《乳糖酸修飾凝膠多糖納米載體的制備及細(xì)胞靶向遞送DNA-siRNA性能研究》篇一乳糖酸修飾凝膠多糖納米載體的制備及細(xì)胞靶向遞送DNA-siRNA性能研究一、引言隨著生物醫(yī)藥技術(shù)的飛速發(fā)展，基因治療在疾病治療領(lǐng)域的應(yīng)用日益廣泛?；蛑委熤?，如何實(shí)現(xiàn)DNA/siRNA等基因藥物的有效遞送是關(guān)鍵技術(shù)之一。乳糖酸修飾的凝膠多糖納米載體作為一種新型的基因藥物遞送載體，具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和潛力。本文旨在研究乳糖酸修飾凝膠多糖納米載體的制備方法，并探討其細(xì)胞靶向遞送DNA/siRNA的性能。二、材料與方法1.材料本研究所用材料包括凝膠多糖、乳糖酸、DNA/siRNA等。所有試劑均為分析純，購自正規(guī)渠道。2.制備方法（1）乳糖酸修飾凝膠多糖的合成：采用化學(xué)合成法，將乳糖酸與凝膠多糖進(jìn)行化學(xué)連接，得到乳糖酸修飾的凝膠多糖。（2）納米載體的制備：將合成的乳糖酸修飾的凝膠多糖與DNA/siRNA混合，通過自組裝技術(shù)制備納米載體。3.細(xì)胞培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)方法（1）細(xì)胞培養(yǎng)：選用適宜的細(xì)胞系進(jìn)行培養(yǎng)，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。（2）細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)：采用MTT法測定納米載體對(duì)細(xì)胞的毒性。（3）細(xì)胞靶向遞送實(shí)驗(yàn)：將納米載體與細(xì)胞共培養(yǎng)，觀察納米載體對(duì)DNA/siRNA的細(xì)胞內(nèi)遞送效果。（4）熒光定量PCR及Westernblot等方法檢測基因表達(dá)情況。三、結(jié)果與討論1.乳糖酸修飾凝膠多糖納米載體的制備結(jié)果通過化學(xué)合成法成功合成乳糖酸修飾的凝膠多糖，并成功制備出納米載體。納米載體具有較好的穩(wěn)定性和分散性。2.細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，乳糖酸修飾凝膠多糖納米載體對(duì)細(xì)胞的毒性較低，具有良好的生物相容性。3.細(xì)胞靶向遞送實(shí)驗(yàn)結(jié)果細(xì)胞靶向遞送實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，乳糖酸修飾的凝膠多糖納米載體能夠有效地將DNA/siRNA遞送到細(xì)胞內(nèi)。由于乳糖酸的靶向作用，納米載體能夠更好地與細(xì)胞膜結(jié)合，提高細(xì)胞內(nèi)DNA/siRNA的轉(zhuǎn)染效率。4.基因表達(dá)情況檢測結(jié)果通過熒光定量PCR及Westernblot等方法檢測基因表達(dá)情況，結(jié)果顯示，經(jīng)乳糖酸修飾的凝膠多糖納米載體遞送的DNA/siRNA能夠有效地在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，并產(chǎn)生相應(yīng)的生物效應(yīng)。四、結(jié)論本研究成功制備了乳糖酸修飾的凝膠多糖納米載體，并研究了其細(xì)胞靶向遞送DNA/siRNA的性能。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該納米載體具有良好的生物相容性和較低的細(xì)胞毒性，能夠有效地將DNA/siRNA遞送到細(xì)胞內(nèi)，并在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生相應(yīng)的生物效應(yīng)。因此，乳糖酸修飾的凝膠多糖納米載體在基因治療領(lǐng)域具有