Royaljelly2008-06-27發(fā)布中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布I本標(biāo)準(zhǔn)的第4章是強(qiáng)制性的，其余是推薦性的。本標(biāo)準(zhǔn)與GB/T9697—2002相比主要變化如下：——由推薦性標(biāo)準(zhǔn)改為條文強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)；——增加了術(shù)語(yǔ)和定義；——修改了蜂王漿的定義；——調(diào)整了蛋白質(zhì)含量的界限值。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A是規(guī)范性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由中華全國(guó)供銷合作總社提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：南京老山藥業(yè)股份有限公司、中華全國(guó)供銷合作總社蜜蜂產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)秘書處、中國(guó)蜂產(chǎn)品協(xié)會(huì)蜂王漿專業(yè)委員會(huì)。本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：1本標(biāo)準(zhǔn)適用于蜂王漿的生產(chǎn)和貿(mào)易。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T601化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備GB/T5009.4—2003食品中灰分的測(cè)定GB7718預(yù)包裝食品標(biāo)簽通則3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。蜂王漿royaljelly蜂皇漿royaljelly工蜂咽下腺和上腭腺分泌的，主要用于飼喂蜂王和蜂幼蟲(chóng)的乳白色、淡黃色或淺橙色漿狀物質(zhì)。4要求4.1感官要求4.1.1色澤無(wú)論是粘漿狀態(tài)還是冰凍狀態(tài)，都應(yīng)是乳白色、淡黃色或淺橙色，有光澤。冰凍狀態(tài)時(shí)還有冰晶的光澤。4.1.2氣味粘漿狀態(tài)時(shí)，應(yīng)有類似花蜜或花粉的香味和辛香味。氣味純正，不得有發(fā)酵、酸敗氣味。4.1.3滋味和口感粘漿狀態(tài)時(shí)，有明顯的酸、澀、辛辣和甜味感，上腭和咽喉有刺激感。咽下或吐出后，咽喉刺激感仍會(huì)存留一些時(shí)間。冰凍狀態(tài)時(shí)，初品嘗有顆粒感，逐漸消失，并出現(xiàn)與粘漿狀態(tài)同樣的口感。4.1.4狀態(tài)常溫下或解凍后呈粘漿狀，具有流動(dòng)性。不應(yīng)有氣泡和雜質(zhì)(如蠟屑等)。4.2等級(jí)根據(jù)理化品質(zhì)，蜂王漿分為優(yōu)等品和合格品兩個(gè)等級(jí)。4.3理化要求產(chǎn)品等級(jí)和理化要求見(jiàn)表1。2GB9697—2008表1產(chǎn)品等級(jí)和理化要求水分/%≤10-羥基-2-癸烯酸/%≥蛋白質(zhì)/%總糖(以葡萄糖計(jì))/%≤酸度(1mol/LNaOH)/(mL/100g)淀粉不得檢出4.4安全衛(wèi)生要求應(yīng)符合國(guó)家法律、法規(guī)和政府規(guī)章要求，符合國(guó)家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的安全衛(wèi)生要求。4.5真實(shí)性要求不得添加或取出任何成分。5試驗(yàn)方法如無(wú)特別說(shuō)明，各方法所用試劑均為分析純?cè)噭?，水為蒸餾水。5.1樣品制備采用不銹鋼棒、管或勺作為取樣器。將樣品裝入樣品瓶?jī)?nèi)，充分?jǐn)嚢枋够旌暇鶆?，作為待測(cè)樣品。每件樣品應(yīng)不少于20g.取樣后應(yīng)立即試驗(yàn)。如不能及時(shí)試驗(yàn)，應(yīng)在一18℃冰箱中冰凍保存。5.2水分5.2.1儀器a)減壓干燥箱；b)稱量瓶：高25mm,直徑35mm;c)分析天平：感量0.0001g。5.2.2試驗(yàn)步驟取蜂王漿試樣約0.5g,置于已干燥至恒量的稱量瓶中，精密稱定，攤平，放入減壓干燥箱，在溫度75℃,壓力一0.095MPa～-0.10MPa(-730mmHg～-760mmHg)下干燥4h后取出稱量瓶，置干燥器中，冷卻30min后稱量，反復(fù)干燥直至前后兩次質(zhì)量差不超過(guò)2mg,為恒量。5.2.3計(jì)算蜂王漿中水分含量按式(1)計(jì)算：式中：X?——蜂王漿中水分含量，%;m?——稱量瓶和試樣的質(zhì)量，單位為克(g);m?——稱量瓶和試樣干燥至恒重后的質(zhì)量，單位為克(g);mg——稱量瓶的質(zhì)量，單位為克(g)。5.2.4平行試驗(yàn)相對(duì)偏差平行試驗(yàn)相對(duì)偏差不得超過(guò)0.8%。3GB9697—20085.3.1試劑本試驗(yàn)所用水為重蒸餾水。a)甲醇：紫外光譜純或在檢測(cè)波長(zhǎng)處透光率大于30%的分析純。c)內(nèi)標(biāo)物：對(duì)羥基苯甲酸甲酯，含量99.0%。d)10-HDA標(biāo)準(zhǔn)品：99.0%以上。使用前應(yīng)在放有濃硫酸的減壓干燥器內(nèi)減壓干燥24h。e)10-HDA標(biāo)準(zhǔn)溶液：取干燥后的10-HDA標(biāo)準(zhǔn)品約25mg,精密稱定，加無(wú)水乙醇溶解并移入25mL容量瓶中，用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻。此溶液每毫升含10-HDA約1mg。f)內(nèi)標(biāo)溶液：取已干燥過(guò)的對(duì)羥基苯甲酸甲酯約650mg,精密稱定，加無(wú)水乙醇溶解并移入1000mL容量瓶中，用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻。此溶液每毫升含內(nèi)標(biāo)物約0.65mg。g)鹽酸(c=0.03mol/L):量取0.1mol/L鹽酸100mL,加入200mL重蒸餾水中。h)流動(dòng)相φ(CH?OH+0.03mol/LHCl+H?O)=55+10+35。5.3.2儀器a)高效液相色譜儀：配置紫外檢測(cè)器，記錄儀或微處理機(jī)；b)色譜柱：4.6mm×250mm不銹鋼柱，填充無(wú)定形硅膠C?s鍵合相，5μm或10μm;c)超聲波清洗儀；d)旋渦混勻器；e)分析天平：感量0.0001g。5.3.3試驗(yàn)步驟5.3.3.1試樣處理樣品解凍至室溫后用玻璃棒攪勻，取約0.5g,置于已稱定的50mL容量瓶中，精密稱定，加0.03mol/L鹽酸1mL和水2mL,置旋渦混勻器上混合使試樣溶解，加無(wú)水乙醇30mL,邊加入邊輕輕搖動(dòng)，再精密加入內(nèi)標(biāo)溶液10mL,并用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，立即置超聲波浴中超聲15min,或置旋渦混勻器上振蕩15min,取出，在3000r/min下離心10min后測(cè)定。如不能及時(shí)測(cè)定，應(yīng)放置在冰箱中冷藏待測(cè)。5.3.3.2色譜條件5.3.3.3校正因子測(cè)定精密吸取10-HDA標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5,1,2,3,4,5mL至10mL容量瓶中。精密加入內(nèi)標(biāo)溶液2mL,用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻。分別吸取此溶液2μL,注入色譜儀，用峰面積比值計(jì)算，應(yīng)呈線性，求出校正因子F。5.3.3.4試樣測(cè)定5.3.4計(jì)算蜂王漿中10-羥基-2-癸烯酸含量按式(2)計(jì)算：X?——蜂王漿中10-羥基-2-癸烯酸含量，%;F——校正因子；A;——試樣中被測(cè)組分峰面積；A,——試樣中內(nèi)標(biāo)物峰面積；4m;——試樣質(zhì)量，單位為克(g)。5.3.5平行試驗(yàn)相對(duì)偏差平行試驗(yàn)相對(duì)偏差不得超過(guò)2.0%。5.4蛋白質(zhì)5.4.1試劑a)濃硫酸(w=95%～98%);b)硫酸銅與硫酸鉀混合試劑：稱取硫酸銅1g、硫酸鉀10g,置研缽中混合均勻，研細(xì)備用；c)混合指示劑：量取甲基紅乙醇溶液(p=1g/L)2份，溴甲酚綠乙醇溶液(p=2g/L)3份，混勻；d)硼酸吸收液(p=20g/L):稱取硼酸2.0g,置于100mL具塞量筒中，加乙醇20mL,并加蒸餾e)氫氧化鈉溶液(p=400g/L):稱取氫氧化鈉40g,加蒸餾水稀釋至100mL;f)稀硫酸：量取濃硫酸5.7mL,加蒸餾水稀釋至100mL;g)鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1mol/L):按GB/T601配制和標(biāo)定。使用前準(zhǔn)確稀釋10倍。5.4.2儀器a)凱氏定氮法消化裝置、50mL凱氏燒瓶(如使用遠(yuǎn)紅外消解電爐則配用50mL消解管加曲頸漏斗);b)10mL酸式滴定管；c)分析天平：感量0.0001g;d)半微量法蒸餾裝置(見(jiàn)附錄A)。5.4.3試驗(yàn)步驟5.4.3.1蒸餾裝置的清洗連接蒸餾裝置，A瓶中加適量蒸餾水與甲基紅指示液數(shù)滴，加稀硫酸使成酸性，加玻璃珠或沸石數(shù)粒，從D漏斗加蒸餾水約50mL,關(guān)閉G夾，開(kāi)放冷凝水，煮沸A瓶中蒸餾水。當(dāng)蒸氣從冷凝管尖端冷凝而出時(shí)，移去火源，關(guān)H夾，使C瓶中的蒸餾水反沖到B瓶中。開(kāi)G夾，放出B瓶中的蒸餾水，關(guān)B瓶及G夾。將冷凝管尖端浸入約50mL蒸餾水中，使蒸餾水自冷凝管尖端反沖至C瓶，再?zèng)_至B瓶，如上法放去蒸餾水。如此將儀器洗滌2次～3次。5.4.3.2消化取蜂王漿試樣約1g置已稱定的濾紙上，精密稱定后包好，放入凱氏燒瓶或消解管中。加入硫酸銅與硫酸鉀混合試劑2g,再沿瓶壁緩緩加入濃硫酸10mL,置，開(kāi)始用較低溫度緩緩加熱，使溶液溫度保持在沸點(diǎn)以下，等泡沸停止后，逐步加大電力，待消化溶液沸騰，保持此狀態(tài)但不使溶液溢出，待溶液成澄明的綠色后，繼續(xù)加熱30min,冷卻后轉(zhuǎn)移至100mL容5.4.3.3蒸餾量取20g/L硼酸溶液10mL,置100mL錐形瓶中，加混合指示劑5滴，將冷凝管尖端浸入液面下以后，精密吸取上述消化溶液5mL,經(jīng)由D漏斗移入反應(yīng)管中，再加入400g/L氫氧化鈉溶液10mL,用少量蒸餾水洗D漏斗數(shù)次，關(guān)G夾，加數(shù)毫升蒸餾水于D漏斗中以封閉管路。加熱A瓶(瓶中的蒸餾水應(yīng)滴加稀硫酸保持酸性),進(jìn)行水蒸氣蒸餾，從硼酸溶液開(kāi)始由酒紅色變?yōu)樗{(lán)綠色時(shí)起，繼續(xù)蒸餾10min后，將冷凝管尖端提出液面，使蒸氣繼續(xù)沖洗1min,用少量蒸餾水淋洗尖端后，停止蒸餾。5.4.3.4滴定將吸收液用0.01mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至由藍(lán)綠色變?yōu)榛易仙珵榻K點(diǎn)。5.4.4計(jì)算蜂王漿中蛋白質(zhì)含量按式(3)計(jì)算：5式中：X?——蜂王漿中蛋白質(zhì)含量，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示，%;V?——滴定試樣時(shí)0.01mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗的體積，單位為毫升(mL);V?——滴定空白時(shí)0.01mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗的體積，單位為毫升(mL);c?——鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，單位為摩爾每升(mol/L);0.014——氮的毫摩爾質(zhì)量，單位為克(g);6.25——氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù)。5.4.5平行試驗(yàn)的相對(duì)偏差平行試驗(yàn)相對(duì)偏差不得超過(guò)3.0%。5.5總糖5.5.1試劑a)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取經(jīng)98℃~100℃干燥至恒重的純葡萄糖(比旋光度+52.5°~+53°)1.000g,加蒸餾水溶解后加入鹽酸5mL,并以蒸餾水稀釋至1000mL,此溶液每毫升相當(dāng)于1mg葡萄糖。b)堿性酒石酸銅甲液：稱取硫酸銅(CuSO?·5H?O)15g及次甲基藍(lán)0.05g,加蒸餾水溶解并稀釋至1000mL,貯存于密塞瓶?jī)?nèi)。c)堿性酒石酸銅乙液：稱取酒石酸鉀鈉50g及氫氧化鈉75g,加蒸餾水溶解，加入亞鐵氰化鉀4g,待其完全溶解后，用蒸餾水稀釋至1000mL,貯存于密塞聚乙烯塑料瓶?jī)?nèi)。堿性酒石酸銅溶液的標(biāo)定：精密吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5mL,置于150mL錐形瓶中，加蒸餾水10mL,自滴定管加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液約9mL,控制在2min內(nèi)加熱至沸，趁沸以每2s一滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直到溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積，同時(shí)平行操作三份，取其平均值，計(jì)算每10mL(甲液、乙液各5mL)堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量(mg)。d)乙酸鋅溶液(p=219g/L):稱取乙酸鋅21.9g,加冰乙酸3mL,加蒸餾水溶解并稀釋至e)亞鐵氰化鉀溶液(p=106g/L)。f)濃鹽酸(w=36%～38%)。g)鹽酸(c=6mol/L):量取鹽酸50mL,加蒸餾水稀釋至100mL。h)氫氧化鈉溶液(p=200g/L)。i)甲基紅指示液(p=1g/L,乙醇溶液)。5.5.2儀器a)電熱恒溫水浴鍋：溫度波動(dòng)±1℃;b)分析天平，感量0.0001g,或電子天平，感量0.001g。5.5.3試驗(yàn)步驟5.5.3.1試樣處理精密稱取蜂王漿試樣約4g,置于100mL容量瓶中，加蒸餾水50mL,振搖使試樣溶解后緩緩加入乙酸鋅溶液及亞鐵氰化鉀溶液各5mL,加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。靜置30min后用干燥濾紙過(guò)濾，棄去初濾液數(shù)毫升，濾液備用。精密吸取上款濾液50mL,置于100mL容量瓶中，加入鹽酸(c=6mol/L)10mL,搖勻，置于電熱6GB9697—2008恒溫水浴鍋中，在68℃~70℃下水解10min,流水冷卻至室溫，加甲基紅指示液2滴，搖勻，用氫氧化鈉溶液(p=200g/L)中和至溶液呈黃色，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，作為試樣溶液備用。5.5.3.2試樣溶液滴定精密吸取堿性酒石酸銅甲液和乙液各5mL,置于150mL錐形瓶中，加蒸餾水10mL,控制在2min加熱至沸，以先快后慢的速度，從滴定管中滴加試樣溶液，并保持溶液沸騰狀態(tài)，待溶液顏色變淺時(shí)，以每2s一滴的速度滴定，直至藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄試樣溶液消耗體積。5.5.4計(jì)算蜂王漿中總糖含量按式(4)計(jì)算：式中：X?——蜂王漿中總糖(以葡萄糖計(jì))含量，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示，%;T——堿性酒石酸銅溶液滴定度，10mL堿性酒石酸銅溶液(甲液、乙液各5mL)相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量，單位為毫克(mg);ms——試樣質(zhì)量，單位為克(g);V?——滴定時(shí)試樣溶液所消耗的體積，單位為毫升(mL)。5.5.5平行試驗(yàn)相對(duì)偏差平行試驗(yàn)相對(duì)偏差不得超過(guò)3.0%。5.6灰分5.6.1試劑濃硫酸(w=95%～98%)。5.6.2儀器a)分析天平：感量±0.0001g;b)石英或瓷坩堝：30mL;c)干燥器：內(nèi)置硅膠干燥劑；d)高溫爐。5.6.3試驗(yàn)步驟5.6.3.1按GB/T5009.4—2003中4.1執(zhí)行。5.6.3.2精密稱量蜂王漿試樣約1.5g,置于已灼燒至恒量的坩堝中，先用小火加熱使樣品充分炭化至無(wú)煙。冷卻至室溫，加入濃硫酸0.5mL～1mL,使樣品濕潤(rùn)。低溫加熱除盡硫酸蒸汽。置高溫爐中，在700℃~800℃下灼燒至無(wú)炭粒，即灰化完全。溫度降至200℃以下后取出，放入干燥器中冷卻至室溫，稱量。重復(fù)灼燒至前后兩次稱量相差不超過(guò)0.3g為恒量。5.6.4計(jì)算蜂王漿中灰分含量按式(5)計(jì)算：式中：X?——蜂王漿中灰分含量，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示，%;ms——坩堝和灰分的質(zhì)量，單位為克(g);m?——坩堝的質(zhì)量，單位為克(g);mg——坩堝和試樣的質(zhì)量，單位為克(g)。5.6.5平行試驗(yàn)相對(duì)偏差平行試驗(yàn)相對(duì)偏差不得超過(guò)2.0%。5.7.1試劑氫氧化鈉溶液(c=0.1mol/L):按GB/T601標(biāo)準(zhǔn)配制并標(biāo)定。5.7.2儀器a)酸度計(jì)：pH值精度為0.1;c)分析天平：感量±0.0001g