ICS65.020.20CCSB66T/YNFSTechnicalTechnicalSpecificationfortheProductionofBiocontrolpreparationsforDendrolimuspunctatusPolyhedrosisVirusIT/YNFS006—2023本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由云南省林業(yè)標準化技術委員會（YNTC02）提出并歸口。本文件主要起草單位：云南省林業(yè)和草原科學院。本文件主要起草人：陳鵬、胡光輝、李浩然、馮丹、馮志偉、李燦雯、馮加德。1T/YNFS006—2023松毛蟲質型多角體病毒生防制劑生產(chǎn)技術規(guī)程本文件規(guī)定了松毛蟲質型多角體病毒（DendrolimuspunctatusCytoplasmicPolyhedrosisVirus，DPWCPV）生防制劑的生產(chǎn)、包裝、貯藏、運輸?shù)燃夹g內容。本文件適用于防治松毛蟲的松毛蟲質型多角體病毒生物制劑的生產(chǎn)和貯藏運輸。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T3796農(nóng)藥包裝通則3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1松毛蟲質型多角體病毒（DendrolimusCytoplasmicPolyhedrosisVirus，簡稱DCPV）具有較高宿主特異性的昆蟲病毒，松毛蟲類害蟲的致命性傳染性天然病原體。3.2質型多角體病毒包涵體CytoplasmicPolyhedralinclusionbody（CPB）包埋病毒粒子的包涵體，是表示病毒數(shù)量的單位。3.3病毒生防制劑Virusbiocontrolpreparations病毒離心沉淀物加入礦物油及保護劑等制成的超低容量噴霧制劑。4松毛蟲質型多角體病毒生防制劑生產(chǎn)4.1松毛蟲病毒增殖參照云南省林學會團體標準“松毛蟲質型多角體病毒林間大圍欄增殖技術規(guī)程”，獲得生防制劑生產(chǎn)蟲源。4.1.1預處理往裝滿50kg罹病蟲的容器桶中，每桶加入剛好淹沒罹病蟲體的清水，在室溫下，浸泡14d~16d。4.1.2切碎2T/YNFS006—2023把4.2.1中經(jīng)浸泡后的罹病蟲體，用斬拌機，切成1cm~2cm的組織碎塊。洗脫過濾將切至1cm~2cm的罹病蟲段，置于攪拌機中，加入清水，淹沒蟲段，以400r/min~600r/min攪拌7min~10min后，再放入脫水機中，在600r/min轉速下脫水5min，在脫水機出液口用20目尼龍紗網(wǎng)過濾后得粗濾液，將大的蟲尸組織塊去掉。再在脫水機出液口用120目濾網(wǎng)將粗濾液過濾得粗提液。4.1.3離心分離在室溫下將粗提液用離心機在6800轉/min的轉速下離心5min得到松毛蟲質型多角體病毒濃縮液Ⅰ,松毛蟲質型多角體病毒含量達1×109CPB/ml以上時，即達到合格的濃縮液Ⅰ,未達含量標準，需延長離心時間，再檢測。4.1.4真空干燥將病毒濃縮液Ⅰ放入真空干燥機中，調整溫度為28℃~35℃、負0.9Pa大氣壓下，真空干燥10h~15h，獲得松毛蟲質型多角體病毒濃縮液Ⅱ。4.1.5質檢對上述干燥后的病毒濃縮液進行取樣，采用血球計數(shù)板法測定松毛蟲質型多角體病毒含量，松毛蟲質型多角體病毒含量達15×109CPB/ml以上時，即達到合格的病毒濃度。若濃度未達到，則再次進行真空干燥。4.1.6制劑制備將病毒濃縮液Ⅱ置于真空干燥機的料罐中，每100kg松毛蟲質型多角體病毒濃縮液Ⅱ加入30kg皂化甘油（市售）和500g分析純活性炭(細度120目以上)，關好料罐，啟動運轉真空干燥機，運轉1h左右，讓其充分混和均勻，制成病毒生防制劑。4.1.7包裝將上述經(jīng)檢驗合格的的松毛蟲質型多角體病毒制劑用避光容器密閉包裝，并貼上標簽。包裝、標簽應符合GB/T3796的規(guī)定。5病毒制