安徽省六安二中、霍邱一中、金寨一中2025屆高三最后一卷生物試卷注意事項1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認(rèn)真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準(zhǔn)考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．2019年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎頒發(fā)給了發(fā)現(xiàn)細(xì)胞適應(yīng)氧氣供應(yīng)變化分子機(jī)制的科學(xué)家。當(dāng)細(xì)胞缺氧時，缺氧誘導(dǎo)因子(HIF-Iα)與芳香烴受體核轉(zhuǎn)位蛋白(ARNT)結(jié)合，調(diào)節(jié)基因的表達(dá)生成促紅細(xì)胞生成素(EPO，一種促進(jìn)紅細(xì)胞生成的蛋白質(zhì)激素)；當(dāng)氧氣充足時，HIF-1α羥基化后被蛋白酶降解，調(diào)節(jié)過程如圖所示。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．HIF-1α被蛋白酶降解后可以生成多種氨基酸分子B．細(xì)胞合成EPO時，tRNA與mRNA發(fā)生堿基互補(bǔ)配對C．HIF-lα與ARNT結(jié)合到DNA上，催化EPO基因轉(zhuǎn)錄D．進(jìn)入高海拔地區(qū)，機(jī)體會增加紅細(xì)胞數(shù)量來適應(yīng)環(huán)境變化2．CCR5是HIV入侵人體T細(xì)胞的主要輔助受體之一。有科學(xué)家為了使嬰兒一出生就具有抵抗艾滋病的能力，通過基因編輯破壞了受精卵中的CCR5基因，該做法引起了民眾普遍的擔(dān)憂。下列各項不屬于擔(dān)憂依據(jù)的是（）A．CCR5基因可能還參與了其他生理過程的調(diào)控B．基因編輯技術(shù)有可能因編輯對象錯誤（脫靶）造成不可預(yù)知的后果C．被編輯個體受其他疾病感染的風(fēng)險可能會提高D．該技術(shù)雖然符合人類倫理道德，但可能存在潛在的安全風(fēng)險3．下列關(guān)于人類與環(huán)境的敘述錯誤的是（）A．溫室效應(yīng)會引起永凍土融化 B．植樹造林是防治酸雨最有效的方法C．工業(yè)用水封閉化屬于水體污染治理的措施 D．大氣中臭氧層減少會使人體免疫功能減退4．下列關(guān)于細(xì)胞及其產(chǎn)生的物質(zhì)的敘述，正確的是（）A．細(xì)胞中大多數(shù)無機(jī)鹽以離子的形式存在，對維持生命活動有重要作用B．同一個體不同細(xì)胞功能的差異主要是因為不同細(xì)胞的遺傳物質(zhì)不同C．再次接觸同種抗原時，記憶細(xì)胞能迅速分裂增殖產(chǎn)生大量新的抗體D．血糖下降時，肌細(xì)胞中的糖原能被分解成葡萄糖，從而維持血糖平衡5．下列有關(guān)信息傳遞的敘述，正確的是（）A．T2噬菌體的遺傳信息傳遞可以在肺炎雙球菌的核糖體上進(jìn)行B．利用昆蟲信息素誘捕或警示有害動物，降低害蟲種群密度，屬于生物防治C．在沒有受到抗原刺激的情況下，少數(shù)B細(xì)胞經(jīng)淋巴因子作用后就可開始增殖、分化D．激素和神經(jīng)遞質(zhì)都是通過與靶細(xì)胞細(xì)胞膜上的受體結(jié)合來傳遞信息6．下列關(guān)于藍(lán)藻和黑藻的敘述，正確的是（）A．都是生產(chǎn)者，都有細(xì)胞壁B．光合色素都分布在類囊體膜中C．都以DNA為主要的遺傳物質(zhì)D．在細(xì)胞分裂時，都會發(fā)生染色質(zhì)和染色體的轉(zhuǎn)化二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）果蠅(2n=8)的精原細(xì)胞要經(jīng)過精確的四次有絲分裂之后，方能啟動減數(shù)分裂形成初級精母細(xì)胞?？蒲袌F(tuán)隊致力于研究有絲分裂向減數(shù)分裂轉(zhuǎn)化的調(diào)控機(jī)制，用EMS誘變篩選，發(fā)現(xiàn)一株果蠅tut突變體，其精原細(xì)胞不能停止有絲分裂，而出現(xiàn)精原細(xì)胞過度增殖的表現(xiàn)型。（1）顯微觀察野生型果蠅精巢，發(fā)現(xiàn)有15%的細(xì)胞是16條染色體、55%的細(xì)胞是8條染色體、30%的細(xì)胞是4條染色體。細(xì)胞中_________條染色體的出現(xiàn)可能與減數(shù)分裂有關(guān)。（2）為探究tut突變體的遺傳特性，研究人員做了雜交實驗，結(jié)果如下。根據(jù)雜交實驗結(jié)果可知，___為隱性性狀。推測它們的遺傳遵循基因的_________定律。若F1與tut突變體雜交后代的性狀及其分離比為__________，則說明上述推測正確。（3）經(jīng)過文獻(xiàn)查閱，發(fā)現(xiàn)已報道有bgcn突變體與tut突變體性狀一樣，研究人員為探究tut突變體的突變基因是否就是bgcn突變體的突變基因，做了如下實驗：實驗結(jié)果表明：___________，理由是_____________________________________。（4）研究人員采用缺失定位法對tut突變體的突變基因進(jìn)行定位：將一株一條染色體缺失某片段的果蠅(缺失突變體)與tut突變體雜交，如果F1表現(xiàn)型會出現(xiàn)過度增殖，則說明____________________。研究人員將tut突變體與一系列缺失突變體果蠅做雜交，發(fā)現(xiàn)tut突變體與編號為BL7591、BL24400、BL26830、BL8065的果蠅缺失突變體雜交后代表型均有過度增殖，tut突變體的突變基因應(yīng)該位于這些染色體缺失區(qū)域的_______(交集/并集)區(qū)域。8．（10分）Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞。科研人員利用胚眙干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療，其技術(shù)流程如圖（圖中數(shù)字序號表示的是相關(guān)過程）。請回答:（1）過程①將進(jìn)行培養(yǎng)的上皮細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中，接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于__________________時期。（2）過程②利用的技術(shù)是____________________，當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時，可從其_________分離出ES細(xì)胞。（3）過程③中獲取的目的基因是____________________，若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，需要構(gòu)建_______________________，構(gòu)建之前可以根據(jù)_______________________設(shè)計引物，利用PCR技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。為了檢測ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因，可采用______________技術(shù)。（4）按此方法和圖示技術(shù)流程，完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的酶有___________和耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）等。通測Rag2基因的表達(dá)情況，可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì)，用__________________進(jìn)行雜交實驗。9．（10分）正常細(xì)胞不能合成干擾素，但含有干擾素基因。我國科學(xué)家釆用基因工程技術(shù)生產(chǎn)干擾素a-2b已實現(xiàn)量產(chǎn)。具體做法是將產(chǎn)生干擾素的人白細(xì)胞的mRNA分離，反轉(zhuǎn)錄得到干擾素基因。將含有四環(huán)素、氨芐青霉素抗性基因的質(zhì)粒PBR322和干擾素基因進(jìn)行雙酶切，用連接酶連接。將重組載體DNA分子在一定條件下導(dǎo)入大腸桿菌，在培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)，檢測干擾素的表達(dá)量，選出高效表達(dá)的工程菌。請回答：（1）在分化誘導(dǎo)因子作用下，正常細(xì)胞可以擺脫抑制、合成干擾素，該過程發(fā)生的實質(zhì)是________________________________（2）據(jù)下圖分析，構(gòu)建重組載體DNA分子時，可以選用_____兩種限制酶對質(zhì)粒pBR322和干擾素基因進(jìn)行雙酶切，目的是既能保證目的基因和質(zhì)粒正向連接，又能防止_____________________________(答兩點)。（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌中，然后將細(xì)菌涂布到含_____的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，就可得到含質(zhì)粒PBR322或重組質(zhì)粒的細(xì)菌單菌落；再從每一個單菌落中挑取部分細(xì)菌轉(zhuǎn)涂到含有_____的培養(yǎng)基上，不能生長的絕大部分是含有重組質(zhì)粒的細(xì)菌，原因是_____（4）干擾素在體外保存非常困難，如果將其分子中的一個半胱氨酸變成絲氨酸，在-70°C條件下可以保存半年。實現(xiàn)這一轉(zhuǎn)變需要直接對_____進(jìn)行修飾或改造，這屬于蛋白質(zhì)工程的范疇。10．（10分）宮頸癌是由人乳頭瘤病毒（HPV）感染引起的，某實驗小組為了檢測牛痘重組病毒疫苗ta-HPV對宮頸癌的預(yù)防效果，將未感染HPV的多只生理狀況相同的健康雌性小鼠隨機(jī)均分為甲、乙、丙三組，實驗過程及結(jié)果如下圖所示。請回答下列問題：（1）向小鼠體內(nèi)注射ta-HPV后，進(jìn)入機(jī)體的ta-HPV首先被_________攝取和處理并傳給T細(xì)胞，受抗原刺激的T細(xì)胞產(chǎn)生淋巴因子。淋巴因子具有_________的功能。（2）15天后同時向甲、乙兩組小鼠注射HPV后，甲組小鼠體內(nèi)的抗體濃度峰值大于乙組的，峰值出現(xiàn)時間也早于乙組小鼠，原因是___________________________。（3）實驗小組將已免疫甲組小鼠的血漿注射到丙組小鼠體內(nèi)后再注射HPV，培養(yǎng)30天后小鼠未被檢測到患宮頸癌，其原因是___________________________。（4）給小鼠注射HPV會誘發(fā)小鼠患宮頸癌等惡性腫瘤，主要是機(jī)體免疫系統(tǒng)的_________功能下降甚至喪失導(dǎo)致的。11．（15分）下圖表示人體神經(jīng)系統(tǒng)對排尿的控制，其中尿道內(nèi)、外括約肌都是一種環(huán)形肌肉，逼尿肌分布于膀胱壁。請據(jù)圖回答：（1）當(dāng)膀胱充盈后，人會產(chǎn)生尿意，請用箭頭和圖中必要文字、字母表示產(chǎn)生尿意的神經(jīng)傳導(dǎo)途徑__________________________________。在神經(jīng)沖動傳導(dǎo)過程中，c神經(jīng)纖維膜內(nèi)形成向_____________方向的局部電流。（2）當(dāng)尿液進(jìn)入尿道后，尿道感受器興奮，興奮傳入初級排尿中樞，進(jìn)一步加強(qiáng)排尿中樞的活動，這是一種_________（“正反饋”或“負(fù)反饋”）調(diào)節(jié)。（3）人產(chǎn)生尿意的部位在_________。某人在車禍中下丘腦受到暫時性損傷，出現(xiàn)多尿癥狀，請分析原因____________________________________。（4）大部分同學(xué)們不記得小時候尿床的經(jīng)歷，這種短期記憶主要與神經(jīng)元的活動及神經(jīng)元之間的聯(lián)系有關(guān)，尤其是與大腦皮層下________有關(guān)。但是還有部分同學(xué)還記得小時候尿床經(jīng)歷，這種長期記憶可能與_______有關(guān)。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

當(dāng)細(xì)胞缺氧時，HIF-Iα與ARNT結(jié)合，通過調(diào)節(jié)基因表達(dá)促進(jìn)EPO的生成，使紅細(xì)胞數(shù)量增加，以運(yùn)輸更多氧氣；當(dāng)氧氣充足時，HIF-1α羥基化后被蛋白酶降解。【詳解】A、HIF-1α能被蛋白酶降解，說明其本質(zhì)為蛋白質(zhì)，降解后生成多種氨基酸分子，A正確；B、由題意可知EPO是一種蛋白質(zhì)激素，其翻譯過程中tRNA攜帶氨基酸與mRNA上密碼子發(fā)生堿基互補(bǔ)配對，B正確；C、由題干可知HIF-lα與ARNT結(jié)合到DNA上對基因的表達(dá)有調(diào)節(jié)作用并非催化，C錯誤；D、高海拔地區(qū)氧氣稀薄，細(xì)胞缺氧，HIF-Iα與ARNT結(jié)合，生成更多EPO，促進(jìn)紅細(xì)胞生成，D正確。故選C?！军c睛】本題通過考查人體缺氧時HIF-1α的調(diào)節(jié)機(jī)制，來考查基礎(chǔ)知識的掌握和運(yùn)用，以及獲取題干信息和讀圖能力。2、D【解析】

HIV通過識別靶細(xì)胞表面的受體進(jìn)入靶細(xì)胞，故可以通過敲除CCR5避免HIV入侵。【詳解】A、CCR5基因可能還參與了其他生理過程的調(diào)控，敲除CCR5基因后其他生理過程會受到影響，A錯誤；B、基因編輯技術(shù)有可能因編輯對象錯誤（脫靶）造成不可預(yù)知的后果，故會引發(fā)民眾的擔(dān)憂，B錯誤；C、被編輯個體受其他疾病感染的風(fēng)險可能會提高，會引發(fā)民眾的擔(dān)憂，C錯誤；D、該技術(shù)不符合人類倫理道德，D正確。故選D。3、B【解析】

（1）臭氧層破壞原因：空氣中的氟利昂等物質(zhì)的大量排放；危害：臭氧層破壞后，到達(dá)地球表面的紫外線將增加，給人類健康和生態(tài)環(huán)境帶來危害（2）酸雨形成原因：主要是硫和氮的氧化物溶于雨水而降落至土壤或水體中，酸雨的pH＜5.6（3）水污染表現(xiàn)：富營養(yǎng)化；結(jié)果：若表現(xiàn)在海洋中稱為赤潮，若表現(xiàn)在湖泊等淡水流域稱為水華?！驹斀狻緼、溫室效應(yīng)會引起全球氣候變暖，永凍土將會融化，造成廣大區(qū)域內(nèi)凍土公路、鐵路和民用建筑的破壞，A正確；B、植樹造林是防治溫室效應(yīng)最有效的措施；防治酸雨最有效的辦法是限制二氧化硫和一氧化氮的排放量，或者從燃料中把這些物質(zhì)去掉，B錯誤；C、嚴(yán)格控制污染源、發(fā)展生產(chǎn)工藝無害化、工業(yè)用水封閉化、采用無水造紙法、無水印染法和建立污水處理廠等措施均屬于水體污染治理的措施，C正確；D、臭氧能吸收對人體和生物有致癌和殺傷作用的紫外線、X射線和γ射線，從而保護(hù)人類和其他生物免受短波輻射的傷害，大氣中臭氧層減少會使人體免疫功能減退，D正確。故選B?！军c睛】本題考查全球性生態(tài)環(huán)境問題，要求考生識記全球性生態(tài)環(huán)境問題的類型、產(chǎn)生原因、危害及緩解措施等基礎(chǔ)知識，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。4、A【解析】

1、細(xì)胞分化：（1）概念：在個體發(fā)育中，由一個或多個細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生一系列穩(wěn)定性差異的過程。（2）特征：具有持久性、穩(wěn)定性和不可逆性。（3）意義：是生物個體發(fā)育的基礎(chǔ)。（4）原因：基因選擇性表達(dá)的結(jié)果，遺傳物質(zhì)沒有改變。2、細(xì)胞中的無機(jī)鹽存在形式：細(xì)胞中大多數(shù)無機(jī)鹽以離子的形式存在，葉綠素中的Mg、血紅蛋白中的Fe等以化合態(tài)。3、B淋巴細(xì)胞受抗原刺激分化為漿細(xì)胞和記憶細(xì)胞，T淋巴細(xì)胞受抗原刺激分化為效應(yīng)T細(xì)胞和記憶細(xì)胞，其中漿細(xì)胞的作用是產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，沒有識別抗原的作用，記憶細(xì)胞在相同的抗原再次侵入人體后參與二次免疫，效應(yīng)T細(xì)胞與被抗原入侵的靶細(xì)胞密切接觸，導(dǎo)致靶細(xì)胞裂解死亡?！驹斀狻緼、細(xì)胞中大多數(shù)無機(jī)鹽以離子的形式存在，對維持生命活動有重要作用，A正確；B、同一個體不同細(xì)胞功能的差異主要是因為不同細(xì)胞表達(dá)的基因不同，B錯誤；C、再次接觸到同種抗原時，記憶細(xì)胞能迅速增殖分化，產(chǎn)生大量漿細(xì)胞，漿細(xì)胞產(chǎn)生大量抗體，C錯誤；D、血糖下降時，肝細(xì)胞中的糖原能被分解成葡萄糖，從而維持血糖平衡，肌糖原不能分解為葡萄糖，D錯誤。故選A。5、B【解析】

生態(tài)系統(tǒng)中信息傳遞在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上有兩個方面的作用，一方面提高農(nóng)產(chǎn)品或畜產(chǎn)品的產(chǎn)量，二是對有害動物進(jìn)行控制。特異性免疫包括體液免疫和細(xì)胞免疫，其具體過程如下：

【詳解】A、T2噬菌體遺傳信息傳遞在大腸桿菌的細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，核糖體上進(jìn)行翻譯，A錯誤；B、利用昆蟲信息素誘捕或警示有害動物，降低害蟲的種群密度，屬于生物防治，B正確；C、B細(xì)胞受到抗原刺激，在淋巴因子的作用下，被激活并進(jìn)行增殖、分化形成漿細(xì)胞和記憶細(xì)胞，C錯誤；D、激素的受體不一定分布在細(xì)胞膜，還可能在細(xì)胞內(nèi)，如性激素，D錯誤。故選B。6、A【解析】

藍(lán)藻是原核生物，沒有被核膜包圍的細(xì)胞核，沒有復(fù)雜的細(xì)胞器，只有核糖體一種細(xì)胞器，含有葉綠素和藻類素，能進(jìn)行光合作用合成有機(jī)物，屬于生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)者；黑藻是真核生物，有成形的細(xì)胞核，有復(fù)雜的細(xì)胞器，能進(jìn)行光合作用合成有機(jī)物，也屬于生產(chǎn)者?！驹斀狻緼、藍(lán)藻是原核生物，黑藻是真核生物，都能進(jìn)行光合作用，都具有細(xì)胞壁，都是生產(chǎn)者，A正確；B、藍(lán)藻的光合色素分布在質(zhì)膜上，B錯誤；C、細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)就是DNA，無主次之分，C錯誤；D、藍(lán)藻無染色體，D錯誤。故選A?！军c睛】本題考查原核細(xì)胞和真核的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同，首先明確藍(lán)藻是原核生物，黑藻是真核生物；其次要求識記原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同，能運(yùn)用所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項。二、綜合題：本大題共4小題7、8和4過度增殖分離正常有絲分裂∶過度增殖=1∶1tut突變體的突變基因與bgcn突變體的突變基因不是同一個基因tut突變體與bgcn突變體雜交，F(xiàn)1為正常表現(xiàn)型，F(xiàn)2性狀分離比為9∶7，符合基因自由組合定律，說明這兩個突變體的突變基因分別在兩對同源染色體上tut突變體的突變基因位于該果蠅的染色體缺失片段交集【解析】

根據(jù)題意可知，本研究是探究tut突變體的遺傳特性，野生型果蠅和tut突變體雜交，子代可進(jìn)行正常有絲分裂，說明該突變基因為隱性遺傳，并遵循基因的分離定律。bgcn突變體與tut突變體雜交，F(xiàn)2出現(xiàn)兩種表現(xiàn)型，且比例為9∶7，說明bgcn突變體的bgcn基因和tut基因分別位于兩對同源染色體上，且基因表達(dá)互不影響。【詳解】（1）含8條染色體的精原細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成含4條染色體的細(xì)胞；含16條染色體的細(xì)胞應(yīng)處于有絲分裂的后期。（2）F1中雌雄果蠅雜交，F(xiàn)2中正常有絲分裂：過度增殖=3:1，表明過度增殖為隱性性狀，且符合基因的分離定律。假設(shè)顯性基因為A，隱性基因為a，若上述推測正確的話，則F1的基因型為Aa，tut突變體的基因型為aa，則F1與tut突變體雜交后代的性狀及其分離比為正常有絲分裂：過度增殖=1:1。（3）據(jù)遺傳圖解可知，tut突變體與bgcn突變體雜交，F(xiàn)1為正常表型，F(xiàn)2性狀分離比為9:7，是9:3:3:1的變式，說明符合基因自由組合定律，tut突變體的突變基因與bgcn突變體的突變基因不是同一個基因，且這兩個突變體的突變基因分別在兩對同源染色體上。（4）若將未突變的果蠅與tut突變體雜交，則F1表型為正常的有絲分裂，但與缺失突變體雜交，F(xiàn)1表型會出現(xiàn)過度增殖，則說明tut突變體的突變基因位于該果蠅的染色體缺失片段。tut突變體與一系列缺失突變體果蠅做雜交，發(fā)現(xiàn)tut突變體與編號為BL7591、BL24400、BL26830、BL8065的果蠅缺失突變體雜交后代表型均有過度增殖，tut突變體的突變基因應(yīng)該位于染色體缺失區(qū)域的交集區(qū)域。【點睛】如果兩對等位基因位于兩對同源染色體上，那么雙雜合個體自交，后代會出現(xiàn)9：3：3：1的比例，如果兩對等位基因位于一對同源染色體上，那么雙雜合個體自交，后代不會出現(xiàn)9：3：3：1的比例。有時考查的是基因自由組合定律的變式，比如本題中的9：7。8、MⅡ中早期胚胎培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（正常的）Rag2基因含（正常的）Rag2基因的基因表達(dá)載體（正常的）Rag2基因的脫氧核苷酸序列（或堿基對序列或遺傳信息）DNA分子雜交限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和胰蛋白酶抗Rag2蛋白的抗體【解析】

題圖分析：圖示是利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療的過程圖解，其中①表示核移植過程，②表示早期胚胎培養(yǎng)過程，③表示采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。然后將改造后的受體細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)之后回輸?shù)交蛉毕菪∈篌w內(nèi)獲得治療?！驹斀狻浚?）MII中期的卵母細(xì)胞含有細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)和環(huán)境條件，故接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于MII中期，即過程①將進(jìn)行培養(yǎng)的上皮細(xì)胞注入去核的處于MII中期的卵母細(xì)胞中。（2）過程②利用的技術(shù)是早期胚胎培養(yǎng)，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胚胎的各種組織，滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤，故當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時，可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出具有全能性的ES細(xì)胞。（3）根據(jù)題干信息可知，過程③中獲取的目的基因是（正常的）Rag2基因，若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，需要構(gòu)建含（正常的）Rag2基因的基因表達(dá)載體，構(gòu)建之前可以根據(jù)Rag2基因的脫氧核苷酸序列（或堿基對序列或遺傳信息）設(shè)計引物，利用PCR技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。將目的基因?qū)隕S細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法，為了檢測ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因，可采用DNA分子雜交技術(shù)。（4）按此方法和圖示技術(shù)流程，完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的技術(shù)包括基因工程、PCR技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，其中基因工程涉及的酶有限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶，動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)涉及的酶有胰蛋白酶，PCR技術(shù)涉及的酶有耐高溫DNA聚合酶（Taq酶）等。檢測Rag2基因的表達(dá)情況，可采用抗原一抗體雜交法，即提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì)，用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實驗?！军c睛】熟知圖中個步驟的含義以及操作流程是解答本題的關(guān)鍵！掌握關(guān)于基因治療的各個環(huán)節(jié)的基礎(chǔ)知識是解答本題的另一關(guān)鍵！9、基因的選擇性表達(dá)酶B、酶C質(zhì)粒與目的基因自身環(huán)化；防止同時破壞質(zhì)粒中的兩個標(biāo)記基因氨芐青霉素四環(huán)素目的基因的插入破壞了四環(huán)素抗性基因，重組質(zhì)粒上只含有氨芐青霉素抗性基因，而質(zhì)粒上含氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)菌不能生長，而只導(dǎo)入質(zhì)粒的細(xì)菌能生長基因【解析】

1、基因表達(dá)載體的組成：目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等。標(biāo)記基因可便于目的基因的鑒定和篩選。2、由于不同限制酶識別的堿基序列不同，所以在切割質(zhì)粒和目的基因時常用雙酶切，可防止目的基因反向粘連和質(zhì)粒自行環(huán)化?！驹斀狻浚?）細(xì)胞分化的實質(zhì)是基因選擇性表達(dá)，故在分化誘導(dǎo)因子作用下，正常細(xì)胞可以擺脫抑制、合成干擾素，該過程發(fā)生的實質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。（2）標(biāo)記基因可用于鑒定目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，所以重組質(zhì)粒上至少要保留一個標(biāo)記基因，由于兩個標(biāo)記基因上均含有酶A的切點，所以不能用酶A切割，為了防止連接時目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化，故在構(gòu)建重組載體DNA分子時，可以選用酶B和酶C兩種限制酶對質(zhì)粒pBR322和干擾素基因進(jìn)行雙酶切。（3）由于質(zhì)粒和重組質(zhì)粒上都含有氨芐青霉素抗性基因，而未導(dǎo)入質(zhì)粒的細(xì)菌不含有該抗性基因，所以將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌中，然后將細(xì)菌涂布到含氨芐青霉素的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，就可得到含質(zhì)粒PBR322或重組質(zhì)粒的細(xì)菌單菌落；由于目的基因的插入破壞了四環(huán)素抗性基因，重組質(zhì)粒上只含有氨芐青霉素抗性基因，而質(zhì)粒上含有氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，因此再從前面培養(yǎng)基上獲得的每一個單菌落中挑取部分細(xì)菌轉(zhuǎn)涂到含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，不能生長的絕大部分是含有重組質(zhì)粒的細(xì)菌。（4）蛋白質(zhì)工程是通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造的一項技術(shù)?！军c睛】本題考查基因工程和蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的操作工具及操作步驟等，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱理解和應(yīng)用層次的考查。10、吞噬細(xì)胞促進(jìn)B細(xì)胞增殖、分化產(chǎn)生漿細(xì)胞和記憶細(xì)胞甲組小鼠初次免疫后機(jī)體產(chǎn)生了記憶細(xì)胞，二次免疫會導(dǎo)致記憶細(xì)胞快速增殖分化產(chǎn)生大量漿細(xì)胞，以合成大量抗體已免疫的甲組小鼠血漿中含有抗HPV的抗體監(jiān)控和清除【解析】

據(jù)圖分析，給甲組健康小鼠注射ta-HPV，甲組小鼠的體內(nèi)可產(chǎn)生一定量的抗HPV的抗體和少量的記憶細(xì)胞，當(dāng)HPV再次進(jìn)入甲組小鼠體內(nèi)，這些抗體和少量的記憶細(xì)胞最終會產(chǎn)生更強(qiáng)的特異性免疫反應(yīng)，及時將HPV清除，甲組小鼠能正常生活；乙組小鼠注射HPV，體內(nèi)沒有足夠的抗體，小鼠全部死亡?！驹斀狻浚?）進(jìn)入機(jī)體的ta-HPV首先被巨噬細(xì)胞攝取處理并傳給T細(xì)胞；T細(xì)胞產(chǎn)生的淋巴因子具有促進(jìn)B細(xì)胞增殖、分化產(chǎn)生漿細(xì)胞和記憶細(xì)胞的作用；（2）甲組小鼠提前注射了ta-HPV，經(jīng)過初次免疫后已經(jīng)產(chǎn)生了記憶細(xì)胞，15天后再次注射HPV，甲組小鼠體內(nèi)進(jìn)行二次免疫，使記憶細(xì)胞快速增殖分化產(chǎn)生大量漿細(xì)胞