廣東省陽江市重點中學2025屆高三壓軸卷生物試卷注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號填寫清楚，將條形碼準確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列動物細胞的生命活動中，不是由單層膜的細胞器完成的是（）A．合成磷脂 B．對蛋白質(zhì)進行分揀C．發(fā)出紡錘絲形成紡錘體 D．消化細胞自身產(chǎn)生的碎渣2．下列對癌細胞快速增殖影響最小的是（）A．細胞核大，核仁數(shù)目多B．細胞膜表面糖蛋白減少C．線粒體DNA拷貝數(shù)目增多D．細胞質(zhì)內(nèi)含有大量游離核糖體3．如圖表示某體外培養(yǎng)的癌細胞細胞周期及各階段的時間（G0期細胞表示一次分裂完成后暫停分裂的細胞）。下列敘述正確的是（）A．癌細胞完整的細胞周期包括G0、G1、S、G2和M期B．細胞分裂間期核糖核苷酸、氨基酸將被大量消耗C．在M期全過程幾乎都可看到高爾基體解體形成的小泡D．一次分裂完成所形成的細胞經(jīng)1．3h后均存在4個中心粒4．某雌雄異株植物，其葉型有闊葉和窄葉兩種類型，由一對等位基因控制?，F(xiàn)有三組雜交實驗，結果如下表：雜交組合親代表現(xiàn)型子代表現(xiàn)型及株數(shù)父本母本雌株雄株1闊葉闊葉闊葉243闊葉119窄葉1222窄葉闊葉闊葉83窄葉78闊葉79窄葉803闊葉窄葉闊葉131窄葉127下列有關表格數(shù)據(jù)的分析，錯誤的是()A．僅根據(jù)第2組實驗，無法判斷兩種葉型的顯隱性關系B．根據(jù)第1組或第3組實驗可以確定葉型基因位于X染色體上C．用第2組的子代闊葉雌株與闊葉雄株雜交，后代性狀分離比為3∶1D．用第1組子代的闊葉雌株與窄葉雄株雜交，后代窄葉植株占1/85．下列有關核酸的敘述，不正確的是（）A．DNA是所有細胞生物的遺傳物質(zhì)B．核酸分子中每個五碳糖連接兩個磷酸和一個堿基C．RNA具有傳遞遺傳信息、轉運和催化等功能D．分子大小相同、堿基含量相同的核酸分子所攜帶的遺傳信息不一定相同6．下列各項中的比較項目，最相近的一組是（）A．線粒體內(nèi)膜的表面大小和線粒體外膜的表面積大小B．植物細胞膜的功能和植物細胞壁的功能C．核糖體的物質(zhì)組成和染色體的物質(zhì)組成D．內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的成分和高爾基體膜的成分二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）腎上腺可以分泌多種激素調(diào)節(jié)機體的生命活動。請回答下列問題：（1）腎上腺皮質(zhì)分泌的糖皮質(zhì)激素能抑制胰島B細胞釋放胰島素，當糖皮質(zhì)激素分泌量增加時，機體內(nèi)胰島素含量會___（填“增加”或“減少”），血糖水平會____（填“升高”或“降低”）。（2）緊急情況使交感神經(jīng)興奮，促進腎上腺皮質(zhì)激素分泌增加，導致心跳加快、血流量增大、呼吸加快等。上述過程的調(diào)節(jié)方式屬于____。激素與靶細胞受體結合并起作用后會____，以防機體長時間處于應激狀態(tài)。（3）機體處于應激狀態(tài)時，內(nèi)臟神經(jīng)興奮性增強，直接支配腎上腺髓質(zhì)分泌去甲腎上腺素，此時心臟收縮加強、心率加快、呼吸急促、神經(jīng)系統(tǒng)興奮性增強。以上說明神經(jīng)調(diào)節(jié)和去甲腎上腺素調(diào)節(jié)的關系是________。8．（10分）2020年初，武漢出現(xiàn)了不明原因的肺炎，經(jīng)檢測是由一種新型冠狀病毒（NCP）引起的?？蒲腥藛T正在加緊研制生產(chǎn)NCP的疫苗和探索相應抗體的制備?；卮鹩嘘P的問題：（1）科研人員提出用康復者血清治療新冠型肺炎，是因為康復者血清中存在_______（填“抗原”或“抗體”），但該方法存在缺陷，如_______________（答出一點即可）。（2）針對血清治療存在的缺陷，研究者從治愈患者捐獻的血液中提取漿細胞，然后用_______誘導該細胞和骨髓瘤細胞發(fā)生融合。幾經(jīng)努力，最終生產(chǎn)出單克隆抗體，此種方法生產(chǎn)的抗體具有______________________的優(yōu)點。（3）科研人員還設想將控制無限增殖的基因（記作X基因）轉入人的漿細胞，構建出產(chǎn)生單克隆抗體的細胞系。用PCR技術擴增X基因的前提是需要知道______。若在漿細胞中的染色體DNA上檢測到X基因，但該漿細胞死亡或不能增殖，則原因最可能是_______________________。9．（10分）細胞的結構、代謝、遺傳等都與蛋白質(zhì)的結構和功能密切相關，而對蛋白質(zhì)的研究和應用，首先需要獲得高純度的蛋白質(zhì)。從紅細胞中提取和分離血紅蛋白的流程圖如下：回答下列問題。（1）流程圖中步驟A、B分別是____________，步驟B所用方法的原理是__________。（2）洗滌紅細胞的目的是_________，此過程中若離心速度過高和時間過長會導致________。（3）在利用凝膠色譜法純化血紅蛋白的過程中，色譜柱不能有氣泡存在，原因是__________。在洗脫過程中加入物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液(pH為1．0)的目的是______。（4）在上述實驗中利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的目的是_____________________。（5）下圖1、2是某同學利用電泳法和凝膠色譜法分離同一種樣品得到的結果，則在圖2中與圖中蛋白質(zhì)P對應的是______________________。10．（10分）前不久，某生物公司的百白破疫苗檢驗不符合規(guī)定。為生產(chǎn)高效價疫苗和簡化計劃免疫程序，科學家研制出基因工程乙肝—百白破（rHB-DTP）四聯(lián)疫苗，經(jīng)各項檢測均通過rHB-DTP四聯(lián)疫苗制檢規(guī)程的要求。其有效成分是乙肝病毒表面抗原和百日咳桿菌、白喉桿菌、破傷風桿菌的類毒素。請分析回答：（1）為獲取百日咳桿菌類毒素的基因，可從百日咳桿菌的細胞中提取對應mRNA，在________的作用下合成雙鏈cDNA片段，獲得的CNA片段與百日咳桿菌中該基因堿基序列________（填“相同”或“不同”）。（2）由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小，且序列已知，獲得目的基因可采用________，然后通過PCR技術大量擴增，此技術的前提是已知________。（3）把目的基因?qū)胧荏w細胞時，科學家采用了改造后的腺病毒作為載體，寫出你認為科學家選它的理由：________（寫出兩點）。（4）研究發(fā)現(xiàn)，如果將白喉桿菌類毒素20位和24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?，免疫效果更好，請完善此種技術的基本流程：從預期蛋白質(zhì)功能出發(fā)→________→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列。（5）實驗證明，一定時間內(nèi)間隔注射該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的________細胞數(shù)量增多，當同種抗原再次侵入人體時二次免疫的特點是________。11．（15分）癌細胞表面蛋白“PDL-1”與T細胞表面蛋白“PD-1”特異性結合后，可抑制T細胞活性并啟動其凋亡，導致腫瘤細胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進行克隆、表達及生物學活性鑒定，為制備抗體打基礎。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細胞中的mRNA反轉錄生成____________________作為模板；設計含有不同的限制酶切點的α和β序列為引物，通過____________________技術擴增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構建表達載體。該表達載體的組成，除了目的基因、標記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴增重組DNA。（4）將擴增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉入可高度表達外源基因的原代293T細胞。一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，檢測細胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學活性和功能，則可裂解293T細胞，提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉入293T細胞，其目的是_________________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

雙層膜結構的細胞器：葉綠體、線粒體；單層膜結構的細胞器：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、液泡；無膜結構的細胞器：核糖體、中心體?！驹斀狻緼、光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中合成磷脂，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是單層膜結構的細胞器，A錯誤；B、高爾基體對蛋白質(zhì)進行分揀，高爾基體是單層膜結構的細胞器，B錯誤；C、中心體無膜結構，能發(fā)出紡錘絲形成紡錘體，C正確；D、溶酶體消化細胞自身產(chǎn)生的碎渣，溶酶體是單層膜結構的細胞器，D錯誤。故選C。【點睛】本題考查動物細胞內(nèi)的多種細胞器，意在考查對各種細胞器結構和功能的掌握。2、B【解析】

與代謝旺盛相適應的是，細胞線粒體多提供更多的能量、核糖體含量多合成更多的蛋白質(zhì)，核仁大，核孔數(shù)量多都是利于物質(zhì)的合成和運輸?！驹斀狻考毎舜螅巳蕯?shù)目多，細胞代謝旺盛，增殖速度加快，對癌細胞快速增殖影響大，A不符合題意；細胞癌變后，細胞表面發(fā)生變化，糖蛋白減少，與細胞擴散有關，對癌細胞快速增殖影響小，B符合題意；線粒體DNA拷貝數(shù)增多，細胞代謝旺盛，增殖速度加快，對癌細胞快速增殖影響大，C不符合題意；細胞質(zhì)內(nèi)含有大量游離核糖體，細胞代謝旺盛，增殖速度加快，對癌細胞快速增殖影響大，D不符合題意。

故選B。3、B【解析】

分析圖形：圖中數(shù)據(jù)為實驗測得體外培養(yǎng)的某種細胞的細胞周期各階段時間。細胞周期包括分裂間期和分裂期（M期），其中分裂間期又分為G1、S和G2期，所占時間為2.8+7.9+3.4+1.2=15.3h，而分裂期所占時間為1.2h?！驹斀狻緼、癌細胞完整的細胞周期包括G1、S、G2和M期，A錯誤；B、細胞分裂間期進行蛋白質(zhì)的合成，有遺傳信息的轉錄和翻譯過程，因此核糖核苷酸、氨基酸將被大量消耗，B正確；C、在M期全過程幾乎都可看到核膜解體形成的小泡，C錯誤；D、在G2時期細胞中已有一對中心體，因此需要經(jīng)歷的時間是14.1h，D錯誤。故選B。4、D【解析】

A、根據(jù)題意和圖表分析，因為第2組雜交組合的親本有闊葉和窄葉，子代也有闊葉和窄葉，所以僅根據(jù)第2組實驗，無法判斷兩種葉型的顯隱性關系，A正確；B、根據(jù)第1組或第3組實驗子代雌雄株的葉形闊葉和窄葉數(shù)目不均等，說明葉形與性別有關。再由雄株有闊葉又有窄葉，可以確定葉形基因位于X染色體上，B正確；C、假設葉形基因為A、a。用第2組的子代闊葉雌株XAXa與闊葉雄株XaY雜交，子代闊葉雌株與闊葉雄株雜交，后代基因型比例為子代雜交后代有XAXA:XAXa:XAY:XaY=1:1:1:1，性狀分離比為3:1，C正確；D、假設葉形基因為A、a.第1組實驗中，由子代雄株有闊葉又有窄葉，可推知母本基因型為XAXa。又因父本闊葉基因型為XAY，進一步推知子代雌株的基因型為1/2XAXA、1/2XAXa。子代闊葉雌株與窄葉雄株雜交，后代窄葉植株占1/2×1/2=1/4，D錯誤。故選D。5、B【解析】

核酸根據(jù)五碳糖不同分為DNA（脫氧核糖核酸）和RNA（核糖核酸）；脫氧核糖核酸的基本組成單位是脫氧核糖核苷酸，1分子脫氧核糖核苷酸由1分子磷酸，1分子堿基和1分子脫氧核糖組成；RNA的基本組成單位是核糖核苷酸，1分子核糖核苷酸由1分子磷酸、1分子堿基和1分子核糖組成。【詳解】A、所有細胞生物的遺傳物質(zhì)是DNA，A正確；B、核酸分子末端的五碳糖連接一個磷酸和一個堿基，B錯誤；

C、RNA具有傳遞遺傳信息（病毒RNA）、轉運（tRNA轉運氨基酸）和催化（RNA酶）等功能，C正確；

D、分子大小相同、堿基含量相同的核酸分子，可能由于堿基對的排列順序不同，導致所攜帶的遺傳信息不一定相同，D正確。

故選B。6、D【解析】

各種細胞器的結構、功能：細胞器分布形態(tài)結構功能線粒體動植物細胞雙層膜結構有氧呼吸的主要場所，細胞的“動力車間”葉綠體植物葉肉細胞雙層膜結構植物細胞進行光合作用的場所；植物細胞的“養(yǎng)料制造車間”和“能量轉換站”。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)動植物細胞單層膜形成的網(wǎng)狀結構細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的合成和加工，以及脂質(zhì)合成的“車間”高爾基體動植物細胞單層膜構成的囊狀結構對來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白質(zhì)進行加工、分類和包裝的“車間”及“發(fā)送站”（動物細胞高爾基體與分泌有關；植物則參與細胞壁形成）核糖體動植物細胞無膜結構，有的附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，有的游離在細胞質(zhì)中合成蛋白質(zhì)的場所，“生產(chǎn)蛋白質(zhì)的機器”溶酶體動植物細胞單層膜形成的泡狀結構“消化車間”，內(nèi)含多種水解酶，能分解衰老、損傷的細胞器，吞噬并且殺死侵入細胞的病毒和細菌。液泡成熟植物細胞單層膜形成的泡狀結構；內(nèi)含細胞液（有機酸、糖類、無機鹽、色素和蛋白質(zhì)等）調(diào)節(jié)植物細胞內(nèi)的環(huán)境，充盈的液泡使植物細胞保持堅挺中心體動物或某些低等植物細胞無膜結構；由兩個互相垂直的中心粒及其周圍物質(zhì)組成與細胞的有絲分裂有關【詳解】A、線粒體內(nèi)膜折疊形成了嵴，故其表面積比線粒體外膜的表面積更大，A錯誤；B、植物細胞膜有控制物質(zhì)進出、進行信息交流等功能，植物細胞壁只有支持和保護功能，故植物細胞膜的功能比細胞壁功能更復雜，B錯誤；C、核糖體由RNA和蛋白質(zhì)組成，染色體主要由DNA和蛋白質(zhì)組成，C錯誤；D、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜和高爾基體膜都屬于生物膜，其組成成分和結構相似，D正確。故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、減少升高神經(jīng)一體液調(diào)節(jié)被滅活神經(jīng)系統(tǒng)直接支配腎上腺髓質(zhì)分泌去甲腎上腺素，去甲腎上腺素能影響神經(jīng)系統(tǒng)的功能【解析】

神經(jīng)調(diào)節(jié)與體液調(diào)節(jié)的聯(lián)系：①不少內(nèi)分泌腺本身直接或間接地受中樞神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)；②內(nèi)分泌腺所分泌的激素也可以影響神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育和功能；③動物的生命活動是在神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)的共同作用下完成的，但以神經(jīng)調(diào)節(jié)為主。神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)共同協(xié)調(diào)、相輔相成，內(nèi)分泌腺受中樞神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，同時內(nèi)分泌腺分泌的激素可以影響神經(jīng)系統(tǒng)的功能?！驹斀狻浚?）糖皮質(zhì)激素能抑制胰島B細胞釋放胰島素，所以當糖皮質(zhì)激素分泌增加會抑制胰島素的釋放，胰島素的作用為降血糖，體內(nèi)胰島素含量降低，血糖升高。（2）緊急情況使交感神經(jīng)興奮，促進腎上腺皮質(zhì)激素分泌增加，屬于神經(jīng)調(diào)節(jié)；腎上腺皮質(zhì)激素分泌增加，導致心跳加快、血流量增大、呼吸加快屬于體液調(diào)節(jié)。激素與靶細胞受體結合并起作用后會被滅活，以維持體內(nèi)激素水平穩(wěn)定，以防機體長時間處于應激狀態(tài)。（3）腎上腺的髓質(zhì)分泌去甲腎上腺素，它的分泌活動受內(nèi)臟神經(jīng)的直接支配，說明內(nèi)分泌腺受中樞神經(jīng)系統(tǒng)的控制；腎上腺素的分泌增多，人表現(xiàn)為警覺性提高、反應靈敏、呼吸頻率加快、心率加速等特征，說明內(nèi)分泌腺分泌的激素也可以影響神經(jīng)系統(tǒng)的功能?！军c睛】本題考查了激素的分級調(diào)節(jié)、反饋調(diào)節(jié)和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)等相關知識，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力，試題難度中等。8、抗體血清成分復雜，對于是否會引起其他問題還存在不確定性角度二：需要的血清數(shù)量比較大（血清抗體含量少）角度三：血清抗體純度低，特異性差滅活的病毒（聚乙二醇、PEG、離心、電激、振動等均可）特異性強、靈敏度高、并可大量制備X基因的（一段）核苷酸序列X基因的插入破壞了漿細胞生命活動必需的某些基因角度二：X基因沒有表達，所以不增殖【解析】

1、基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斀狻浚?）康復者的血清中含有抗新型冠狀病毒的抗體，因此有科研人員建議用康復者的血清來治療患者，但存在血清成分復雜，對于是否會引起其他問題還存在不確定性或需要的血清數(shù)量比較大或血清抗體純度低，特異性差等問題，該方法還存在一定的缺陷。（2）可以采用滅活的病毒或利用聚乙二醇等誘導將漿細胞和骨髓瘤細胞融合。單克隆抗體與普通血清抗體相比較，最主要的優(yōu)點在于它的特異性強，靈敏度高，并可大量制備。（3）若用PCR技術擴增X基因，則需要用到熱穩(wěn)定DNA聚合酶，該方法能夠成功獲取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物，以便于擴增X基因。若X基因的插入破壞了漿細胞生命活動必需的某些基因，或者X基因?qū)霛{細胞后沒有表達，都可能導致在漿細胞中的染色體DNA上檢測到X基因，但該漿細胞死亡或不能增殖等現(xiàn)象?！军c睛】本題考查基因工程、單克隆抗體的制備等知識，要求考生識記基因的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)；識記單克隆抗體的制備過程，能結合所學的知識準確答題。9、血紅蛋白的釋放、粗分離（或透析）透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保留在袋內(nèi)去除雜蛋白（或血漿蛋白）白細胞和淋巴細胞一同沉淀，達不到分離的效果氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境，保持體外的pH和體內(nèi)一致，保證血紅蛋白的結構和功能穩(wěn)定對分離的蛋白質(zhì)樣品進行純度鑒定丙【解析】

血紅蛋白的提取與分離的實驗步驟主要有：（1）樣品處理：①紅細胞的洗滌，②血紅蛋白的釋放，③分離血紅蛋白。（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析。（3）純化：調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)。（4）純度鑒定——SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳?！驹斀狻浚?）樣品處理過程為：紅細胞的洗滌→血紅蛋白的釋放→分離血紅蛋白溶液→透析，所以圖中A、B依次是血紅蛋白的釋放、透析；透析的原理是透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保留在袋內(nèi)。（2）為去除雜蛋白（或血漿蛋白），需要洗滌紅細胞；在該過程中離心速度過高和時間過長會導致白細胞等一同沉淀，達不到分離效果。（3）因氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果，故在凝膠色譜柱裝填時不得有氣泡存在；磷酸緩沖液（pH為1.0）能夠準確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境，保持體外的pH和體內(nèi)的一致，以保證血紅蛋白的結構和功能穩(wěn)定。（4）血紅蛋白的純化是通過凝膠色譜（或分配色譜）法將雜蛋白除去，最后經(jīng)SDS一聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。（5）SDS凝膠電泳裝置是垂直的裝置，此種電泳方法主要取決于蛋白質(zhì)分子量的大小，與電荷無關，同時加樣在“-”極，通電后，樣品蛋白質(zhì)向“+”極移動，分子量相對小的，移動距離大，因此從圖1的電泳結果分析，P比N、M移向“+”距離大，說明P的分子量相對比較小，因此洗脫出來的時間比較長，符合圖2中的丙?！军c睛】理清血紅蛋白的提取和分離的實驗原理、樣品處理和凝膠色譜操作的流程及其注意事項等相關知識。在此基礎上，以圖示中的“箭頭指向和文字信息”為切入點，從中把握所蘊含的生物學信息，進而對相關題情境進行分析解答是解題關鍵。10、逆轉錄酶不同化學方法人工合成（人工化學合成）一段目的基因的核苷酸序列以便合成引物能自主復制、有多個限制酶切位點、有標記基因、對宿主細胞無害（答出其中兩個即可）設計預期的蛋白質(zhì)結構記憶短時間內(nèi)迅速產(chǎn)生大量的抗體和記憶細胞，免疫預防作用更強?！窘馕觥?/p>

1、基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。2、記憶細胞使得二次免疫反應快而強?！驹斀狻浚?）由mRNA合成cDNA的過程屬于逆轉錄過程，需要逆轉錄酶。獲得的cDNA片段只包含基因的編碼區(qū)，沒有非編碼區(qū)，因此與百日咳桿菌中該基因堿基序列不同。（2）由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小，且序列已知，獲得目的基因可采用化學方法人工合成，然后通過PCR技術大量擴增。通過PCR技術大量擴增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物。（3）改造后的腺病毒具有能自主復制、有多個限制酶切位點、有標記基因、對宿主細胞無害等特點，故可用做載體。（4）將白喉桿菌類毒素20位和24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼釋儆诘鞍踪|(zhì)工程的范疇。其基本流程是從預期蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設計預期的蛋白質(zhì)結構→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列。（5）一定時間內(nèi)間隔注射該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的記憶細胞數(shù)量增多，當同種抗原再次侵入人體時，記憶細胞會立即增殖分化，產(chǎn)生漿細胞或者效應T細胞發(fā)揮免疫效應。二次免疫的特點是短時間內(nèi)迅速產(chǎn)生大量的抗體和記憶細胞，免疫預防作用更強?！军c睛】本題考查基因工程的基本工具和基本步驟、蛋白質(zhì)工程的步驟，二次免疫過程，要求考生識記基因操作工具的作用、目的基因獲取的方法、蛋白質(zhì)工程的操作步驟、二次免疫的特點，結合題干分析答題。11、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復制原點卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】

基因工程技術的基本