I本標(biāo)準(zhǔn)的第3章、第5章為強制性的，其余為推薦性的。本標(biāo)準(zhǔn)由中國石油和化學(xué)工業(yè)協(xié)會提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(SAC/TC133)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位：沈陽化工研究院。本標(biāo)準(zhǔn)參加起草單位：先正達(dá)南通作物保護(hù)有限公司、湖北沙隆達(dá)天門農(nóng)化有限責(zé)任公司。1該產(chǎn)品有效成分百草枯的其他名稱、結(jié)構(gòu)式和基本物化參數(shù)如下：相對分子質(zhì)量：186.3(按1997國際相對原子質(zhì)量計)熔點：約300℃分解(百草枯二氯化物)蒸氣壓(百草枯二氯化物，20℃):<0.1mPa溶解度(百草枯二氯化物，20℃,g/L):水700,微溶于低級醇類，不溶于烴類穩(wěn)定性(百草枯二氯化物):在中性和酸性介質(zhì)中穩(wěn)定，在堿性介質(zhì)中迅速水解；其水溶液在紫外光照射下降解該產(chǎn)品中催吐劑三氮唑嘧啶酮的名稱、結(jié)構(gòu)式和基本物化參數(shù)如下：化學(xué)名稱：2-氨基-6-甲基-4-正丙基-(1,2,4)三氮唑-嘧啶酮(5)結(jié)構(gòu)式：相對分子質(zhì)量：207.2(按1997國際相對原子質(zhì)量計)熔點(℃):164～165穩(wěn)定性：在堿性介質(zhì)中水解本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了百草枯母藥的要求、試驗方法以及標(biāo)志、標(biāo)簽、包裝和貯運。本標(biāo)準(zhǔn)適用于由百草枯和生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質(zhì)以及催吐劑組成的百草枯母藥。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T1601農(nóng)藥pH值測定方法2GB/T1604商品農(nóng)藥驗收規(guī)則GB/T1605—2001商品農(nóng)藥采樣方法GB3796農(nóng)藥包裝通則3要求3.1外觀均相液體。3.2技術(shù)指標(biāo)百草枯母藥應(yīng)符合表1要求。表1百草枯母藥控制項目指標(biāo)百草枯陽離子的質(zhì)量分?jǐn)?shù)/%≥百草枯陽離子與三氮唑嘧啶酮質(zhì)量比“百草枯質(zhì)量分?jǐn)?shù)的0.3%水不溶物/%≤pH值范圍a允許使用其他催吐劑(須符合FAOSpecification56/TK/S/F(1994)中的有關(guān)要求),其他催吐劑檢測方法及其相應(yīng)指標(biāo)要求以及FAOSpecification56/TK/S/F(1994)可在全國農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會獲得。b正常生產(chǎn)時，4,4’-聯(lián)吡啶質(zhì)量分?jǐn)?shù)每3個月至少進(jìn)行一次測定。4試驗方法4.1抽樣按GB/T1605—2001中“商品原藥采樣”方法進(jìn)行。用隨機數(shù)表法確定抽樣的包裝件；最終抽樣量應(yīng)不少于200mL。4.2鑒別試驗高效液相色譜法——本鑒別試驗可與百草枯含量的測定同時進(jìn)行。在相同的色譜操作條件下，試樣溶液某一色譜峰的保留時間與標(biāo)樣溶液中百草枯色譜峰的保留時間，其相對差值分別應(yīng)在1.5%以內(nèi)。比色法——本鑒別試驗可與百草枯含量的測定同時進(jìn)行。在相同的操作條件下，試樣溶液最大吸收波長與標(biāo)樣溶液最大吸收波長應(yīng)一致，均為600nm。4.3百草枯含量的測定4.3.1液相色譜法(仲裁法)4.3.1.1方法提要試樣用蒸餾水溶解，以庚磺酸鈉-乙腈-緩沖溶液為流動相，在以CapcellPakC18MG、5μm為填料的色譜柱和紫外可變波長檢測器，對試樣中的百草枯進(jìn)行液相色譜分離和測定。4.3.1.2試劑和溶液磷酸；三乙胺；水：新蒸二次蒸餾水；3百草枯二氯化物標(biāo)樣(使用前須在120℃干燥4h以上):已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%。流動相：稱取3.64g的庚磺酸鈉，溶于900mL二次蒸餾水中，加入16mL磷酸；再用三乙胺調(diào)至pH=2;再加入100mL乙腈，混合均勻后，用0.45μm濾膜過濾；超聲10min。液相色譜儀：具有紫外可變波長檢測器和定量進(jìn)樣閥；色譜數(shù)據(jù)處理機或色譜工作站；色譜柱：4.6mm(id)×250mm不銹鋼柱，內(nèi)裝CapcellPakC18MG、5μm填充物(或具有相同柱效的其他反相色譜柱);過濾器：濾膜孔徑約0.45μm;4.3.1.4液相色譜操作條件柱溫：室溫(溫差變化應(yīng)不大于2℃);保留時間：百草枯約5.2min。上述液相色譜操作條件，系典型操作參數(shù)?？筛鶕?jù)不同儀器特點，對給定的操作參數(shù)作適當(dāng)調(diào)整，以期獲得最佳效果。典型的百草枯母藥的液相色譜圖見圖1。1——百草枯。圖1百草枯母藥液相色譜圖4.3.1.5測定步驟4.3.1.5.1標(biāo)樣溶液的制備稱取百草枯二氯化物標(biāo)樣0.15g(精確至0.0002g),置于50mL容量瓶中，加水溶解并定容，搖勻；用移液管吸取5mL,置于另一50mL容量瓶中，加水定容，搖勻。4.3.1.5.2試樣溶液的制備稱取含百草枯0.1g的試樣(精確至0.0002g),置于50mL容量瓶中，加水溶解并定容，搖勻；用移液管吸取5mL,置于另一50mL容量瓶中，加水定容，搖勻。再用0.45μm濾膜過濾。4.3.1.5.3測定在上述色譜操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰兩針百草枯峰面積相對變化小于1.0%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)樣分析。4GB19307—20034.3.1.6計算將測得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標(biāo)樣溶液中百草枯的峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中百草枯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w?(%)按式(1)計算： (1)A?——標(biāo)樣溶液中百草枯峰面積的平均值；A?——試樣溶液中百草枯峰面積的平均值；m?——標(biāo)樣的質(zhì)量，單位為克(g);m?——試樣的質(zhì)量，單位為克(g);p——百草枯二氯化物標(biāo)樣的純度，%;M?——百草枯的摩爾質(zhì)量，單位為克每摩爾(g/mol)(M?=186.3);M?——百草枯二氯化物的摩爾質(zhì)量，單位為克每摩爾(g/mol)(M?=257.2)。4.3.1.7允許差兩次平行測定結(jié)果之差，應(yīng)不大于1.0%,取其算術(shù)平均值作為測定結(jié)果。4.3.2比色法4.3.2.1方法提要百草枯在連二亞硫酸鈉堿性溶液中被還原成藍(lán)色的游離基，此游離基可用一永久的藍(lán)色玻璃片作參比，在600nm處測得其吸光度，用百草枯二氯化物標(biāo)樣繪制百草枯標(biāo)準(zhǔn)曲線，由此求出試樣中百草枯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。4.3.2.2試劑和溶液連二亞硫酸鈉；0.1mol/L氫氧化鈉溶液；質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%連二亞硫酸鈉堿性溶液：用0.1mol/L氫氧化鈉溶液配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的連二亞硫酸鈉堿性溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配，保存時間不超過3h;百草枯二氯化物標(biāo)樣(使用前須在120℃干燥4h以上):已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%;標(biāo)樣溶液：稱取百草枯二氯化物標(biāo)樣0.17g(精確至0.0002g),于500mL容量瓶中，用水溶解、定容、搖勻。避光保存，保存期為6個月。4.3.2.3儀器分光光度計：配有1cm比色池，用一塊藍(lán)色玻璃濾光片(或一片能在600nm處產(chǎn)生約1.5吸收光度的永久材料如天然玻璃濾光片或金屬網(wǎng))置入吸收池的池架上，此池架和參比池的透光面相接觸。4.3.2.4測定步驟4.3.2.4.1校正曲線的繪制準(zhǔn)確移取9.00mL、10.00mL、11.00mL、12.00mL、13.00mL標(biāo)樣溶液，分別放入5個100mL容量瓶中，用水稀釋至80mL。取其中一個容量瓶，加入10mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%連二亞硫酸鈉堿性溶液，并用水稀釋至刻度。塞緊玻璃塞，以氣泡從一端升至另一端的速度將容量瓶上下顛倒三次(不要劇烈搖動，以免由于氧化作用而使顏色消褪),立即將此溶液轉(zhuǎn)入1cm比色池中，以永久參比濾光片作參比，在600nm處測定該溶液的吸光度。同樣處理其他容量瓶中的溶液，但必須在完成一個溶液的吸收測定后，才可加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%連二亞硫酸鈉堿性溶液進(jìn)行下一個溶液的測定。以吸光度為縱坐標(biāo)，百草枯的質(zhì)量濃度(單位為g/mL)為橫坐標(biāo)，繪制校正曲線。4.3.2.4.2試樣的測定稱取含百草枯0.12g的試樣(精確至0.0002g),于500mL5GB19307—2003確吸取10.00mL,放入100mL容量瓶中，用水稀釋至80mL。加入10mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%連二亞硫酸鈉堿性溶液，并用水稀釋至刻度。塞緊玻璃塞，以氣泡從一端升至另一端的速度將容量瓶上下顛倒三次(不要劇烈搖動，以免由于氧化作用而使顏色消褪),立即將此溶液轉(zhuǎn)入1cm比色池中，以永久參比濾光片作參比，在600nm處測定該溶液的吸光度。根據(jù)試樣溶液的吸光度，從校正曲線上查得試樣溶液的質(zhì)量濃度。4.3.2.5計算試樣中百草枯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w?(%)按式(2)計算：pi——從校正曲線上查得的試樣溶液中百草枯的質(zhì)量濃度，單位為克每毫升(g/mL);4.3.2.6允許差兩次平行測定結(jié)果之差，應(yīng)不大于1.0%,取其算術(shù)平均值作為測定結(jié)果。4.4pH值的測定4.5百草枯與三氮唑嘧啶酮質(zhì)量比的測定4.5.1方法提要波長檢測器，對試樣中的三氮唑嘧啶酮進(jìn)行液相色譜分離和測定，再計算出百草枯與三氮唑嘧啶酮質(zhì)量比。4.5.2試劑和溶液三氮唑嘧啶酮標(biāo)樣：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%。4.5.3儀器液相色譜儀：具有紫外可變波長檢測器和定量進(jìn)樣閥；色譜數(shù)據(jù)處理機或色譜工作站；效的其他反相色譜柱);過濾器：濾膜孔徑約0.45μm;4.5.4液相色譜操作條件柱溫：室溫(溫差變化應(yīng)不大于2℃);上述液相色譜操作條件，系典型操作參數(shù)?？筛鶕?jù)不同儀器特點，對給定的操作參數(shù)作適當(dāng)調(diào)整，以期獲得最佳效果。典型的百草枯母藥中三氮唑嘧啶酮的液相色譜圖見圖2。61——三氮唑嘧啶酮。圖2百草枯母藥中三氮唑嘧啶酮的液相色譜圖4.5.5測定步驟4.5.5.1標(biāo)樣溶液的制備稱取三氮唑嘧啶酮標(biāo)樣0.1g(精確至0.0002g),置于100mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容，搖勻；用移液管吸取1mL,置于50mL容量瓶中，加水定容，搖勻。4.5.5.2試樣溶液的制備稱取1.2g的試樣(精確至0.0002g),置于50mL容量瓶中，加水溶解并定容，搖勻。用0.45μm濾膜過濾。4.5.5.3測定在上述色譜操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰兩針三氮唑嘧啶酮峰面積相對變化小于3.0%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)樣分析。4.5.6計算將測得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標(biāo)樣溶液中三氮唑嘧啶酮的峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中三氮唑嘧啶酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)ws(%)按式(3)計算：式中：A?——標(biāo)樣溶液中三氮唑嘧啶酮峰面積的平均值；A?——試樣溶液中三氮唑嘧啶酮峰面積的平均值；m?——m?——p——標(biāo)樣的質(zhì)量，單位為克(g);試樣的質(zhì)量，單位為克(g);三氮唑嘧啶酮標(biāo)樣的純度，%。試樣中百草枯與三氮唑嘧啶酮質(zhì)量比ζ按式(4)計算：7wi——試樣中百草枯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)；w?——試樣中三氮唑嘧啶酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。4.6.1方法提要波長檢測器，對試樣中的4,4’-聯(lián)吡啶進(jìn)行液相色譜分離和測定。4.6.2試劑和溶液4,4’-聯(lián)吡啶標(biāo)樣：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%4.6.3儀器液相色譜儀：具有紫外可變波長檢測器和定量進(jìn)樣閥；色譜數(shù)據(jù)處理機或色譜工作站；效的其他反相色譜柱);4.6.4液相色譜操作條件柱溫：室溫(溫差變化應(yīng)不大于2℃);上述液相色譜操作條件，系典型操作參數(shù)?？筛鶕?jù)不同儀器特點，對給定的操作參數(shù)作適當(dāng)調(diào)整，以期獲得最佳效果。典型的4,4’-聯(lián)吡啶標(biāo)樣的液相色譜圖見圖3。4.6.5測定步驟4.6.5.1標(biāo)樣溶液的制備稱取4,4’-聯(lián)吡啶標(biāo)樣0.1g(精確至0.0002g),置于100mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容，搖勻；用移液管吸取1mL,置于50mL容量瓶中，加水定容，搖勻。4.6.5.2試樣溶液的制備稱取2g的試樣(精確至0.0002g),置于50mL容量瓶中，加水溶解并定容，搖勻。用0.45μm濾4.6.5.3測定在上述色譜操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰兩針4,4’-聯(lián)吡啶峰面積相對變化小于3.0%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)樣分析。4.6.6計算將測得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標(biāo)樣溶液中4,4’-聯(lián)吡啶的峰面積分別進(jìn)行平均。試樣………8A?——標(biāo)樣溶液中4,4’-聯(lián)吡啶峰面積的平均值；A?——試樣溶液中4,4’-聯(lián)吡啶峰面積的平均值；p——4,4’-聯(lián)吡啶標(biāo)樣的純度，%。1——4,4'-聯(lián)吡啶。4.7水不溶物的測定4.7.1試劑和儀器4.7.2測定方法稱取20g試樣(精確至0.01g),放入250mL燒杯中，加入100mL水，攪拌2min。用已在烘箱中恒重(精確至0.0002g)