ICS07.080G00中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)核酸檢測(cè)試劑盒溯源性技術(shù)規(guī)范T2019-08-30發(fā)布2019-08-30實(shí)施國家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局GB／T37868—2019前言 引言 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4溯源性技術(shù)要求 4.2具體要求 5溯源性建立 5.2溯源性的建立 5.3溯源等級(jí)圖 ⅠGB／T37868—2019本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國計(jì)量科學(xué)研究院。ⅡGB／T37868—2019核酸檢測(cè)試劑盒是一類應(yīng)用于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR,分子雜交、序列測(cè)定等技術(shù)，以核酸為檢測(cè)目標(biāo)物的產(chǎn)品，廣泛應(yīng)用于法醫(yī)DNA鑒定、轉(zhuǎn)基因核酸檢驗(yàn)、病毒及細(xì)菌等病原微生物核酸檢驗(yàn)、遺傳病及腫瘤基因檢測(cè)等領(lǐng)域。本標(biāo)準(zhǔn)是對(duì)核酸檢測(cè)試劑盒中試劑組分標(biāo)稱特性值和量值的溯源性進(jìn)行規(guī)范。1GB／T37868—2019核酸檢測(cè)試劑盒溯源性技術(shù)規(guī)范本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了核酸檢測(cè)試劑盒溯源性的術(shù)語和定義、技術(shù)要求、溯源性建立。本標(biāo)準(zhǔn)適用于研發(fā)、生產(chǎn)、應(yīng)用過程中核酸檢測(cè)試劑盒標(biāo)示的試劑組分的標(biāo)稱特性值和量值的溯源性建立。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。通用計(jì)量術(shù)語及定義生物計(jì)量術(shù)語及定義3術(shù)語和定義及界定的術(shù)語和定義適用于本文件。為了便于使用，以下重復(fù)列出了及中的某些術(shù)語和定義。3.1溯源性通過一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈，使測(cè)量結(jié)果或測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)的值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)，通常是與國家測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)或國際測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來的特性。注1：此概念常用形容詞“可溯源的”來表述。注2：這條不間斷的比較鏈稱為溯源鏈。定義標(biāo)稱特性不以大小區(qū)分的現(xiàn)象、物體或物質(zhì)的特性。例2：油漆樣品的顏色。例3：化學(xué)中斑點(diǎn)測(cè)試的顏色。例4：ISO兩個(gè)字母的國家代碼。例5：在多肽中氨基酸的序列。注1：標(biāo)稱特性具有一個(gè)值，它可用文字、字母代碼或其他方式表示。定義3.3量值全稱量的值簡稱值用數(shù)和參照對(duì)象一起表示的量的大小。2GB／T37868—2019注1：根據(jù)參照對(duì)象的類型，量值可以表示為：一個(gè)數(shù)和一個(gè)測(cè)量單位的乘積，量綱為一，測(cè)量單位為1,通常不標(biāo)識(shí)；一個(gè)數(shù)和一個(gè)參照對(duì)象的測(cè)量程序；一個(gè)數(shù)和一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。注2：數(shù)可以是復(fù)數(shù)。注3：一個(gè)量值可用多種方式表示。注4：對(duì)向量或張量，每個(gè)分量有一個(gè)量值。,定義3.4測(cè)量不確定度根據(jù)所用到的信息，表征賦予被測(cè)量量值分散性的非負(fù)參數(shù)。,定義3.5準(zhǔn)確度等級(jí)在規(guī)定工作條件下，符合規(guī)定的計(jì)量要求，使測(cè)量誤差或儀器不確定度保持在規(guī)定極限內(nèi)的測(cè)量儀器或測(cè)量系統(tǒng)的等別或級(jí)別。注1：準(zhǔn)確度等級(jí)通常用約定采用的數(shù)字或符號(hào)表示。注2：準(zhǔn)確度等級(jí)也適用于實(shí)物量具。,定義3.6最大允許誤差對(duì)給定的測(cè)量、測(cè)量儀器或測(cè)量系統(tǒng)，由規(guī)范或規(guī)程所允許的，相對(duì)于已知參考量值的測(cè)量誤差的極限值。注1：通常，術(shù)語“最大允許誤差”或“誤差限”是用在有兩個(gè)極端值的場(chǎng)合。注2：不應(yīng)該用術(shù)語“容差”表示“最大允許誤差”。,定義4溯源性技術(shù)要求核酸檢測(cè)試劑盒溯源性技術(shù)要求包括：試劑盒中試劑組分的標(biāo)稱特性值和量值的溯源性要求。核酸檢測(cè)試劑盒的研發(fā)、生產(chǎn)中，其試劑組分的標(biāo)稱特性值和量值要明確，并規(guī)范表述，應(yīng)具有能夠證明試劑盒中試劑組分的標(biāo)稱特性值和量值具備溯源性的證據(jù)。核酸檢測(cè)試劑盒中試劑組分標(biāo)稱特性值的溯源性要求如下：a)引物和探針序列：標(biāo)出堿基特異排列順序及堿基個(gè)數(shù)，適用時(shí)，包括修飾。b)陽性質(zhì)控和陰性質(zhì)控序列：標(biāo)出目標(biāo)基因堿基特異排列順序及堿基個(gè)數(shù)，或標(biāo)出組成成分。注：陰性質(zhì)控為緩沖溶液或水時(shí)，不需要提供序列相關(guān)文件，需給出組分說明。c)空白對(duì)照：標(biāo)出具體成分說明，如緩沖溶液或水等。不需要給出序列相關(guān)文件。核酸檢測(cè)試劑盒中試劑組分標(biāo)示的體積值、濃度值、分子質(zhì)量等量值的溯源性要求如下：3GB／T37868—2019a)體積值、濃度值等應(yīng)具有法定計(jì)量單位及不確定度；引物、探針應(yīng)標(biāo)出分子質(zhì)量及堿基個(gè)數(shù)，脫氧核糖核苷三磷酸(應(yīng)給出脫氧核糖核苷三磷酸分子質(zhì)量。核酸檢測(cè)試劑盒中的標(biāo)稱特性值和量值應(yīng)繪制溯源等級(jí)圖，用以表明試劑組分標(biāo)稱特性值和量值的計(jì)量特性與給定測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)之間的關(guān)系。4.2.4溯源性證據(jù)文件核酸檢測(cè)試劑盒應(yīng)具備的溯源性證據(jù)文件包括但不限于以下內(nèi)容：a)標(biāo)稱特性值和量值確定方法的確認(rèn)記錄；b)量值測(cè)量不確定度的評(píng)估程序及評(píng)估報(bào)告；c)用于確定標(biāo)稱特性值和量值的相關(guān)儀器計(jì)量校準(zhǔn)證書；d)用于確定標(biāo)稱特性值和量值的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書。5溯源性建立以核酸檢測(cè)試劑盒中試劑組分的標(biāo)稱特性值和量值為對(duì)象，通過不間斷的溯源鏈與計(jì)量學(xué)上高等級(jí)的測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)建立聯(lián)系，保證試劑盒組分標(biāo)稱特性值和量值的有效性。5.2溯源性的建立5.2.1標(biāo)稱特性值溯源性的建立核酸檢測(cè)試劑盒中的引物、探針、陽性質(zhì)控、陰性質(zhì)控、酶等試劑組分的標(biāo)稱特性值需要建立溯源性，建立的要素見表1。表1核酸檢測(cè)試劑盒試劑組分標(biāo)稱特性值溯源性建立要素標(biāo)稱特性值測(cè)定方法溯源標(biāo)準(zhǔn)證據(jù)文件序列序列測(cè)定參考序列、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)序列、序列測(cè)定結(jié)果文件a、儀器校準(zhǔn)證書、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書陽性質(zhì)控序列序列測(cè)定參考序列標(biāo)準(zhǔn)序列、序列測(cè)定結(jié)果文件、儀器校準(zhǔn)證書陰性質(zhì)控序列序列測(cè)定參考序列標(biāo)準(zhǔn)序列、序列測(cè)定結(jié)果文件、儀器校準(zhǔn)證書、成分說明b酶功能序列序列測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)序列測(cè)定文件、儀器校準(zhǔn)證書、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書等，證據(jù)文件為序列測(cè)定結(jié)果文件。b陰性質(zhì)控為緩沖溶液或水時(shí)，不需要提供序列相關(guān)文件。需給出成分說明，如緩沖溶液或水等。4GB／T37868—20195.2.2量值溯源性的建立核酸檢測(cè)試劑盒試劑組分的體積、質(zhì)量、濃度、酶活力等的量值，需要建立溯源性，建立的要素見表2核酸檢測(cè)試劑盒試劑組分量值溯源性建立要素量值測(cè)定方法溯源標(biāo)準(zhǔn)證據(jù)文件體積值質(zhì)量值濃度值分子質(zhì)量容量測(cè)定質(zhì)量測(cè)定質(zhì)譜測(cè)定計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)（砝碼、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等）用于傳遞量值的計(jì)量器具（天平、容量瓶、移液器等）體積、質(zhì)量測(cè)定報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書校準(zhǔn)證書陽性質(zhì)控體積值質(zhì)量值濃度值容量測(cè)定質(zhì)量測(cè)定計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)（砝碼、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等）用于傳遞量值的計(jì)量器具（天平、容量瓶、移液器等）體積、質(zhì)量測(cè)定報(bào)告校準(zhǔn)證書陰性質(zhì)控體積值質(zhì)量值濃度值容量測(cè)定質(zhì)量測(cè)定計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)（砝碼、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等）用于傳遞量值的計(jì)量器具（天平、容量瓶、移液器等）體積、質(zhì)量測(cè)定報(bào)告校準(zhǔn)證書dNTP體積值質(zhì)量值濃度值分子質(zhì)量容量測(cè)定質(zhì)量測(cè)定質(zhì)譜測(cè)定計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)（砝碼、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等）用于傳遞量值的計(jì)量器具（天平、容量瓶、移液器等）體積、質(zhì)量測(cè)定報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書校準(zhǔn)證書鎂離子體積值質(zhì)量值濃度值分子質(zhì)量容量測(cè)定質(zhì)量測(cè)定質(zhì)譜測(cè)定計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)（砝碼、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等）用于傳遞量值的計(jì)量器具（天平、容量瓶、移液器等）體積、質(zhì)量測(cè)定報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書校準(zhǔn)證書酶體積值質(zhì)量值濃度值酶活力值容量測(cè)定質(zhì)量測(cè)定酶活力測(cè)定計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)（砝碼、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等）用于傳遞量值的計(jì)量器具（天平、容量瓶、移液器等）酶活力約定方法或參考方法體積、質(zhì)量測(cè)定報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書校準(zhǔn)證書酶活力測(cè)定報(bào)告工作標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)體積值質(zhì)量值特性量值容量測(cè)定質(zhì)量測(cè)定特性量值確定計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)（砝碼、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等）用于傳遞量值的計(jì)量器具（天平、容量瓶、移液器等）約定方法或參考方法體積、質(zhì)量測(cè)定報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書校準(zhǔn)證書特性量值確定報(bào)告5.3溯源等級(jí)圖核酸檢測(cè)試劑盒中試劑組分的標(biāo)稱特性值和量值要建立溯源性，繪制溯源等級(jí)圖。溯源等級(jí)圖應(yīng)5GB／T37868—2019清晰標(biāo)明標(biāo)稱特性值和量值溯源到上級(jí)計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)的途徑。以下給出溯源等級(jí)圖的示例圖。5.3.2序列溯源等級(jí)圖序列溯源到參考序列值，其溯源等級(jí)圖示例見圖1。圖1序列溯源等級(jí)圖5.3.3容量溯源等級(jí)圖核酸檢測(cè)試劑盒中試劑組分容量溯源等級(jí)圖示例見圖2。圖2容量溯源等級(jí)圖5.3.4質(zhì)量溯源等級(jí)圖核酸檢測(cè)試劑盒中試劑組分質(zhì)量溯源等級(jí)圖示例見圖3。6GB／T37868—2019圖3質(zhì)量溯源等級(jí)圖5.3.5分子質(zhì)量溯源等級(jí)圖分子質(zhì)量測(cè)定溯源到相對(duì)原