PAGE32-真題分類再回訪·課堂定時(shí)練規(guī)范eq\x(命題素材源于教材類)溫馨提示：當(dāng)您做這類題時(shí)，駕馭不夠精確的肯定要依題中提示的頁碼剛好翻閱教材，回扣落實(shí)教材基礎(chǔ)學(xué)問，肯定會(huì)有新發(fā)覺喲！提示：以下題的答案可以照抄教材1．[2024·全國卷Ⅰ，38]為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為試驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下試驗(yàn)流程?；卮鹣铝袉栴}：(1)上述試驗(yàn)前必需給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是________________________________________________________________________。(2)寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要試驗(yàn)步驟：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，須要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所采納的培育基屬于__________，運(yùn)用該培育基進(jìn)行細(xì)胞培育的結(jié)果是____________________________。圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是__________________________。(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖，可采納的方法有__________________________________________________(答出2點(diǎn)即可)?！靖呖糣S教材】[人教選修3]P44[人教選修3]P542．[2024·全國卷Ⅰ]基因工程中可以通過PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因?；卮鹣铝袉栴}。(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀╛___________和____________。(2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制起先時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是______________。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是__________。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的________。(3)目前在PCR反應(yīng)中運(yùn)用Taq酶而不運(yùn)用大腸桿菌DNA聚合酶的主要緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________?！靖呖糣S教材】[人教選修3]P9[人教選修3]P103．[2024·全國卷Ⅱ]植物組織培育技術(shù)在科學(xué)探討和生產(chǎn)實(shí)踐中得到了廣泛的應(yīng)用?；卮鹣铝袉栴}。(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比，這種微型繁殖技術(shù)的特點(diǎn)有____________________(答出2點(diǎn)即可)。(2)通過組織培育技術(shù)，可把植物組織細(xì)胞培育成胚狀體，再通過人工種皮(人工薄膜)包裝得到人工種子(如圖所示)，這種人工種子在相宜條件下可萌發(fā)生長。人工種皮具備透氣性的作用是____________________________________。人工胚乳能夠?yàn)榕郀铙w生長供應(yīng)所需的物質(zhì)，因此應(yīng)含有植物激素、__________________和________________等幾類物質(zhì)。(3)用脫毒苗進(jìn)行繁殖，可以削減作物感染病毒。為了獲得脫毒苗，可以選取植物的________________進(jìn)行組織培育。(4)植物組織培育技術(shù)可與基因工程技術(shù)相結(jié)合獲得轉(zhuǎn)基因植株。將含有目的基因的細(xì)胞培育成一個(gè)完整植株的基本程序是__________________________________________________________________________________________________________(用流程圖表示)?！靖呖糣S教材】[人教選修3]P38[人教選修3]P40[人教選修3]P39[人教選修3]P424．[2024·全國卷Ⅲ]培育胡蘿卜根組織可獲得試管苗，獲得試管苗的過程如圖所示。回答下列問題。(1)利用胡蘿卜根段進(jìn)行組織培育可以形成試管苗。用分化的植物細(xì)胞可以培育成完整的植株，這是因?yàn)橹参锛?xì)胞具有_________________________________________________。(2)步驟③切取的組織塊中要帶有形成層，緣由是________________________________________________________________________。(3)從步驟⑤到步驟⑥須要更換新的培育基，其緣由是_______________________________________________________________________________________。在新的培育基上愈傷組織通過細(xì)胞的________________過程，最終可形成試管苗。(4)步驟⑥要進(jìn)行照光培育，其作用是__________________________________。(5)經(jīng)組織培育得到的植株，一般可保持原品種的________________，這種繁殖方式屬于______________繁殖?！靖呖糣S教材】[人教選修3]P33～34[人教選修3]P355．[2024·全國卷Ⅰ，38][生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]回答下列問題：(1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中進(jìn)行了表達(dá)。該探討除證明白質(zhì)?？梢宰鳛檩d體外，還證明白________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。(2)體外重組的質(zhì)?？赏ㄟ^Ca2＋參加的________方法導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞；而體外重組的噬菌體DNA通常需與_____________組裝成完整噬菌體后，才能通過侵染的方法將重組的噬菌體DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞。在細(xì)菌、心肌細(xì)胞、葉肉細(xì)胞中，可作為重組噬菌體宿主細(xì)胞的是______________。(3)真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)可能會(huì)被降解。為防止蛋白質(zhì)被降解，在試驗(yàn)中應(yīng)選用___________________________________________的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加________的抑制劑?！靖呖糣S教材】[人教選修3]P3[人教選修3]P136．[2024·全國卷Ⅰ，38]真核生物基因中通常有內(nèi)含子，而原核生物基因中沒有，原核生物沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的RNA序列的機(jī)制。已知在人體中基因A(有內(nèi)含子)可以表達(dá)出某種特定蛋白(簡稱蛋白A)?；卮鹣铝袉栴}：(1)某同學(xué)從人的基因組文庫中獲得了基因A，以大腸桿菌作為受體細(xì)胞卻未得到蛋白A，其緣由是_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)若用家蠶作為表達(dá)基因A的受體，在噬菌體和昆蟲病毒兩種載體中，不選用______________作為載體，其緣由是______________________________________________。(3)若要高效地獲得蛋白A，可選用大腸桿菌作為受體。因?yàn)榕c家蠶相比，大腸桿菌具有__________________(答出兩點(diǎn)即可)等優(yōu)點(diǎn)。(4)若要檢測基因A是否翻譯出蛋白A，可用的檢測物質(zhì)是________________(填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗體”)。(5)艾弗里等人的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化試驗(yàn)為證明DNA是遺傳物質(zhì)做出了重要貢獻(xiàn)，也可以說是基因工程的先導(dǎo)，假如說他們的工作為基因工程理論的建立供應(yīng)了啟示，那么，這一啟示是__________________________________________?！靖呖糣S教材】[人教選修3]P13[人教選修3]P27．[2024·全國卷Ⅲ，38節(jié)選]編碼蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五個(gè)片段組成，編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成，如圖1所示。圖1圖2回答下列問題：(3)現(xiàn)通過基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白，要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細(xì)胞增殖的作用，某同學(xué)做了如下試驗(yàn)：將肯定量的含T淋巴細(xì)胞的培育液平均分成四組，其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一組作為比照，培育并定期檢測T淋巴細(xì)胞濃度，結(jié)果如圖2。①由圖2可知，當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時(shí)，添加蛋白乙的培育液中T淋巴細(xì)胞濃度不再增加，此時(shí)若要使T淋巴細(xì)胞接著增殖，可采納的方法是________。細(xì)胞培育過程中，培育箱中通常要維持肯定的CO2濃度，CO2的作用是____________________。②僅依據(jù)圖1、圖2可知，上述甲、乙、丙三種蛋白中，若缺少________(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所編碼的肽段，則會(huì)降低其刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果?！靖呖糣S教材】[人教選修3]P45[人教選修3]P468．[2024·全國卷Ⅲ，38][生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]2024年《細(xì)胞》期刊報(bào)道，中國科學(xué)家領(lǐng)先勝利地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)非人靈長類動(dòng)物進(jìn)行克隆，獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”?；卮鹣铝袉栴}：(1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程，核移植是指________________________________________________________________________。通過核移植方法獲得的克隆猴，與核供體相比，克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目________(填“減半”“加倍”或“不變”)。(2)哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度________(填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植，其緣由是________________________________________________________________________。(3)在哺乳動(dòng)物核移植的過程中，若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體，通常，所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目________(填“相同”或“不同”)，性染色體組合________(填“相同”或“不同”)?！靖呖糣S教材】[人教選修3]P47eq\x(重要考點(diǎn)反復(fù)考查類)考點(diǎn)Ⅰ基因工程1．[2024·全國卷Ⅱ，38][生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]某種熒光蛋白(GFP)在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光，這一特性可用于檢測細(xì)胞中目的基因的表達(dá)。某科研團(tuán)隊(duì)將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GFP基因的5′末端，獲得了L1－GFP融合基因(簡稱為甲)，并將其插入質(zhì)粒P0，構(gòu)建了真核表達(dá)載體P1，其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點(diǎn)的示意圖如下，圖中E1～E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同?；卮鹣铝袉栴}：(1)據(jù)圖推斷，該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí)，運(yùn)用了兩種限制酶，這兩種酶是___________。運(yùn)用這兩種酶進(jìn)行酶切是為了保證_____________，也是為了保證__________。(2)將P1轉(zhuǎn)入體外培育的牛皮膚細(xì)胞后，若在該細(xì)胞中視察到了綠色熒光，則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了________和________過程。(3)為了獲得含有甲的牛，該團(tuán)隊(duì)須要做的工作包括：將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的________移入牛的________中、體外培育、胚胎移植等。(4)為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中，某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定，在鑒定時(shí)應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的________(填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”)作為PCR模板。2．[2024·全國卷Ⅱ]幾丁質(zhì)是很多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增加其抗真菌病的實(shí)力?；卮鹣铝袉栴}：(1)在進(jìn)行基因工程操作時(shí)，若要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，常選用嫩葉而不選用老葉作為試驗(yàn)材料，緣由是__________________________________________________________________________________________________________________________。提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是______________________________________________________________________________________________。(2)以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是________________________________________________________________________________________________________。(3)若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，須要通過質(zhì)粒載體而不能干脆將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。(4)當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是________________________________________________________________________。(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的實(shí)力沒有提高，依據(jù)中心法則分析，其可能的緣由是_____________________________________________________________________________________________________________。3．[2024·全國卷Ⅰ]某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活(Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質(zhì)粒載體用BamHⅠ酶切后，與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng)，用得到的混合物干脆轉(zhuǎn)化大腸桿菌。結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?；卮鹣铝袉栴}：(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有________________________(答出兩點(diǎn)即可)，而作為基因表達(dá)載體，除滿意上述基本條件外，還需具有啟動(dòng)子和終止子。(2)假如用含有氨芐青霉素的培育基進(jìn)行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的，其緣由是__________________________；并且________和________的細(xì)胞也是不能區(qū)分的，其緣由是______________________________。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落，還需運(yùn)用含有________的固體培育基。(3)基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其DNA復(fù)制所需的原料來自________________。4．[2024·全國卷Ⅲ]圖(a)中的三個(gè)DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制性內(nèi)切酶的識(shí)別序列與切割位點(diǎn)，圖(b)為某種表達(dá)載體的示意圖(載體上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切點(diǎn)是唯一的)。依據(jù)基因工程的有關(guān)學(xué)問，回答下列問題：經(jīng)BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以與上述表達(dá)載體被________酶切后的產(chǎn)物連接，理由是____________________________________________________________________________________________________________________________。若某人利用圖(b)所示的表達(dá)載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子，如圖(c)所示。這三種重組子中，不能在宿主細(xì)胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物的有________，不能表達(dá)的緣由是________________________________________________________________________________________________________________。(3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有________________和________________，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是________________?？键c(diǎn)Ⅱ細(xì)胞工程和胚胎工程5．[2024·全國卷Ⅲ，38]W是一種具有特定功能的人體蛋白質(zhì)。某探討小組擬仿照制備乳腺生物反應(yīng)器的探討思路，制備一種膀胱生物反應(yīng)器來獲得W，基本過程如圖所示。回答下列問題：(1)步驟①中須要運(yùn)用的工具酶有__________________________。步驟②和③所代表的操作分別是__________和__________。步驟④稱為_________________________________________________________________________________________________________。(2)與乳腺生物反應(yīng)器相比，用膀胱生物反應(yīng)器生產(chǎn)W的優(yōu)勢在于不受轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的________________________________________________________________________(答出2點(diǎn)即可)的限制。(3)一般來說，在同一動(dòng)物個(gè)體中，乳腺上皮細(xì)胞與膀胱上皮細(xì)胞的細(xì)胞核中染色體DNA所含的遺傳信息________(填“相同”或“不同”)，緣由是________________________________________________________________________。(4)從上述流程可知，制備生物反應(yīng)器涉及胚胎工程，胚胎工程中所用到的主要技術(shù)有________________________________(答出2點(diǎn)即可)。6．[2024·全國卷Ⅱ]下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的流程?；卮鹣铝袉栴}：(1)圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為________。過程①表示去除細(xì)胞核，該過程一般要在卵母細(xì)胞培育至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，去核時(shí)常采納________的方法。②代表的過程是________。(2)經(jīng)過多次傳代后，供體細(xì)胞中________的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此，選材時(shí)必需關(guān)注傳代次數(shù)。(3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)與克隆羊“多利”培育勝利一樣，其他克隆動(dòng)物的勝利獲得也證明白________________________________________________________________________________________________________。7．[經(jīng)典高考]某課題組為解決本地種奶牛產(chǎn)奶量低的問題，引進(jìn)了含高產(chǎn)奶基因但對(duì)本地適應(yīng)性差的純種公牛。(1)擬進(jìn)行如下雜交：♂A(具高產(chǎn)奶基因的純種)×♀B(具相宜本地生長基因的純種)→C選擇B作為母本，緣由之一是胚胎能在母體內(nèi)正常________________。若C中的母牛表現(xiàn)為相宜本地生長，但產(chǎn)奶量并未提高，說明高產(chǎn)奶是________性狀。為獲得產(chǎn)奶量高且相宜本地生長的母牛，依據(jù)現(xiàn)有類型，最佳雜交組合是________，后代中出現(xiàn)這種母牛的概率是______________(假設(shè)兩對(duì)基因分別位于不同對(duì)常染色體上)。(2)用以上最佳組合，按以下流程可加速獲得優(yōu)良個(gè)體。精子要具有受精實(shí)力，需對(duì)其進(jìn)行________處理；卵子的成熟在過程________中完成。在過程④的培育基中含有葡萄糖，其作用是________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，過程⑤前應(yīng)鑒定胚胎的______________________。子代母牛的優(yōu)良性狀與過程________的基因重組有關(guān)。(3)為了提高已有胚胎的利用率，可采納________技術(shù)。8．[2024·全國卷Ⅱ，38]植樹造林、“無廢棄物農(nóng)業(yè)”、污水凈化是建設(shè)漂亮中國的重要措施?；卮鹣铝杏嘘P(guān)生態(tài)工程的問題：(1)在植樹造林時(shí)，一般認(rèn)為，全部種植一種植物的做法是不行取的。因?yàn)榕c混合種植方式所構(gòu)建的生態(tài)系統(tǒng)相比，依據(jù)種植一種植物方式所構(gòu)建的生態(tài)系統(tǒng)，其反抗力穩(wěn)定性________。反抗力穩(wěn)定性的含義是________________________________________________________________________________________________________________________。(2)“無廢棄物農(nóng)業(yè)”是我國利用生態(tài)工程的原理進(jìn)行農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的一種模式，其做法是收集有機(jī)物質(zhì)，包括人畜糞便、枯枝落葉等，采納堆肥和漚肥等多種方式，把它們轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)肥料，再施用到農(nóng)田中。施用有機(jī)肥料的優(yōu)點(diǎn)是_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出3點(diǎn)即可)。在有機(jī)肥料的形成過程中，微生物起到了重要作用，這些微生物屬于生態(tài)系統(tǒng)組分中的________。在污水凈化過程中，除發(fā)揮污水處理廠的作用外，若要利用生物來回收污水中的銅、鎘等金屬元素，請(qǐng)供應(yīng)一個(gè)方案：_______________________________________________________________________________________________________。eq\x(地方考題共性借鑒類)考點(diǎn)Ⅰ重點(diǎn)考查基因工程類1．[2024·江蘇卷，33]假如已知一小段DNA的序列，可采納PCR的方法，簡捷地分析出已知序列兩側(cè)的序列，詳細(xì)流程如圖(以EcoRⅠ酶切為例)：請(qǐng)據(jù)圖回答問題：(1)步驟Ⅰ用的EcoRⅠ是一種________酶，它通過識(shí)別特定的________切割特定位點(diǎn)。(2)步驟Ⅱ用的DNA連接酶催化相鄰核苷酸之間的3′-羥基與5′-磷酸間形成________；PCR循環(huán)中，升溫到95℃是為了獲得________；TaqDNA聚合酶的作用是催化________________________________________________________________________。(3)若如表所列為已知的DNA序列和設(shè)計(jì)的一些PCR引物，步驟Ⅲ選用的PCR引物必需是________(從引物①②③④中選擇，填編號(hào))。DNA序列(虛線處省略了部分核苷酸序列)已知序列PCR引物①5′－AACTATGCGCTCATGA－3′②5′－GCAATGCGTAGCCTCT－3′③5′－AGAGGCTACGCATTGC－3′④5′－TCATGAGCGCATAGTT－3′(4)對(duì)PCR產(chǎn)物測序，經(jīng)分析得到了片段F的完整序列。下列DNA單鏈序列中(虛線處省略了部分核苷酸序列)，結(jié)果正確的是________。A．5′－AACTATGCGAGCCCTT－3′B．5′－AATTCCATGCTGAATT－3′C．5′－GCAATGCGTTCGGGAA－3′D．5′－TTGATACGCCGAGTAC－3′2．[2024·山東卷，25]水稻胚乳中含直鏈淀粉和支鏈淀粉，直鏈淀粉所占比例越小糯性越強(qiáng)?？蒲腥藛T將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，實(shí)現(xiàn)了對(duì)直鏈淀粉合成酶基因(Wx基因)啟動(dòng)子序列的定點(diǎn)編輯，從而獲得了3個(gè)突變品系。(1)將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時(shí)，所需的酶是________________________，重組載體進(jìn)入水稻細(xì)胞并在細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為________。(2)依據(jù)啟動(dòng)子的作用推想，Wx基因啟動(dòng)子序列的變更影響了________________________，從而變更了Wx基因的轉(zhuǎn)錄水平。與野生型水稻相比，3個(gè)突變品系中Wx基因限制合成的直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列________(填“發(fā)生”或“不發(fā)生”)變更，緣由是____________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)為檢測啟動(dòng)子變更對(duì)Wx基因表達(dá)的影響，科研人員須要檢測Wx基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA(WxmRNA)的量。檢測時(shí)分別提取各品系胚乳中的總RNA，經(jīng)________過程獲得總cDNA。通過PCR技術(shù)可在總cDNA中專一性地?cái)U(kuò)增出Wx基因的cDNA，緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)各品系WxmRNA量的檢測結(jié)果如圖所示，據(jù)圖推想糯性最強(qiáng)的品系為__________，緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。3．[2024·天津卷]B基因存在于水稻基因組中，僅在體細(xì)胞(2n)和精子中正常表達(dá)，在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為探討B(tài)基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響，設(shè)計(jì)了如下試驗(yàn)。據(jù)圖回答：(1)B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄，推想其可能的緣由是卵細(xì)胞中________(單選)。A．含B基因的染色體缺失B．DNA聚合酶失活C．B基因發(fā)生基因突變D．B基因的啟動(dòng)子無法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄(2)從水稻體細(xì)胞或________中提取總RNA，構(gòu)建____________文庫，進(jìn)而獲得B基因編碼蛋白的序列。將該序列與Luc基因(表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光)連接成融合基因(表達(dá)的蛋白質(zhì)能保留兩種蛋白質(zhì)各自的功能)，然后構(gòu)建重組表達(dá)載體。(3)在過程①、②轉(zhuǎn)化篩選時(shí)，過程________中T-DNA整合到受體細(xì)胞染色體DNA上，過程________在培育基中應(yīng)加入卡那霉素。(4)獲得轉(zhuǎn)基因植株過程中，以下鑒定篩選方式正確的是________(多選)。A．將隨機(jī)斷裂的B基因片段制備成探針進(jìn)行DNA分子雜交B．以Luc基因?yàn)槟０逶O(shè)計(jì)探針進(jìn)行DNA分子雜交C．以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計(jì)探針與從卵細(xì)胞提取的mRNA雜交D．檢測加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光(5)從轉(zhuǎn)基因植株未成熟種子中分別出胚，視察到細(xì)胞內(nèi)僅含一個(gè)染色體組，判定該胚是由未受精的卵細(xì)胞發(fā)育形成的，而一般狀況下水稻卵細(xì)胞在未受精時(shí)不進(jìn)行發(fā)育，由此表明________________________________________________________________________________________________________________________________________________。4．[2024·江蘇卷]圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖，載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr)。請(qǐng)回答下列問題：(1)EcoRV酶切位點(diǎn)為，EcoRV酶切出來的線性載體P1為________末端。(2)用TaqDNA聚合酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲得的目的基因片段，其兩端各自帶有一個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。載體P1用酶處理，在兩端各添加了一個(gè)堿基為________的脫氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在________酶作用下，形成重組質(zhì)粒P3。(3)為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落，采納含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選，得到A、B、C三類菌落，其生長狀況如下表(“＋”代表生長，“－”代表不生長)。依據(jù)表中結(jié)果推斷，應(yīng)選擇的菌落是________(填表中字母)類，另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入狀況分別是__________________、____________________。菌落類型平板類型ABC無抗生素＋＋＋氨芐青霉素＋＋－四環(huán)素＋－－氨芐青霉素＋四環(huán)素＋－－為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR鑒定。圖2所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置，PCR鑒定時(shí)應(yīng)選擇的一對(duì)引物是________。某學(xué)生嘗試用圖中另外一對(duì)引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp片段，緣由是______________________________________________________________________________________?？键c(diǎn)Ⅱ重點(diǎn)考查細(xì)胞工程類1．[2024·江蘇卷，28]新型冠狀病毒可通過表面的刺突蛋白(S蛋白)與人呼吸道黏膜上皮細(xì)胞的ACE2受體結(jié)合，侵入人體，引起肺炎。圖1為病毒侵入后，人體內(nèi)發(fā)生的部分免疫反應(yīng)示意圖。單克隆抗體可阻斷病毒的粘附或入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的探討熱點(diǎn)之一。圖2為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：(1)圖1中人體內(nèi)抗原遞呈細(xì)胞吞噬病毒，并將病毒的抗原暴露在細(xì)胞表面，被________細(xì)胞表面的受體識(shí)別后激活該細(xì)胞。(2)B細(xì)胞識(shí)別入侵的病毒后，在淋巴因子作用下，經(jīng)過細(xì)胞的________，形成________細(xì)胞。(3)為推斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原學(xué)檢查，檢測病毒的________；采集血液樣本主要用于血清學(xué)檢查，檢測________________。(4)據(jù)圖2所示，研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射________免疫小鼠以激活小鼠的免疫細(xì)胞，再提取激活的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，用HAT培育基篩選獲得________細(xì)胞。因?yàn)橥环N抗原可能激活________細(xì)胞，還需接著篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細(xì)胞株。2．[2024·江蘇卷]利用基因編輯技術(shù)將病毒外殼蛋白基因?qū)胴i細(xì)胞中，然后通過核移植技術(shù)培育基因編輯豬，可用于生產(chǎn)基因工程疫苗。下圖為基因編輯豬培育流程，請(qǐng)回答下列問題：(1)對(duì)1號(hào)豬運(yùn)用________處理，使其超數(shù)排卵，收集并選取處在__________時(shí)期的卵母細(xì)胞用于核移植。(2)采集2號(hào)豬的組織塊，用__________處理獲得分散的成纖維細(xì)胞，放置于37℃的CO2培育箱中培育，其中CO2的作用是______________________。(3)為獲得更多基因編輯豬，可在胚胎移植前對(duì)胚胎進(jìn)行________。產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自于________號(hào)豬。(4)為檢測病毒外殼蛋白基因是否被導(dǎo)入4號(hào)豬并正常表達(dá)，可采納的方法有________(填序號(hào))。①DNA測序②染色體倍性分析③體細(xì)胞結(jié)構(gòu)分析④抗原—抗體雜交3．某植物有A、B兩品種?？蒲腥藛T在設(shè)計(jì)品種A進(jìn)行組織培育試驗(yàn)時(shí)，參照品種B的最佳激素配比(見下表)進(jìn)行了預(yù)試驗(yàn)。品種B組織培育階段細(xì)胞分裂素濃度(μmol/L)生長素濃度(μmol/L)Ⅰ誘導(dǎo)形成愈傷組織m1n1Ⅱ誘導(dǎo)形成幼芽m2n2Ⅲ誘導(dǎo)生根m3n3據(jù)表回答：(1)Ⅰ階段時(shí)通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體，緣由是________________________________________________________________________________________________。(2)在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是________________階段。(3)為確定品種A的Ⅰ階段的最適細(xì)胞分裂素濃度，參照品種B的激素配比(m1>2.0)，以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的試驗(yàn)，細(xì)胞分裂素最高濃度應(yīng)設(shè)為________μmol/L。(4)Ⅲ階段時(shí)，科研人員分別選用濃度低于或高于n3μmol/L的生長素處理品種A幼芽都能達(dá)到最佳生根效果，緣由是處理幼芽時(shí)，選用低濃度生長素時(shí)的處理方法為________，選用高濃度生長素時(shí)的處理方法為________。(5)在________階段用秋水仙素對(duì)材料進(jìn)行處理，最易獲得由單個(gè)細(xì)胞形成的多倍體?？键c(diǎn)Ⅲ綜合考查類1．[2024·海南卷]人的T細(xì)胞可以產(chǎn)生某種具有臨床價(jià)值的蛋白質(zhì)(Y)，該蛋白質(zhì)由一條多肽鏈組成。目前可以利用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)Y?；卮鹣铝袉栴}。(1)若要獲得Y的基因，可從人的T細(xì)胞中提取______作為模板，在________催化下合成cDNA，再利用________________技術(shù)在體外擴(kuò)增獲得大量Y的基因。(2)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。若將上述所得Y的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的________________中，得到含目的基因的重組Ti質(zhì)粒，則可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將該基因?qū)肽撤N植物的葉肉細(xì)胞中。若該葉肉細(xì)胞經(jīng)培育、篩選等得到了能穩(wěn)定表達(dá)Y的愈傷組織，則說明Y的基因已經(jīng)_____________________________________________________________________________________________________________________。(3)自然的Y通常須要在低溫條件下保存。假設(shè)將Y的第6位氨基酸甲變更為氨基酸乙可提高其熱穩(wěn)定性，若要依據(jù)蛋白質(zhì)工程的原理對(duì)Y進(jìn)行改造以提高其熱穩(wěn)定性，詳細(xì)思路是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。2．[2024·浙江4月選考，32節(jié)選]回答下列與利用生物技術(shù)培育抗病品種有關(guān)的問題：(1)通過抗病性強(qiáng)的植株獲得抗病目的基因有多種方法。現(xiàn)已獲得純度高的抗病蛋白(可作為抗原)，可通過________技術(shù)獲得特異性探針，并將________中全部基因進(jìn)行表達(dá)，然后利用該探針，找出能與探針特異性結(jié)合的表達(dá)產(chǎn)物，進(jìn)而獲得與之對(duì)應(yīng)的目的基因。(2)將上述抗病基因通過轉(zhuǎn)基因的方法導(dǎo)入植物的分生組織可獲得抗病性強(qiáng)的植株。若在試管苗期間用分子水平方法推斷抗病基因是否表達(dá)，應(yīng)檢測________(A.質(zhì)粒載體B．轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物C．抗性基因D．病原微生物)。(3)植物細(xì)胞在培育過程中往往會(huì)發(fā)生________，可利用這一特性篩選抗致病真菌實(shí)力強(qiáng)的細(xì)胞。篩選時(shí)在培育基中加入________，并將存活的細(xì)胞進(jìn)一步培育至再生植株。若利用________培育建立的細(xì)胞系用于篩選，則可快速獲得穩(wěn)定遺傳的抗病植株。(4)用抗病品種與高產(chǎn)品種進(jìn)行雜交育種過程中，有時(shí)會(huì)遇到因胚發(fā)育中止而得不到可育種子的狀況。若要使該胚接著發(fā)育獲得植株，可采納的方法是____________________。eq\x(非選擇題分類規(guī)范提升練)類型一教材長句問答落實(shí)類1．啟動(dòng)子與起始密碼、終止子與終止密碼有何區(qū)分？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。2．切割目的基因和載體必需均運(yùn)用同一種限制酶切割嗎？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。3．為何用未受精卵母細(xì)胞作細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。4．細(xì)胞融合后，融合細(xì)胞中的染色體數(shù)、染色體組數(shù)應(yīng)如何計(jì)算？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。5．在胚胎發(fā)育過程中，細(xì)胞分化是從哪個(gè)時(shí)期起先的？________________________________________________________________________。6．試管嬰兒與設(shè)計(jì)試管嬰兒的不同？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。7．生態(tài)工程設(shè)計(jì)的常用方法有哪些？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。8．生態(tài)工程基本原理的推斷方法？①________________________________________________________________________。②________________________________________________________________________。③________________________________________________________________________。④________________________________________________________________________。⑤________________________________________________________________________。⑥________________________________________________________________________。類型二析因推斷探究綜合類1．[2024·河北省石家莊二中高三模擬]探針是指以放射性同位素、生物素或熒光染料等進(jìn)行標(biāo)記的已知核苷酸序列的核酸片段，可用于核酸分子雜交以檢測目標(biāo)核苷酸序列是否存在。下圖(1)是某試驗(yàn)小組制備的兩種探針，圖(2)是探針與目的基因雜交的示意圖。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：(1)核酸探針與目標(biāo)核苷酸序列間的分子雜交遵循________________。設(shè)計(jì)核苷酸序列是核酸探針技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。圖(1)所示的兩種核酸探針(探針2只標(biāo)注了部分堿基序列)都不合理，請(qǐng)分別說明理由________________、________________。(2)cDNA探針是目前應(yīng)用最為廣泛的一種探針。制備cDNA探針時(shí)，首先需提取、分別獲得________________作為模板，在________________的催化下合成cDNA探針。利用制備好的β-珠蛋白基因的cDNA探針與β-珠蛋白基因雜交后，出現(xiàn)了如圖(2)中甲、乙、丙、丁等所示的“發(fā)夾結(jié)構(gòu)”，緣由是____________________________________。(3)基因工程中利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)α-抗胰蛋白酶，應(yīng)將構(gòu)建好的重組DNA導(dǎo)入________中，再利用SRY基因(某一條性染色體上的某性別確定基因)探針進(jìn)行檢測，將檢測反應(yīng)呈________(填“陽”或“陰”)性的胚胎進(jìn)行移植培育。2．[2024·河北省衡水中學(xué)高三三模]通過胚胎工程建立的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型，常用于基因表達(dá)調(diào)控的探討、良種動(dòng)物的篩選以及基因藥物的生產(chǎn)等。制備轉(zhuǎn)基因鼠的流程如圖所示，請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：(1)體外受精時(shí)，人工采集的動(dòng)物精子必需經(jīng)過________處理才能完成圖示中的①過程，完成②過程常采納的方法是________。(2)圖示中甲為處于________期的去核卵母細(xì)胞。以體細(xì)胞為供體進(jìn)行⑤過程勝利率較低，而以胚胎干細(xì)胞為供體勝利率會(huì)顯著提高，緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)圖中重組細(xì)胞須要利用__________技術(shù)培育到相宜時(shí)期才能進(jìn)行移植，胚胎移植過程中，是否須要通過注射免疫抑制劑以避開代孕鼠對(duì)植入的胚胎產(chǎn)生排斥反應(yīng)？__________(填“是”或“否”)。為獲得更多轉(zhuǎn)基因鼠，可在胚胎移植前對(duì)胚胎進(jìn)行__________。(4)進(jìn)行胚胎移植的優(yōu)勢是可以____________________________________________________________________________________________。3．[2024·湖北省黃岡中學(xué)高三三模]中國科學(xué)家領(lǐng)先分別并發(fā)布的新型冠狀病毒(COVID－19)照片，相關(guān)探討已發(fā)表在頂級(jí)醫(yī)學(xué)雜志《柳葉刀》上。探討表明，COVID－19是典型的單鏈RNA病毒，其RNA可干脆用作翻譯的模板，引起的疫情在全球爆發(fā)。請(qǐng)思索回答相關(guān)問題：(1)有人對(duì)病毒和細(xì)菌混淆不清，其實(shí)與細(xì)菌相比，病毒的顯著結(jié)構(gòu)特征是________________。(2)冠狀病毒都是RNA病毒，其變異速率比DNA病毒快，給探討帶來肯定困難，從遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)上分析，其緣由是________________________________________。(3)在我國中西醫(yī)藥物聯(lián)合治療新冠肺炎過程中，關(guān)鍵還是靠自身的特異性免疫功能才能康復(fù)，殲滅病毒、復(fù)原健康是人體免疫系統(tǒng)________功能的體現(xiàn)，人體內(nèi)能特異性識(shí)別被COVID－19感染細(xì)胞的免疫細(xì)胞是________________。(4)新冠肺炎的診斷依靠病癥、抗體檢測、CT和核酸檢測。核酸試劑盒用于快速檢測時(shí)，要用到(熒光)PCR技術(shù)和分子雜交技術(shù)，“分子雜交”的依據(jù)是核酸分子具有________性。從疫區(qū)歸國的某人，免疫功能正常，其多次COVID－19血清抗體檢測都呈陰性，嚴(yán)格封閉隔離八天后卻發(fā)病并確診為新冠肺炎患者。對(duì)于這一事實(shí)，最可能的說明是____________________________________________________________________________________________________________________________________________________。專題七現(xiàn)代生物科技專題真題分類再回訪課堂定時(shí)練規(guī)范命題素材源于教材類1．(1)誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞(2)取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞，加入培育液制成單細(xì)胞懸液(3)選擇培育基只有雜交瘤細(xì)胞能夠生存抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性(4)將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；將雜交瘤細(xì)胞在體外培育解析：(1)試驗(yàn)前給小鼠甲注射病毒A，其目的是刺激機(jī)體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)，從而產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞。(2)制備單細(xì)胞懸液的主要試驗(yàn)步驟：從健康小鼠體內(nèi)取出組織塊，剪碎，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理一段時(shí)間，這樣組織就會(huì)分散成單個(gè)細(xì)胞，然后用培育液將分散的細(xì)胞稀釋制成單細(xì)胞懸液。(3)圖中篩選1采納特定的選擇培育基，在該培育基上，未融合的細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜種細(xì)胞(雜交瘤細(xì)胞)才能生存。圖中篩選2含多次篩選，利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，就可獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。(4)要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖，可將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培育，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。2．(1)基因組文庫cDNA文庫(2)解旋酶加熱至90～95℃氫鍵(3)Taq酶熱穩(wěn)定性高，而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會(huì)失活解析：(1)基因文庫包括基因組文庫和cDNA文庫。(2)體內(nèi)DNA復(fù)制時(shí)，需用解旋酶打開氫鍵使雙鏈DNA解旋，而PCR擴(kuò)增目的基因時(shí)，是借助高溫加熱至90～95℃破壞雙鏈之間的氫鍵，使DNA成為單鏈。(3)PCR反應(yīng)體系中進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成時(shí)，溫度需限制在70～75℃，則應(yīng)運(yùn)用耐高溫的DNA聚合酶，即Taq酶，而不能運(yùn)用大腸桿菌DNA聚合酶(高溫下會(huì)失活)。3．(1)能保持植物原有的遺傳特性，繁殖速度快(2)有利于胚狀體進(jìn)行呼吸作用礦質(zhì)元素糖(3)莖尖(4)含目的基因的細(xì)胞eq\o(→,\s\up7(培育))愈傷組織eq\o(→,\s\up7(誘導(dǎo)分化))小植株解析：(1)植物微型繁殖可以保持優(yōu)良品種的遺傳特性，還可以高效、快速、大量繁殖。(2)人工種皮具備透氣性，可以保證胚狀體進(jìn)行有氧呼吸時(shí)對(duì)氧的需求；人工胚乳應(yīng)當(dāng)含有植物激素、礦質(zhì)元素和糖等物質(zhì)，保證胚狀體的正常生長。(3)植物分生區(qū)旁邊(如莖尖)的病毒極少，可以切取莖尖進(jìn)行組織培育，獲得脫毒苗。(4)獲得轉(zhuǎn)基因植株，首先要通過細(xì)胞的脫分化過程，培育出愈傷組織，對(duì)愈傷組織接著培育，以使誘導(dǎo)分化形成小植株。4．(1)全能性(或答：形成完整植株所需的全部基因)(2)形成層簡單誘導(dǎo)形成愈傷組織(3)誘導(dǎo)愈傷組織形成和誘導(dǎo)愈傷組織分化形成試管苗所需的生長素和細(xì)胞分裂素的比例不同分化(或答：再分化)(4)誘導(dǎo)葉綠素的形成，使試管苗能夠進(jìn)行光合作用(5)遺傳特性無性解析：(1)植物細(xì)胞具有全能性，利用已分化的植物細(xì)胞通過植物組織培育技術(shù)可以培育成完整植株。(2)形成層細(xì)胞分化程度低，全能性較高，更簡單誘導(dǎo)形成愈傷組織，進(jìn)而獲得完整植株。(3)愈傷組織的形成和試管苗的分化須要不同的生長素與細(xì)胞分裂素比例，因此誘導(dǎo)愈傷組織的形成階段與分化階段須要不同的培育基。愈傷組織通過再分化過程，最終可形成試管苗。(4)葉綠素的形成須要光，試管苗的發(fā)育也須要光，因此試管苗的誘導(dǎo)階段須要光照。(5)通過植物組織培育獲得植株，該方法屬于無性繁殖的一種，可以保持原品種的遺傳特性。5．(1)體外重組的質(zhì)?？梢赃M(jìn)入受體細(xì)胞；真核生物基因可在原核細(xì)胞中表達(dá)(2)轉(zhuǎn)化外殼蛋白(噬菌體蛋白)細(xì)菌(3)蛋白酶缺陷型蛋白酶解析：(1)將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中進(jìn)行了表達(dá)，該過程可證明：體外重組的質(zhì)?？梢赃M(jìn)入體細(xì)胞，真核生物基因可在原核細(xì)胞中表達(dá)等。(2)體外重組的質(zhì)?？赏ㄟ^Ca2＋參加的轉(zhuǎn)化方法導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞；體外重組的噬菌體DNA通常需與蛋白質(zhì)外殼組裝成完整的噬菌體后，才能通過侵染的方法將重組噬菌體DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞；噬菌體侵染的是細(xì)菌，不能寄生在其它細(xì)胞中，因此可作為重組噬菌體宿主細(xì)胞的是細(xì)菌。(3)若要使蛋白質(zhì)不被降解，則大腸桿菌體內(nèi)不能存在蛋白酶，因此，試驗(yàn)中應(yīng)選用蛋白酶缺陷型的大腸桿菌作為受體細(xì)胞。同理，在蛋白質(zhì)純化過程中，也不能使蛋白質(zhì)降解，因此，應(yīng)添加蛋白酶抑制劑。6．(1)基因A有內(nèi)含子，在大腸桿菌中，其初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的RNA序列不能被切除，無法表達(dá)出蛋白A(2)噬菌體噬菌體的宿主是細(xì)菌，而不是家蠶(3)繁殖快、簡單培育(4)蛋白A的抗體(5)DNA可以從一種生物個(gè)體轉(zhuǎn)移到另一種生物個(gè)體解析：(1)基因A的編碼區(qū)中有內(nèi)含子，真核生物細(xì)胞內(nèi)含有把內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄形成的RNA切除的機(jī)制，而原核生物細(xì)胞內(nèi)基因中的內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄后不切除，轉(zhuǎn)錄后干脆參加了表達(dá)，所以翻譯形成的蛋白質(zhì)不是蛋白A。(2)由于噬菌體是專性寄生在大腸桿菌體內(nèi)的病毒，無法侵染到真核生物家蠶細(xì)胞內(nèi)，所以不能用噬菌體作為運(yùn)載體。家蠶屬于昆蟲，故可用昆蟲病毒作為運(yùn)載體。(3)大腸桿菌作為受體菌是因?yàn)槠渚哂蟹敝持芷诙?、易培育等特點(diǎn)。(4)檢測目的基因是否表達(dá)通常用抗原－抗體雜交技術(shù)。(5)艾弗里等人的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化試驗(yàn)為證明DNA是遺傳物質(zhì)做出了重要貢獻(xiàn)，還為基因工程理論的建立供應(yīng)了啟示，即DNA可以從一種生物個(gè)體轉(zhuǎn)移到另一種生物個(gè)體。7．(3)①進(jìn)行細(xì)胞傳代培育維持培育液的pH②C解析：①當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時(shí)，添加蛋白乙的培育液中T淋巴細(xì)胞濃度不再增加，可能是由于發(fā)生了接觸抑制，可用胰蛋白酶處理貼壁生長的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液分瓶接著傳代培育。動(dòng)物細(xì)胞培育中，CO2的作用是維持培育液的pH。②比照分析圖1和圖2可知，能刺激T淋巴細(xì)胞增殖的甲和乙中都含有C片段，而對(duì)T淋巴細(xì)胞增殖促進(jìn)作用很弱的丙中沒有C片段，據(jù)此可知，若缺少C片段所編碼的肽段，則會(huì)降低其刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果。8．(1)將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核，移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中不變(2)小于胚胎細(xì)胞分化程度低，復(fù)原全能性相對(duì)簡單(3)相同不同解析：(1)核移植是指將動(dòng)物的體細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)去核卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)胚胎最終發(fā)育成為一個(gè)動(dòng)物個(gè)體；通過核移植方法獲得的克隆猴的細(xì)胞核來自供體，因此克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目和供體一樣。(2)動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，復(fù)原其全能性相對(duì)簡單，因此胚胎細(xì)胞核移植的難度小于體細(xì)胞核移植。(3)哺乳動(dòng)物雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞中常染色體相同，性染色體前者是XX，后者是XY，因此分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體，通常所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目相同，性染色體組合不同。重要考點(diǎn)反復(fù)考查類考點(diǎn)Ⅰ1．(1)E1和E4甲的完整甲與載體正確連接(2)轉(zhuǎn)錄翻譯(3)細(xì)胞核去核卵母細(xì)胞(4)核DNA解析：(1)要保證目的基因在受體細(xì)胞中能夠正常表達(dá)，目的基因的首端應(yīng)有啟動(dòng)子，尾端應(yīng)有終止子。甲是將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GFP基因的5′末端而獲得的L1-GFP融合基因，據(jù)此結(jié)合題意并分析圖示可知：該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí)，假如用E2或E3，則目的基因不完整，而運(yùn)用E1和E4這兩種限制酶進(jìn)行酶切既保證了甲的完整，又保證了甲與載體正確連接，因此，運(yùn)用的兩種限制酶應(yīng)是E1和E4。(2)構(gòu)建的真核表達(dá)載體P1中含有GFP基因，而GFP基因的表達(dá)產(chǎn)物“某種熒光蛋白(GFP)”在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光。若在導(dǎo)入P1的牛皮膚細(xì)胞中視察到了綠色熒光，則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了表達(dá)，基因的表達(dá)過程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯。(3)若要獲得含有甲的牛，可采納核移植技術(shù)，即將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的細(xì)胞核移入牛的去核卵母細(xì)胞中獲得重組細(xì)胞，并將該重組細(xì)胞在體外培育成重組胚胎，再經(jīng)過胚胎移植等獲得含有甲的牛。(4)若利用PCR方法檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中，則應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的核DNA作為PCR模板。2．(1)嫩葉組織細(xì)胞易破裂防止RNA降解(2)在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以mRNA為模板依據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則可以合成cDNA(3)目的基因無復(fù)制原點(diǎn)；目的基因無表達(dá)所需啟動(dòng)子(4)磷酸二酯鍵(5)目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異樣解析：(1)在進(jìn)行基因工程操作時(shí)，若要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，常選用嫩葉而不選用老葉作為試驗(yàn)材料，緣由是嫩葉組織細(xì)胞易破裂。提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是防止RNA降解。(2)以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以mRNA為模板依據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則可以合成cDNA。(3)若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，須要通過質(zhì)粒載體而不能干脆將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，其緣由是目的基因無復(fù)制原點(diǎn)、目的基因無表達(dá)所需啟動(dòng)子。(4)當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵。(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的實(shí)力沒有提高，依據(jù)中心法則分析，其可能的緣由是目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異樣。3．(1)能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因、具有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)(答出兩點(diǎn)即可)(2)二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在該培育基上二者都不能生長含有質(zhì)粒載體含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒(或答含有重組質(zhì)粒)二者都含氨芐青霉素抗性基因，在該培育基上均能生長四環(huán)素(3)受體細(xì)胞解析：(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有：能夠自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因、具有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)等。(2)依題意可知，目的基因插入后，導(dǎo)致四環(huán)素抗性基因(Tetr)失活，而氨芐青霉素抗性基因(Ampr)仍能行使正常功能。假如用含有氨芐青霉素的培育基進(jìn)行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細(xì)胞，因二者均不含氨芐青霉素抗性基因，在該培育基上都不能生長，所以是不能區(qū)分的；含有質(zhì)粒載體和含有目的基因的重組質(zhì)粒的細(xì)胞，因二者都含氨芐青霉素抗性基因，在該培育基上都能生長，因此也是不能區(qū)分的。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落，還需運(yùn)用含有四環(huán)素的固體培育基；因目的基因插入后，導(dǎo)致四環(huán)素抗性基因(Tetr)失活，含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌在該培育基中不能生長，而含有質(zhì)粒載體的則能正常生長。(3)噬菌體是特地寄生在細(xì)菌細(xì)胞中的病毒，在侵染細(xì)菌時(shí)，噬菌體的DNA進(jìn)入到細(xì)菌細(xì)胞中，而蛋白質(zhì)外殼仍留在細(xì)胞外；在噬菌體DNA的指導(dǎo)下，利用細(xì)菌細(xì)胞中的物質(zhì)來合成噬菌體的組成成分，據(jù)此可推知：基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其DNA復(fù)制所需的原料來自于受體細(xì)胞。4．(1)Sau3AⅠ兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端(2)甲和丙甲中目的基因插入在啟動(dòng)子的上游，丙中目的基因插入在終止子的下游，兩者的目的基因均不能轉(zhuǎn)錄(3)E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶T4DNA連接酶解析：(1)由于限制酶Sau3AⅠ與BamHⅠ切割后形成的黏性末端相同，所以經(jīng)BamHⅠ酶切割得到的目的基因可以與上述表達(dá)載體被Sau3AⅠ酶切后的產(chǎn)物連接。(2)在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子應(yīng)位于目的基因的首端，終止子應(yīng)位于目的基因的尾端，這樣目的基因才能順當(dāng)進(jìn)行表達(dá)。圖中甲、丙均不符合，所以不能表達(dá)出目的基因的產(chǎn)物。(3)常見的DNA連接酶有E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是T4DNA連接酶?？键c(diǎn)Ⅱ5．(1)限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶顯微注射體外培育胚胎移植(2)性別、年齡(3)相同兩種上皮細(xì)胞都是體細(xì)胞，且來源于同一個(gè)受精卵(4)體外受精、胚胎移植解析：(1)在基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程中須要運(yùn)用限制性核酸內(nèi)切酶切割W基因和載體，同時(shí)須要DNA連接酶進(jìn)行連接。將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用顯微注射法，從受精卵到早期胚胎須要進(jìn)行體外培育，將獲得的早期胚胎通過胚胎移植移至代孕母體體內(nèi)。(2)乳腺生物反應(yīng)器和膀胱生物反應(yīng)器都屬于動(dòng)物反應(yīng)器。前者受動(dòng)物性別(只能是雌性)和年齡(哺乳期)限制，后者不受動(dòng)物性別和年齡限制。(3)題述兩種上皮細(xì)胞都是體細(xì)胞，且來源于同一個(gè)受精卵，所以其細(xì)胞核中染色體DNA所含遺傳信息相同。(4)胚胎工程中所用到的技術(shù)主要有體外受精、胚胎移植。6．(1)XX或XY顯微操作(去核法)胚胎移植(2)遺傳物質(zhì)(3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響(4)已經(jīng)分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性解析：(1)供應(yīng)細(xì)胞核的供體可能為雌性，也可能為雄性，因此圖中A(正常細(xì)胞核)的性染色體組成為XX或XY。常采納顯微操作法去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核。②表示將早期胚胎移入受體，該過程為胚胎移植。(2)取供體動(dòng)物的體細(xì)胞培育，一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，因?yàn)?0代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。超過10代接著培育，則其遺傳物質(zhì)(或核型)的穩(wěn)定性會(huì)降低。(3)克隆動(dòng)物的細(xì)胞核基因來自供體細(xì)胞，因此大部分性狀與供體相同，但細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體(或供應(yīng)卵母細(xì)胞的個(gè)體)，即卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響，這就確定了克隆動(dòng)物的性狀與供體不完全相同。(4)克隆動(dòng)物的培育采納的是核移植技術(shù)，核移植技術(shù)的原理是：已經(jīng)分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。7．(1)生長發(fā)育(或胚胎發(fā)育)隱性♂A×♀C1/8(2)獲能(或增加活力)③供能性別、高產(chǎn)奶和相宜本地生長的基因②(3)胚胎分割解析：(1)由于胚胎能在母體內(nèi)正常生長發(fā)育，所以應(yīng)選擇B作為母本。若子代母牛表現(xiàn)為相宜本地生長，但產(chǎn)奶量并未提高，這說明相宜本地生長是顯性性狀(設(shè)基因?yàn)镸)，高產(chǎn)奶是隱性性狀(設(shè)基因?yàn)閚)。則♂A的基因型是mmnn，♀B的基因型是MMNN，♀C的基因型是MmNn，為獲得產(chǎn)奶量高且相宜本地生長的母牛(M_nn)，可選擇♂A和♀C進(jìn)行雜交，后代出現(xiàn)該種母牛的概率是1/2×1/2×1/2＝1/8。(2)精子只有經(jīng)過獲能處理后才具有受精實(shí)力，卵子的成熟發(fā)生在受精過程中，即過程③。胚胎培育過程的培育基中含有葡萄糖，葡萄糖氧化分解可供應(yīng)能量。具有優(yōu)良性狀的母牛含有高產(chǎn)奶和相宜本地生長的基因，則胚胎移植前應(yīng)進(jìn)行鑒定，同時(shí)還需鑒定性別?；蛑亟M發(fā)生在減數(shù)分裂過程中，使限制不同性狀的基因重新組合。由于供體公牛是純合子，不會(huì)發(fā)生基因重組，供體母牛是雜合子，則子代母牛的優(yōu)良性狀與供體母牛產(chǎn)卵過程中的基因重組有關(guān)。(3)為提高已有胚胎的利用率，可采納胚胎分割技術(shù)，增加胚胎的數(shù)量。8．(1)低生態(tài)系統(tǒng)反抗外界干擾并使自身的結(jié)構(gòu)與功能保持原狀或不受損害的實(shí)力(2)改善了土壤結(jié)構(gòu)；培育了土壤微生物；實(shí)現(xiàn)了土壤養(yǎng)分的循環(huán)利用分解者(3)種植能汲取這些金屬元素的水生植物，再從植物中回收金屬解析：(1)生態(tài)系統(tǒng)的反抗力穩(wěn)定性取決于生態(tài)系統(tǒng)中物種組成的困難程度，種植一種植物，生態(tài)系統(tǒng)的生物種類過少，反抗力穩(wěn)定性較低；所謂反抗力穩(wěn)定性是指生態(tài)系統(tǒng)反抗外界干擾并使自身的結(jié)構(gòu)與功能保持原狀或不受損害的實(shí)力。(2)由于有機(jī)肥料中有機(jī)物較多，故施用有機(jī)肥料可以改善土壤結(jié)構(gòu)、培育土壤微生物、實(shí)現(xiàn)了土壤養(yǎng)分的循環(huán)利用。分解人畜糞便、枯枝敗葉中有機(jī)物質(zhì)的微生物屬于分解者。(3)要利用生物來回收污水中的銅、鎘等金屬元素，可以通過種植能汲取這些金屬元素的水生植物，來汲取污水中的金屬元素，然后再從植物中回收金屬元素。地方考題共性借鑒類考點(diǎn)Ⅰ1．(1)限制性核酸內(nèi)切(或限制)核苷酸序列(2)磷酸二酯鍵DNA單鏈以DNA為模板的DNA鏈的延長(3)②④(4)B解析：(1)依據(jù)題圖可知，步驟Ⅰ是獲得目的DNA片段，所用的酶EcoRⅠ是一種限制酶，其能識(shí)別特定的核苷酸序列，并使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。(2)步驟Ⅱ是將目的DNA片段連接成環(huán)狀，其中DNA連接酶的作用是催化相鄰核苷酸之間的3′-羥基和5′-磷酸間形成磷酸二酯鍵。PCR循環(huán)中，上升溫度到95℃是為了打開氫鍵使雙鏈解旋，獲得DNA單鏈，TaqDNA聚合酶的作用是催化游離的脫氧核苷酸連接到引物3′端，合成DNA子鏈。(3)引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3′端起先延長DNA子鏈，因?yàn)镈NA的合成方向總是從子鏈的5′端向3′端延長，故為擴(kuò)增未知序列，選擇的與模板鏈相結(jié)合的引物應(yīng)為5′-TCATGAGCGCATAGTT-3′(引物④)和5′-GCAATGCGTAGCCTCT-3′(引物②)。(4)分析題意可知，片段F的兩端為限制酶EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的黏性末端，因此其5′端序列應(yīng)為AATT-,3′端序列應(yīng)為-TTAA，B正確。2．(1)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶轉(zhuǎn)化(2)RNA聚合酶與啟動(dòng)子的識(shí)別和結(jié)合不發(fā)生編碼直鏈淀粉合成酶的堿基序列中不含啟動(dòng)子(3)逆轉(zhuǎn)錄(或反轉(zhuǎn)錄)引物是依據(jù)Wx基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的(或引物能與Wx基因的cDNA特異性結(jié)合)(4)品系3品系3的WxmRNA最少，限制合成的直鏈淀粉合成酶最少，直鏈淀粉合成量最少，糯性最強(qiáng)解析：(1)限制性核酸內(nèi)切酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開；DNA連接酶能將DNA片段拼接起來。將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時(shí)，須要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的參加。轉(zhuǎn)化是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。(2)啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。Wx基因啟動(dòng)子序列的變更影響了RNA聚合酶與啟動(dòng)子的識(shí)別和結(jié)合，從而變更了Wx基因的轉(zhuǎn)錄水平，使直鏈淀粉合成酶基因的表達(dá)量變更。依據(jù)題干信息可知，基因編輯系統(tǒng)是對(duì)啟動(dòng)子序列進(jìn)行定點(diǎn)編輯，由于編碼直鏈淀粉合成酶的堿基序列中不含啟動(dòng)子，所以與野生型水稻相比，3個(gè)突變品系中Wx基因限制合成的直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列沒有發(fā)生變更。(3)用提取的各品系胚乳中的總RNA合成總cDNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄，須要逆轉(zhuǎn)錄酶的參加。由于引物能與Wx基因的cDNA特異性結(jié)合，故通過PCR技術(shù)可在總cDNA中專一性地?cái)U(kuò)增出Wx基因的cDNA。(4)mRNA是蛋白質(zhì)合成的干脆模板，依據(jù)題圖分析可知，4個(gè)品系中品系3的WxmRNA量最低，限制合成的直鏈淀粉合成酶最少，直鏈淀粉合成量最少，糯性最強(qiáng)。3．(1)D(2)精子cDNA(3)②①(4)BCD(5)B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精干脆發(fā)育成胚解析：(1)B基因的啟動(dòng)子無法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄，會(huì)導(dǎo)致B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。(2)利用水稻體細(xì)胞或精子中提取的總RNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄法構(gòu)建的基因文庫為cDNA文庫。(3)過程①需將基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌，所以可在培育基中應(yīng)加入卡那霉素以篩選勝利導(dǎo)入了基因表達(dá)載體的農(nóng)桿菌。過程②為農(nóng)桿菌感染水稻愈傷組織，該過程中，農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T－DNA可整合到受體細(xì)胞染色體DNA上。(4)水稻細(xì)胞中原來就有B基因，正常植株也會(huì)出現(xiàn)雜交帶，A錯(cuò)誤；B、D選項(xiàng)是檢測Luc基因及其產(chǎn)物，B、D正確；C選項(xiàng)的檢測對(duì)象是卵細(xì)胞中的mRNA，正常水稻植株卵細(xì)胞中無B基因的mRNA，C正確。(5)一般狀況下，水稻卵細(xì)胞在未受精時(shí)不能發(fā)育成胚，而轉(zhuǎn)基因植株未受精的卵細(xì)胞能發(fā)