廣東省華附南海實(shí)驗(yàn)高中2025屆高三第二次診斷性檢測生物試卷注意事項(xiàng)：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型（B）填涂在答題卡相應(yīng)位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2．作答選擇題時(shí)，選出每小題答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目選項(xiàng)的答案信息點(diǎn)涂黑；如需改動(dòng)，用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3．非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答，答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內(nèi)相應(yīng)位置上；如需改動(dòng)，先劃掉原來的答案，然后再寫上新答案；不準(zhǔn)使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4．考生必須保證答題卡的整潔。考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．在培養(yǎng)基中加入青霉素培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，并逐漸提高青霉素濃度，可得到抗藥性不斷增強(qiáng)的金黃色葡萄球菌品系。下列敘述正確的是（）A．金黃色葡萄球菌的抗藥性受多對等位基因控制B．全部抗藥性基因構(gòu)成了金黃色葡萄球菌品系的基因庫C．青霉素使金黃色葡萄球菌的抗藥性基因不斷突變加強(qiáng)D．金黃色葡萄球菌抗藥性增強(qiáng)過程發(fā)生了多個(gè)突變基因的重組2．油料種子萌發(fā)時(shí)，油脂水解生成脂肪酸和甘油，然后在多種酶的催化下形成葡萄糖，最后轉(zhuǎn)變成蔗糖，并轉(zhuǎn)運(yùn)至胚軸供給胚生長和發(fā)育（如下圖所示）。下列分析正確的是（）A．由油脂儲(chǔ)存能量不利于胚的生長和發(fā)育B．琥珀酸在線粒體內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)樘O果酸的過程形成了大量ATPC．油料種子萌發(fā)初期（真葉長出之前），干重先增加，后減少D．1分子蔗糖由2分子葡萄糖組成3．下列有關(guān)細(xì)胞中糖類和脂質(zhì)的敘述，正確的是（）A．淀粉是植物細(xì)胞的儲(chǔ)能物質(zhì)，均勻分布于各細(xì)胞B．染色體的組成成分是脫氧核糖和蛋白質(zhì)C．脂質(zhì)在哺乳動(dòng)物卵細(xì)胞形成中具有重要作用D．脂質(zhì)可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色4．人體的體溫調(diào)定點(diǎn)，在正常生理狀態(tài)下為37℃。如果體溫偏離這個(gè)數(shù)值，則通過反饋系統(tǒng)將信息傳回下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞，此中樞會(huì)整合這些信息并與調(diào)定點(diǎn)比較，相應(yīng)地調(diào)節(jié)散熱機(jī)制或產(chǎn)熱機(jī)制，維持體溫的相對穩(wěn)定。體溫調(diào)定點(diǎn)不是一成不變的，如正常人體因病毒感染引起的發(fā)熱過程分為體溫上升期、高溫持續(xù)期和體溫下降期。下圖為發(fā)熱體溫上升期，機(jī)體體溫調(diào)節(jié)過程示意圖。下列說法不正確的是（）A．激素甲和激素乙都是通過體液運(yùn)輸發(fā)揮作用B．體溫上升期，骨骼肌不自主收縮有助于增加產(chǎn)熱C．體溫升高后的持續(xù)期，人體的產(chǎn)熱量大于散熱量D．體溫調(diào)節(jié)過程體現(xiàn)了神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)是相互聯(lián)系的5．禽流感病毒中H5亞型能突破種間屏障感染人類，科研人員擬在新型流感疫苗研發(fā)中對人流感病毒H3亞型和禽流感病毒H5亞型進(jìn)行共預(yù)防。取兩種病毒的RNA逆轉(zhuǎn)錄分別獲得H5基因和H3基因，利用基因工程技術(shù)構(gòu)建含有這兩種基因的重組DNA，分三次每次間隔10天對小鼠進(jìn)行肌肉注射，測得其體內(nèi)針對H5蛋白和H3蛋白的抗體濃度迅速增加。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．肌肉注射后，細(xì)胞通過胞吞吸收重組DNAB．H5基因和H3基因均能在實(shí)驗(yàn)小鼠體內(nèi)表達(dá)C．新型流感疫苗使小鼠同時(shí)產(chǎn)生了兩種抗體，說明該實(shí)驗(yàn)小鼠沒有發(fā)生非特異性免疫D．使用上述兩種病毒分別刺激離體的實(shí)驗(yàn)小鼠脾臟淋巴細(xì)胞后效應(yīng)T細(xì)胞數(shù)量快速增加，說明新型流感疫苗誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生了細(xì)胞免疫6．下列關(guān)于生物進(jìn)化理論的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．染色體結(jié)構(gòu)變異可為生物進(jìn)化提供原材料B．在自然條件下，種群的基因頻率也可能發(fā)生變化C．同種生物不同表現(xiàn)型的個(gè)體對環(huán)境的適應(yīng)性可能不同D．種群基因型頻率的改變一定會(huì)導(dǎo)致基因頻率的改變二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）我國科學(xué)家目前正在探索培育過量表達(dá)蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因（TaSUT1A）的轉(zhuǎn)基因小麥，通過分析TaSUT1A在轉(zhuǎn)基因小麥中的遺傳及其在抗干旱環(huán)境中的作用，選育抗旱的轉(zhuǎn)基因小麥新品種。小麥屬于單子葉植物，下圖為基本技術(shù)流程示意圖。請回答下列問題：（1）為了大量擴(kuò)增分離得到的TaSUT1A，一般采用的技術(shù)是______________，該技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，其目的是______________________________。（2）一般采用相同的_______切割目的基因片段與載體，原因是_________________。（3）將構(gòu)建好的基因表達(dá)載體導(dǎo)入小麥細(xì)胞常用____________法，但成本較高；受體細(xì)胞經(jīng)脫分化形成愈傷組織，脫分化是讓已經(jīng)分化的細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)后失去其______________________的過程。（4）為了證明TaSUT1A是否表達(dá)，可以通過______________檢測有無蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白生成，并通過與________________中蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白含量的對比來確定TaSUT1A是否過量表達(dá)。8．（10分）請回答與大腸桿菌純化培養(yǎng)有關(guān)的問題：（1）制備培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在熔化后分裝前必須進(jìn)行______，培養(yǎng)基在接種前要進(jìn)行______滅菌。（2）純化大腸桿菌①通過接種在瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行連續(xù)劃線操作，將聚焦的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面，在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體，這種方法稱為___________。②用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)_____（是、否）需要設(shè)置對照組？為什么？________。（3）討論分析①純化大腸桿菌時(shí)，__________（可/不可）用加入抗生素的方法防止雜菌感染。②用該方法分享大腸桿菌時(shí)，從第二次劃線操作起，每次總是要從上一次劃線的末端開始劃線，并劃線數(shù)次，其原因是_______________________________________________。③大腸桿菌與酵母菌的最本質(zhì)區(qū)別是___________________________________________。9．（10分）白細(xì)胞介素是人體重要的淋巴因子，具有免疫調(diào)節(jié)、抑制腫瘤等多種功能。近年來科學(xué)家將藥用蛋白轉(zhuǎn)向植物生產(chǎn)，如圖是將人的白細(xì)胞介素基因?qū)腭R鈴薯中，培養(yǎng)生產(chǎn)白細(xì)胞介素的過程。（tsr為一種抗生素—硫鏈絲菌素的抗性基因）（1）提取人的白細(xì)胞介素基因適宜選用的限制酶是___________，不能使用限制酶SmaI的原因是___________。（2）除圖示方法外，也可從利用___________法構(gòu)建的cDNA文庫中獲取目的基因。獲得目的基因后可采用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增，需提供Taq酶和___________等。（3）將目的基因?qū)腭R鈴薯細(xì)胞常采用___________法，其原理是將目的基因?qū)隩i質(zhì)粒上的___________。（4）為篩選出含目的基因的馬鈴薯細(xì)胞，需要在培養(yǎng)基中添加___________。最終為了檢測目的基因是否在馬鈴薯中表達(dá)，可通過____________方法進(jìn)行分子水平的檢測。10．（10分）胡蘿卜素和花青素都是植物體內(nèi)重要的色素。請回答有關(guān)問題：（1）胡蘿卜素具有易溶于__________的特點(diǎn)，是_________（填“揮發(fā)性”或“非揮發(fā)性”）物質(zhì)。（2）現(xiàn)有乙醇和乙酸乙酯兩種溶劑，應(yīng)選用其中的__________作為胡蘿卜素的萃取劑，不選用另外一種的理由是_____________________________________。（3）花青素是構(gòu)成很多植物花瓣和果實(shí)顏色的主要色素之一，花青素主要存在于_________（填細(xì)胞器名稱）中。（4）花青素的提取工藝如下：實(shí)驗(yàn)原料加75%酒精添加金屬離子研磨組織勻漿水浴保溫?cái)嚢?0分鐘.離心上清液→測花青素提取率①75%酒精的作用是：______________________；若從食品安全角度考慮，則對金屬離子的要求是：______________________。②興趣小組分別對水浴溫度、某金屬離子的添加濃度進(jìn)行了探究實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，水浴溫度在69～71℃范圍內(nèi)，提取率提高；某金屬離子的添加濃度在0.1～0.3g/L范圍內(nèi)，提取率較高。他們認(rèn)為要達(dá)到最高提取率，還必須對水浴溫度和某金屬離子的添加濃度進(jìn)行進(jìn)一步優(yōu)化，并確定以此為探究課題。請擬定該課題名稱：_______________________________。11．（15分）（1）紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來提取和分離血紅蛋白，該過程中對采集到的新鮮血液要進(jìn)行洗滌和粗分離，洗滌紅細(xì)胞用的試劑是________，其目的是______________。紅細(xì)胞破裂后，需用離心的方法分離血紅蛋白溶液，離心后位于第_______層的液體是血紅蛋白水溶液。血紅蛋白提取液的純化過程是采用________方法。（2）下圖1表示制備固定化酵母細(xì)胞的有關(guān)操作，圖中的X溶液的作用是_________。在制備海藻酸鈉與酵母細(xì)胞的混合液時(shí)，應(yīng)將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，才能加入已活化的酵母細(xì)胞，目的是防止___________________________________。（3）為了探究某加酶洗衣粉中堿性蛋白酶含量與洗滌效果的關(guān)系，某同學(xué)通過實(shí)驗(yàn)獲得如上圖2所示的結(jié)果。由圖可知，加酶洗衣粉中堿性蛋白酶的最適含量是________%，本實(shí)驗(yàn)的自變量是______________________．

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、D【解析】

金黃色葡萄球菌屬于原核生物，沒有染色體，不能進(jìn)行有性生殖和減數(shù)分裂，所以其抗藥性差異的主要來源是基因突變；金黃色葡萄球菌存在著各種各樣的基因突變，青霉素對金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的抗藥性變異進(jìn)行選擇，最終得到抗藥性不斷增強(qiáng)的金黃色葡萄球菌品系?！驹斀狻緼、等位基因位于同源染色體的同一位置上，而金黃色葡萄球菌沒有染色體，A錯(cuò)誤；B、金黃色葡萄球菌品系的基因庫包括其含有的抗藥性基因在內(nèi)的所有基因，B錯(cuò)誤；C、青霉素對金黃色葡萄球菌突變產(chǎn)生的抗藥性基因進(jìn)行選擇，C錯(cuò)誤；D、金黃色葡萄球菌抗藥性增強(qiáng)過程發(fā)生了多個(gè)突變基因的重組，D正確。故選D。2、C【解析】

本題為脂肪轉(zhuǎn)化為葡萄糖的糖異生途徑，糖異生又稱為葡糖異生。由簡單的非糖前體（乳酸、甘油、生糖氨基酸等）轉(zhuǎn)變?yōu)樘牵ㄆ咸烟腔蛱窃┑倪^程。糖異生不是糖酵解的簡單逆轉(zhuǎn)。雖然由丙酮酸開始的糖異生利用了糖酵解中的七步進(jìn)似平衡反應(yīng)的逆反應(yīng)，但還必需利用另外四步酵解中不曾出現(xiàn)的酶促反應(yīng)，繞過酵解過程中不可逆的三個(gè)反應(yīng)。糖異生保證了機(jī)體的血糖水平處于正常水平?！驹斀狻緼、大多數(shù)植物種子以貯藏油脂為主，這是因?yàn)榕c糖類相比，相同質(zhì)量的油脂徹底氧化分解釋放出的能量比糖類多，因此油脂是更妤的儲(chǔ)能物質(zhì)，所以油脂儲(chǔ)存能量利于胚的生長和發(fā)育，A錯(cuò)誤；B、琥珀酸在線粒體內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)樘O果酸的過程中沒有形成大量ATP，B錯(cuò)誤；C、早期由于大量油脂轉(zhuǎn)變?yōu)檎崽?，蔗糖的氧元素含量高于油脂，?dǎo)致干重增加；之后大量蔗糖用于細(xì)胞呼吸等異化作用，被分解為二氧化碳和水等代謝廢物，導(dǎo)致干重減少，C正確；D、1分子蔗糖水解產(chǎn)物為1分子葡萄糖和1分子果糖，D錯(cuò)誤。故選C。3、C【解析】

脂質(zhì)包括脂肪、磷脂和固醇，固醇又包括膽固醇、性激素和維生素D。脂肪的作用是儲(chǔ)藏能量，緩沖壓力，減少摩擦，保溫；磷脂是構(gòu)成細(xì)胞膜、細(xì)胞器膜和細(xì)胞核膜的重要成分；膽固醇是構(gòu)成動(dòng)物細(xì)胞膜的重要成分，與細(xì)胞膜的流動(dòng)性有關(guān)；性激素能促進(jìn)生殖器官的生長發(fā)育，激發(fā)和維持第二性征及雌性動(dòng)物的性周期；維生素D能促進(jìn)動(dòng)物腸道對鈣磷的吸收，調(diào)節(jié)鈣磷的平衡?！驹斀狻緼、淀粉在植物不同細(xì)胞中的含量是不同的，A錯(cuò)誤；B、染色體的主要組成成分是DNA和蛋白質(zhì)，DNA的中文名稱是脫氧核糖核酸，B錯(cuò)誤；C、脂質(zhì)中的性激素在哺乳動(dòng)物卵細(xì)胞的形成中具有重要作用，C正確；D、脂質(zhì)中的脂肪才可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色，D錯(cuò)誤。故選C。4、C【解析】

據(jù)圖分析，圖示為體溫調(diào)節(jié)過程，包括神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)，激素甲表示下丘腦分泌的促甲狀腺激素釋放激素，乙表示垂體分泌的促甲狀腺激素，圖中增加產(chǎn)熱的方式有骨骼肌收縮和甲狀腺激素調(diào)節(jié)使代謝增強(qiáng)，減少散熱的方式是皮膚血管收縮。【詳解】A、激素調(diào)節(jié)的特點(diǎn)之一是通過體液運(yùn)輸，所以激素甲和激素乙都是通過體液運(yùn)輸發(fā)揮作用，A正確；B、體溫上升期，產(chǎn)熱量大于散熱量，骨骼肌不自主收縮有助于增加產(chǎn)熱，B正確；C、體溫升高后的持續(xù)期，人體的產(chǎn)熱量等于散熱量，C錯(cuò)誤；D、由圖可知，體溫調(diào)節(jié)過程是神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)相互聯(lián)系、共同作用的結(jié)果，D正確。故選C。5、C【解析】

1、體液免疫過程為：（1）感應(yīng)階段：除少數(shù)抗原可以直接刺激B細(xì)胞外，大多數(shù)抗原被吞噬細(xì)胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇；吞噬細(xì)胞將抗原呈遞給T細(xì)胞，再由T細(xì)胞呈遞給B細(xì)胞；（2）反應(yīng)階段：B細(xì)胞接受抗原刺激后，開始進(jìn)行一系列的增殖、分化，形成記憶細(xì)胞和漿細(xì)胞；（3）效應(yīng)階段：漿細(xì)胞分泌抗體與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合，發(fā)揮免疫效應(yīng)。2、細(xì)胞免疫過程為：（1）感應(yīng)階段：吞噬細(xì)胞攝取和處理抗原，并暴露出其抗原決定簇，然后將抗原呈遞給T細(xì)胞；（2）反應(yīng)階段：T細(xì)胞接受抗原刺激后增殖、分化形成記憶細(xì)胞和效應(yīng)T細(xì)胞，同時(shí)T細(xì)胞能合成并分泌淋巴因子，增強(qiáng)免疫功能。（3）效應(yīng)階段：效應(yīng)T細(xì)胞發(fā)揮效應(yīng)?！驹斀狻緼、重組DNA是大分子，肌肉注射后，存在于組織液中，細(xì)胞通過胞吞吸收大分子，A正確；B、因體內(nèi)針對H5蛋白和H3蛋白的抗體濃度迅速增加，說明是H5基因和H3基因在實(shí)驗(yàn)組小鼠細(xì)胞內(nèi)均表達(dá)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)作為抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生體液免疫的結(jié)果，B正確；C、注射疫苗后，小鼠非特異性免疫和特異性免疫都有發(fā)生，C錯(cuò)誤；D、使用病毒刺激分離的實(shí)驗(yàn)小鼠脾臟淋巴細(xì)胞，效應(yīng)T細(xì)胞增加明顯，說明此前疫苗已引發(fā)細(xì)胞免疫產(chǎn)生記憶T細(xì)胞，D正確。故選C。6、D【解析】

突變和基因重組可以為生物進(jìn)化提供原材料，自然選擇可以決定生物進(jìn)化的方向?！驹斀狻緼、染色體結(jié)構(gòu)變異屬于可遺傳的變異，可為生物進(jìn)化提供原材料，A正確；B、在自然條件下種群的基因頻率也可能發(fā)生變化，生物也會(huì)發(fā)生進(jìn)化，B正確；C、同種生物不同表現(xiàn)型的個(gè)體對環(huán)境的適應(yīng)性也可能不同，如樺尺蠖，C正確；D、種群基因型頻率的改變不一定會(huì)導(dǎo)致基因頻率的改變，如AA:Aa:aa=1:2:1和只有Aa相比，基因頻率相同，D錯(cuò)誤。故選D?！军c(diǎn)睛】可遺傳的變異包括基因突變、基因重組和染色體變異均可為生物進(jìn)行提供原材料。二、綜合題：本大題共4小題7、PCR技術(shù)根據(jù)這一序列合成引物限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）獲得相同的黏性末端基因槍特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞抗原-抗體雜交普通正常小麥【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）為了大量擴(kuò)增分離得到的TaSUT1A，一般采用的是PCR技術(shù)，該技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，其目的是根據(jù)這一序列合成引物。（2）一般采用相同的限制酶切割目的基因片段與載體，這樣可獲得相同的黏性末端，便于DNA連接酶連接。（3）將構(gòu)建好的基因表達(dá)載體導(dǎo)入小麥細(xì)胞常用基因槍法。愈傷組織在結(jié)構(gòu)形態(tài)上的特點(diǎn)是呈無固定形態(tài)的薄壁細(xì)胞。脫分化是讓已經(jīng)分化的細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)后失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過程。（4）為了證明TaSUT1A是否表達(dá)，可以通過抗原-抗體雜交檢測有無蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白生成，并通過與普通正常小麥中蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白含量的對比來確定TaSUT1A是否過量表達(dá)?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。8、調(diào)pH高壓蒸汽平板劃線法是需要判斷培養(yǎng)基是否被污染不可線條末端的細(xì)菌數(shù)量少，最終可得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而形成的菌落大腸桿菌無成形的細(xì)胞核【解析】

（1）配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在熔化后分裝前必須進(jìn)行調(diào)pH，培養(yǎng)基在接種前要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。（2）①通過接種在瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行連續(xù)劃線操作，將聚焦的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面，在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體，這種方法稱為平板劃線法。②因需要判斷培養(yǎng)基是否被污染，故需要設(shè)置對照。（3）討論分析①純化大腸桿菌時(shí)，不可用加入抗生素的方法防止雜交污染，抗生素也可以殺死大腸桿菌。②線條末端的細(xì)菌數(shù)量少，最終可得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而形成的菌落。③大腸桿菌為原核生物，無成形的細(xì)胞核。9、PstⅠ和HindⅢ限制酶SmaⅠ酶切位點(diǎn)位于白細(xì)胞介素基因中部，使用它會(huì)造成目的基因斷裂反轉(zhuǎn)錄引物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化T-DNA硫鏈絲菌素抗原—抗體雜交【解析】

分析題圖，圖示表示人的白細(xì)胞介素基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點(diǎn)，所以切割載體和目的基因時(shí)用限制酶PstⅠ和HindⅢ，再用DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體形成重組載體。獲取目的基因的方法包括從基因文庫中獲取、cDNA文庫法、供體細(xì)胞的DNA中直接分離基因（鳥槍法）。農(nóng)桿菌通過侵染植物傷口進(jìn)入細(xì)胞后，可將Ti質(zhì)粒的T-DNA插入到植物基因組中。【詳解】（1）載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點(diǎn)，使用限制酶SmaI則會(huì)破壞目的基因；（2）目的基因的獲取可以采用cDNA文庫法（即逆轉(zhuǎn)錄法），指以某生物成熟mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄而成的cDNA序列的重組DNA群體，采用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增，需提供Taq酶和引物等；（3）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，利用的是Ti質(zhì)粒上的T-DNA；（4）構(gòu)建好的表達(dá)載體含有硫鏈絲菌素的抗性基因，因此可以在培養(yǎng)基中添加硫鏈絲菌素進(jìn)行篩選，為檢測目的基因是否順利表達(dá)，可以通過抗原-抗體雜交技術(shù)?！军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是分析題圖中的限制酶切割位點(diǎn)，明確目的基因和質(zhì)粒都有PstⅠ和HindⅢ的切割位點(diǎn)，從而可以用于構(gòu)建基因表達(dá)載體，其他的酶切位點(diǎn)則會(huì)破壞目的基因或抗性基因。10、有機(jī)溶劑非揮發(fā)性乙酸乙酯萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)不與水混溶，而乙醇為水溶性有機(jī)溶劑液泡作為花青素的提取液（溶解提取花青素）金屬離子要對人無害（或有益）探究水浴溫度和某金屬離子添加濃度對花青素提取率的影響【解析】

提取植物中的有效成分的基本方法有三種：蒸餾、壓榨法和萃取。蒸餾是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來，適用于提取揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油；壓榨法，是通過機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油，適用于易焦糊原料的提?。惠腿∵m用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶液中，不同的原料應(yīng)用不同的方法來提取。【詳解】（1