福建省龍巖一中2025屆高考生物一模試卷注意事項：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫在答題卡上。2．回答選擇題時，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑，如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號。回答非選擇題時，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下圖是人體某免疫過程的部分示意圖，下列相關(guān)敘述正確的是（）A．細(xì)胞甲是漿細(xì)胞，由B淋巴細(xì)胞增殖、分化而來B．細(xì)胞甲分泌的抗體直接作用于細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)的抗原C．細(xì)胞乙在非特異性免疫和特異性免疫中都能發(fā)揮作用D．各種漿細(xì)胞分泌不同抗體的原因是其基因的種類不同2．土壤內(nèi)含有松散的顆粒，有利于微生物和小動物的生存，下列說法正確的是（）A．土壤中微生物的存在有利于生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)B．土壤中微生物能將有機(jī)物分解，釋放的能量供給綠色植物利用C．利用土壤小動物的避光趨濕怕高溫，可采用帶燈罩的日光燈制作誘蟲器來進(jìn)行收集D．為調(diào)查土壤中小動物的豐富度，可選用樣方法，并隨機(jī)取樣3．如圖是一個基因型為AaBb的卵原細(xì)胞分裂過程中某一時期的示意圖。該細(xì)胞（）A．有兩個染色體組、4個核DNA分子B．正發(fā)生著同源染色體分離C．產(chǎn)生的卵細(xì)胞基因型是AB或AbD．產(chǎn)生過程中發(fā)生了染色體結(jié)構(gòu)變異4．赫爾希和蔡斯進(jìn)行了驗(yàn)證DNA是噬菌體遺傳物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)。下列相關(guān)說法錯誤的是（）①將大腸桿菌細(xì)胞分別放在含放射性同位素35S或32P的培養(yǎng)基中培養(yǎng)②將大腸桿菌細(xì)胞放在含放射性同位素35S和32P的培養(yǎng)基中培養(yǎng)③用T2噬菌體分別侵染被35S或32P標(biāo)記的大腸桿菌使T2噬菌體分別被35S或32P標(biāo)記④噬菌體侵染大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)過程：吸附→注入→復(fù)制→組裝→釋放⑤用35S或32P標(biāo)記噬菌體DNA的實(shí)驗(yàn)方法叫熒光標(biāo)記法⑥用32P標(biāo)記的噬菌體侵染大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，上清液理論上不含放射性，因噬菌體已將含32P的DNA全部注入到大腸桿菌內(nèi)⑦赫爾希和蔡斯的噬菌體侵染大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)證明了DNA是主要的遺傳物質(zhì)A．①④⑥ B．②③⑤ C．④⑥⑦ D．②⑤⑦5．關(guān)于“觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂實(shí)驗(yàn)”及相關(guān)敘述錯誤的是（）A．在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時期的細(xì)胞，分裂間期的細(xì)胞最多B．通過統(tǒng)計視野中不同時期的細(xì)胞數(shù)目，可比較細(xì)胞周期不同時期的時間長短C．有絲分裂產(chǎn)生的子細(xì)胞染色體數(shù)目不變，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上保持相似性D．培養(yǎng)洋蔥根尖時添加適量DNA合成可逆抑制劑，可使細(xì)胞停滯在細(xì)胞周期的分裂期6．測定玉米正常植株和矮化突變體植株的內(nèi)源赤霉素含量，結(jié)果如下圖。用等量外源赤霉素分別處理正常植株和矮化突變體植株的莖，正常植株莖的節(jié)間無顯著變化，矮化突變體植株莖的節(jié)間恢復(fù)到正常植株的長度。下列敘述錯誤的是（）A．赤霉素能促進(jìn)玉米莖節(jié)間的伸長B．該實(shí)驗(yàn)不能說明赤霉素作用的兩重性C．不能確定該矮化突變體是由基因突變所致D．矮化突變體的莖可能對赤霉素的作用不敏感7．果蠅的紅眼對白眼顯性，有關(guān)基因位于X染色體上。人為地將相同數(shù)量的純合紅眼雌果蠅和白眼雄果蠅（親本）培養(yǎng)在同一環(huán)境中，若交配只發(fā)生在同一世代的雌雄個體之間且是隨機(jī)的，同時不考慮突變因素，那么，下列有關(guān)敘述中正確的是A．親本中紅眼基因頻率和白眼基因頻率相同B．F2的雌果蠅基因型相同，表現(xiàn)型不同C．白眼雌果蠅最先出現(xiàn)在F3，這是基因重組的結(jié)果D．F2和F3的雄果蠅都能產(chǎn)生3種基因型的配子8．（10分）下列有關(guān)高中生物實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A．觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布時，應(yīng)選擇染色均勻、色澤較淺的區(qū)域進(jìn)行觀察B．低溫誘導(dǎo)洋蔥根尖細(xì)胞染色體加倍的實(shí)驗(yàn)中能觀察到同源染色體聯(lián)會現(xiàn)象C．利用口腔上皮細(xì)胞觀察線粒體的實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞的完整性遭到破壞D．探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量動態(tài)變化的實(shí)驗(yàn)中無需要使用顯微鏡二、非選擇題9．（10分）癌細(xì)胞表面蛋白“PDL-1”與T細(xì)胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后，可抑制T細(xì)胞活性并啟動其凋亡，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進(jìn)行克隆、表達(dá)及生物學(xué)活性鑒定，為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點(diǎn)見圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細(xì)胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板；設(shè)計含有不同的限制酶切點(diǎn)的α和β序列為引物，通過____________________技術(shù)擴(kuò)增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進(jìn)行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建表達(dá)載體。該表達(dá)載體的組成，除了目的基因、標(biāo)記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴(kuò)增重組DNA。（4）將擴(kuò)增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達(dá)外源基因的原代293T細(xì)胞。一段時間后，為確定PD-1基因是否表達(dá)，檢測細(xì)胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，則可裂解293T細(xì)胞，提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞，其目的是_________________________。10．（14分）冰葉日中花是一種原產(chǎn)非洲的植物，長期逆境脅迫下，其光合作用能夠從C3途徑（卡爾文循環(huán)）可以變?yōu)镃AM途徑（圖一所示）。請回答下列問題：（1）適宜條件下，冰葉日中花通過C3途徑進(jìn)行光合作用，白天氣孔處于_________狀態(tài)，CO2與_________結(jié)合進(jìn)入卡爾文循環(huán)，卡爾文循環(huán)發(fā)生的場所是_________。（2）長期在高溫、缺水、高鹽等逆境脅迫下，冰葉日中花進(jìn)行CAM途徑，白天氣孔關(guān)閉，CO2來源于_________和_________。逆境脅迫下進(jìn)行CAM途徑的意義是_________。（3）圖二是長期在兩種條件下生長的冰葉日中花某一天的光合曲線圖，表示C3和CAM光合途徑分別是_________曲線與_________曲線。11．（14分）前不久，某生物公司的百白破疫苗檢驗(yàn)不符合規(guī)定。為生產(chǎn)高效價疫苗和簡化計劃免疫程序，科學(xué)家研制出基因工程乙肝—百白破（rHB-DTP）四聯(lián)疫苗，經(jīng)各項檢測均通過rHB-DTP四聯(lián)疫苗制檢規(guī)程的要求。其有效成分是乙肝病毒表面抗原和百日咳桿菌、白喉桿菌、破傷風(fēng)桿菌的類毒素。請分析回答：（1）為獲取百日咳桿菌類毒素的基因，可從百日咳桿菌的細(xì)胞中提取對應(yīng)mRNA，在________的作用下合成雙鏈cDNA片段，獲得的CNA片段與百日咳桿菌中該基因堿基序列________（填“相同”或“不同”）。（2）由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小，且序列已知，獲得目的基因可采用________，然后通過PCR技術(shù)大量擴(kuò)增，此技術(shù)的前提是已知________。（3）把目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時，科學(xué)家采用了改造后的腺病毒作為載體，寫出你認(rèn)為科學(xué)家選它的理由：________（寫出兩點(diǎn)）。（4）研究發(fā)現(xiàn)，如果將白喉桿菌類毒素20位和24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼幔庖咝Ч?，請完善此種技術(shù)的基本流程：從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)→________→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列。（5）實(shí)驗(yàn)證明，一定時間內(nèi)間隔注射該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的________細(xì)胞數(shù)量增多，當(dāng)同種抗原再次侵入人體時二次免疫的特點(diǎn)是________。12．圓褐固氮菌能將大氣中的氮?dú)廪D(zhuǎn)化為氨供自身利用，是異養(yǎng)需氧型的原核生物。某同學(xué)利用稀釋涂布平板法從土壤中分離獲得圓褐固氮菌?；卮鹣铝袉栴}。（1）根據(jù)菌落的____等特征，進(jìn)行反復(fù)分離、純化可以分離得到純化菌種。分離、純化圓褐固氮菌時不能隔絕空氣，其原因是___（答出兩點(diǎn)）。（2）某同學(xué)計劃統(tǒng)計土壤樣液中圓褐固氮菌的總數(shù)，他選用10-4、10-5、10-6稀釋倍數(shù)進(jìn)行涂布，每個稀釋倍數(shù)下都設(shè)置了3個培養(yǎng)皿。從無菌操作的角度分析，該同學(xué)還應(yīng)設(shè)置的一組對照組是____，其目的是__。在10-4濃度下一個培養(yǎng)基表面發(fā)現(xiàn)圓褐固氮菌菌落呈黃褐色，而有一個菌落半邊呈白色，半邊呈黃褐色。出現(xiàn)上述現(xiàn)象的可能原因是____。（3）若用固定化酶技術(shù)固定圓褐固氮菌產(chǎn)生的固氮酶，和一般酶制劑相比，其優(yōu)點(diǎn)是____；將冷卻后的海藻酸鈉溶液與圓褐固氮菌菌液進(jìn)行混合，通過注射器滴入CaCl2溶液中，這種技術(shù)稱為_____。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】

分析題圖可知，甲為漿細(xì)胞，乙為吞噬細(xì)胞?！驹斀狻緼、細(xì)胞甲是漿細(xì)胞，由B淋巴細(xì)胞或記憶細(xì)胞增殖、分化而來，A錯誤；B、抗體直接作用于細(xì)胞外的抗原，B錯誤；C、吞噬細(xì)胞參與非特異性免疫中的第二道防線，在特異性免疫中可吞噬、處理、呈遞抗原，C正確；D、各種漿細(xì)胞分泌不同抗體的原因是基因的選擇性表達(dá)，D錯誤。故選C。【點(diǎn)睛】解答此類題目的關(guān)鍵是理解掌握抗原、抗體的概念以及特異性免疫的過程。2、A【解析】

土壤中微生物能將有機(jī)物分解成無機(jī)物可供綠色植物利用，但其分解釋放的能量不能供給綠色植物利用；利用土壤小動物的避光趨濕怕高溫，可采用帶燈罩的熱光源制作誘蟲器來進(jìn)行收集；在進(jìn)行調(diào)查土壤中小動物的豐富度時常用取樣器取樣的方法進(jìn)行采集、調(diào)查?！驹斀狻緼、土壤中既有分解者也有生產(chǎn)者和消費(fèi)者，因此，土壤中微生物的存在有利于生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)，A正確；B、土壤中微生物能將有機(jī)物分解成無機(jī)物可供綠色植物利用，但其分解釋放的能量除了滿足自身生命活動需要，其余均以熱能的形式散失了，綠色植物無法利用這部分能量，B錯誤；C、利用土壤小動物的避光趨濕怕高溫，可采用帶燈罩的熱光源制作誘蟲器來進(jìn)行收集，C錯誤；D、許多土壤動物有較強(qiáng)的活動能力，而且身體微小，因此不適于用樣方法或標(biāo)志重捕法進(jìn)行調(diào)查，在進(jìn)行調(diào)查土壤中小動物的豐富度時常用取樣器取樣的方法進(jìn)行采集、調(diào)查，D錯誤。故選A。3、A【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：由于該動物為二倍體，而該細(xì)胞中無同源染色體，并且處于著絲點(diǎn)分裂狀態(tài)，因此是處于減數(shù)第二次分裂后期狀態(tài)的細(xì)胞，并且細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)是均等分裂的，因此該細(xì)胞是第一極體。【詳解】A、該細(xì)胞中著絲點(diǎn)已分裂，染色體加倍，有兩個染色體組、4個核DNA分子，A正確；

B、該細(xì)胞中不含同源染色體，B錯誤；

C、由于卵原細(xì)胞的基因型為AaBb，所以該細(xì)胞產(chǎn)生的卵細(xì)胞基因型是aB或ab，C錯誤；

D、該細(xì)胞的產(chǎn)生過程中發(fā)生了基因突變或基因重組（交叉互換），D錯誤。

故選A?！军c(diǎn)睛】本題以減數(shù)分裂細(xì)胞圖為載體，考查了有絲分裂、減數(shù)分裂和生物變異等方面的知識，意在考查考生的識圖能力、分析能力，難度適中。考生在學(xué)習(xí)過程中要能夠識記并掌握有絲分裂和減數(shù)分裂過程中染色體和DNA數(shù)目的變化情況，并準(zhǔn)確判斷。4、D【解析】

T2噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)：（1）研究者：1952年，赫爾希和蔡斯。（2）實(shí)驗(yàn)材料：T2噬菌體和大腸桿菌等。（3）實(shí)驗(yàn)方法：放射性同位素標(biāo)記法。（4）實(shí)驗(yàn)思路：S是蛋白質(zhì)的特有元素，DNA分子中含有P，蛋白質(zhì)中幾乎不含有，用放射性同位素32P和放射性同位素35S分別標(biāo)記DNA和蛋白質(zhì)，直接單獨(dú)去觀察它們的作用。（5）實(shí)驗(yàn)過程：首先用放射性同位素35S標(biāo)記了一部分噬菌體的蛋白質(zhì)，并用放射性同位素32P標(biāo)記了另一部分噬菌體的DNA，然后，用被標(biāo)記的T2噬菌體分別去侵染細(xì)菌，一段時間后攪拌、離心，檢測上清液和沉淀物的放射性。簡單過程為：標(biāo)記細(xì)菌→標(biāo)記噬菌體→用標(biāo)記的噬菌體侵染普通細(xì)菌→攪拌離心。（6）分析：測試的結(jié)果表明，噬菌體的蛋白質(zhì)并沒有進(jìn)入細(xì)菌內(nèi)部，而是留在細(xì)菌的外部，噬菌體的DNA卻進(jìn)入了細(xì)菌體內(nèi)，可見，噬菌體在細(xì)菌內(nèi)的增殖是在噬菌體DNA的作用下完成的。（7）結(jié)論：在噬菌體中，親代和子代間具有連續(xù)性的物質(zhì)是DNA，即子代噬菌體的各種性狀是通過親代DNA傳給后代的，DNA才是真正的遺傳物質(zhì)。【詳解】①②分別標(biāo)記噬菌體的DNA和蛋白質(zhì)，要先分別標(biāo)記大腸桿菌，即將大腸桿菌細(xì)胞分別放在含放射性同位素35S或32P的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，①正確，②錯誤；③用T2噬菌體分別侵染被35S或32P標(biāo)記的大腸桿菌使T2噬菌體分別被35S或32P標(biāo)記，③正確；④噬菌體侵染大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)過程：吸附→注入→復(fù)制→組裝→釋放，④正確；⑤用35S或32P標(biāo)記噬菌體DNA的實(shí)驗(yàn)方法叫放射性同位素標(biāo)記法，⑤錯誤；⑥用32P標(biāo)記的噬菌體侵染大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，上清液理論上不含放射性，因噬菌體已將含32P的DNA全部注入到大腸桿菌內(nèi)，⑥正確；⑦赫爾希和蔡斯的噬菌體侵染大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)證明了DNA是噬菌體的遺傳物質(zhì)，⑦錯誤。綜上②⑤⑦錯誤。故選D。5、D【解析】

１、有絲分裂不同時期的特點(diǎn)：（１）間期：進(jìn)行DNA的復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成；（２）前期：核膜、核仁逐漸解體消失，出現(xiàn)紡錘體和染色體；（３）中期：染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰；（４）后期：著絲點(diǎn)分裂，姐妹染色單體分開成為染色體，并均勻地移向兩極；（５）末期：核膜、核仁重建、紡錘體和染色體消失。2、有絲分裂的意義：親代細(xì)胞的染色體經(jīng)過復(fù)制后，精確地平均分配到兩個子細(xì)胞中，保持了細(xì)胞的親子代之間遺傳性狀的穩(wěn)定性?！驹斀狻緼、分裂間期所占時間最長，故不同分裂時期的細(xì)胞中分裂間期的細(xì)胞最多，A正確；B、視野中不同時期的細(xì)胞數(shù)目與細(xì)胞周期不同時期的時間長短成正比例，B正確；C、有絲分裂產(chǎn)生的子細(xì)胞染色體數(shù)目不變，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上保持相似性，C正確；D、DNA復(fù)制發(fā)生在分裂間期，培養(yǎng)洋蔥根尖時添加適量DNA合成可逆抑制劑，可使細(xì)胞停滯在細(xì)胞周期的分裂間期，D錯誤。故選D。6、D【解析】

分析題圖，矮化突變體玉米中的內(nèi)源赤霉素含量較正常玉米低，但在施加外源赤霉素處理后，矮化突變體植株莖的結(jié)節(jié)恢復(fù)到正常植株的水平，可推斷矮化突變體玉米是由于自身產(chǎn)生的內(nèi)源性赤霉素不足而導(dǎo)致的結(jié)節(jié)長度短，植株本身能夠正常利用赤霉素使莖結(jié)節(jié)伸長?！驹斀狻緼、矮化突變體植株添加了外源赤霉素恢復(fù)到正常植株的長度說明赤霉素能促進(jìn)玉米莖節(jié)間的伸長，A正確。B、該實(shí)驗(yàn)中沒有現(xiàn)象可以說明赤霉素對莖的生長起抑制作用，故不能體現(xiàn)赤霉素作用的兩重性，B正確；C、根據(jù)題目中的信息，無法得知矮化突變體的產(chǎn)生原因，C正確；D、矮化突變體產(chǎn)生的原因是內(nèi)源性赤霉素產(chǎn)生不足，仍能利用赤霉素使莖結(jié)節(jié)伸長，D錯誤；故選D。7、D【解析】

分析題意：假設(shè)果蠅的紅眼和白眼由一對等位基因A/a控制，親本純合紅眼雌果蠅的基因型為XAXA，白眼雄果蠅基因型為XaY，F(xiàn)1中雌果蠅基因型為XAXa，雄果蠅基因型為XAY?！驹斀狻緼、親本中純合紅眼雌果蠅和白眼雄果蠅相同數(shù)量，Y染色體上無白眼基因，故紅眼基因頻率大于白眼基因頻率，A錯誤；B、F1雌雄隨機(jī)交配，F(xiàn)2的雌果蠅基因型為XAXA、XAXa，表現(xiàn)型均為紅眼，B錯誤；C、白眼雌果蠅最先出現(xiàn)在F3，這是基因分離以及雌雄受精的結(jié)果，C錯誤；D、F2和F3的雄果蠅基因型均為XAY、XaY，能產(chǎn)生XA、Xa、Y3種基因型的配子，D正確。故選D。8、A【解析】

1、DNA主要分布在細(xì)胞核內(nèi)，RNA大部分存在于細(xì)胞質(zhì)中。甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色，吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。2、同源染色體聯(lián)會現(xiàn)象出現(xiàn)在減數(shù)第一次分裂前期。3、健那綠染液是將活細(xì)胞中線粒體染色的專一性染料，可以使活細(xì)胞中的線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色，而細(xì)胞質(zhì)接近無色，線粒體能在健那綠染液中維持活性數(shù)小時?！驹斀狻緼、觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布時，應(yīng)選擇染色均勻、色澤較淺的區(qū)域進(jìn)行觀察，以免色澤重疊影響觀察，A正確；B、洋蔥根尖細(xì)胞只進(jìn)行有絲分裂，無同源染色體聯(lián)會現(xiàn)象，B錯誤；C、利用口腔上皮細(xì)胞觀察線粒體的實(shí)驗(yàn)中，用健那綠染液對細(xì)胞中線粒體進(jìn)行染色，細(xì)胞保持活性，細(xì)胞的完整性未遭到破壞，C錯誤；D、探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動態(tài)變化實(shí)驗(yàn)采用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)法，需要借助顯微鏡計數(shù)，D錯誤。故選A?！军c(diǎn)睛】本題考查教材中相關(guān)實(shí)驗(yàn)，意在考查理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用。二、非選擇題9、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（cDNA）。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA；由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理，所以用該cDNA進(jìn)行PCR技術(shù)擴(kuò)增短時間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。（2）分析圖1中堿基序列，α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列，β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列，與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進(jìn)行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建基因表達(dá)載體。基因表達(dá)載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)等。（3）根據(jù)第（2）題可知，基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因，因此一定溫度下，與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。（4）基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，一段時間后，為確定PD-1基因是否表達(dá)，可以檢測細(xì)胞膜表面是否具有PD-1基因表達(dá)的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)，即從裂解293T細(xì)胞中，提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。為了增加實(shí)驗(yàn)的可信度，還需要設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞，因?yàn)椴缓琍D-1基因，所以“PD-1與PDL-1信號通路”不會阻斷。【點(diǎn)睛】題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識在新的情景材料下分析運(yùn)用。10、開放C5葉綠體基質(zhì)蘋果酸分解細(xì)胞呼吸減少水分的散失AB【解析】

分析圖一：冰葉日中花夜間二氧化碳通過氣孔進(jìn)入葉肉細(xì)胞內(nèi)，形成蘋果酸儲存在液泡中，白天液泡中的蘋果酸釋放二氧化碳進(jìn)入葉綠體中參與光合作用。在圖二中，中午時分B植物的光合作用降低，說明此時氣孔關(guān)閉?！驹斀狻浚?）在適宜的條件下，冰葉日中花通過C3途徑進(jìn)行光合作用，白天冰葉日中花的氣孔開放；CO2通過氣孔進(jìn)入葉綠體，和C5結(jié)合生成2分子C3，進(jìn)入卡爾文循環(huán)，卡爾文循環(huán)發(fā)生的場所是葉綠體基質(zhì)。（2）長期在高溫、缺水、高鹽等逆境脅迫下，冰葉日中花白天氣孔關(guān)閉，根據(jù)圖1的提示，其CO2可以來自于液泡中的蘋果酸的分解和線粒體細(xì)胞呼吸產(chǎn)生。逆境脅迫下關(guān)閉氣孔進(jìn)行CAM途徑的意義是減少水分的散失。（3）由于進(jìn)行CAM途徑是在高溫干旱的條件下為了防止水分丟失，所以關(guān)閉氣孔，導(dǎo)致植物對CO2的吸收減少，光合作用降低，因此對應(yīng)B曲線；而C3途徑不存在這個問題，所以隨著光照增強(qiáng)光合作用不斷增強(qiáng)，對應(yīng)A曲線?！军c(diǎn)睛】本題重點(diǎn)是結(jié)合圖中的CAM途徑對植物光合作用進(jìn)行分析，考生需要思考為什么植物進(jìn)行這個途徑，怎樣進(jìn)行的。11、逆轉(zhuǎn)錄酶不同化學(xué)方法人工合成（人工化學(xué)合成）一段目的基因的核苷酸序列以便合成引物能自主復(fù)制、有多個限制酶切位點(diǎn)、有標(biāo)記基因、對宿主細(xì)胞無害（答出其中兩個即可）設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)記憶短時間內(nèi)迅速產(chǎn)生大量的抗體和記憶細(xì)胞，免疫預(yù)防作用更強(qiáng)?！窘馕觥?/p>

1、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。2、記憶細(xì)胞使得二次免疫反應(yīng)快而強(qiáng)。【詳解】（1）由mRNA合成cDNA的過程屬于逆轉(zhuǎn)錄過程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶。獲得的cDNA片段只包含基因的編碼區(qū)，沒有非編碼區(qū)，因此與百日咳桿菌中該基因堿基序列不同。（2）由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小，且序列已知，獲得目的基因可采用化學(xué)方法人工合成，然后通過PCR技術(shù)大量擴(kuò)增。通過PCR技術(shù)大量擴(kuò)增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物。（3）改造后的腺病毒具有能自主復(fù)制、有多個限制酶切位點(diǎn)、有標(biāo)記基因、對宿主細(xì)胞無害等特點(diǎn)，故可用做載體。（4）將白