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文檔簡介

條除卷新等秋當電化

徐完宏

實驗診斷學(第五版)

第一章:概論

實驗診斷學的教學強調以實驗檢查的臨床應用為目的。要求學生通過學習掌握各項檢驗的選用原則和適應

證,熟悉或了解檢驗原理和方法,標本的采集和送檢要求,重點掌握各項常用檢驗的參考值及其臨床意義,

能聯(lián)系臨床,正確解釋和運用檢驗結果,來指導臨床診斷,病情觀察和疾病防治工作。

[教學目的與要求]

掌握實驗診斷學的概念。了解實驗診斷的現(xiàn)狀和進展、主要內容、檢驗標本的采集和處理。強調學習實驗

診斷的意義和重要性、實驗診斷的臨床應用和評價。

[教學內容]

一、實驗診斷學的概念和主要內容。

二、實驗診斷的現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢。

三、學習實驗診斷的意義和重要性,學習的方法和要求。

四、檢驗標本的采集和處理。

五、實驗診斷的臨床應用和評價。

[教學時數(shù)]1學時

[教學方法]課堂講授。

一.實驗診斷學的基本概念

1.實驗診斷學:(Laboratorydiagnosis)就是運用物理學、化學和生物學等實驗技術和方法,通過感觀、

試劑反應、儀器分析和動物實驗等手段,對病人血液、體液、分泌物、排泄物以及組織細胞等標

本進行檢驗,以獲得反映機體功能狀態(tài)、病理變化或病因等客觀資料,作為疾病診斷、療效觀察

及預后的評估指標。

2.實驗診斷學的進展和現(xiàn)狀:實驗診斷學是從臨床醫(yī)學領域分離出來,并形成一門新興獨立的學科,

隨著科學技術的迅速發(fā)展,各種新技術、新方法不斷運用于實驗診斷。它包括臨床檢驗診斷、臨

床微生物學、臨床寄生蟲學、臨床化學、臨床免疫學、臨床核醫(yī)學、血庫等。

補充:實驗診斷學發(fā)展歷史

3.實驗診斷學的特點:

(1)實現(xiàn)了檢測自動化、微量化,以滿足日益增長的需求;

(2)實施質量控制(quailitycontrol)以確保檢驗質量;

(3)實現(xiàn)電腦化;

(4)各種檢驗試劑合不斷出現(xiàn)。

4.實驗診斷與檢驗醫(yī)學:實驗診斷學是以檢驗的臨床應用為目的,而檢驗醫(yī)學是以檢驗方法的研究

和改進為目的;實驗診斷學是臨床醫(yī)學各專業(yè)診斷學教學的主要內容,為基礎課和臨床課之間的

橋梁課程,是解釋疾病規(guī)律以及診斷和防治疾病最基本的理論和方法,教學的重點是使學生掌握

臨床思維、運用實驗結果,綜合為臨床所用

5.實驗診斷重要性:

(1)為準確診斷、及時治療提供依據(jù);

(2)為分析病情、觀察療效、判斷預后提供依據(jù);

(3)為預防疾病提供資料:

(4)為開展醫(yī)學研究奠定基礎。

補充:實驗診斷作為疾病診斷、療效觀測、預后評估、衛(wèi)生防疫、撰寫科學論文、開展科學研究方面的作

6.實驗診斷學的主要內容:它包括臨床血液學檢驗,排泄物、分泌物及體液的檢驗,臨床生物化學

檢驗,臨床免疫學檢驗和臨床病原體檢驗

7.實驗診斷學的應用范圍:直接為臨床醫(yī)療服務,為開展預防工作提供依據(jù),進行社會普查,開展

健康咨詢。

8.學習實驗診斷學:學習實驗診斷學:重點掌握各項檢驗的適應癥,選用原則,標本的采集和處理

以及影響檢驗結果的因素,實驗的主要原理、參考值以及數(shù)值變化的臨床意義,學會臨床思維,

能運用這些檢驗結果結合其它臨床資料綜合分析,進行診斷和防治工作。

標本的采集和處理

1.血液標本的采集與處理

(1)血液標本的種類:主要是全血.、血清和血漿,全血主要是對血細胞成分做一分析,如血

常規(guī);血清主要適合生物化學和免疫學分析;血漿也適合生物化學分析。

(2)采血部位:毛細血管采血適合嬰幼兒和燒傷部位;靜脈采血是最常見的,成人通常是在

肘部、腕部,嬰幼兒則是在頸外靜脈;動脈采血多作血氣分析。

(3)采血時間:空腹采血,特定時間采血,急診采血。

2.標本采集后的處理:

(1)抗凝劑:采集全血或血漿,需加入抗凝劑。

附采血部位以及所需抗凝劑

一.毛細血管采血法

1.采血部位

2.采血針

3.采血步驟

二.靜脈采血法

1.采血部位

2.采血器材

3.采血步驟

血液標本的采集

一.常用抗凝劑

1.檸檬酸鈉

109mmol/l、106mmol/l

1:9止凝血檢驗

1:4血沉檢驗

輸血保養(yǎng)液

2.草酸鈉

0.1mmol/1

1:9止凝血檢驗

3.雙草酸鹽抗凝劑

100ml抗凝劑含草酸鉀0.8g,使紅細胞縮小

草酸鏤1.2g使紅細胞擴大

0.2-0.5ml80℃烘干抗凝2-5ml血液

適用范圍:紅細胞比積、血細胞計數(shù),網織紅細胞計數(shù);不適合血小板計數(shù)和白細胞分類

4.肝素

抗凝機制:

0.5ml(lg/1)37-50C干燥后抗凝5ml血液

適用范圍:紅細胞計數(shù)、血紅蛋白測定、紅細胞比枳和生化測定;不適合血小板計數(shù)和白細胞分類

5.乙二胺四乙酸(EDTA)鹽

K3EDTA,K2EDTA

0.5ml(15g/l)干燥后抗凝5ml血液

適用范圍:血細胞計數(shù);不適合血小板計數(shù)和止凝血檢驗

草酸鹽:與血中鈣離子結合形成不溶性草酸鈣而起抗凝作用,2mg草酸鹽可抗凝1ml血液,常見有草酸鉀、

草酸鈉。

枸椽酸鈉:每毫升血液需5mg抗凝抗凝劑。

肝素:作用機制為抑制凝血酶原轉化為凝血酶使纖維蛋白原不能轉化為纖維蛋白。0.1~0.2mg可抗凝1ml

血液。

乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na?):與血中鈣離子結合起抗凝作用,卜2mg可抗凝1ml血液。

(2)及時送檢與檢測:由于血細胞能量代謝以及細胞和血漿離子的濃度不同,所有檢測標本

應及時檢測。

(3)微生物檢驗的血標本:由于機體極少量的微生物就可引起感染性疾病,所以微生物檢測

除注意無菌外,還需增菌。

3.骨髓標本的采集與送檢:主要是骨髓細胞學檢驗和骨髓細菌培養(yǎng),骨穿選擇骼前上棘、骼后上棘、胸

骨柄,如做骨髓細胞學檢驗,應及時涂片;如細菌培養(yǎng),應置增菌培養(yǎng)基。

4.排泄物、體液標本的采集與處理:尿液、糞便、漿膜腔穿刺液應及時送檢。

三.實驗診斷的臨床應用和評價

1,正確選擇檢驗項目:實驗結果有的可以明確診斷;有的實驗結果可以輔助診斷。一定要在認真和詳細

地進行詢問病史和體格檢查得到初步診斷的基礎上,從疾病診斷的實際需要出發(fā),選用針對性和特異

性較強的項目檢查,做到有的放矢,避免濫用和杜絕浪費。從病人實際狀態(tài)出發(fā),選擇盡量少的檢驗

項目,就能對疾病作出明確的診斷。

2.參考值:參考值和參考范圍都是統(tǒng)計學概念。參考值是指對抽樣的個體進行某項檢測所得的值;所有

抽樣組測得的平均值加減標準差即為參考范圍。

3.檢驗質量保證:

(1)分析前:醫(yī)生應根據(jù)病情正確選擇檢驗項目;并進行必要的準備,正確采集標本;合理

的處理標本和及時送檢。

(2)分析過程中:技術和素質合格人員;合適的實驗條件、符合要求的檢測方法和分析儀器、

分析試劑、室內和室間的質量控制。

(3)分析后:及時正確報告檢驗結果,醫(yī)生應結合臨床資料進行綜合分析,對檢驗結果與疾

病的關系作出正確的解釋。

4.影響檢驗結果常見因素:病人狀況的個體差異;檢驗標本的采集和處理因素的影響;藥物的影響。

第二章臨床血液學檢驗

[教學目的與要求]

一、掌握紅細胞有關各項檢驗指標的參考值、病理改變及其臨床意義。

二、熟悉貧血的形態(tài)學分類及臨床意義。

三、掌握白細胞計數(shù)、分類計數(shù)的參考值及病理改變的臨床意義。

四、熟悉中性粒細胞核象變化及白細胞形態(tài)病理改變的臨床意義。

五、熟悉網織紅細胞計數(shù)及沉降率測定,掌握其參考值及臨床意義。

[教學內容]

一、紅細胞和貧血的實驗室檢查

(―)紅細胞計數(shù)(RBC)、血紅蛋白測定(I1GB):

1、紅細胞和血紅蛋白測定的方法及參考值。

2、紅細胞和血紅蛋白的生理性變化,以及病理性增多和減少的臨床意義(以減少為重點)。

3、紅細胞形態(tài)病理性改變(紅細胞大小、形態(tài)及嗜色性的改變)、以及出現(xiàn)核殘余物和有核紅細胞的

臨床意義。

(二)血細胞比容(HCT)測定、紅細胞平均指數(shù)(MCV、MCH,MCHC)和紅細胞體積分布寬度(RDW)測定

的參考值及臨床意義。

(三)貧血的形態(tài)學分類:簡述根據(jù)MCV、RDW的貧血形態(tài)學分類。

(四)網織紅細胞計數(shù):染色原理、方法、參考值及臨床意義。

(五)簡介溶血性貧血實驗檢查原則。

二、白細胞計數(shù)和分類計數(shù)

(-)簡述各類白細胞的細胞動力學。

(-)白細胞計數(shù)及分類計數(shù)的參考值及生理變化。

(三)各類白細胞增多與減少的臨床意義。

(四)中性粒細胞核象變化的概念及臨床意義。

(五)白細胞常見的病理形態(tài)及其臨床意義。

(六)類白血病反應的概念及臨床意義。

三、紅細胞沉降率測定

(一)簡述紅細胞沉降率測定的原理和方法,影響紅細胞沉降率的因素。

(二)紅細胞沉降率的參考值及沉降率增快的臨床意義。

[教學時數(shù)]12學時(課堂教授6、實習6)。

[教學方法]

一、理論課:利用掛圖及幻燈等教授上述內容的基礎理論和基本知識。

二、實驗課:

(-)簡介自動血細胞分析儀的檢驗原理和方法,進行血細胞分析儀的操作示教(結合播放錄象和幻燈),

講解報告單數(shù)據(jù)及血細胞直方圖的閱讀。

(-)進行白細胞計數(shù)(應用血細胞計數(shù)板顯微鏡計數(shù)法)、血涂制作及瑞氏染色的示范操作,再由學生

分組互相練習,并進行白細胞計數(shù)及分類計數(shù)。

(三)血細胞形態(tài)示數(shù):顯微鏡下示教正常紅細胞及異形紅細胞、正常白細胞及病理白細胞的形態(tài)(結合

圖片及幻燈示教)。

(四)網織紅細胞計數(shù)操作及形態(tài)示教。

(五)紅細胞沉降率測定示教。

(六)常見的貧血及白細胞病理改變(感染與白血?。┑湫筒±龑嶒灆z查結果的分析討論。

前言:1.血液的組成:[嗜中性粒細胞

嗜磴性粒細胞

“白細胞J嗜酸性粒細胞

"血細胞J紅細胞單核細胞

血小板[淋巴細胞

血液Y水Ir纖維蛋白質

[血漿J[血漿蛋白j白蛋白

、固體成分J無機鹽

、球蛋白

非蛋白氮、葡萄糖、脂質、激素

補充:血液:Blood,血細胞:Bloodcell,白細胞:whitebloodcell,Leukocyte,紅細胞:Redbloodcell.erythocyte,

血小板:BloodplantletceH,plantlet,嗜中性粒細胞neutrophil:嗜磴性粒細胞baseophil:嗜酸性粒細胞

eosinophil:單核細胞monocyte:淋匕細胞lymphocyte:血漿plasm:血漿蛋白plasmprotein:纖維蛋白

質fibrin:白蛋白albumin:球蛋白globulin.。

2.血液檢查的意義:

血液循環(huán)于機體,與機體各組織、器官發(fā)生聯(lián)系。血液檢查不光反映血液系統(tǒng)本身的質與量的變化,

還反映與血液系統(tǒng)有關的器官、組織功能狀態(tài)。

第一節(jié)血液一般檢查

血液一般檢查,通稱為血常規(guī)檢查(Bloodroutineexamination)是指外周血液中紅細胞、白細胞質

和量的化學檢查,它包括紅細胞計數(shù)(RBC)、血紅蛋白的測定(Hb)、白細胞計數(shù)(WBC)和白細胞分類

(DiffentialcountDC)。

-.紅細胞計數(shù)和血紅蛋白的測定

(一).RBC、HB的代謝

l.RBC、HB生成

紅系祖細胞1---〉原始紅細胞1--->早幼紅細胞1--->中幼紅細胞1---->晚幼

t

促紅細胞生成素

睪丸激素

存在于骨髓、外周血液

I

紅細胞,——>網織紅細胞=>成熟紅細胞衰老紅細胞

tt

在此之前均是有核細胞,存在于骨髓攜帶02、C02,壽命120天

r以含鐵血黃素細胞排出體外,所以正常人需補鐵

Fej

衰老紅細胞「I進入骨髓再次參與造血

t《珠蛋白,——>進入骨髓再次參與造血

網狀內皮系統(tǒng)

原咋琳ix=>膽綠素=,膽紅素

t

血中白蛋白作為載體

<糞膽素

膽紅素二〉直接膽紅素(儲存于膽囊)=>尿膽原(腸道)/

L、、由尿排出

肝腸循環(huán)

為什么委縮性胃炎的病人會發(fā)生貧血

注:可補充■<

為什么正常人糞便是黃色

2.紅蛋白結構:

血紅蛋白是紅細胞主要成分,山珠蛋白和亞鐵血紅素組成。珠蛋白具有種屬特異性,每一珠蛋白

分子含有兩對肽鏈,即一對a鏈和一對非a鏈,各個肽鏈氨基酸的排列都有嚴格的順序,血紅蛋白肽

鏈主要組合形式有三種:

a202成人主要血紅蛋白HbA

a262成人次要血紅蛋白HbA2

a2Y2胎兒主要血紅蛋白HbF

若6鏈、a鏈合成障礙使得三種血紅蛋白比例異常,即各種地中海貧血"若肽鏈氨基酸被置換、丟失、

加長,稱之為血紅蛋白分子?。╩oleculardisease)。

氨基酸位置.6.7…26…63..95

HbAB鏈正常氨基酸順序.Glu.Glu…Glu…His..Lys

正常的密碼子(mRNA).GAA.GAA…GAA…CAU..AAA

HbS.Vai.............................???

密碼子(mRNA).GUL..................................…

HbC.Lys...........................?.???

密碼子(mRNA).AAA.............................…

HbSiriraj......Lys.....................????

密碼子(mRNA)......AAA....................?…

HbE..............Lys..........??.

密碼子(mRNA)..............AAA.........…

HbMs..........................Tyr..

密碼子(mRNA).............................UAU.?…

HbN,……..............................Glu

密碼子(mRNA)...............................GAA

亞鐵血紅素是血紅蛋白的色素部分,是由鐵原子和原口卜啾IX組成,鐵原子位于原咋琳IX環(huán)中心。

正常情況下,F(xiàn)e"具有6條配位鍵,其中4條與原葉琳1X4個氮原子聯(lián)結;另2條配位鍵分別位于血

紅素兩側,第5配位鍵與多肽鏈聯(lián)結,第6條配位鍵即血紅蛋白的載體。

當與02結合即HbO2-氧合血紅蛋白,02釋放后,第6條配位鍵空著-還原血紅蛋白,若Fe"被

氧化成Fe。第6條配位鍵被乂0占據(jù),形成高鐵血紅蛋白;若被CO、S占據(jù),形成各種血紅蛋白衍

生物,分別稱HbCO碳化血紅蛋白,HbS硫化血紅蛋白。

(二).參考值

RBCHb

成人男性(4.0-5.5)10I2/L120-160g/L

成人女性(3.5-5.0)IO12/L110-150g/L

新生兒(6.0-7.0)IO'7L170-200g/L

(三).臨床意義

l.RBC.Hb增多

成人男性.RBC>6.0*10'7L,Hb>170g/L

成人女性.RBC>5.5*10"/L,Hb>160g/L

(1).相對增多:因血漿容量減少,使紅細胞容量增加,例如嚴重嘔吐、腹瀉、大量出汗、大面積燒傷、尿

崩癥等。

(2).絕對增多:臨床稱之為纖細胞增多癥(Polycythemiaerythrocytosis)

原發(fā)性:真性紅細胞增多癥(Polycythemiavera),是一種原因未明的以RBC增多為主骨髓性疾病,

其特點RBCt,libt,全身血容量也增加,白細胞、血小板t?

可補充真性紅細胞增多癥的危害、目前治療手段

繼發(fā)性:主要是血液中促紅細胞生成素(erythropoietinEPO)增多,

EPO代償性增加:因血氧飽和度減低,組織缺氧引起「胎兒、高原居民

-嚴重慢性心、肺功能不全

EP0非代償性增加:血氧飽和度不減低,組織不缺氧。EP0增加主要是某些腫瘤或腎臟疾患有關。

2.RBC.Hb減少

貧血:單位體積內血液中紅細胞、血紅蛋白、血球壓積(RBC,Hb,Hct)低于正常參考值,稱為貧血

(Anemia)o成人男性Hb〈人0g/L,成人女性Hb〈人0g/L.

貧血程度分四級:,輕度Hb<110g/L(90-110)

J中度Hb90-60g/L

|重度Hb60-30g/L

、極重度Hb<30g/L

「嬰兒:身體生長發(fā)育迅速而紅細胞生長相對不足

(1).生理性減叱妊辰:血漿容量增加使血液稀釋

[老年人:造血功能減退

(2).病理性減少:J骨髓侵潤

「骨髓功能減退j原因未明

/紅細胞生成減少JI造血容量減少

I造血物質缺乏「鐵缺乏

《鐵失利用

[DNA合成障礙

「紅細胞內在缺陷:球形、地中海

紅細胞破壞增多.

[紅細胞外在缺陷:獲得性

I紅細胞丟失過多:急性失血、慢性失血

二.紅細胞形態(tài)

1.正常紅細胞形態(tài):正常紅細胞呈雙面凹陷、圓盤形、大小較一致,直徑6-9um,平均直徑7.5um;紅細

胞厚度分別為邊緣約2um、中央約lum,染色后四周呈淺橘紅色,中央呈淡染區(qū).

。小RBC(microcyte):直徑<6um,見低色素貧血

大RBC(Macrocyte):直徑>10um,見于溶血性貧血、急性失血

2.紅細胞大小異常巨RBC(Megalocyte):直徑〉15um,常見葉酸、VitB12缺乏

、RBC大小不均(Anisocytosis):紅細胞大小不均

3.形態(tài)異常:

球形RBC(spherocyte)直徑〈6um,厚度〉209um,體積小,著色深,中心淡染區(qū)消失,見遺傳

性RBC增多癥。

橢圓形RBC(elliptecyte,ovalcell)橢圓形見于遺傳性RBC增多癥。

口形細胞(stomatocyte)見于遺傳性橢圓形增多癥、DIC、灑精中毒。

靶形細胞(target)種細胞的中央淡染區(qū)擴大,中心部位也有部分色素存留而深染,狀似射擊之靶狀,見于

地中海貧血,缺鐵貧,溶液貧,黃疸或脾切除后。

鐮刀形細胞(sicklecell)形如鑲刀狀,見于鐮刀形細胞貧血(Hbs)病。是由于HbA的B鏈上第六個

氨基酸谷氨酸被頡氨酸替代。B6cg⑹,B珠蛋白基因第六位密碼子由GAG-GTG,即單個堿基A-T的突

變,在正常情況人中,DNA的MstH片斷為1.1Kb;而Hbs病人由于單個堿基的置換導致Mstll位點丟失,

MstH酶切DNA得到的片斷長度為1.3Kb,雜合子中有1.1Kb和1.3Kb兩條片斷,純合子只有1.3Kb一條片

斷。

淚滴形細胞(dacryocyte,teardropcell)細胞呈淚滴狀或手鏡狀,見于骨髓纖維化,海洋性貧血,溶貧。

紅細胞形態(tài)不整(po汰iliocytosls)指RBC發(fā)生各種明顯的形態(tài)學異常改變,RBC可呈梨形、淚滴形、

新月形、長圓形、啞鈴形等,見于機械、物理因素所致。

紅細胞緡線狀形成(rouleauxrormation)涂片中RBC呈串狀重疊,邊似緡線狀,見于多發(fā)性骨髓瘤、原

發(fā)性巨球蛋白血癥。

棘形細胞(acanthocyte,burrcell)細胞外周呈鈍鋸齒狀突起,見于先天性62脂蛋白血癥、脾切除后、灑精

中毒、肝病、尿毒癥。

4.染色異常:

低色索性(hypochromic)紅細胞染色過淺,中心淡染區(qū)擴大,見于缺鐵貧血、海洋性貧血。

高色素性(hyperchromic)紅細胞著色深,中心淡染區(qū)消失,見于巨幼細胞貧血、球形細胞。

嗜多色性(pdychromatic)紅細胞呈淡灰色或紫灰色,是一種剛脫核而未完全成熟的紅細胞,體積較正常

紅細胞稍大,見于增生性貧血。

5.結構異常:

嗜堿性點彩RBC(basophilic)內可見大小數(shù)量不一深蘭色的顆粒,其顆粒是核糖體發(fā)生聚集變性所致,

見于鉛中毒,增生性貧血。

Howell-Jolly氏小體:紫紅色園形小體位于成熟紅細胞或晚幼紅細胞胞漿中,見于溶貧、巨幼貧等。

Cabot氏環(huán):紅細胞中出現(xiàn)一種紫紅色呈園形或8字形細線狀,見于溶貧、巨幼貧、脾切除。

有核紅細胞(nucleatederythrocyte):即幼稚紅細胞見于增生性貧血、紅血病、紅白血病、髓外造血。

三.細胞計數(shù)和白細胞分類計數(shù)

(―)白細胞功能:

中性粒細胞:吞噬入侵的細菌等病原微生物,防止病原微生物在體內擴散,并參與免疫復合物和壞死

組織的清除。

嗜堿性粒細胞:不具吞噬作用。嗜堿性顆粒含有組織胺、過敏性慢反應物質、嗜堿性粒細胞趨化因子。

嗜堿性粒細胞表面有IgE的Fc受體,當與IgE結合再受相應抗原或抗IgE抗體攻擊時,引起顆粒釋放。

嗜酸性粒細胞:抑制嗜堿性粒細胞和肥大細胞合成、釋放其性物質,吞噬其釋放顆粒,并分泌組織胺

酶,破壞組織胺,參與對蠕蟲的免疫反應。

單核細胞:具有強大的吞噬功能:[吞噬病毒、原蟲、真菌細菌

[吞噬抗原、傳遞免疫信息

I吞噬組織碎片、免疫復合物

淋巴細胞:為人體主要免疫活性細胞。在骨髓、脾臟、淋巴結和其它淋巴組織生發(fā)中心發(fā)育成熟為B

淋巴細胞,經抗原激活后分化成漿細胞,產生特異性抗體,參與體液免疫。

在胸腺、脾臟、淋巴結和其它淋巴組織依賴胸腺素發(fā)育成熟稱為T淋巴細胞。T淋巴細胞被抗原致敏

后產生多種免疫活性物質,參與細胞免疫。

(二)正常白細胞形態(tài)

名稱外形直徑(um)核形核質'胞漿量、色、顆粒

中性粒細胞園形10-13桿狀核染色質緊密淡紅色內含有許多小顆粒

neutrophil,N分葉2-5分葉成淡紫紅色

嗜堿性粒細胞園較N小核為二分葉核,核呈紫色紅色內含大小不等黑色顆粒

basophil,B不明顯

嗜酸性粒細胞園形10-15核呈二分葉核眼鏡狀,深紫色淡紅色,內充滿粗大均勻而

園的鮮紅色顆粒

Eosinophil,E

單核細胞大而園、橢圓14-20核大,不規(guī)則,呈腎形、馬蹄形漿多,淡灰色、蘭色,內

monocyte,M常見偽足S形,淡紫色,染色質疏松呈網狀含細小、紫紅色顆粒

淋巴細胞大:圓形10-18圓形、橢圓形深紫色蔚蘭色、量多、少量紫紅

lymphocyteL染色質粗密成塊色顆粒

?。簣A形6-9同上深蘭色、量少、無顆粒

(三)白細胞計數(shù)及分類參考值

WBC:成人(4.0-10.0)*109/L

新生兒(15.0-20.0)*109/L

6個月-2歲(11.0-12.0)*109/L

DC:百分率絕對值

「N:桿狀核1-5%(40-50)*106/L

分葉核'50-70%(2000-7000)*IO7L

EOS0.5-5%(50-500)*106/L

B0-1%(o-ioo)*IO7L

L20-40%(800-4000)*10,7L

<M3-8%(120-800)*106/L

(四)白細胞計數(shù)及分類臨床意義

WBC〈10*IO'L稱白細胞增多,WBC〈4.0*10也稱白細胞減低。

白細胞的增減主要是受中性粒細胞的影響。

粒細胞<1.5*109/L:粒細胞減少癥;<0.5*109/L:粒細胞缺乏癥。

1.生理性變化:

(1)年齡:新生兒WBC便高達15*1OVL,3-4天后降低至IO*1()9/L左右,保持3個月,然后降至成人水

平。初生兒外周血白細胞主要是中性粒細胞,第6-9天不斷下降至與淋巴細胞大致相等。以后淋巴細胞不

斷增高,整個嬰兒期,淋巴細胞均較高,到2-3歲后淋巴細胞又不斷下降,中性粒細胞逐漸上升,到4-5

歲二者基本相等。

(2)日間變化:安靜檢驗時WBC低,活動進食后WBC高。

(3)運動、疼痛、情緒影響:一般腦力勞動和體力勞動、冷熱水浴、日光或紫外線照射均可使WBC升高,

情緒激動升高。

(4)妊娠、分娩:妊娠、分娩WBC升高。

一白細胞總數(shù)

中性粒細胞

淋巴細胞

2.病理變化

(1).中性粒細胞

反應性升高:「急性感染和化膿性炎癥

急性中毒

廣泛組織損傷或壞死

急性出血、急性溶血

惡性腫瘤

I其它如類風濕性關節(jié)炎等

異常增多:粒細胞白血病、骨髓增生性疾病。

中性粒細胞降低(某些傳染?。篏桿菌、病毒、原蟲

化學藥品及放射損害

J血液病、再障、粒細胞減少癥

脾亢

〔過敏性休克、自身免疫性疾病

(2).中性粒細胞核象變化

正常粒細胞核象:正常外周血中中性粒細胞分以3葉居多,可見少量桿狀核粒細胞。桿狀核與分葉核之間

比值為1:13。

核左移:桿狀核增多(大于5%),甚至出現(xiàn)桿狀核以前更幼稚階段的粒細胞。

再生性核左移:核左移伴白細胞總數(shù)增高者常見于感染、急性中毒、急性溶血、急性失血。

杜狀核粒細胞增多〉0.06輕度左移

〉0.10伴少數(shù)晚幼粒細胞:中度左移

〉0.25出現(xiàn)更幼稚粒細胞:重度左移

退行性核左移:核左移而白細胞總數(shù)不增高,甚至減少者常見于再障、粒細胞減少癥、嚴重感染

核右移:分葉核粒細胞要葉過多,分葉在5葉以上的細胞超過0.03進稱核右移。核右移主要是缺乏造血物

質使脫氧核糖核酸合成障礙或造血功能減退所致。

(3)中性粒細胞常見的形態(tài):

A.中性粒細胞中毒性改變j細胞大小不均:見于化膿性炎癥、慢性感染

I中毒性顆粒:嚴重化膿性感染及大面積燒傷

|空泡形成:胞漿脂肪變性所致致,見于嚴重感染

、核變性:核固縮、核溶解、核碎裂

B.棒狀小體(Auer小體)

Wright.Giemsa染色的血涂片中,白細胞胞漿中出現(xiàn)呈紫紅色細桿狀物質,長l-6um,1條或數(shù)條不定,稱

棒小體。它出現(xiàn)在白血病細胞中,故見到棒狀小體可確診為急性白血病。急粒、急單則出現(xiàn)棒狀小體:急

淋則不出現(xiàn)。

(4)嗜酸性粒細胞過敏性疾?。合?、食物過敏

升高見于皮膚病

寄生蟲性疾病:釣蟲、蛔蟲

某些血液?。郝?/p>

某些惡性腫瘤

某些傳染病

其他

降低見于r傷寒、付傷寒

一嚴重燒傷、大手術后

I腎上腺皮質功能亢進、應用腎上腺皮質激素或促腎上腺皮質激素

(5)嗜堿性粒細胞r-增多:慢粒、全身中毒、轉移腫瘤

t減少:無意義

(6)淋巴細胞增多某些病毒及桿菌感染

某些血液病

1腎移植排異前期

減少接觸放射線

I應用腎上腺皮質激素、促腎上腺皮質激素

異常淋巴細胞:根據(jù)形態(tài)學特點分三型

名稱外形核形、核質胞漿、色、顆粒

1(空泡型)~~圓形、橢圓形圓形、腎形或不規(guī)則,核染色豐富、深蘭色,含有大小不等空

泡,

質呈粗網狀或小塊狀無核仁無顆?;蛏贁?shù)顆粒

2(不規(guī)則型)大、不規(guī)態(tài)形圓形、腎形,不規(guī)則,核染色質豐富,淡蘭色或、淡灰蘭色,少

量嗜天青顆粒

呈花邊狀較1型細致,亦呈網狀,核仁不

明顯

3(幼稚型)大、圓形、橢圓形、橢圓形,核染色質呈纖細豐富,蘭色、深蘭色,無顆粒,

有少許空泡

圓形網狀,可見1-2核仁

臨床意義:

一般認為異常淋巴細胞主要是由T淋巴細胞受抗原刺激轉化而來,增多見于:

a.病毒感染性疾病,某些細菌感染,螺旋體病、立克次體、原蟲等

b.藥物過敏

c.輸血、血液透析或體外循環(huán)術后

d.其它疾病,如免疫性疾病、粒細胞缺乏癥、放射治療

(7)單核細胞增多生理性:嬰兒、兒童

病理性:某些感染

某些血液病

{減少:無意義

四.網織紅細胞計數(shù)(Reticulocyte)

1.原理:網織紅細胞是介于晚幼紅細胞和成熟RBC之間未完全成熟的RBC。胞漿中尚殘存多少不等的

核糖核酸等嗜堿性物質,用煌焦油蘭、新亞甲蘭進行活體染色,這些嗜堿性物質即被凝集沉淀著色,

在胞漿中呈現(xiàn)蘭色細顆粒狀,顆粒狀間又有細絲狀聯(lián)綴,而構成網狀結構,故稱網織紅RBC。

2.參考值:百分數(shù):成人0.5-1.5%

新生兒2-6%

絕對值:(24-84)*109/L

3.臨床意義

1.反映骨髓造血功能:「Rett表示骨髓紅細胞增生活躍

J溶貧、急性失血Rett-t

缺鐵貧Ret-f

IRetJ表示骨髓造血功能低下,再障RetI急性白血病Ret,

2.作為貧血治療的療效判斷及治療性試驗的觀察指標

3.作為病情觀察的指標

五.紅細胞沉降率的測定

紅細胞沉降率(erythrocytesedimentationrateESR)簡稱血沉。

1.原理:RBC由于自身重量產生自然下沉力,而在下沉時,必須與等體積的血漿發(fā)生位置互換,造成

血漿向上流動,通常情況RBC膜表面唾液酸帶負電荷,紅細胞互相排斥,使細胞間距為25nm。

彼此分散懸浮于血漿中。卜沉受到的阻力較大,故沉降率較慢。此外,血液白蛋白帶有負電荷,纖維

蛋白原、球蛋白帶有正電荷,正常情況下,下沉速度慢,在某些病理狀態(tài)下,血漿中纖維蛋白原或球

蛋白增加,能降低RBC的電位,促使其成緡線狀聚集,減少了血漿對RBC沉降的阻力,因而血沉

加快。膽固醇、甘油三酯也能促進血沉,白蛋白帶負電荷,有抑制RBC緡線狀聚集的用。卵磷酯也

有抑制RBC聚集作用,有利于維持RBC懸浮性。

2.參考值:成人男性0—15mm/hr,女性0—20mm/hr

3.臨床意義:

(1).生理變空廠新生兒、兒童ESRf

月經期、妊辰ESRt

老年人ESRt

(2).病理性

(A)炎癥性疾?。杭毙约毦匝装Y、自身免疫性疾病、慢性炎癥:

(B)組織壞死及損傷:范圍較大組織損傷或手術創(chuàng)傷

缺血性組織壞死:心肌梗塞、肺梗塞等

(C)惡性腫瘤:增長迅速的惡性腫瘤ESR多快,與B2巨球蛋白、纖維蛋白原增高等有關。手術、放

療、化療后、ESR趨于正常,良性腫瘤則正常

(D)各種原因所致的高球蛋白血癥:多發(fā)性骨髓瘤、自身免疫性疾病、亞急性感染性心內膜炎、慢性腎

炎、肝硬化等

(E)貧血

(F)高膽固醇血癥

4.ESR臨床應用

(1).動態(tài)觀察病情變化:活動期ESR,靜止期ESR正常

(2).區(qū)分良性與惡性腫瘤:良性腫瘤ESR-,惡性腫瘤ESRt

(3).反映血漿中球蛋白增高

(4).區(qū)分功能性與器質性疾病:心絞痛ESR一,心肌梗塞ESRt

六.紅細胞比積和紅細胞有關參數(shù)

(-)紅細胞比積

1.定義:紅細胞比積(HemocrilHet)又稱紅細胞壓積(Packedcellvolume)是指紅細胞在血液中所占

容積的比值。

2.參考值:男性0.4—0.5L/L

女性0.37-0.48L/L

3.臨床意義:Hctt各種原因所致血液濃縮,常作為補液參考

HctI各種類型貧血

(-)紅細胞常數(shù)計數(shù)

1.三種常數(shù)定義

(I)平均紅細胞體積(meancorpuscularvolumeMCV)

每升血液中紅細胞比積

MCV=-----------------------------------------------*1()15fl

每升血液中RBC數(shù)目

(IL=10l5FL)

(2)平均紅細胞血紅蛋白量(meancorpuscularhemoglobinMCH)

每升血液中血紅蛋白含量

MCH=-----------------------------------------*10設pg

每升血液中RBC數(shù)目

(lg=10l2pg)

(3)平均紅細胞血紅蛋白深度(meancorpuscularhemoglobinconcentrationMCHC)

每升血液中血紅蛋白含量

MCHC=-----------------------------------------g/l

每升血液中紅細胞比積

2.參考值

MCV:手工法82-92fl,儀器法80-100fl

MCH:手工法27-31pg,儀器法27-34pg

MCHC:320-360g/l

3.應用舉例:

RBC3.5*l0l2/L,Hct0.36、Hb120g/l

MCV=0.36*10'73.5*1012=103fl

MCH=120*1012/3.5*10I2=34.3pg

MCHC=120/0.36=333

4.臨床意義

根據(jù)三次平均值可進行貧血形態(tài)學分類

分類MCVMCHMCHC病因

正常細胞82-10027-34320-360

正常細胞性貧血82-10027-34320-360再障、急性失血貧、溶貧

大細胞性貧血)100〉34320-360葉酸、B12缺乏引起巨幼貧

小細胞低色素性貧血(80(27(320缺鐵貧、海洋性貧血、粒幼細

胞貧血

單純小細胞貧血〈80(27320-360慢性感染、炎癥、肝病、尿毒癥、

惡性腫瘤

附由1液自動化分析儀檢測原理:

電阻抗法(Coulter原理):根據(jù)血細胞非傳導性,以電介質溶液中懸浮顆粒在通過計數(shù)小孔時引起的電阻

變化進行檢測,進行血細胞計數(shù)何體積測定。

容量、電導、光散射(VCS)法:首先在標本內加入只作用紅細胞的溶血劑,使紅細胞溶解,然后加入抗溶

血劑,起中和前溶血劑的作用,使白細胞的表面、胞質及大小等特征仍保持原狀,采用鞘流技術使含白細

胞通過檢測器,接受VCS檢測技術。體積(V)測量使用的是電阻抗法(Coulter原理):電導性(C)測

量是根據(jù)細胞壁產生高頻電流的性能采用高頻電磁探針,測量細胞內部結構,細胞核和質的比例,細胞內

質粒的大小和密度,因此電導性(C)能識別體積相同而性質不同的兩個細胞亞群;光散射(S)是根據(jù)細胞

表面光散射的特性提供細胞類型的鑒別方式。

中間細胞:原始細胞、幼稚細胞、單核細胞、嗜堿性粒細胞、嗜酸性粒細胞

ABBOTTCELL-DYN1600型血細胞分析儀直方圖分析

在AbbottCell-DYD1600型血細胞分析儀的應用中,血細胞分布直方圖具有直觀性,對分析病人標本和

對儀器狀態(tài)及性能都很有幫助。

一,白細胞分布直方圖

電阻法白細胞計數(shù)和分類的基本原理如下:在溶血素(Lyse)的作用下,白細胞在高滲和化學作用的共同

影響下,膜的透性增加,細胞內液逸出,而細胞核及細胞器卻不能通過胞膜,皺縮的膜包裹細胞核及胞質

顆粒形成一個“溶血素作用后細胞”(lysemodifiedcell,本文簡稱為LMC)?LMC通過計數(shù)孔,在

孔的內外有電場存在,每一個大小不同的LMC通過電場都產生一個與其體積成正比的電脈沖,通過對收

集到的脈沖信號的分析,從而計出細胞的數(shù)量,并且能夠對白細胞跟據(jù)脈沖大小的分布計算出白細胞的分

類(其實是LMC的脈沖大小)。值得注意的是,電阻法對白細胞的分類根據(jù)的是LMC的體枳,而不是根

據(jù)生理狀態(tài)下的白細胞體積。LMC與生理條件下的體積分布對照如下:

生理條件下的細胞由小到大:

淋巴細胞嗜堿性粒細胞中性粒細胞I嗜酸性粒細胞單核細胞

“溶血素作用后細胞“小到大:

淋巴細胞嗜堿性粒細胞嗜酸性粒細胞單核細胞中性粒細胞

1,溶血素對各類白細胞的作用:

淋巴細胞:細胞體積小,胞核單一且較小,胞漿量少,胞質顆粒少。經溶血素作用后形成一個由胞膜緊緊

裹在核上的LMC,體積在35~98fl,CD1600在三分類上屬LYM。

嗜堿性粒細胞:細胞體積較小,胞核單-且較小,胞漿量極少,胞漿中有嗜堿性顆粒。經溶血素作用后形

成一個山胞膜緊緊裹在核及上的LMC,體積在98135f1,CD1600在三分類上并入MID。

嗜酸性粒細胞:細胞體積較大,胞核多為兩個,胞漿量較多,胞漿有較多的粗大嗜酸性粒顆粒。經溶血素

作用后形成一個由胞膜裹在核及胞質顆粒上的LMC,體積在98135f1,CD1600在三分類上并入MID。

單核細胞:生理狀態(tài)下,細胞體積最大,胞核單一,較大,在三維空間上有折皺,胞漿量中等,顆粒較少。

經溶血素作用后形成一個由胞膜裹在核上的一個中等大小的LMC,體積在98135f1,CD1600在三分類上

并入MIDo

中性粒細胞:生理狀態(tài)下,細胞體積較大,分葉核,胞漿豐富,有大量中性顆粒。經溶血素作用后,形成

一個由胞膜核及中性顆粒上的LMC,體積在135~350fl,CD1600在三分類上屬GRAN。

白細胞分布直方圖的模式:

AbbottCcll-DYDi1600血far由分析儀白班由介類

白細胞分布直方圖是以“溶血素作用后細胞”體積為橫軸,以數(shù)量為縱軸。橫軸分為256個通道,每通道

為1.37fL收集到的相應的脈沖數(shù)量在坐標系中描點,從而繪出一條連續(xù)的曲線。理想的白細胞曲線是

由三個連續(xù)的正態(tài)分布形成的曲線。

2,白細胞的干擾“R”的分布。

類似于"RO、RI、R2、R3、R4及Rm”這樣的標記經常會出現(xiàn)在CD1600的報告單的WBC計數(shù)及分

類的數(shù)值結果旁邊,這些R的標記是對白細胞分布中的某些區(qū)域數(shù)值異常所進行的提示。具體R的分布

見下圖:

BAbbottCcll-PYN16g血細電分析儀白細胞1分類

3,白細胞分類與計數(shù)中出現(xiàn)的異常情況:

3.1,中介值細胞區(qū)域出異常白細胞峰。

BAbbottCell-DYN1600血幼電余析儀內的感分類

3.2,由大量白血病細胞出現(xiàn)形成的單一峰。

BAbbottCcll-DYN1600血氣由分新儀自編胞分類

3.3,由堵孔或半堵孔引起的干擾峰及判斷。

由于計數(shù)用的寶石孔被蛋白質塊、細胞碎片、纖維、結晶等堵塞或半堵塞,白細胞計數(shù)會出現(xiàn)非常嚴重的

干擾,表現(xiàn)為白細胞總數(shù)假性增高,具體反映在直方圖上如下圖標示,而在數(shù)值上,淋巴細胞計數(shù)增高,

百分比加大,高達80%以上,有RO,RI,R2,Rm提示出現(xiàn)。

3.3.1,出現(xiàn)下圖所示峰形一般再結合計數(shù)時間即可做出白細胞寶石孔堵孔的判斷。

BAbbottCcllfYN1600血細感分析儀白細胞分類

異常類型;式石孔部分襦4U產生了大量的總值J2城手機體號

■K的螳形異常%LVMW

GRAN的怫均消失,第或

彩W56Q2P02^03003?*

3.3.2如果出現(xiàn)下圖所示峰形,考慮到試劑質量不高的情況下,測試嬰幼兒標本時,從直方圖及數(shù)值上不

易與半堵孔的情況區(qū)

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