專題強化練(十五)發(fā)酵工程1．(2024·廣東模擬預料)很多國家以淀粉或纖維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液等為原料，通過發(fā)酵獲得了大量的微生物菌體——單細胞蛋白。單細胞蛋白含有豐富的蛋白質、糖類、脂質和維生素等物質，可以制成飼料，使家畜、家禽增重快，提高產奶、產蛋量，也可以作為食品添加劑。某愛好小組通過試驗分別出能分解纖維素的微生物。請回答下列相關問題：(1)試驗小組嘗試從收割后的小麥田里分別出分解纖維素的微生物，應當配制以________為唯一碳源的培育基。配制的培育基用________法滅菌，滅菌的作用是_____________________。(2)滅菌的培育基須要倒平板操作，冷凝后平板需倒置的目的是________________________。(3)若要對培育的細菌計數，則須要用________法進行接種，當樣品的稀釋度足夠高時，培育基表面生長的是單菌落，運用這種方法統(tǒng)計的結果往往比實際值偏小，理由是________________________________________________________________________。(4)能夠分解纖維素的微生物體內能夠合成纖維素酶，纖維素酶包括_________________，若須要檢測分別的微生物中是否含有目的菌株，應在培育基中加入________染液。解析：(1)在以纖維素為唯一碳源的培育基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。常用高壓蒸汽滅菌法對培育基進行滅菌處理，滅菌的作用是殺死培育基中的全部微生物，包括芽孢和孢子。(2)平板倒置的目的是防止皿蓋上的冷凝水落入培育基造成培育基污染、避開培育基中的水分過快蒸發(fā)。(3)用稀釋涂布平板法對接種的細菌進行計數，運用這種方法統(tǒng)計的結果往往比實際值偏小，緣由是當兩個或多個細胞連在一起時，平板上視察到的只是一個菌落。(4)纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。剛果紅能與培育基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅－纖維素的復合物不能形成，培育基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透亮圈。答案：(1)纖維素高壓蒸汽滅菌殺死培育基中的全部微生物，包括芽孢和孢子(2)防止皿蓋上的冷凝水落入培育基造成培育基污染、避開培育基中的水分過快蒸發(fā)(3)稀釋涂布平板當兩個或多個細胞連在一起時，平板上視察到的只是一個菌落(4)C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶剛果紅2．(2024·廣東模擬預料)科研人員嘗試利用紫外線誘變的方法獲得青霉素高產菌株。某探討小組對誘變處理得到突變菌S(需氧型)進行分別純化、擴大培育、發(fā)酵培育，并對青霉素生產效能進行測定。回答下列問題：(1)對誘變處理得到的突變菌S制成較稀濃度的懸液，其目的是在培育時獲得________，然后將活化的突變菌接種到液體培育基中，并置于在搖床上進行振蕩培育，其中振蕩操作的目的是：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)菌種的擴大培育和發(fā)酵培育涉及不同的代謝過程，生產中這兩個過程中的溫度要求是不同的，其緣由是____________________________________。發(fā)酵過程中再添加的麩質發(fā)酵料需保持松散狀態(tài)，其目的是________。除溫度、氧氣等因素外，培育基的_______________(答出1點即可)也是影響突變菌S發(fā)酵產率的重要因素。(3)發(fā)酵培育過程中菌液濃度及青霉素濃度改變如圖所示。發(fā)酵至約________h時，青霉素濃度增長速率最快。在培育基成分和理化因素均相宜的條件下，影響發(fā)酵最終產量的因素有____________________________(答出2點即可)。解析：(1)對誘變處理得到的突變菌S制成較稀濃度的懸液，其目的是在培育時獲得單菌落，便于純化培育和計數，然后將活化的突變菌接種到液體培育基中，并置于在搖床上進行振蕩培育，這里振蕩操作是為了增加培育液中溶解氧含量，使菌種和養(yǎng)分物質充分接觸，從而有利于菌種的生長。(2)菌種的擴大培育和發(fā)酵培育涉及不同的代謝過程，生產中這兩個過程中的溫度要求是不同的，這是因為突變菌S生長繁殖和青霉素合成代謝所需酶的最適溫度不同，因此為了達到不同的目的須要設置不同的溫度培育。發(fā)酵過程中再添加的麩質發(fā)酵料需保持松散狀態(tài)，是為了增加通氣性，保證青霉菌代謝的須要。除溫度、氧氣等因素外，培育基的pH、成分、雜菌污染狀況也是影響突變菌S發(fā)酵產率的重要因素。(3)結合圖示可知，發(fā)酵至約75h左右時，青霉素濃度增長速率最快，因此為了獲得青霉素的高產，可將培育時間限制在75h左右。在培育基成分和理化因素均相宜的條件下，影響發(fā)酵最終產量的因素有菌液濃度、菌體合成青霉素的實力、發(fā)酵時間等。答案：(1)單菌落增加培育液中溶解氧含量；使菌種和養(yǎng)分物質更好接觸(2)突變菌S生長繁殖和青霉素合成代謝所需酶的最適溫度不同增加通氣性pH、成分、雜菌污染狀況(3)75(50～75h之間均可)菌液濃度、菌體合成青霉素的實力(其他合理答案也可)3．(2024·廣東模擬預料)網絡中有位四川姑娘發(fā)布了一系列生活視頻，視頻中的她釀制果酒果醋、腌制泡菜臘肉、手工造紙、養(yǎng)蠶絲、染布、蜀繡、再到制作各種家居物件……，田園牧歌式的生活獲得了網友們的熱評和點贊?；卮鹣铝袉栴}：(1)果酒釀造過程中，起主要作用的微生物是酵母菌，酵母菌的異化作用類型是________，發(fā)酵產生的果酒在醋酸菌的作用下會進一步轉變?yōu)榇姿?，與酒精發(fā)酵的條件相比，醋酸發(fā)酵須要____________________________________(答出2點)(2)工業(yè)上生產酒精可采納________法固定酵母細胞，細胞固定化技術的優(yōu)點是____________________________________(答出2點)。(3)若要測定果酒發(fā)酵液中的酵母菌密度，進行下圖所示操作。將發(fā)酵液用________法接種到培育基，一段時間后，培育基A、B、C中菌落數分別為36、40、35，表明1L發(fā)酵液中的酵母菌數量約為________個，統(tǒng)計結果比酵母菌的實際數目偏________(大或小)。解析：(1)酵母菌是兼性厭氧型生物，既能有氧呼吸也能無氧呼吸；醋酸菌為好氧菌，相宜的溫度比酵母菌高，因此需持續(xù)通氧、更高的培育溫度(30～35℃)。(2)包埋法可以用來固定微生物；固定化微生物(細胞)更簡單與產物分別，且可重復利用。(3)稀釋涂布平板常用來對微生物進行計數；0.1mL中含有(36＋40＋35)÷3＝111÷3＝37個，則1mL中含有370個，圖中的1mL發(fā)酵液被稀釋了105倍，因此原發(fā)酵液1mL中含有3.7×107個，1L發(fā)酵液中的酵母菌數量約為3.7×1010個；由于常有幾個細菌靠的比較近，表現(xiàn)為一個菌落，因此統(tǒng)計結果比酵母菌的實際數目偏小。答案：(1)兼性厭氧持續(xù)通氧、更高的培育溫度(30～35℃)(2)包埋便于產物的分別，固定化的細胞可重復利用(3)稀釋涂布平板3.7×1010小4．(2024·湖南長郡中學模擬預料)甘肅某地由于TNT(主要成分為2，4二硝基甲苯磺酸鹽)紅水蒸發(fā)池滲漏，對土壤造成嚴峻污染，威逼到黃河上游的水質平安。因此，TNT紅水污染土壤修復是目前亟待解決的環(huán)境問題。某試驗小組欲通過生物修復分別有效降解2，4二硝基甲苯磺酸鹽的菌株，進行了如下試驗，請回答下列問題：(1)LB培育基的制備：取胰蛋白胨、NaCl和酵母提取物溶于蒸餾水中，此過程中胰蛋白胨供應的養(yǎng)分物質是__________________，用NaOH調整pH至7.2，用____________在121℃條件下滅菌15分鐘。若要獲得本探討所用的固體培育基，需在上述培育基中加入__________。(2)菌株分別與鑒定：取______________________土壤，放入裝有100mL無菌LB液體培育基的錐形瓶中，在30℃和120rpm的恒溫搖床上振蕩24小時，此過程的目的是__________。取1mL培育液，采納__________法分別純化菌株。(3)該試驗小組欲進一步探究菌株對2，4二硝基甲苯磺酸鹽的降解實力，請幫助設計試驗，寫出試驗思路：__________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)探究鹽度對菌株生長的影響探討發(fā)覺，純化的菌株在NaCl濃度為0%～3%之間對2，4二硝基甲苯磺酸鹽的降解率在96小時后達到90%，但當NaCl濃度達到5%后，降解率幾乎為0。探討中偶然發(fā)覺菌株B1在NaCl濃度達到5%后，降解率卻達到50%，說明________________________________________________________________________。解析：(1)蛋白胨既可以供應碳源，也可以供應氮源；用NaOH調整pH至7.2，在121℃條件下用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌15分鐘；若要獲得本探討所用的固體培育基，需在上述培育基中加入瓊脂。(2)自然界中目的菌株的篩選依據：依據它對生存環(huán)境的要求，到相應的環(huán)境中去找尋，本試驗要分別有效降解2，4二硝基甲苯磺酸鹽的菌株，因此取甘肅某TNT紅水污染場地污染土壤。放入裝有100mL無菌LB液體培育基的錐形瓶中，在30℃和120rpm的恒溫搖床上振蕩24小時，此過程的目的是富集培育，讓微生物的數目增加；取1mL培育液，采納稀釋涂布平板法分別純化菌株。(3)要分析菌株對2，4二硝基甲苯磺酸鹽的降解實力，可以取人工配制的肯定濃度的2，4二硝基甲苯磺酸鹽(TNT)溶液加入錐形瓶中，之后再在錐形瓶中加入肯定量的純化菌液，每隔肯定時間取樣，測定2，4二硝基甲苯磺酸鹽濃度。(4)由題干可知，純化菌株在NaCl濃度為0%～3%之間對2，4二硝基甲苯磺酸鹽的降解率在96小時后達到90%，但當NaCl濃度達到5%后，降解率幾乎為0。而偶然發(fā)覺菌株B1在NaCl濃度達到5%后，降解率達到50%，說明菌株B1具有肯定的耐鹽實力，能在較高鹽濃度條件下降解2，4二硝基甲苯磺酸鹽。答案：(1)碳源和氮源高壓蒸汽滅菌鍋瓊脂(2)甘肅某TNT紅水污染場地污染富集培育稀釋涂布平板(3)取人工配制的肯定濃度的2，4二硝基甲苯磺酸鹽(TNT)溶液加入錐形瓶中，之后再在錐形瓶中加入肯定量的純化菌液，每隔肯定時間取樣，測定2，4二硝基甲苯磺酸鹽濃度(4)菌株B1具有肯定的耐鹽實力，能在較高鹽濃度條件下降解2，4二硝基甲苯磺酸鹽5．(2024·河南模擬預料)低密度聚乙烯(LDPE)因具有延展性等優(yōu)點而廣泛應用于保鮮膜，塑料膜等制造業(yè)，而LDPE(呈乳白色)不易被降解，對環(huán)境造成了極大的污染，通過微生物降解LDPE是綠色環(huán)保的新途徑。以下為篩選LDPE降解菌(LDPE17菌株)的過程?；卮鹣铝袉栴}：(1)首先從塑料膜埋藏地采集樣品，將樣品加入無菌水中振蕩，靜置，取上清液用以__________為唯一碳源的液體培育基進行富集培育，富集培育的目的是_____________________________。用涂布器將菌液接種到固體培育基上，30℃培育3d。對所用的培育皿、錐形瓶等玻璃制品常采納__________法進行滅菌。(2)培育后，挑取有透亮圈的菌落在選擇培育基上進行連續(xù)劃線分別，直至得到純培育菌株—LDPE17菌株，即為初篩菌株，連續(xù)劃線時須要留意_______________________________(答兩點)。如何推斷選擇培育基是否具有篩選作用，簡要寫出試驗思路并預期試驗結果和結論：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)在去除氮源的LDPE17菌株富集培育基中，分別添加蛋白胨、牛肉膏、(NH4)2SO4、NH4Cl、(NH4)2HPO4，每種氮源做三個平行試驗，培育48h，測定各試驗組中LDPE的濃度。該試驗探究的目的是__________________，該試驗的無關變量有_______________________(答2個)。(4)欲將獲得的LDPE17菌株進行長期保存，常采納的方法是______________________。解析：(1)為了篩選LDPE降解菌(LDPE17菌株)應以LDPE(低密度聚乙烯)為唯一碳源的液體培育基進行富集培育，富集培育是為了增加目的菌的濃度，以確保能從樣品中分別得到所需的微生物。耐高溫的，須要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培育皿)和金屬用具等，可以采納這種方法滅菌，所以試驗中對所用的培育皿、錐形瓶等玻璃制品應采納干熱滅菌法進行滅菌。(2)劃線的要求，劃線時，不能把接種環(huán)深化到培育基中進行接種，只能在培育基表面進行劃線操作，連續(xù)劃線時須要留意不能劃破培育基；劃線應當從上一區(qū)末端劃線；劃線前后要灼燒接種環(huán)；最終一區(qū)的劃線不能與第一區(qū)相連等。為了推斷選擇培育基是否具有篩選作用，應當在選擇培育基和完全培育基上分別接種等量的相應濃度的菌液，視察菌落的生長狀況來推斷。試驗思路：應在選擇培育基和完全培育基上分別接種等量的相應濃度的菌液，在相同且相宜條件下培育。預期試驗結果及結論：若選擇培育基上長出的菌落數量明顯少于完全培育基上的菌落，則證明該培育基具有篩選作用。(3)在去除氮源的LDPE17菌株富集培育基中，分別添加蛋白胨、牛肉膏、(NH4)2SO4、NH4Cl、(NH4)2HPO4，即每組的氮源不同，試驗的自變量是不同的氮源，所以該試驗探究的目的是探究不同氮源對LDPE17菌株生長繁殖的影響。該試驗中除了氮源不同，其他的條件應當相同且相宜，所以無關變量有每種氮源的含氮量、培育溫度、培育時間等。(4)對分別出的細菌進行長期保存，常采納甘油管藏法。答案：(1)LDPE(低密度聚乙烯)增加目的菌的濃度，以確保能從樣品中分別得到所需的微生物干熱滅菌(2)不能劃破培育基；從上一區(qū)末端劃線；劃線前后要灼燒接種環(huán)；最終一區(qū)的劃線不能與第一區(qū)相連等試驗思路：應在選擇培育基和完全培育基上分別接種等量的相應濃度的菌液，在相同且相宜條件下培育；預期試驗結果及結論：若選擇培育基上長出的菌落數量明顯少于完全培育基上的菌落，則證明該培育基具有篩選作用(3)探究不同氮源對LDPE17菌株生長繁殖的影響每種氮源的含氮量、培育溫度、培育時間(4)甘油管藏法6．(2024·河北石家莊模擬預料)苧麻的蛋白質含量高，年生物產量大，是畜牧業(yè)植物蛋白質飼料的重要來源。但苧麻含有大量木質纖維素，動物消化汲取困難。黑曲霉為真菌，在發(fā)酵過程中能產生纖維素酶、木質素降解酶等多種酶。為探究黑曲霉菌液對青貯料(苧麻與麥麩)進行混合發(fā)酵后養(yǎng)分成分、木質纖維素降解效果的影響，并尋求黑曲霉菌液最佳添加量。科研人員做了如下試驗并得到相關結果：項目比照CK處理Ⅰ處理Ⅱ處理Ⅲ處理Ⅳ可溶性碳水化合物含量%3.143.383.383.253.21中性洗滌纖維含量%41.9537.4934.4734.4234.85酸性洗滌纖維含量%22.3818.9017.7817.8317.84酸性洗滌木質素含量%16.8515.0414.4814.9214.56注：CK：每千克青貯料中添加200mL無菌水；處理Ⅰ：每千克青貯料中添加50mL黑曲霉菌液＋150mL無菌水；處理Ⅱ：每千克青貯料中添加100mL黑曲霉菌液＋100mL無菌水；處理Ⅲ：每千克青貯料中添加150mL黑曲霉菌液＋50mL無菌水；處理Ⅳ：每千克青貯料中添加200mL黑曲霉菌液。回答下列問題：(1)纖維素酶可以把植物細胞壁的纖維素分解為____________，從而降低青貯料中纖維素的含量。(2)黑曲霉的PDA液體產酶培育基組成為：麩皮，豆粉餅，(NH4)2SO4，KH2PO4，MgSO4·7H2O；培育時須要通氣振蕩，由此可知黑曲霉的代謝類型為____________；豆粉餅可供應黑曲霉生長所需的______________；若要分別高產纖維素酶的黑曲霉菌落，上述培育基中還須要添加__________，且在培育基滅菌前將pH調至____________(填“酸性”、“中性”、或“微堿性”)。(3)探討結果表明添加黑曲霉菌液可以有效改良青貯料的品質，理由是_____________________________________________________________________________________；其中黑曲霉菌液最佳添加量為每千克青貯料中添加______________mL黑曲霉菌液。(4)上述試驗中所用黑曲霉菌液濃度的計數方法為：用多層紗布過濾黑曲霉培育液得到孢子懸浮液，取1mL用無菌水逐級稀釋10倍，稀釋4次，取0.1mL稀釋液滴加至血球計數板計數，統(tǒng)計得到計數板中平均孢子數為56.8個，則黑曲霉培育液中孢子濃度為____________個·mL－1。解析：(1)纖維素酶是一種復合酶，C1酶、Cx酶把纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶把纖維二糖分解成葡萄糖。(2)由黑曲霉的PDA液體產酶培育基組成中含有麩皮和豆粉餅可知黑曲霉同化類型為異養(yǎng)型；由培育時須要通氣振蕩可知黑曲霉的異化作用為需氧型，因此代謝類型為異養(yǎng)需氧型。豆粉餅可供應黑曲霉生長所需的氮源和碳源。若要分別高產纖維素酶的黑曲霉菌落則須要固體培育基，須要在上述液體培育基中添加瓊脂。黑曲霉屬于霉菌，培育霉菌的培育基須要將pH調至酸性。(3)由表中信息可知，與比照組(不添加黑曲霉菌液)相比，添加黑曲霉菌液的處理組青貯料的可溶性碳水化合物含量均上升，纖維素和木質素的含量均下降，說明添加黑曲霉菌液可以分解纖維素和木質素，改良青貯料的品質。綜合考慮可溶性碳水化合物含量、中性洗滌纖維含量、酸性洗滌纖維含量、酸性洗滌木質素含量的改變，相比其它3組，處理Ⅱ組可溶性碳水化合物含量最高，該條件下中性洗滌纖維含量、酸性洗滌纖維含量、酸性洗滌木質素的總量最低(3種物質數量之和)，因此處理Ⅱ組為處理的最佳方案，由表中注解可知處理Ⅱ組的方案為每千克青貯料中添加100mL黑曲霉菌液。(4)由題干信息中的計數方法可知：0.1mL稀釋液滴加至血球計數板計數，統(tǒng)計得到計數板中平均孢子數為56.8個，則1mL稀釋液中孢子數目為568個，由于每mL孢子原液已經稀釋了104倍，因此黑曲霉培育液中孢子濃度為568×104個·mL－1，即5.68×106個·mL－1。答案：(1)纖維二糖和葡萄糖(2)異養(yǎng)需氧(型)氮源和碳源瓊脂酸性(3)與比照組相比，添加黑曲霉菌液的處理組青貯料的可溶性碳水化合物含量均上升，纖維素和木質素的含量均下降100(4)5.68×1067．(2024·上海虹口二模)人誤食被金黃色葡萄球菌污染的食物后，可能出現(xiàn)腹瀉、嘔吐等癥狀。探討者嘗試用蜻蜓腸道共生菌的代謝產物開發(fā)新型抑菌藥物，部分試驗步驟如圖所示，圖中數字編號代表試驗步驟。(1)金黃色葡萄球菌可通過被污染的食物進入人體，這種傳播方式屬于__________。A．空氣傳播 B．媒介物傳播C．病媒傳播 D．接觸傳播(2)培育蜻蜓腸道共生菌的培育基配方如表所示。據表中信息和所學學問推斷，馬鈴薯為共生菌生長供應的養(yǎng)分成分包括__________。馬鈴薯葡萄糖瓊脂水200.0g20.0g20.0g1000mLA．碳源 B．氮源C．無機鹽 D．生長因子(3)為避開雜菌污染，圖中試驗操作應采納的正確方法是__________。A．步驟①用自來水浸泡蜻蜓B．步驟②在超凈工作臺上操作C．步驟③加入蒸餾水研磨蜻蜓腸道D．試驗器材須要高壓滅菌(4)接種培育一段時間，培育基上共出現(xiàn)42種蜻蜓腸道共生菌。簡述從個體水平和分子水平區(qū)分這些菌株的方法______________________________________________________________________________________________________________________________。探討者分別出蜻蜓腸道菌株A，提取其代謝產物并用丙酮定容制成“藥液”。欲比較“藥液”與慶大霉素(用無菌水配制的抗菌素溶液)對金黃色葡萄球菌的抑菌效果，請在下列橫線處填寫簡要的試驗步驟，完成試驗方案(全部試驗均在無菌環(huán)境操作)。(5)試驗主要步驟如下：①將________勻稱涂布在圖中所示的平板培育基上；②用無菌鑷子將分別浸過A、B、C液和無菌水的圓紙片瀝干后勻稱置于上述培育基表面。A、B、C液分別為___________________________________________________________；③在恒溫培育箱培育一段時間后，檢測“因變量”的方法是____________________；④為使試驗結果更精確的做法是____________________________________________________________________________________________________________________。解析：(1)病原體通過無生命的媒介物傳播屬于媒介傳播，因此金黃色葡萄球菌可通過被污染的食物進入人體，這種傳播方式屬于媒介物傳播。故選B。(2)馬鈴薯中含有糖類、蛋白質、少量脂肪和礦物質等物質，如表所示的培育基中，馬鈴薯可為共生菌生長供應碳源、氮源、無機鹽、生長因子。(3)自然水中有雜菌，步驟①應當用無菌水浸泡蜻蜓，A錯誤；超凈工作臺是一種供應局部無塵無菌工作環(huán)境的單向流型空氣凈化設備，為防止雜菌污染，步驟②在超凈工作臺上操作，B正確；步驟③加入無菌水研磨蜻蜓腸道，C錯誤；為防止雜菌污染，試驗器材須要高壓滅菌，D正確。(4)在個體水平上，不同菌落的形態(tài)、大小、顏色、邊緣、表面狀況等不同，可用肉眼進行形態(tài)學鑒定，視察菌落的形態(tài)、大小、顏色、邊緣、表面狀況等(或制成臨時裝片，在顯微鏡下視察細菌的形態(tài))，以區(qū)分鑒定菌株；在分子水平上，不同菌株的遺傳信息不同，可提取菌體的DNA進行測序，來鑒定菌株。(5)欲比較“藥液”與慶大霉素(用無菌水配制的抗菌素溶液)對金黃色葡萄球菌的抑菌效果，則試驗的自變量為抑菌液的種類，因變量為抑菌效果，詳細的試驗步驟為：將稀釋的金黃色葡萄球菌“菌液”勻稱涂布在圖中所示的平板培育基上；用無菌鑷子將分別浸過丙酮溶液、相同濃度的藥液和慶大霉素和無菌水的圓紙片瀝干后勻稱置于上述培育基表面；因變量為抑菌效果，金黃色葡萄球菌若受到抑菌液的抑制，則圓紙片四周會出現(xiàn)清楚區(qū)，因此可用直尺測量每個圓紙片四周清楚區(qū)的寬度，并記錄，從而檢測因變量；為使試驗結果更精確，應遵循試驗的平行重復原則，重復上述試驗步驟多次，并對各組測量的數據求平均值。答案：(1)B(2)ABCD(3)BD(4)個體水平：可用肉眼進行形態(tài)學鑒定，視察菌落的形態(tài)、大小、顏色、邊緣、表面狀況等(或制成臨時裝片，在顯微鏡下視察細菌的形態(tài))，以區(qū)分鑒定菌株；分子水平：提取菌體的DNA進行測序，來鑒定菌株(5)稀釋的金黃色葡萄球菌“菌液”丙酮溶液、相同濃度的藥液和慶大霉素用直尺測量每個圓紙片四周清楚區(qū)的寬度，并記錄重復上述試驗步驟多次，并對各組測量的數據求平均值8．(2024·廣東茂名二模)探討人員在某造紙廠旁邊土壤采樣篩選出菌株H，以玉米芯(玉米棒脫粒后的剩余部分，含較多的木聚糖)為原料，在試驗室發(fā)酵生產木寡糖等高附加值低聚糖，以期提高玉米的整體利用價值。(1)生產實踐中，常在堿性的條件下高溫處理玉米芯以提取木聚糖。為篩選出能耐高溫耐堿性的木聚糖分解菌H，首先制備以木聚糖為____________的固體培育基，調整培育基pH＝10.0，然后將土壤加入含有____________的錐形瓶中稀釋，用____________法將菌種稀釋液接種到培育基，在50℃環(huán)境中培育以獲得單菌落。(2)基于菌株H的特性，探討人員設計了如上圖所示的發(fā)酵設備，該設備的限制系統(tǒng)需感應____________等理化性質的改變，以保證良好的發(fā)酵環(huán)境。(3)該設備以肯定的速度在加料口不斷添加新的培育基，同時又以同樣速度在出料口放出舊的培育基，可大大提高生產效率，緣由是____________________________________________________________________________________________________________(答出2點即可)。(4)該設備處理玉米芯與將玉米芯進行焚燒處理相比，優(yōu)點是____________(答出2點即可)。解析：(1)因為要篩選木聚糖分解菌，因此應當選擇以木聚糖為唯一碳源的固體培育基；因為培育基和器具在前面都已經滅菌，因此稀釋的時候應當用無菌水稀釋；因為前面已經稀釋，所以此處應當用稀釋涂布平板法。(2)由于篩選到的是耐高溫耐堿性的木聚糖分解菌。為了讓該分解菌分解效率較高，因此要限制溫度和pH。而木聚糖分解菌是好氧菌(由圖中知道該設備須要通入無菌空氣)，因此須要感應氧氣的改變。(3)不斷添加新的培育基可以保證微生物對養(yǎng)分物質的需求；放出舊的培育基可以防止代謝廢物對菌株的影響。(4)由于充分利用了玉米芯，變廢為寶可以提高資源利用率，相比燃燒可以削減污染。然后由于將反應局限在一個容器中進行處理，可以削減占有土地資源。答案：(1)唯一碳源無菌水稀釋涂布平板(2)溫度、pH、O2濃度(3)①保證微生物對養(yǎng)分物質的需求；②防止代謝產物對菌株H發(fā)酵的影響(4)削減污染，削減占有土地資源，提高資源利用率9．(2024·廣東深圳二模)米諾環(huán)素(分子式：C23H27N3O7)是一種四環(huán)素類抗生素，應用于人類疾病治療和畜禽養(yǎng)殖。由于進入人體或動物體內不能完全被汲取，造成其在環(huán)境中殘留。某探討人員在自然水域中篩選和分別得到了一種米諾環(huán)素高效降解菌DM13，并綻開相關探討。下表是探討過程中運用的培育基種類及配方，回答下列問題。培育基種類配方BP培育基蛋白胨5.0g、牛肉膏3.0g、氯化鈉5.0g，蒸餾水定容至1000mLBPA培育基蛋白胨5.0g、牛肉膏3.0g、氯化鈉5.0g、瓊脂25.0g，蒸餾水定容至1000mLMM培育基MgSO4·7H2O0.15g、FeSO4·7H2O0.01g、CaCl20.02g、KH2PO41g、Na2HPO41g、NH4NO31g、葡萄糖0.5g，蒸餾水定容至1000mL(1)分別微生物前，可通過選擇培育來增加米諾環(huán)素降解菌的濃度，需在BP培育基中添加肯定濃度的________，該物質同時供應微生物生長