基于中藥復方藥材的感冒膠囊的制備工藝研究摘要該項目選用藿香，葛根，穿心蓮，連翹和瓜蔞5味中藥材制成中藥復方，將中藥化學研究與現代制備工藝相結合，從中藥復方藥材中提取，分離純化，干燥和制劑成型等方面進行了研究，通過指標性成分的質量監(jiān)測和控制，將中藥復方制成適合夏季感冒或者上呼吸道感染患者使用的膠囊劑。這種制劑如果在臨床上推廣使用，會極其方便病人。本研究通過查閱文獻資料，確定各味中藥的有效藥理成分及化學性質，根據中藥化學成分的特點，初步確立提取方法，采用單因素考察法、正交法制定藿葛膠囊最適宜的制備工藝，包括藥材提取方法、提取時間、溶媒的選擇、溶媒加入量、分離純化方法及工藝、制粒方式、干燥溫度及時間、裝量。經本研究表明藿香，葛根，穿心蓮，連翹，瓜蔞等藥材提取工藝較為合理且數據可靠，藿葛膠囊的成型工藝滿足要求;HPLC法測定膠囊中葛根的含量，該法，操作簡單，準確，重現性良好，且其它成分不受干擾，能有效進行質量評價與控制。關鍵詞：藿葛膠囊；制劑工藝；質量標準目錄TOC\o"1-3"\h\u19399第一章緒論 .32結果：12倍量(v/w)的乙醇能夠使95%以上的成分滲漉提取出來，70%乙醇洗脫較65%乙醇穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的含量略高。稱市售穿心蓮加3倍量70%乙醇，室溫浸漬5h后開始滲漉，流速10-15mL/分，收集滲漉10倍量。55C減壓回收乙醇，至基本無醇味并濃縮至浸膏。55C減壓干燥、粉碎、即得。（3）結論70%乙醇，3倍量常溫浸泡5h,滲漉速度為10～15mL/min,采集10倍滲漉量。3.1.4葛根、瓜菱與廣蘊香、連翹提油后的藥渣水煎醇沉工藝的正交試驗三萜皂苷和有機酸都是水溶法性的，所以用水煎煮的方法對其進行提取。瓜蔞中各組分對葛根素的檢測無顯著影響，故將其用作群藥進行煎煮考察其提取方法。取廣藿香和連翹精餾揮發(fā)油所得藥渣，用葛根和瓜蔞加水煎煮，過濾，棄去藥渣，合并濾液和水溶液，降壓濃縮到藥液的相對密度為1.2克/毫升左右（30℃），加乙醇3倍量，析出，常溫靜置一夜，過濾，棄出析出物，濾液循環(huán)乙醇，降壓烘干，得到干浸膏。測定了產量、葛根素（%），其結果如表3-11所示。表3-11葛根、瓜蔞與廣藿香、連翹藥渣水煎醇沉正交試驗因素-水平表水平因素煎煮時間（h）煎煮次數加水倍數11.01621.52832.03103.1.5分離、純化工藝研究將葛根，瓜蔞分別用廣藿香和連翹提取揮發(fā)油的藥渣用水煎煮，醇沉實驗葛根，瓜蔞和廣藿香分別用連翹提取揮發(fā)油，水煎液煎煮2次，每次煎煮1h,首次加10倍量水，二次加8倍量水。煎液過濾后棄渣。將2次濾液與廣霍香及連翹提油所得水溶液合并濃縮至相對密度為1.26g·mL（30C），并分別加濃縮藥液重2,

25,

3倍乙醇（w/w）.對浸膏得量進行了研究，得率及浸膏含葛根素量（%）.結果表明：濃縮藥液加3倍乙醇時浸膏產量，產率均較小，葛根素量最大，其數據見表3～12。表3-12葛根、瓜蔞與廣藿香、連翹濃縮液醇沉試驗結果樣品編號甲醇倍數浸膏得量得率浸膏中葛根素含量（%）12.09.729.9016.6422.58.868.2017.6033.08.407.8019.27結論：將葛根，廣藿香，連翹加水煎取濃縮液并加入3倍的醇，得到浸膏用量較少時利于膠囊劑的制備，葛根素用量略多。3.2制備工藝研究3.2.1廣藿香、連翹揮發(fā)油的β-環(huán)糊精包合物的工藝研究（1）包合的溫度選擇試驗量取揮發(fā)油2mL加入4mL乙醇中稀釋后加入β_環(huán)糊精8g和水48mL,分別于40℃,50℃,60℃,70℃和80℃包合混合1h;降溫，過濾，40℃烘干后得到揮發(fā)油β_環(huán)糊精。結果如表3-13所示。表3-13不同溫度下廣董香、連翹揮發(fā)油的β-環(huán)糊精包合試驗結果試驗溫度試驗溫度(°C)油(mL)β-環(huán)糊精(g)水(mL)包合物得量(g)包合物得率（%）揮發(fā)油回收量（mL）揮發(fā)油包和率（%）8028488.93590.351.3657028488.96290.011.2606028488.93290.001.2605028488.94590.401.25634028489.00091.011.3368結論：包合溫度對包和率影響不明顯。（2）廣藿香、連翹揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合的正交試驗量取廣藿香和連翹揮發(fā)油各2mL（加入乙醇2mL進行稀釋），滴入β-環(huán)糊精水溶液中，待滴液完成后繼續(xù)攪拌1h,冷卻，過濾，洗滌，烘干50℃,得到包合物，收回揮發(fā)油并計算包合率。（3）結論方差分析顯示因素B是主要的影響因素。較好的工藝是B3D1C3A3；根據生產的實際情況，調整后的方案是B2DIC2A3。以此為基礎方案進行實驗。即油脂：β-環(huán)糊精（mL:g）的配比為1：6、β-環(huán)糊：水（g:v）為1：8、混合時間為1.0h、包合溫度為80℃。3.2.2濃縮工藝研究（1）不同溫度保溫對穿心蓮內酯的影響取4中所得穿心蓮提取物在30°C-80°C下保溫2h，研究穿心蓮提物對穿心蓮內酯含量的影響。試驗結果表明：2h時80℃保溫對于穿心蓮提取物穿心蓮內酯的含量沒有顯著影響。數據見表3-14。表3-14不同溫度保溫2h對穿心蓮內酯含量的影響溫度(°C)室溫30-4040-5050-6060-7070-80穿心蓮內酯峰面積732676743980737972734450738361744611含量(%)3.403.453.433.413.433.46保溫2h，80℃對穿心蓮提取物穿心蓮內酯的含量沒有顯著影響。（2）濃縮溫度的考察取穿心蓮滲漉液70%、65%，分別于不同溫度，薄膜濃縮（減壓），研究了不同濃縮溫度對提取物，穿心蓮內酯及脫水后穿心蓮內酯的影響。結果表明，12h時30～80℃減壓濃縮效果不顯著。試驗結果如表3-15所示。表3-15不同濃縮溫度對穿心蓮內酯含量的影響濃縮溫度(°C)30-4040-5050-6060-7070-80穿心蓮內酯含量(%)3.683.773.723.673.67脫水穿心蓮內酯峰含量(%)29211842495388244612923598972362738脫水穿心蓮內酯含量(%)1.341.381.351.311.31（3）干燥溫度考察.取穿心蓮提取物水浴濃縮至流浸膏后，于55℃、85℃下進行減壓干燥24h和48h。結果：穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯在55℃（48小時）的干燥效果不顯著。85C（48小時）的效應顯著，前者降低，后者增加。但其總量并沒有達到一定的比例，并且仍在下降，試驗結果如表3-16所示。表3-16不同干燥溫度和時間對兩種穿心蓮內酯含量的影響溫度(°C)干燥時間558524482448穿心蓮內酯含量(%)3.843.842.771.32脫水穿心蓮內酯峰面積3734818360350240368484462722脫水穿心蓮內酯含量(%)4.874.835.335.86在12小時內，30~80℃的減壓濃縮下，對穿心蓮內酯的含量無顯著影響。穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯在55℃（48小時）的干燥效果不顯著。85℃（48小時）的效應顯著，前者降低，后者增加。但總量卻不成正比，甚至還在下降。結論在穿心蓮的提取工藝中，應在55℃進行濃縮干燥。低于55℃，在減壓下進行干燥；在群藥浸膏提取過程中，應在85℃的減壓下進行干燥，對提取液中的葛根素含量沒有任何影響。3.2.3制劑成型性研究（1）膠囊劑型的選擇因處方所含穿心蓮浸膏味極苦辛，片劑比膠囊劑過程煩瑣，使用硬膠囊劑比片劑更合適且硬膠囊劑崩解時限比片劑縮短，還適于迅速發(fā)揮該藥清熱、鎮(zhèn)痛等藥理作用。而且便于攜帶。（2）選擇輔料的依據輔料要有克服半成品吸潮粘滯現象的特點。利于制粒及灌裝，廉易獲得。淀粉：常作為輔料使用，性能穩(wěn)定，難溶于水，容易吸收水分。國產廉價。微晶纖維素：常作為輔料使用，性能穩(wěn)定，難溶于水，容易吸收水分。國產廉價。a-乳糖：常見輔料，特性穩(wěn)定，易溶于水，不易吸濕。國產比以上2種輔料貴。無水乙醇：是一種常見的輔料，性能穩(wěn)定，難溶，容易吸水。國產廉價。（3）未制粒工藝研究按各處方用量混勻、采用裝囊機裝入1號硬膠囊中，即得。處方1、2、3、4：葛根、廣藿香、連翹、瓜萎干浸膏，用量為1.805g；廣藿香和連翹揮發(fā)油的β-環(huán)糊精包合物用量為0.307g、穿心蓮干浸膏0.18g、淀粉0.454g/微晶纖維素0.454g/乳糖0.454g/淀粉0.227g，微晶纖維素0.227g。（4）制粒工藝稱取處方用量，混勻，加無水乙醇適量，制成軟材，擠壓過篩制粒，50°C烘干、整粒，裝入1#硬膠囊中，即得。處方1、2、3、4：葛根、廣藿香、連翹、瓜萎干浸膏，用量為1.805g；廣藿香和連翹揮發(fā)油的β-環(huán)糊精包合物用量為0.307g、穿心蓮干浸膏0.18g、淀粉0.454g/晶纖維素0.454g/乳糖0.454g，無水乙醇適量。（5）制備工藝確定綜合試驗與結果，確定藿葛膠囊的制備方法，其步驟為：取藿香，連翹加水6倍，用水蒸氣蒸餾法進行揮發(fā)油的提取，揮發(fā)油與水提取液另一器具采集。將藥渣和葛根，瓜蔞分別加入水中煎2次，第1次加入10倍量的清水，浸泡1h后，煎1h后過濾，收集濾液，第2次加入8倍量的清水煎1h后，過濾，丟棄藥渣。將上述濾液與上述水溶液合并后減壓濃縮到相對密度1.1～1.2克/毫升（30℃），降溫至常溫，加入乙醇使含醇量達到一定程度，靜置一夜后過濾即可。濾液回收乙醇。以及濃縮到相對密度為1.25～1.30克/毫升（80C）；減壓烘干后破碎。揮發(fā)油經β-環(huán)糊精（1:6）包合后在50℃烘干。穿心蓮經乙醇滲漉后采集10倍滲漉液。滲濾液在較低溫度（80℃）下回收乙醇，濃縮成清膏，清膏相對密度在1.28克/毫升左右，減壓低溫(55℃)烘干，破碎成細粉。將以上細粉攪拌均勻后加入適量淀粉，攪拌均勻后加入無水乙醇配制成軟材，制粒，烘干，整粒后裝入膠囊中即得。第四章藿葛膠囊質量標準研究藿葛膠囊的葛根主要活性成分是葛根素（Puerarin），化學性質比較穩(wěn)定，因此用高效液相色譜法對藿葛膠囊進行了含量測定。4.1方法的適用性實驗分別取樣液，陰性對照液和對照品，照第2章2.1條的色譜條件每份進樣10微米，測其HPLC圖譜如圖3所示。圖譜顯示葛根素色譜峰的峰形勻稱銳利，且與其他色譜峰有較好的分離，而陰性對照色譜中與葛根素色譜峰位保留時間一致的色譜峰不存在，說明陰性對照不存在干擾。4.2樣品提取方法的選擇4.2.1超聲波提取將產品內容物取細粉研末，取0.30克左右，準確稱定后置于具塞錐形瓶內，準確加30%，50mL乙醇，密塞入，稱定量，超聲處理10min,冷卻后，再次稱定量，以1:50mL乙醇補足減失量，振搖，過濾，得到續(xù)濾液，以微孔濾膜過濾（0.45pum），濾液為試樣溶液。4.2.2加熱回流提取取該品內容物，研為細粉，取0.30克左右，精密稱定量，置于索氏提取器內，加甲醇60mL,升溫回流萃取到無色時，將甲醇蒸干，殘渣加入甲醇溶解并定容到50mL,搖勻后過濾，得到續(xù)濾液，采用0.45pum微孔濾膜過濾，濾液即為樣品溶液。4.2.3冷浸提取將該產品內容物取細粉研末，取0.30克左右，準確稱定后置于具塞錐形瓶內，準確加甲醇50mL;稱量，搖勻后冷浸萃取24h;稱量，以甲醇補足減失量，搖勻后過濾，得到續(xù)濾液，經0.45um微孔濾膜過濾后濾液為樣品溶液。4.3提取溶劑的選擇葛根素對甲醇和乙醇均有良好的溶解度，將其分別用甲醇和稀乙醇作溶劑，根據樣品溶液的配制方法將其分別配制成樣品溶液并依法對葛根素進行了含量測定，其結果如表4-1所示，說明各溶劑提取結果基本一致。表4-1提取溶劑的選擇提取溶劑甲醇50%甲醇70%乙醇(葛根素含量(mg/g)21.8221.7821.874.4精密度試驗取對照品溶液在第2章2.1色譜條件下進樣檢測，反復進樣六次，峰面積RSD均達到0.32%。結果如表4-2所示表4-2精密度實驗結果試驗次數葛根素峰面積平均峰面積RSD(%)1564501825716991356875994561019856590880.6755653263656414564.5穩(wěn)定性試驗汲取藿葛膠囊樣品溶液（編號20121217）10pul于0、0.5、1、2、4、8h進樣檢測并記錄峰面積結果如表4-3所示。表4-3穩(wěn)定性試驗結果時間（h）葛根素峰面積平均峰面積RSD(%)061592660.55978413160655092614591160908351.104607381786122091結果表明：樣品溶液在8h內穩(wěn)定4.6討論（1）同等條件下揮發(fā)油的得量和浸泡時間沒有明顯關系，加水6倍揮發(fā)油得量更多，蒸餾4h,揮發(fā)油得率最高，為了節(jié)省成本可以考慮確定4h就可以。故提取揮發(fā)油的方法是加6倍的水，不浸、蒸餾4h、采集揮發(fā)油。（2）提取葛根應從節(jié)約資源和簡化操作等各種因素考慮，可以選擇的水煎工藝為加水10倍，浸泡1h,煎2次，1次為1h。（3）醇沉的最佳工藝是將藥液濃縮到相對密度1.10（45'C時進行熱測），在不調pH值的情況下，加入95%乙醇，使含醇量達到60%。將群藥水煎成濃縮液并加入3倍的醇，所得浸膏用量較小利于膠囊劑的制備，葛根素用量略有增加。（4）乙醇添加量至10倍量時穿心蓮內酯含量為91.07%,脫水穿心蓮內酯的含量為91.66%,滲漉為12倍量（V/W）時穿心蓮內酯類94.87%,脫水穿心內酯95.38%。從成本的角度出發(fā)，將乙醇洗脫體積定為10倍（v/w）。故穿心蓮的提取方法是在室溫下用3倍量乙醇浸泡5h滲漉，速度10～15mL/min;采集10倍滲漉量。（5）包合溫度對于包和率的影響并不顯著。在其它包合率影響因素（表7-2）中，因子B（油：β-環(huán)糊精比）是最重要的。較好的工藝是B3D1C3A3；根據實際情況，調整的方案是B2D1C2A3。最后確定最佳條件：以此為基礎方案進行實驗。即油脂：β-環(huán)糊精（mL:g）的配比為1：6;B-環(huán)糊精：水（g:v）為1：8;1.0h的攪拌時間和80C的包合溫度。（6）根據方中藥物有效成分采用相應提取，純化技術進行研究，對制備過程中關鍵點進行考察，制成膠囊劑。因條件所限，只開展藥學試驗研究而未中試和大量生產，只限于實驗室小量試驗研究而來不及開展藥理，毒理及其他臨床前和臨床研究。實驗研究因時間匆忙而有不足，需要后續(xù)進-步改進或新增研究項目。結語藿葛膠囊是以藿香、葛根、連翹為主要原料，采用水汽蒸餾方法對揮發(fā)性藥材藿香、連翹進行了提取，并對加水量、浸泡時間、是否浸泡等進行了研究；研究了用β-環(huán)糊精（1:6）包合揮發(fā)油的時間、溫度、比例和加水量；研究了提取藥渣和葛根、瓜蔞水的加水量、提取時間和提取次數：研究了穿心蓮乙醇滲透過程中醇含量的變化；通過實驗篩選，確定了提取工藝、成型工藝、輔料品種和加入量等工藝條件。該制劑成型性考察時，通過對輔料類型及用量的篩選，最終選擇糊精作為輔料，顆粒流動性較好，可以成功制備成膠囊。藿葛膠囊是以廣藿香、連翹為原料，加入6倍量水，經水蒸汽蒸餾提取，對揮發(fā)油、水浸提液進行分離；將葛根、瓜蔞加水煎煮，首次加10倍水量，浸泡1小時，濾出濾液；第二次加入8倍的清水，煎煮1小時，過濾，把殘渣扔掉；將上述濾液與上述的水溶液混合后，再減壓進行濃縮，直到具有1.1-12克/毫升（30℃）的相對密度，冷卻至室溫，加入乙醇，使其含量達到70%，然后放置過夜，過濾。濾液中回收乙醇；將其濃縮到相對密度為1.25一1.30(80℃)，減壓烘干，將揮發(fā)油與β_環(huán)糊精混合，50℃烘干；用70%滲漉乙醇穿心蓮；取10倍滲漉液，在較低溫度下回收乙醇；濃縮到相對密度在1.28g/ml的清膏（80℃）,減壓低溫(55°C)干燥，粉碎成細粉；將以上細粉攪拌均勻后加入適量淀粉，攪拌均勻后加入無水乙醇配制成軟材，制粒，烘干，整粒后裝入膠囊中即得。采用HPLC法(中國藥典2010年版一部附錄VID)測定葛根素的含量，經方法學檢驗，該方法具有良好的可行性和可控性。綜合以上初步得出藿葛膠囊提取工藝較為合理、制備方法切實可行、質量可控制。參考文獻[1]HugenPW，BurgerDM，KoopmansPP，etalSaquinavireoft-gelcapeules(Fortovase)givelowerexposurethanexpected，evenafterterahigh-fatbreakfast[J].PharmWorldSic，2002，24(3)：83-86.[2]MarvinCM，StraughnA，MhartreRM，etal.Thefleetofgelatincross-linkingonthebioequivalenceofhardandsoftgelatinacet-aminopbencapsules[J].PharmRes，2000.17(8)：962.[3]ZhangRX，NephrologyDO.Clinicalcurativeeffectobservationofvalsartancapsulescombinedwithambrettecapsuleintreatingdiabeticnephropathy[J].ChineseJournalof