----------2A××室：為××室平均菌落數(shù)。C1：為第一取樣點(diǎn)取樣菌落數(shù)。C2：為第二取樣點(diǎn)取樣菌落數(shù)。3.1項(xiàng)目可接收標(biāo)準(zhǔn)菌落數(shù)≤10CFU/inch23.1.2.5消毒效果及周期評(píng)價(jià)。3.3.1.新潔爾滅為陽(yáng)離子型表面活性劑，能吸附于細(xì)胞表面，改變細(xì)胞壁通透性，從而展現(xiàn)出強(qiáng)大殺菌作用。其殺菌作用和濃度有著直接關(guān)系。所以經(jīng)過(guò)對(duì)新潔爾滅消毒液濃度確實(shí)定并和要求可接收程度標(biāo)準(zhǔn)相比較，若在可接收程度標(biāo)準(zhǔn)范圍之內(nèi)，則可判定該消毒方法有效性及穩(wěn)定性。具體方法為：在潔凈區(qū)內(nèi)指定多個(gè)房間，然后設(shè)定3個(gè)濃度梯度，分別為0.05%、0.10%、0.15%，根據(jù)濃度梯度，配制好對(duì)應(yīng)濃度新潔爾滅溶液。然后用不一樣濃度新潔爾滅溶液擦拭潔凈區(qū)墻壁（指定位置），并在擦拭后對(duì)應(yīng)位置上分別取樣，做潔凈區(qū)房間表面污染試驗(yàn)。依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果和潔凈區(qū)最大許可微生物濃度程度標(biāo)準(zhǔn)來(lái)確定最好消毒濃度。3.1.3.1.3.1.3.3.1.3.13.1.30萬(wàn)級(jí)潔凈區(qū)（液體制劑車間）潔凈區(qū)域面積m2取樣點(diǎn)（個(gè)）稱量室92配液室302灌封室342洗烘瓶室402男二更92女二更9230萬(wàn)級(jí)潔凈區(qū)（固體制劑車間）潔凈區(qū)域面積m2取樣點(diǎn)（個(gè)）粉碎室182稱量室92制粒室362整?；旌鲜?72壓片室172膠囊填充室332包衣室102男二更92女二更923.1.〇〇在墻壁水平面上均勻部署。3.13.1.3.1用滅菌生理鹽水潤(rùn)濕滅菌脫脂棉按要求取樣面積充足擦拭取樣部位，然后放入裝有生理鹽水滅菌容器內(nèi)，充足振搖。根據(jù)《中國(guó)藥典》（二部）附錄ⅪJ微生物程度檢驗(yàn)法項(xiàng)下平皿菌落計(jì)數(shù)法檢測(cè)浸出液含菌量即可。并做空白試驗(yàn)。檢驗(yàn)結(jié)果以算術(shù)平均值計(jì)算。并跟蹤檢驗(yàn)三個(gè)批次。檢驗(yàn)結(jié)果和可接收程度標(biāo)準(zhǔn)相比較，消毒效果達(dá)成預(yù)期標(biāo)準(zhǔn)而且消毒濃度最低濃度即為所要選最好消毒濃度。結(jié)果計(jì)算：C1+C2A××室=----------2A××室：為××室平均菌落數(shù)。C1：為第一取樣點(diǎn)取樣菌落數(shù)。C2：為第二取樣點(diǎn)取樣菌落數(shù)。3.1項(xiàng)目可接收標(biāo)準(zhǔn)總菌落數(shù)≤30CUF/inch23.1.3.5消毒效果評(píng)價(jià)。3.2消毒劑消毒頻次、消毒劑更換頻次驗(yàn)證。3.23.2不一樣等級(jí)潔凈區(qū)有不相同級(jí)潔凈度要求。潔凈度受到人員、內(nèi)環(huán)境、設(shè)備等很多原因影響。潔凈區(qū)工作人員每日雖按SOP對(duì)潔凈區(qū)環(huán)境進(jìn)行全方面清潔，但卻不能確保把進(jìn)入室內(nèi)人員或物品散發(fā)細(xì)菌全部殺死或清除出潔凈區(qū)。所以潔凈區(qū)應(yīng)定時(shí)進(jìn)行消毒。經(jīng)過(guò)對(duì)潔凈區(qū)沉降菌及表面污染細(xì)菌這兩項(xiàng)指標(biāo)跟蹤檢測(cè)（一天一次，連續(xù)十天），以出現(xiàn)不符合可接收程度標(biāo)準(zhǔn)（一個(gè)指標(biāo)不符合即為不符合）那一天（dx）為界，統(tǒng)計(jì)dx以前天數(shù)，此天數(shù)即為消毒劑消毒頻次確定理論依據(jù)，從而判定該消毒頻次確定有效性及合理性。3.23.2.3.2.3.230萬(wàn)級(jí)潔凈區(qū)（液體制劑車間）潔凈區(qū)域面積m2取樣點(diǎn)（個(gè)）稱量室92配液室302灌封室342洗烘瓶室402男二更92女二更9230萬(wàn)級(jí)潔凈區(qū)（固體制劑車間）潔凈區(qū)域面積m2取樣點(diǎn)（個(gè)）粉碎室182稱量室92濕混制粒室362整?；旌鲜?72壓片室172膠囊填充室332包衣室102男二更92女二更923.2〇〇3.2.13.23.23.23.23.2.13.2.13.21號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)+2號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)A=2其中A為各個(gè)室平均菌落數(shù)。3.23.2.3.23.2.13.2.13.230萬(wàn)級(jí)潔凈區(qū)（液體制劑車間）潔凈區(qū)域面積m2取樣點(diǎn)（個(gè)）稱量室92配液室302灌封室342洗烘瓶室402男二更92女二更9230萬(wàn)級(jí)潔凈區(qū)（固體制劑車間）潔凈區(qū)域面積m2取樣點(diǎn)（個(gè)）粉碎室182稱量室92制粒室362整?；旌鲜?72壓片室172膠囊填充室332包衣室102男二更92女二更923.2〇〇在墻壁水平面上均勻部署。3.23.23.2用滅菌生理鹽水潤(rùn)濕滅菌脫脂棉按要求取樣面積充足擦拭取樣部位，然后放入裝有生理鹽水滅菌容器內(nèi)，充足振搖。根據(jù)《中國(guó)藥典》（二部）附錄ⅪJ微生物程度檢驗(yàn)法項(xiàng)下平皿菌落計(jì)數(shù)法檢測(cè)浸出液含菌量即可。檢驗(yàn)結(jié)果以算術(shù)平均值計(jì)算。結(jié)果計(jì)算：C1+C2A××室=----------2A××室：為××室平均菌落數(shù)。C1：為第一取樣點(diǎn)取樣菌落數(shù)。C2：為第二取樣點(diǎn)取樣菌落數(shù)。3.2.1項(xiàng)目可接收標(biāo)準(zhǔn)沉降菌≤15CFU/皿表面細(xì)菌≤30CFU/inch23.2.1.7消毒頻次dx值確定：依據(jù)檢測(cè)結(jié)果，確定消毒劑消毒頻次dx值。3.2.1.8消毒頻次評(píng)價(jià)匯報(bào)。3.23.2細(xì)菌和其它生物一樣，存在著遺傳和變異。細(xì)菌變異按其本質(zhì)原因可分為遺傳型變異和非遺傳型變異兩大類型。其中和消毒滅菌有很大關(guān)系就是耐藥性變異。耐藥性變異是指細(xì)菌對(duì)很多藥品（包含消毒劑）是敏感，但在使用一段時(shí)間后，細(xì)菌會(huì)對(duì)該種藥品（包含消毒劑）產(chǎn)生抵御力，從而影響到療效或消毒滅菌效果。所以潔凈區(qū)使用消毒劑品種應(yīng)定時(shí)更換，以防耐藥菌株產(chǎn)生。經(jīng)過(guò)使用一個(gè)消毒劑（甲酚皂或新潔爾滅溶液）根據(jù)SOP要求對(duì)潔凈區(qū)環(huán)境定時(shí)消毒（消毒頻次已驗(yàn)證過(guò)），每消毒一次，對(duì)潔凈區(qū)環(huán)境沉降菌和表面細(xì)菌這兩項(xiàng)指標(biāo)就取樣檢測(cè)一次。連續(xù)消毒檢測(cè)多個(gè)周期（以周為單位，共設(shè)定12個(gè)時(shí)間周期，分別為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12），然后將檢測(cè)結(jié)果和潔凈區(qū)沉降菌、可接收程度標(biāo)準(zhǔn)相比較，以出現(xiàn)不符合可接收程度標(biāo)準(zhǔn)（一項(xiàng)指標(biāo)不合格即為不合格）那一個(gè)消毒周期（Wx）為界，統(tǒng)計(jì)Wx以前消毒周期，此周期即為消毒劑更換頻次確定理論依據(jù)，從而判定該消毒劑更換頻次確定有效性及合理性。3.23.2.3.23.230萬(wàn)級(jí)潔凈區(qū)（液體制劑車間）潔凈區(qū)域面積m2取樣點(diǎn)（個(gè)）稱量室92配液室302灌封室342洗烘瓶室402男二更92女二更9230萬(wàn)級(jí)潔凈區(qū)（固體制劑車間）潔凈區(qū)域面積m2取樣點(diǎn)（個(gè)）粉碎室182稱量室92濕混制粒室362干燥整?；旌鲜?72壓片室172膠囊填充室332包衣室102男二更92女二更923.2〇〇3.2.23.23.23.23.23.2.23.2.23.21號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)+2號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)A=2其中A為各個(gè)室平均菌落數(shù)。3.23.2.2.4.13.23.2.23.23.230萬(wàn)級(jí)潔凈區(qū)（液體制劑車間）潔凈區(qū)域面積m2取樣點(diǎn)（個(gè)）稱量室92配液室302灌封室342洗烘瓶室402男二更92女二更9230萬(wàn)級(jí)潔凈區(qū)（固體制劑車間）潔凈區(qū)域面積m2取樣點(diǎn)（個(gè)）粉碎室182稱量室92制粒室362整?；旌鲜?72壓片室172膠囊填充室332包衣室102男二更92女二更