一、填空題

1、植物組織培養(yǎng)成功與否，一方面取決于培養(yǎng)材料本身的性質(zhì);另一方面取決于培養(yǎng)基的

種類和成分。

2.一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成—細(xì)胞團(tuán)的現(xiàn)象稱為"脫分

化"。

3植物組織培養(yǎng)技術(shù)的三大難題分別為褐變、污染和玻璃化o

4具有防止褐變作用的維生素是維生素C。

5病毒在植物體內(nèi)的運(yùn)轉(zhuǎn)方式有短距離運(yùn)轉(zhuǎn)和長(zhǎng)距離運(yùn)轉(zhuǎn)兩種,前者經(jīng)過(guò)胞間連絲

向鄰近細(xì)胞中擴(kuò)散，速度很慢。后者通過(guò)寄主植物韌皮部的疏導(dǎo)組織隨著營(yíng)養(yǎng)輸送進(jìn)行轉(zhuǎn)移,速度很

快。

6、6-BA/NAA的高低決定了外植體的發(fā)育方向，比值低時(shí)促進(jìn)根的生長(zhǎng)，這時(shí)—分化

占主導(dǎo)地位；比值高促進(jìn)—苗—的生長(zhǎng)，這時(shí)—分裂—占主導(dǎo)地位；懸浮培養(yǎng)的材料必須達(dá)到懸浮培養(yǎng)

物質(zhì)分散性多、細(xì)胞核較小均一性好和生長(zhǎng)迅速等三個(gè)要求。

7、連續(xù)培養(yǎng)是指在培養(yǎng)過(guò)程中，以不斷抽取用過(guò)的培養(yǎng)基并注入新鮮的培養(yǎng)基，使培養(yǎng)不

斷得到養(yǎng)分補(bǔ)充，保持其穩(wěn)定狀態(tài)的培養(yǎng)。

8.培養(yǎng)基的母液一般是配成大量元素，微量元素，維生素和氨基酸4類存放備用。MS培養(yǎng)基

中組成大量元素的鹽類分別是—硝酸鉀—和—硝酸鎂

9.一般情況下，細(xì)胞分裂/生長(zhǎng)素的比值高，有利于愈傷組織長(zhǎng)—芽比值低有利于長(zhǎng)—根

10.在植物的材料滅菌中，酒精的濃度用70%~75%,處理時(shí)間一般在幾秒至幾十秒范圍，是靠_使蛋白質(zhì)

凝固—?dú)⒕模簧臐舛纫话阌?%~2%,處理的時(shí)間在5~10min范圍，升汞是靠_Hg2+_殺菌的；殺菌劑中的

次氯酸鈉是靠_C10-_殺菌的。

11.培養(yǎng)植物適宜的溫度大多在_25±2℃_,光照強(qiáng)度在_1000lx_,光照時(shí)間在_16h_。

12、進(jìn)行熱處理植物脫毒的溫度在_85℃__左右。

13、配制螯合態(tài)鐵鹽需要的成分是_FeSOa?7H2O_和_Naz-EDTA_。

14、培養(yǎng)基中有機(jī)態(tài)N素營(yíng)養(yǎng)主要是殖態(tài)￡和鎂態(tài)氮。

15、原生質(zhì)體的融合可實(shí)現(xiàn)_體細(xì)胞_的雜交，其融合的方式分為_(kāi)自發(fā)融合_和_誘導(dǎo)融合—兩類。

16、從再生植株倍性來(lái)看，小抱子培養(yǎng)通常產(chǎn)生單倍體植株,胚培養(yǎng)通常產(chǎn)生二倍體植株,胚

乳培養(yǎng)通常產(chǎn)生三倍體植株。

17.進(jìn)行植物組織培養(yǎng)最基本的前提條件是配置培養(yǎng)基。

18.離體葉片在誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，一般從葉緣或葉脈處容易發(fā)生愈傷組織。

19.某些生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)及抗生素、酶類物質(zhì)遇熱不穩(wěn)定，對(duì)其滅菌時(shí)不能進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,而要進(jìn)行

過(guò)濾方法除菌。

20配制培養(yǎng)基時(shí)，一般先配制母液，其目的在于—使用方便—和—用量準(zhǔn)確

21分生區(qū)域內(nèi)無(wú)維管束，病毒只能通過(guò)—胞間連絲—傳遞。

22在無(wú)毒苗的組織培養(yǎng)中，外植體的大小與其成活率成—正比而與脫毒效果成—反比

二、單項(xiàng)選擇題

1、（C）可作為植物外植體的表面消毒劑是O

A.漂白粉和水B.次氯酸鈉溶液和聚乙二醇C.氯化汞和新潔爾滅D.酒精和氯化鈉

2、（B）大多數(shù)植物組織培養(yǎng)最適溫度一般為℃o

A.37±1℃B.26±2℃C.16±2℃D.4±2℃

3、（A）在適宜的培養(yǎng)條件下，還可使愈傷組織長(zhǎng)期傳代生存下去，這種培養(yǎng)稱為o

A.繼代培養(yǎng)B.再分化培養(yǎng)C.胚狀體培養(yǎng)D.馴化

4、（B）大多數(shù)植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基最適pH為o

A.5.0-7.0B.5.0-6.0C.3.0-4.0D.7.0-8.0

5、（A）外植體褐變的原因是o

A.外植體中的多酚氧化酶被激活，使細(xì)胞的代謝發(fā)生變化。

B.外植體中的琥珀酸脫氫酶被激活，使細(xì)胞的代謝發(fā)生變化。

C.外植體中的磷酸化酶被激活，使細(xì)胞的代謝發(fā)生變化。

D.外植體中的三磷酸腺甘酶被激活，使細(xì)胞的代謝發(fā)生變化。

6.植物組培初代接種易污染的可能原因_BC_。

A材料過(guò)嫩B材料過(guò)老C接種材料過(guò)大D每瓶接種數(shù)量太少

7.影響培養(yǎng)基凝固程度因素有_ADo

A瓊脂的質(zhì)量好壞；B高壓滅菌的時(shí)間；C高壓滅菌的溫度；D培養(yǎng)基的PH

8.愈傷組織不分化、生長(zhǎng)過(guò)旺、疏松，其原因有_C_

A糖的濃度過(guò)高B培養(yǎng)基的滲透壓過(guò)低C生長(zhǎng)素和分裂素過(guò)高D生長(zhǎng)素和分裂素過(guò)低

9.有一種植物經(jīng)初代培養(yǎng)得到4株無(wú)菌苗，以后按每36天繼代增殖一次，每次增殖倍數(shù)為3倍，一

年后繁殖苗有_C

A3X4'°株B4X3'2株C4X3'°株D3X4"株

10.下列不屬于生長(zhǎng)素類的植物激素是—AC。-----------------------------------

NAA（蔡乙酸）、IBA（丐I口朵丁酸）、IAA

ABA；BNAA；CZT；D2.4-D6（嗎I噪乙酸）、苯乙酸（PAA）、2,4-D

（合成植物生長(zhǎng)素）都屬于生長(zhǎng)素類，

11.植物組織培養(yǎng)可用于：ABCDo

A快速繁殖；B脫除病毒；C提高品質(zhì)；D育種；E減少品種變異

12、誘導(dǎo)試管苗分化叢芽，培養(yǎng)基的調(diào)整應(yīng)Bo

A加大生長(zhǎng)素的濃度B加大分裂素的濃度C加活性炭D降低鹽的濃度。

13.下列不屬于MS中微量元素的鹽是ABDo

ANH4NO3；BKNO3；CZnSO4.7H20;DMgS04.7H20

14.對(duì)生根培養(yǎng)不起作用的激素是：_A_。

AGA；BIAA；CNAA；DIBA

15、(D)在下列選項(xiàng)中，不需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是d。

A、利用基因工程培育抗棉鈴蟲(chóng)的棉花植株

B、利用細(xì)胞工程技術(shù)培養(yǎng)“番茄一馬鈴薯”雜種植株

C、利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株

D、利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，得到染色體數(shù)目加倍的植株

16、(C)植物組織培養(yǎng)形成的愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng)，又可以分化形成根、芽等器官，這一過(guò)程稱

為o

A、脫分化B、去分化C、再分化D、脫分化或去分化

17、(B)下列哪種不是原生質(zhì)體分離所用的酶—Bo

A、纖維素酶B、淀粉酶C、果膠酶D、半纖維素酶

18、(A)在花藥培養(yǎng)中下列哪種不是花粉的發(fā)育過(guò)程_Ao

A、營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育途徑B、生殖細(xì)胞發(fā)育途徑

C、胚狀體發(fā)育途徑D、花粉均等分裂途徑

19、(D)下列哪種在MS培養(yǎng)基中不起促進(jìn)生長(zhǎng)作用——Do

A、氨基酸B、肌醇C、維生素D、瓊脂

20、(B)下列技術(shù)培育出的新個(gè)體中，遺傳物質(zhì)只來(lái)源于一個(gè)親本的是o

①細(xì)胞組織培養(yǎng)②細(xì)胞融合③桿插④誘導(dǎo)產(chǎn)生多倍體⑤雜交育種⑥轉(zhuǎn)基因工程

A、①④B、①③C、②④D、⑤⑥

21、(a)下列那種不是無(wú)性繁殖的器官o

A、種子B、枝條C、塊莖D、塊根

22、(b)植物離體保存的主要步驟是o

①離體培養(yǎng)物的保存②離體培養(yǎng)與祛除病原物③種質(zhì)離體收集④遺傳穩(wěn)定性鑒定

A、①②③④B、③②①④C、②④①③D、①②④③

23、（c）原生質(zhì)體純化步驟大致有如下幾步o

①將收集到的濾液離心，轉(zhuǎn)速以將原生質(zhì)體沉淀而碎片等仍懸浮在上清液中為準(zhǔn)，一般以500r/min離

心15min。用吸管謹(jǐn)慎地吸去上清液。

②將離心下來(lái)的原生質(zhì)體重新懸浮在洗液中（除不含酶外，其他成分和酶液相同），再次離心，去上清液,

如此重復(fù)三次。

③將原生質(zhì)體混合液經(jīng)篩孔大小為40?100um的濾網(wǎng)過(guò)濾，以除去未消化的細(xì)胞團(tuán)塊和篩管、導(dǎo)管等雜

質(zhì)，收集濾液。

④用培養(yǎng)基清洗一次，最后用培養(yǎng)基將原生質(zhì)調(diào)到一定密度進(jìn)行培養(yǎng)。一般原生質(zhì)體的培養(yǎng)密度為10,?

106/mlo

A、①②③④B、③②①④C、③①②④D、②③①④

24、（c）下列有關(guān)細(xì)胞全能性的含義，正確的是o

A、每個(gè)生物體內(nèi)的所有細(xì)胞都具有相同的功能

B、生物體內(nèi)的任何一個(gè)細(xì)胞可以完成該個(gè)體的全部功能

C、生物體的每一個(gè)活細(xì)胞都具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能

D、生物體的每個(gè)細(xì)胞都經(jīng)過(guò)產(chǎn)生、分裂、分化、生長(zhǎng)、衰老、死亡的全過(guò)程

25、（d）下列不屬于活性炭在組織培養(yǎng)中的作用是o

A、吸附有毒物質(zhì)

B、減少褐變，防止玻璃化

C、創(chuàng)造黑暗環(huán)境，增加培養(yǎng)基的通透性，利于根的生長(zhǎng)

D、增加培養(yǎng)基中的養(yǎng)分

三、判斷題

1、（J）胚狀體的維管組織與母體結(jié)構(gòu)和外植體的維管組織一般沒(méi)有聯(lián)系。

2、（義）培養(yǎng)基當(dāng)中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例高時(shí)，僅形成愈傷組織。

3、（X）對(duì)植物器官或愈傷組織上分離出的單細(xì)胞（或小細(xì)胞團(tuán)）進(jìn)行培養(yǎng)，形成單細(xì)胞無(wú)性系或再

生植株的技術(shù)稱為植物組織培養(yǎng)技術(shù)。

4、（J）植物組織與細(xì)胞培養(yǎng)方法生產(chǎn)出藥品，農(nóng)藥，香料，色素及食品添加劑。

5、（X）超低溫保存是指在-100℃溫下使細(xì)胞代謝和生長(zhǎng)處于基本停止的狀態(tài)，在適宜的條件下可迅

速繁殖，生出新的植株，并保持原來(lái)的遺傳特性。

6、（X）FAD法可顯示細(xì)胞內(nèi)脫氫酶的活性，脫氫酶使FAD還原生成一種紅色的物質(zhì)，作為檢驗(yàn)活細(xì)

胞的方法。

7、（X）蔗糖可作為滲透性冰凍保護(hù)劑。

8、（X）一方親本的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)分另一方親本的少量核物質(zhì)和全部細(xì)胞質(zhì)融合

9、（J）有些植物對(duì)病毒極為敏感，一旦感染病毒就會(huì)在其葉片乃至全株上表現(xiàn)特有的病斑，把這種

植物稱為病毒敏感植物或指示植物。

10（V）花藥和花粉培養(yǎng)可獲得單倍體植株。

叫細(xì)胞質(zhì)雜交。

四、名詞解釋

1、脫分化有高度分化能力的植物組織或器官，產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程。

2、愈傷組織植物各器官的外植體在離體的條件下，經(jīng)細(xì)胞脫分化（等一系列過(guò)程改變了它們?cè)械?/p>

特性）而形成的一種能迅速增殖的不特定結(jié)構(gòu)和功能的細(xì)胞團(tuán)，稱為愈傷組織。

3、人工種子是指將植物離體培養(yǎng)產(chǎn)生的體細(xì)胞胚包埋在含有營(yíng)養(yǎng)成分和保護(hù)功能的物質(zhì)中，在適宜

的條件下發(fā)芽出苗的顆粒體。

4、胚狀體在離體或活體條件下，通過(guò)體細(xì)胞經(jīng)原胚期、球形胚期、心形胚期、魚雷胚期和子葉期等階

段形成的胚叫體細(xì)胞胚狀體。

5、植物快速繁殖利用離體培養(yǎng)技術(shù)，將來(lái)自優(yōu)良植株的器官、組織和細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，在短期內(nèi)

獲得大量遺傳性一致的個(gè)體的方法

6、看護(hù)培養(yǎng)把單個(gè)細(xì)胞置于一塊活躍生長(zhǎng)的愈傷組織（也稱看護(hù)愈傷組織，nursecaIIi）上培養(yǎng)，

在愈傷組織和培養(yǎng)的細(xì)胞之間用一片濾紙相隔。這培養(yǎng)的單細(xì)胞長(zhǎng)出微小的細(xì)胞團(tuán)之后，再移至瓊脂培養(yǎng)基

上。

7、植物種質(zhì)保存利用天然或人工創(chuàng)造的適宜環(huán)境，使個(gè)體中所含有的遺傳物質(zhì)保持遺傳完整性，有

高的活力，能通過(guò)繁殖將其遺傳特性傳遞下去。

8、連續(xù)培養(yǎng)

是利用特別的培養(yǎng)容器進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)的一種方式。連續(xù)培養(yǎng)過(guò)程中，不斷注入新鮮培養(yǎng)基，排掉

等體積的用過(guò)的培養(yǎng)基，培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)得到不斷補(bǔ)充。

9、馴化或煉苗：在移植之前必須對(duì)試管苗進(jìn)行提高其適應(yīng)能力的鍛煉，使植株生長(zhǎng)粗壯，增強(qiáng)小苗體質(zhì)

以提高移苗成活率。同時(shí)進(jìn)一步將瓶?jī)?nèi)植物打開(kāi)進(jìn)行煉苗。使試管苗慢慢適應(yīng)外界環(huán)境。這個(gè)過(guò)程叫做馴化

或煉苗。有瓶煉和盤煉，移栽方式有容器移栽和大田移栽。

五、簡(jiǎn)答題

（一）、某培養(yǎng)基的配方是MS+BA1.5mg/L+NAA2.5mg/L+lBA1.0mg/L+2.5%蔗糖+0.7%瓊脂粉。

MS母液的濃度分別是：大量元素50倍，微量元素100倍，鐵鹽20倍，有機(jī)物100倍；BA母液濃度1.0mg/ml,

NAA母液濃度0.5mg/ml,IBA母液濃度0.2mg/ml。栗配制800ml該培養(yǎng)基，需要吸取各種母液各多少ml?分

別稱取蔗糖、瓊脂粉各多少克？（要求寫出計(jì)算步驟）

BA=0.8*1.5/1=1.2ml

大量元素:800/50=16ml

NAA=0.8*2.5/0.5=4ml微量元素：800/100=8ml

鐵鹽：800/20=40ml

IBA=0.8*1/0.2=4ml有機(jī)物：800/100=8ml

蔗糖=800*2.5%=20g

瓊脂粉=800*0.7%=5.6g

Ms綠色書23頁(yè)表

（二）、如何減輕試管苗玻璃化現(xiàn)象？如何防止外植體的真菌污染？

1.（第四章21頁(yè)）（1）利用固體培養(yǎng)方法，增加瓊脂濃度，降低培養(yǎng)基中的滲透勢(shì)，造成細(xì)胞吸水阻

遏。或提高培養(yǎng)基中蔗糖含量或加入滲透劑，減少培養(yǎng)基中植物材料可獲得的水分，這也可以抑制玻璃化的

發(fā)生。

（2）適當(dāng)降低培養(yǎng)基中的細(xì)胞分裂素和赤霉素的濃度?；蛘撸m當(dāng)增加培養(yǎng)基中Ca、Mg、Mn、K、P、Fe、

Cu、Zn元素含量，降低N和CL元素比例，特別是降低胺態(tài)氮的濃度，提高硝態(tài)氮量。

（3）增加自然光照。因?yàn)樽匀还庵械淖贤饩€能促進(jìn)試管苗成熟。

（4）改善培養(yǎng)器皿的氣體交換狀態(tài)封口膜

（5）在培養(yǎng)基中添加其他物質(zhì)。如添加馬鈴薯汁可降低油菜的玻璃苗的產(chǎn)生頻率。

2.（第三章11頁(yè)）

在接種前栗求無(wú)菌室內(nèi)做到用空氣循環(huán)過(guò)濾裝置使空氣過(guò)濾滅菌或通過(guò)紫外線照射滅菌外，再利用超凈

工作臺(tái)接種前，應(yīng)開(kāi)機(jī)15min以達(dá)到空氣的充分過(guò)濾滅菌。而且接種時(shí)嚴(yán)格操作，如在接種前去掉橡皮筋，

打開(kāi)棉塞時(shí)動(dòng)作要輕及去掉瓶塞后瓶子應(yīng)拿成斜角，最好瓶口放在酒精火焰的前方等等。

（三）、簡(jiǎn)答出一般莖段是怎樣選材消毒和接種的？

選材：較幼嫩的材料，器官的生理狀態(tài)和發(fā)肓年齡，外植體的大小為0.5—1.0cm（第三章3