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第一章發(fā)酵工程第3節(jié)發(fā)酵工程及應用本節(jié)聚焦什么是發(fā)酵工程?發(fā)酵工程的一般流程是什么?發(fā)酵工程在生產(chǎn)上有哪些重要的價值?從社會中來青霉素是世界上第一個應用于臨床的抗生素。早期科學家只能從青霉菌中提取少量青霉素,它的價格貴如金。隨著高產(chǎn)菌種的選育、發(fā)酵技術的發(fā)展等,青霉素步入了產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的道路。如今,1瓶規(guī)格160萬單位的青霉素注射劑的價格只要1元左右。那么,在工業(yè)上,青霉素究竟是怎樣生產(chǎn)的呢?與社會的聯(lián)系發(fā)酵工程的形成微生物純培養(yǎng)技術的建立密閉式發(fā)酵罐的設計成功人們對發(fā)酵原理的認識發(fā)酵工程形成那么發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)是什么呢?應用發(fā)酵工程能夠生成哪些產(chǎn)品呢?一、發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)一般包括:菌種的選育,

擴大培養(yǎng),

培養(yǎng)基的配制、滅菌,

接種、發(fā)酵,

產(chǎn)品的分離、提純等方面。發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)選育菌種:可以從自然界中篩選,也可通過誘變育種或基因工程獲得擴大培養(yǎng)發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵:發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)。在了解發(fā)酵進程的同時,還要控制發(fā)酵條件。如環(huán)境條件不僅會影響微生物的生長繁殖,而且會影響微生物代謝物的形成接種滅菌:不能有雜菌污染。如在青霉素生產(chǎn)過程中如果污染了雜菌,某些雜菌會分泌青霉素酶將青霉素分解掉分離、提純產(chǎn)物:(1)若產(chǎn)品是微生物本身,可采用過濾、沉淀等方法;(2)若產(chǎn)品是代謝物,可根據(jù)產(chǎn)物性質采取適當?shù)拇胧┇@得產(chǎn)品

中心環(huán)節(jié)電動機排氣管pH計冷卻水排出口冷卻夾層發(fā)酵液攪拌葉輪生物傳感器裝置空氣入口放料管閥門培養(yǎng)物或營養(yǎng)物質的加入口觀察孔取樣管溫度傳感器和控制裝置冷卻水進入口發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵中心環(huán)節(jié)在發(fā)酵過程中,要隨時檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等,以了解發(fā)酵進程。還要及時添加必需的營養(yǎng)組分,要嚴格控制溫度、pH和溶解氧等發(fā)酵條件。環(huán)境條件不僅會影響微生物的生長繁殖,而且會影響微生物代謝物的形成。如谷氨酸的發(fā)酵生產(chǎn):在中性和弱堿性條件下會積累谷氨酸;在酸性條件下則容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺。發(fā)酵罐示意圖環(huán)節(jié)目的菌種選育擴大培養(yǎng)培養(yǎng)基的配制滅菌產(chǎn)品的分離、提純性狀優(yōu)良菌種可從自然界篩選,也可通過誘變育種或基因工程育種獲得。工業(yè)發(fā)酵罐體積大,接種菌種總體積大。發(fā)酵前需對菌種擴大培養(yǎng)。選原料制備培養(yǎng)基。生產(chǎn)實踐中,培養(yǎng)基配方要經(jīng)過反復實驗才能確定。發(fā)酵工程所用大多為單一菌種,有雜菌污染影響產(chǎn)量,培養(yǎng)基和設備需嚴格滅菌現(xiàn)代發(fā)酵工程的大型發(fā)酵罐有計算機控制系統(tǒng),能對溫度、PH、溶解氧、罐壓、通氣量、攪拌、泡沫和營養(yǎng)進行監(jiān)測和控制。還可以進行反饋控制,使發(fā)酵全過程處于最佳狀態(tài)。發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié),發(fā)酵過程中,要隨時檢測培養(yǎng)液中微生物數(shù)量、產(chǎn)品濃度等,以了解發(fā)酵進程。還要及時添加必需的營養(yǎng)組分,嚴格控制溫度、PH和溶解氧等發(fā)酵條件。環(huán)境條件不僅影響微生物生長繁殖,還影響微生物代謝物的形成。如果發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細胞本身,可在發(fā)酵結束后,采用過濾、沉淀方法將菌體分離和干燥,即可得到產(chǎn)品。如果產(chǎn)品是代謝物,可據(jù)產(chǎn)物性質采取適當提取、分離純化措施來獲得產(chǎn)品。接種發(fā)酵罐發(fā)酵發(fā)酵工程基本環(huán)節(jié)分析1、微生物菌種資源豐富,選擇發(fā)酵工程用的菌種時需要考慮哪些因素?2、怎樣對發(fā)酵條件進行調(diào)控以滿足微生物的生長需要?(1)要對溫度、pH、溶解氧等發(fā)酵條件進行嚴格控制,使其最適合微生物的生長繁殖(2)及時添加必要的營養(yǎng)組分。(3)對培養(yǎng)基和發(fā)酵設備進行嚴格的滅菌。需要考慮的因素包括:在低成本的培養(yǎng)基上能迅速生長繁殖;生產(chǎn)所需代謝物的產(chǎn)量高;發(fā)酵條件容易控制;菌種不易變異、退化等。思考·討論3、在產(chǎn)物分離和提純方面,發(fā)酵工程與傳統(tǒng)發(fā)酵技術相比有哪些改進之處?發(fā)酵工程基本環(huán)節(jié)分析傳統(tǒng)發(fā)酵技術獲得的產(chǎn)物一般不是單一的組分,而是成分復雜的混合物,再對產(chǎn)物進行分離和提純處理,或者僅采用簡單的沉淀、過濾等方法來分離和提純產(chǎn)物。在發(fā)酵工程中使用的分離和提純產(chǎn)物的方法較多。在產(chǎn)物的初分離階段,常采用沉淀、萃取、膜分離、吸附和離子交換等方法;在進一步純化階段,會采用液相層析法、結晶法等方法。發(fā)酵工程產(chǎn)物無論是代謝物還是菌體本身,都需要進行質量檢查,合格后才能成為正式產(chǎn)品。思考·討論4、進行發(fā)酵生產(chǎn)時,排出的氣體和廢棄培養(yǎng)液能直接排放到外界環(huán)境中嗎?為什么?不能。因為在進行發(fā)酵生產(chǎn)時,微生物及其代謝物中都可能含有危害環(huán)境的物質。為了減少或避免污染物的產(chǎn)生和排放,實現(xiàn)清潔生產(chǎn),應該對排出的氣體和廢棄培養(yǎng)液進行二次清潔或滅菌處理發(fā)酵工程有哪些特點?教材24頁二、發(fā)酵工程的應用發(fā)酵工程以其生產(chǎn)條件溫和、原料來源豐富且價格低廉、產(chǎn)物專一、廢棄物對環(huán)境的污染小和容易處理等特點,在食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)和農(nóng)牧業(yè)等許多領域得到了廣泛的應用,形成了規(guī)模龐大的發(fā)酵工業(yè)。啤酒的工業(yè)化流程

發(fā)芽焙烤碾磨糖化蒸煮發(fā)酵主發(fā)酵消毒終止后發(fā)酵完成酵母菌的繁殖,大部分糖的分解和代謝物的生成。主發(fā)酵結束后,發(fā)酵液還不適合飲用,要在低溫、密閉的環(huán)境下儲存一段時間進行后發(fā)酵,這樣才能形成澄清、成熟的啤酒。教材25頁我國是世界上啤酒的生產(chǎn)和消費大國。啤酒是以大麥為主要原料經(jīng)酵母菌發(fā)酵制成的,其工業(yè)化生產(chǎn)流程如下圖所示。其中發(fā)酵過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個階段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生產(chǎn)都在主發(fā)酵階段完成。主發(fā)酵結束后,發(fā)酵液還不適合引用,要在低溫、密閉的環(huán)境下儲存一段時間進行后發(fā)酵,這樣才能形成澄清、成熟的啤酒。發(fā)酵的溫度和發(fā)酵的時間隨啤酒品種和口味要求的不同而有所差異。啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)流程思考·討論1、與傳統(tǒng)的手工發(fā)酵相比,在工業(yè)化啤酒生產(chǎn)過程中,哪些工程手段使啤酒產(chǎn)量和質量明顯提高?菌種的選育、對原材料的處理、發(fā)酵過程的控制、產(chǎn)品的消毒等,都有助于提高啤酒的產(chǎn)量和品質。思考·討論閱讀教材24-27頁回答以下問題:二、發(fā)酵工程的應用1、發(fā)酵工程有哪些方面的應用?2、在食品工業(yè)上的應用有哪些?3、在醫(yī)藥工業(yè)上的應用有哪些?4、在農(nóng)牧業(yè)上的應用有哪些?(一)、在食品工業(yè)上的應用生產(chǎn)傳統(tǒng)的發(fā)酵產(chǎn)品

發(fā)酵工程使這些產(chǎn)品的產(chǎn)量和質量明顯提高大豆中蛋白小分子肽和氨基酸醬油黑曲霉淋洗、調(diào)制各種谷物、水果釀酒酵母各種酒類利用霉菌發(fā)酵生產(chǎn)醬油、利用釀酒酵母生產(chǎn)各種酒類生產(chǎn)各種各樣的食品添加劑食品添加劑不僅可以增加食品的營養(yǎng),改善食品的口味、色澤和品質,有時還可以延長食品的保存期。添加劑類型舉例酸度調(diào)節(jié)劑L-蘋果酸、檸檬酸、乳酸增味劑5-肌苷酸二鈉、谷氨酸鈉著色劑β-胡蘿卜素、紅曲黃色素增稠劑黃原膠、β-環(huán)狀糊精、結冷膠防腐劑乳酸鏈球菌素、溶菌酶(一)、在食品工業(yè)上的應用生產(chǎn)酶制劑a-淀粉酶、β-淀粉酶、果膠酶、氨基肽酶和脂肪酶等。目前,已有50多種酶制劑成功用于食品的直接生產(chǎn)、改進生產(chǎn)工藝、簡化生產(chǎn)過程、改善產(chǎn)品的品質和口味、延長食品儲存期和提高產(chǎn)品產(chǎn)量等方面。(一)、在食品工業(yè)上的應用采用基因工程的方法,將植物或動物的基因轉移到微生物中,獲得具有某種藥物生產(chǎn)能力的微生物;直接對菌種進行改造,再通過發(fā)酵技術大量生產(chǎn)所需要的產(chǎn)品。利用工程菌發(fā)酵生產(chǎn)生長激素釋放抑制激素通過誘變的青霉菌發(fā)酵生產(chǎn)青霉素(二)、在醫(yī)藥工業(yè)上的應用科學家還利用基因工程,將病原體的抗原基因轉入適當?shù)奈⑸锛毎?,獲得的表達產(chǎn)物就可以作為疫苗使用。未來甚至還可能用微生物來生產(chǎn)過去只能從植物中分離提取的紫杉醇、青蒿素前體等化合物。(二)、在醫(yī)藥工業(yè)上的應用(三)、在農(nóng)牧業(yè)上的應用利用根瘤菌和固氮菌生產(chǎn)的根瘤菌肥、固氮菌肥生產(chǎn)微生物肥料

微生物肥料利用了微生物在代謝過程中產(chǎn)生的

、

等來增進土壤肥力,改良土壤結構,促進植株生長。有機酸生物活性物質(三)、在農(nóng)牧業(yè)上的應用生產(chǎn)微生物農(nóng)藥微生物農(nóng)藥是利用

來防治病蟲害的。微生物農(nóng)藥作為

的重要手段,微生物其代謝物生物防治生物防治例子:利用蘇云金桿菌防治多種農(nóng)林蟲害、利用白僵菌防治玉米螟和松毛蟲,

一種放線菌產(chǎn)生的抗生素-井岡霉素可防治水稻枯紋病。(三)、在農(nóng)牧業(yè)上的應用生產(chǎn)微生物飼料微生物含有豐富的

。以淀粉或纖維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液等為原料,通過發(fā)酵獲得了大量的

,即單細胞蛋白,用單細胞蛋白制成的微生物飼料,能使家畜、家禽增重快,產(chǎn)奶或產(chǎn)蛋量顯著提高微生物菌體蛋白質(三)、在其他方面的應用發(fā)酵工程正滲透到幾乎所有的工農(nóng)業(yè)領域,在助力解決

等方面的重大問題上,作出了越來越大的貢獻。糧食、環(huán)境、健康能源1、解決資源短缺和環(huán)境污染問題利用纖維廢料發(fā)酵生產(chǎn)酒精、乙烯等能源物質2、對極端微生物(生活在高溫、高壓、高鹽和低溫環(huán)境)的利用利用嗜熱菌、嗜鹽菌生產(chǎn)洗滌劑小試牛刀下列不屬于發(fā)酵工程應用的是(

)A.利用工程菌生產(chǎn)人生長激素釋放抑制激素B.利用啤酒酵母釀造啤酒C.用培養(yǎng)的人細胞構建人造皮膚D.用酵母菌生產(chǎn)作為食品添加劑的單細胞蛋白C發(fā)酵法生產(chǎn)酒精后的廢液(pH4.3)含有大量有機物,可用于培養(yǎng)、獲得白地霉菌體,生產(chǎn)高蛋白飼料。培養(yǎng)、制取白地霉菌體的實驗過程示意圖如下。請據(jù)圖回答下列問題:(1)實驗過程中培養(yǎng)白地霉的培養(yǎng)基是____________。培養(yǎng)基定量分裝前,先調(diào)節(jié)________,分裝后用棉塞封瓶口,最后________處理。(2)圖中①過程稱為______,從甲到丁的培養(yǎng)過程是為了__________。白地霉菌的代謝類型為____

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