ICS65.020.01CCSICS65.020.01CCSB05廊 坊 市 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB1310/T345—2024平菇液體菌種制備技術(shù)規(guī)范2024-06-28發(fā)布 2024-07-28實(shí)施廊坊市場(chǎng)監(jiān)理局 發(fā)布DB1310/T345—2024DB1310/T345—2024II前 言本文按GB/T1.1—2020《準(zhǔn)工導(dǎo)則 第部分標(biāo)化件結(jié)和起規(guī)》起草。本文件由廊坊市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局提出。本文件主要起草人：周志國(guó)、陳文杰、解春艷、王艷、侯桂森、任思竹、付強(qiáng)、閆訓(xùn)友、史振霞、張瑞青、杜偉娜、王素霞、喬麗秀、李春葉。DB1310/T345—2024DB1310/T345—2024PAGEPAGE1平菇液體菌種制備技術(shù)規(guī)范范圍本文件規(guī)定了平菇液體菌種的基本要求、生產(chǎn)技術(shù)和生產(chǎn)檔案等要求。本文件適用于平菇液體菌種的制備。（GB150 GB5749 GB19172 GB50073 GB/T4789.28 食微物學(xué)驗(yàn)培基試質(zhì)量求GB/T12728 用術(shù)語(yǔ)NY/T528 GB/T12728界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。液體菌種在生物發(fā)酵罐中通過(guò)深層培養(yǎng)(液體發(fā)酵)技術(shù)生產(chǎn)的液體形態(tài)的食用菌菌種。母種經(jīng)各種方法選育得到的具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，以玻璃試管為培養(yǎng)容器和單位，也稱一級(jí)種、試管種。液體菌種菌齡菌種接入培養(yǎng)基開(kāi)始計(jì)算的液體菌種培養(yǎng)時(shí)間。發(fā)酵罐空消對(duì)尚未加水投料的空發(fā)酵罐進(jìn)行高壓滅菌。發(fā)酵罐實(shí)消指對(duì)投料后的發(fā)酵罐進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。通氣量單位時(shí)間通入發(fā)酵罐中無(wú)菌空氣體積與發(fā)酵罐體積的比值。菌種活力菌種的生長(zhǎng)、繁殖能力。人員要求工作人員應(yīng)該保持個(gè)人衛(wèi)生，進(jìn)液體菌種發(fā)酵車間須穿戴經(jīng)滅菌處理的工作服、口罩、鞋、帽。場(chǎng)所要求NY/T528GB5749要求。廠房及設(shè)施要求廠房設(shè)計(jì)應(yīng)符合NY/T528要求。潔凈車間應(yīng)設(shè)有多功能實(shí)驗(yàn)室、菌種保藏室、無(wú)菌接種室、搖瓶室、發(fā)酵罐室，設(shè)計(jì)符合GB50073要求。生產(chǎn)設(shè)備要求GB150工藝流程步驟如圖1所示。圖1 工藝程DB1310/T345—2024DB1310/T345—2024PAGEPAGE3母種活化配方及操作流程應(yīng)符合NY/T528要求?；罨竽阜N質(zhì)量應(yīng)符合GB19172要求。容器使用無(wú)色或近無(wú)色專用玻璃三角甁做搖瓶,使用硅膠塞或?qū)Ｓ梅饪谕笟饽みM(jìn)行封口。生產(chǎn)用水應(yīng)符合GB5749要求，培養(yǎng)基質(zhì)應(yīng)符合NY/T528要求，玉米粉過(guò)30目篩。其中，培養(yǎng)基配方根據(jù)成分不同，分為配方1和配方2：120g5g2g1g0.5g，維生素B110mg1L，pH6.0～6.5；210g20g5g2g2g1g，B110mg1L，pH6.0～6.5。滅菌121～12225min。接種塊～823～2524h25℃±1180r/min5d～6d1h80100℃，煮沸1h40min～60min。生產(chǎn)用水應(yīng)符合GB5749要求，培養(yǎng)基質(zhì)應(yīng)符合NY/T528要求，玉米粉過(guò)30目篩。其中，培養(yǎng)基配方根據(jù)成分不同，分為配方1和配方2：18g15g3g2g2g1g，維B110mg0.4g1L，pH6.0～6.5；210g20g（）15g3g2g，硫酸1g0.4g1L，pH6.0～6.5。60%～70%，加入0.41min～2min0.05MPa0MPa.11MP80m～0i30mi，30min冷卻0MPa，0.01MPa0.04MPa～0.05MPa25接種0.5‰～175950.01MPa～0.05MPa，23℃～256d～7d。平菇發(fā)酵罐液體菌種感官見(jiàn)表1。表1 平菇酵液菌感要求項(xiàng)目要求菌液色澤菌絲球或菌絲片段呈白色，菌液呈淺棕色菌液形態(tài)培養(yǎng)液澄清透明，菌絲球、菌絲片段均勻懸浮于液體中，不分層，直徑小于3.5mm菌液氣味有平菇液體培養(yǎng)時(shí)特有的香氣，無(wú)酸、臭等異味，發(fā)酵罐排氣口氣味正常，無(wú)明顯改變顯微鏡下菌絲形態(tài)可見(jiàn)平菇菌種液體培養(yǎng)中特有的菌絲形態(tài)，菌絲粗壯，分支較少，無(wú)雜菌pH5.3～6.0菌絲濕重（g/mL）0.2～0.25菌種活力檢測(cè)菌絲日平均生長(zhǎng)速度不低于0.5cm霉菌無(wú)細(xì)菌無(wú)發(fā)酵罐液體菌種檢測(cè)方法如下：——形態(tài)學(xué)觀察：主要是通過(guò)肉眼觀察菌球形態(tài)，包括菌液色澤、菌液形態(tài)、通過(guò)鼻嗅檢測(cè)菌液氣味，通過(guò)顯微鏡觀察菌絲體形態(tài)?！猵H測(cè)定：通過(guò)pH計(jì)或pH試紙測(cè)定菌液酸堿度。pH小于5為不正常。10000r/m