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國

國

家

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準(zhǔn)2GB5009.31—20162食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)水產(chǎn)品中揮發(fā)酚殘留量的測定國家衛(wèi)生和計劃生育委員會

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國家衛(wèi)生和計劃生育委員會

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- -

-中 華 人 民 共 和 國2GB5009.31—20162前 言本標(biāo)準(zhǔn)代替SC/T3031—2006《水產(chǎn)品中揮發(fā)酚殘留量的測定 分光光度法》。本標(biāo)準(zhǔn)與SC/T3031—2006相比,主要變化如下:———將處理方法中的攪拌改為恒溫磁力攪拌;———增加水蒸氣蒸餾儀為處理方法中的提取裝置。Ⅰ2GB5009.31—20162食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)水產(chǎn)品中揮發(fā)酚殘留量的測定1

范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水產(chǎn)品中揮發(fā)酚殘留量的分光光度測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于水產(chǎn)品中可食部分揮發(fā)酚殘留量的測定。2

原理用堿性溶液破壞樣品組織結(jié)構(gòu),在酸性條件下用水蒸氣蒸餾出揮發(fā)酚類化合物,在鐵氰化鉀存在下,與4-氨基安替比林反應(yīng)生成橙紅色的安替比林染料,用三氯甲烷萃取,在460nm

波長測定吸光度定量。3

試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為

GB/T6682規(guī)定的三級水。13. 試劑111 ( 312133.. 11 ( 312133.. 氨水(NH3·H2O)。3.. 硫酸(H2SO4)。143.. 氫氧化鈉14 F 6151617183.. 鐵 F 6151617183.. 硫酸銅(CuSO4·5H2O

)。3.. 甲基橙(C14H15N3NaO3S)。3.. 氯化銨(NH4Cl)。 C193..

4-氨基安替比林(11H13 C19 1 51123..0

活性炭粉末(粒徑 1 51123. 試劑配制 2213.. 無酚水:取實驗用水,每升水中加入0.g經(jīng)200℃烘干30min的活性炭粉末,充分振搖后 221過夜,用雙層中速濾紙過濾后即可使用;或向?qū)嶒炗盟屑託溲趸c(NaOH)使水呈強堿性,并滴加高錳酸鉀溶液至紫紅色,移入全玻璃蒸餾器中加熱蒸餾,取餾出液備用。無酚水應(yīng)貯于玻璃瓶中,取用時應(yīng)避免與硅膠制品(橡皮塞或乳膠管等)接觸。22233..

50%硫酸溶液:將濃硫酸在攪拌下緩緩加入等體積的實驗用水22233..

10%氫氧化鈉溶液:稱取10g氫氧化鈉溶于水中,稀釋至100mL,混勻。 6 4243..

8%鐵氰化鉀溶液:稱取8g鐵氰化鉀(K3[Fe(CN)])溶于水中,稀釋至100mL,混勻 6 424藏,可使用一周。12GB5009.31—20162 C25263..

10%硫酸銅溶液:稱取10g硫酸銅(uSO4·5H2O)溶于水中,稀釋至100 C25263..

0.5%

甲基橙指示液:稱取甲基橙0.5g溶于水中,稀釋至100mL,混勻。 74p27 C 4283.. 緩沖溶液:稱取20g氯化銨(NH4Cl)溶于100mL氨水(NH3·H2O)中, 74p27 C 4283..

2%4-氨基安替比林溶液:稱取2g4-氨基安替比林(11H13N3O)溶于水中,稀釋至100mL,

℃冷藏,可使用一周。33. 標(biāo)準(zhǔn)品3C苯酚標(biāo)準(zhǔn)品(6H6O),純度≥99%。C43. 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制4 1413.. 標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:稱取苯酚0.1g(精確至0.

mg)于50mL小燒杯中,加無酚水溶解,再轉(zhuǎn) 141100mL容量瓶中,定容,混勻,于4℃保存,苯酚質(zhì)量濃度為100μg/mL,有效期為7d。 0423.. 標(biāo)準(zhǔn)工作液:取適量苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液,用無酚水稀釋至每毫升含1.0μg苯酚,配制后要在 042使用。4

儀器和設(shè)備1 123454. 水蒸氣蒸餾儀或500mL玻璃水蒸氣蒸餾裝置(見附錄1 123454. 天平:感量為0.mg和0.1g。4.

500mL(梨形)分液漏斗。4. 磁力攪拌器。4. 分光光度計。674. 調(diào)溫電爐或調(diào)溫電加熱套。674. 組織搗碎機。5

分析步驟15. 試樣制備及保存1水產(chǎn)品取可食部分用組織搗碎機勻漿后,攪拌均勻,分裝,密閉冷藏或冷凍保存。25. 試樣處理2215.. 蒸餾提21稱取預(yù)處理的樣品10g~20g(精確到0.1g,同時做空白試驗)放燒杯中,加入氫氧化鈉溶液75mL,用磁力攪拌器攪拌10min。再加3~5滴甲基橙溶液,用硫酸溶液調(diào)節(jié)pH≤4(溶液呈橙紅色),再加硫酸銅溶液5mL,混勻后,置于水蒸氣蒸餾儀提取瓶或500mL蒸餾瓶中,用少量無酚水洗凈燒杯,洗滌液并入水蒸氣蒸餾儀提取瓶或蒸餾瓶中并加數(shù)粒玻璃珠。使用玻璃水蒸氣蒸餾裝置(或水蒸氣蒸餾儀)進行蒸餾,應(yīng)連接好水蒸氣蒸餾裝置,確保嚴(yán)密不漏氣,取250mL錐形瓶接收餾出液,中速蒸餾60min~90min,至餾出液約240mL時,停止蒸餾,并用10mL無酚水沖洗冷凝管,洗滌液并入餾出液中(蒸餾過程中保持酸性)。蒸餾液應(yīng)盡量避免與橡膠制品接觸(橡皮塞、橡膠管和乳膠管里含有酚類化合物添加劑),如需使用時用硅膠管(塞)代替。225.. 顯220 5將餾出液移入分液漏斗中,加2.mL緩沖溶液,混勻。加1.mL4-氨基安替比林溶液,混勻,0 52m

…………m

…………(1)25231.mL鐵氰化鉀溶液,充分混勻后,放置105235.. 萃取24準(zhǔn)確加入10.mL三氯甲烷,密塞,劇烈振搖2min,靜置分層,徹底澄清透明后(不能存有氣泡24用干脫脂棉拭干分液漏斗頸管內(nèi)壁,于頸管內(nèi)塞入一小團干脫脂棉,將三氯甲烷通過干脫脂棉團,棄去最初濾出的數(shù)滴萃取液,直接放入光程為1cm

的比色皿中。安替比林染料用三氯甲烷萃取后,需6h以內(nèi)測定。5.. 測定于460nm

波長下,以空白三氯甲烷萃取液為參比,用分光光度計測量吸光度。255.. 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪255 0 0 00 1

0取8個分液漏斗,分別加入100mL

水,依次加入0.

mL、0.

5 0 0 00 1

07.mL、10.mL、5.mL苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液,再分別加無酚水至250mL,顯色、萃取后,測定吸光度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。6

分析結(jié)果的表述1試樣中揮發(fā)酚的含量按式()計算:1X=m1-m0式中:μμgX

———試樣中揮發(fā)酚的含量(以苯酚計),單位為毫克每千克(mg/kg);μμgm1———由標(biāo)準(zhǔn)曲線求得試樣溶液中苯酚的量,單位為微克(g);m0———空白的苯酚量,單位為微克(g);m

———試樣質(zhì)量,單位為克()。計算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示,結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。7

精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)