安徽滁州市定遠縣西片三校2025年高三下學(xué)期階段性練習(xí)生物試題請考生注意：1．請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上，請用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認真閱讀答題紙上的《注意事項》，按規(guī)定答題。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．已知淀粉酶可以把淀粉水解為麥芽糖等物質(zhì)，蛋白酶可以把蛋白質(zhì)水解為多肽。某同學(xué)設(shè)計如下實驗（實驗中所涉及的酶的化學(xué)本質(zhì)都是蛋白質(zhì)）探究有關(guān)性質(zhì)，下列分析錯誤的是試管加入的物質(zhì)1234質(zhì)量分數(shù)為1%的淀粉溶液2mL2mL2mL2mL淀粉酶溶液2mL2mL淀粉酶＋蛋白酶（等量混合）4mL4mL蒸餾水2mL2mL碘液2滴2滴雙縮脲試劑2mL2mL預(yù)期顏色變化不變藍紫色①②A．該實驗的目的之一是研究酶之間的相互影響B(tài)．該實驗有多組對照，如1號和3號試管，2號和4號試管C．為了遵循等量原則，實驗過程中，1號、2號試管加入的蒸餾水的體積相同D．①處預(yù)期的顏色變化為藍色，②處不會發(fā)生顏色變化2．某二倍體生物（2N=10）在細胞分裂過程的某階段含有5對同源染色體，該階段不可能發(fā)生（）A．形成的子染色體移向兩極 B．染色質(zhì)縮短變粗C．同源染色體間交叉互換 D．著絲點排列在赤道板上3．腫瘤分良性腫瘤和惡性腫瘤，具備擴散能力的腫瘤就是惡性腫瘤，即癌癥。下列有關(guān)癌細胞的敘述，錯誤的是（）A．腫瘤是基因突變導(dǎo)致細胞異常增殖的結(jié)果B．癌細胞表面沒有糖蛋白導(dǎo)致其容易擴散C．癌細胞在體外培養(yǎng)時可呈多層重疊生長D．可以利用抗體對癌癥進行靶向治療和免疫治療4．某植物花蕊的性別分化受兩對獨立遺傳的等位基因控制，顯性基因B和E共同存在時，植株開兩性花，為野生型；僅有顯性基因E存在時，植株的雄蕊會轉(zhuǎn)化成雌蕊，成為表現(xiàn)型為雙雌蕊的可育植物；只要不存在顯性基因E，植物表現(xiàn)為敗育。下列有關(guān)敘述不正確的是（）A．表現(xiàn)為可育個體的基因型有6種B．BbEe個體自花傳粉，子代中敗育個體的比例為1/4C．BBEE和bbEE雜交，F(xiàn)1自交得到的F2代全部可育D．BBee和bbEE雜交，子代全部為野生型5．下列說法正確的是（）A．環(huán)境容納量是指一定空間中所能維持的種群最大數(shù)量B．調(diào)查土壤小動物類群豐富度可以用標志重捕法進行采集和調(diào)查C．演替過程中草本植物逐漸取代苔蘚，主要原因是苔蘚壽命較短D．生態(tài)系統(tǒng)的能量流動包含能量的輸入、傳遞、轉(zhuǎn)化和散失6．下為能量流經(jīng)某生態(tài)系統(tǒng)中第二營養(yǎng)級的示意圖（單位J/cm2·a），下列說法正確的是（）A．圖中B表示用于生長、發(fā)育和繁殖的能量是80B．該生態(tài)系統(tǒng)第一營養(yǎng)級同化的能量至少為400C．能量由第二營養(yǎng)級到第三營養(yǎng)級的傳遞效率是20%D．畜牧業(yè)中，放養(yǎng)與圈養(yǎng)相比，可提高圖中C/B的比值二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）某研究人員以白光為對照組，探究不同光質(zhì)對蕃茄幼苗生長的影響，其他條件均相同且適宜。請據(jù)下表中的相關(guān)實驗數(shù)據(jù)，回答下列問題：光質(zhì)株高（cm）莖粗（cm）單株干重（mg）壯苗指數(shù)白光8.630.1846.590.99藍光6.770.2254.721.76綠光11.590.1030.470.27黃光9.680.1540.380.63紅光7.990.2060.181.51（注：壯苗指數(shù)越大，反映苗越壯，移栽后生長越好。）（1）光合色素吸收的光能，對蕃茄幼苗光合作用有兩方面直接用途：一是將水分解成___________，二是___________。（2）結(jié)合上表數(shù)據(jù)進行分析：上表所列觀測指標中__________最能直接、準確地反映幼苗的凈光合速率大小；如果忽略光質(zhì)對蕃茄幼苗呼吸作用的影響，則可推測對蕃茄幼苗光合作用最有效的光是_______。與對照組相比，壯苗指數(shù)以__________處理的較好。（3）分析表中數(shù)據(jù)并得出結(jié)論：與對照組相比，____________________________________。8．（10分）白細胞介素是人體重要的淋巴因子，具有免疫調(diào)節(jié)、抑制腫瘤等多種功能。近年來科學(xué)家將藥用蛋白轉(zhuǎn)向植物生產(chǎn)，如圖是將人的白細胞介素基因?qū)腭R鈴薯中，培養(yǎng)生產(chǎn)白細胞介素的過程。（tsr為一種抗生素—硫鏈絲菌素的抗性基因）（1）提取人的白細胞介素基因適宜選用的限制酶是___________，不能使用限制酶SmaI的原因是___________。（2）除圖示方法外，也可從利用___________法構(gòu)建的cDNA文庫中獲取目的基因。獲得目的基因后可采用PCR技術(shù)大量擴增，需提供Taq酶和___________等。（3）將目的基因?qū)腭R鈴薯細胞常采用___________法，其原理是將目的基因?qū)隩i質(zhì)粒上的___________。（4）為篩選出含目的基因的馬鈴薯細胞，需要在培養(yǎng)基中添加___________。最終為了檢測目的基因是否在馬鈴薯中表達，可通過____________方法進行分子水平的檢測。9．（10分）人類甲病和乙病均為單基因遺傳病，并且分別由B、b和A、a兩對等位基因控制，（不考慮同源染色體的交叉互換）某家族遺傳家系圖如下，其中一個為伴性遺傳病，回答以下相關(guān)問題。（1）根據(jù)該遺傳系譜圖分析，甲病和，乙病的遺傳方式為___________________，_________________________。（2）在遺傳系譜圖中I3、Ⅱ2、Ⅱ3、Ⅲ7的基因型分別為_____________、_____________、_____________、_________。（3）Ⅱ3與Ⅱ4的后代中理論上共有_______種基因型和________種表現(xiàn)型。（4）假設(shè)Ⅱ1為甲病的攜帶者，Ⅱ1與Ⅱ2再生一個同時患兩種病男孩的概率為________________（5）在Ⅱ3與Ⅱ4的后代個體中基因b的頻率為_____________。10．（10分）為增加油葵種子中的含油量，科學(xué)家嘗試將花生中的酶A基因?qū)胗涂毎@得轉(zhuǎn)基因油葵新品種。（1）為獲取目的基因，可從花生細胞中提取_________，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA。以此cDNA為模板通過PCR技術(shù)擴增目的基因。（2）構(gòu)建重組DNA分子（如圖所示）最好選用_________限制酶，目的是可避免_________。（3）普通大腸桿菌細胞中沒有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因，將構(gòu)建的重組DNA分子導(dǎo)入農(nóng)桿菌中,將獲得的農(nóng)桿菌接種在含_________的固體平板上培養(yǎng)得到含重組質(zhì)粒的單菌落，再利用培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液。（4）剪取油葵的葉片放入浸染液中一段時間后，經(jīng)過篩選獲得轉(zhuǎn)基因油菜細胞。最后經(jīng)過__________________培育成轉(zhuǎn)基因油葵植株。此種技術(shù)的原理是_________。（5）研究發(fā)現(xiàn)，如果將該酶A的20位和24位氨基酸變?yōu)榘腚装彼?，其催化能力將提?倍。通過蛋白質(zhì)工程對酶A進行改造，所需步驟有_________。a．蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)設(shè)計b．蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能分析c．蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的定向改造d．酶A基因的定向改造e．將改造后的酶A基因?qū)胧荏w細胞f．將定向改造的酶A導(dǎo)入受體細胞（6）經(jīng)過種植轉(zhuǎn)基因油葵發(fā)現(xiàn)，雖然轉(zhuǎn)基因油葵種子中含油量上升，但是抗灰霉菌的能力丟失，其原因是_________。11．（15分）苯丙酮尿癥是一種單基因遺傳病，由于PKU某因突變導(dǎo)致患者尿液中含有大量苯丙酮酸?；蚨c整合可替換特定某因用于該病治療，即將正常PKU基因定點整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細胞的染色體DNA上，替換突變基因。簡要過程如下圖所示。請回答下列問題：注：圖中neoR為新霉素抗性基因，HB1和HB2為小鼠胚胎干細胞染色體DNA上突變的PKU基因兩側(cè)的一段DNA序列。（1）構(gòu)建重組載體時，需要根據(jù)_____________序列分別合成HB1'和HB2'，在二者之間除了插入正常的PKU基因和neoR基因以外，還必須含有_____________。此過程常用的工具酶有____________，neoR基因的作用是___________。（2）可用________技術(shù)將重組載體導(dǎo)入小鼠胚胎干細胞，誘導(dǎo)相應(yīng)區(qū)域互換，完成胚胎干細胞的基因改造。胚胎干細胞的特點有_________（答出兩點即可）。（3）現(xiàn)用完成基因改造后的胚胎干細胞進行個體生物學(xué)水平鑒定，寫出鑒定思路、結(jié)果及結(jié)論：___________________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

A、由表格實驗處理可以看出：該實驗把淀粉酶和蛋白酶混合，則實驗的目的之一是研究酶之間的相互影響，A正確；B、根據(jù)實驗設(shè)計要遵循單一變量原則，可推出1號和3號試管間形成對照，2號和4號試管間形成對照，B正確；C、根據(jù)等量原則，實驗過程中，1號、2號試管各加入2mL蒸餾水的目的是保證各試管中液體的體積相同，防止液體體積的差異影響顏色的變化，C正確；D、3號試管中淀粉酶被蛋白酶分解，淀粉沒有被水解，遇碘液變藍；蛋白酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，與雙縮脲試劑反應(yīng)呈紫色，D錯誤。故選D。2、A【解析】

題干中描述該生物為二倍體生物，且體細胞中的染色體共有10條，因此在該細胞分裂時期依然含有5對同源染色體，即10條染色體，表明染色體的數(shù)量并沒有發(fā)生加倍，以此為突破點解決問題是本題的關(guān)鍵。【詳解】A、形成的子染色體移向兩極或為有絲分裂后期，此時細胞中為10對同源染色體，或為減II后期，此時細胞中不含同源染色體，因此，含5對同源染色體的細胞不可能進行子染色體移向兩極的活動，A錯誤；B、有絲分裂和減I分裂一直存在同源染色體，染色質(zhì)縮短變粗為有絲分裂前期或減I前期的活動，細胞含5對同源染色體時可能發(fā)生，B正確；C、交叉互換為減I前期的活動，細胞含5對同源染色體時可能發(fā)生，C正確；D、著絲點排列在赤道板上，或為有絲分裂中期，或為減II中期，有絲分裂中期在細胞含5對同源染色體時有可能發(fā)生，D正確；故選A。3、B【解析】

細胞癌變的原因有外因和內(nèi)因:外因是致癌因子，包括物理致癌因子、化學(xué)致癌因子和病毒致癌因子；內(nèi)因是原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變?！驹斀狻緼、腫瘤是體內(nèi)的原癌基因和抑癌基因突變后導(dǎo)致細胞異常增殖的結(jié)果，A正確；B、癌細胞表面的糖蛋白減少（并非沒有糖蛋白）導(dǎo)致其容易擴散，B錯誤；C、正常細胞在體外培養(yǎng)時可能出現(xiàn)接觸抑制而只能呈現(xiàn)單層，但癌細胞在體外培養(yǎng)時可呈多層重疊生長，C正確；D、可以利用抗體靶向治療癌癥，即讓藥物進入患者體內(nèi)，特異地選擇致癌位點來發(fā)生作用，使腫瘤細胞特異性死亡，從而達到治療效果，D正確。故選B。癌細胞的主要特征：（1）失去接觸抑制，能無限增殖；（2）細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著改變；（3）細胞表面發(fā)生變化，細胞膜上的糖蛋白等物質(zhì)減少，導(dǎo)致細胞間的黏著性降低。4、D【解析】

1、基因分離定律和自由組合定律的實質(zhì)：進行有性生殖的生物在進行減數(shù)分裂產(chǎn)生配子的過程中，位于同源染色體上的等位基因隨同源染色體分離而分離，分別進入不同的配子中，隨配子獨立遺傳給后代，同時，位于非同源染色體上的非等位基因進行自由組合。

2、由題意知，E、e和B、b獨立遺傳，因此遵循自由組合定律，且B_E_為兩性花（野生型），bbE_為雙雌蕊可育植物，B_ee、bbee為敗育?！驹斀狻緼、表現(xiàn)為可育個體的基因型有6種，包括BBEE、BbEE、bbEE、BBEe、BbEe、bbEe，A正確；B、BbEe個體自花傳粉，子代中只要含有ee就都敗育，所以比例是1/4，B正確；C、BBEE和bbEE雜交，得到F1BbEE，F(xiàn)1自交得到的F2代都含有E，全部可育，C正確；D．BBee和bbEE雜交，BBee是不育的，無法完成雜交實驗，D錯誤。故選D。5、D【解析】

1、環(huán)境容納量是指在環(huán)境條件不受破壞的情況下，一定空間中所能維持的種群最大數(shù)量；2、許多土壤動物有較強的活動能力，而且身體微小，因此不適于用樣方法或標記重捕法進行調(diào)查.在進行這類研究時，常用取樣器取樣的方法進行采集、調(diào)查。即用一定規(guī)格的捕蟲器（如采集罐、吸蟲器等）進行取樣，通過調(diào)查樣本中小動物的種類和數(shù)量來推測某一區(qū)域內(nèi)土壤動物的豐富度；3、生態(tài)系統(tǒng)的能量流動包含能量的輸入、傳遞、轉(zhuǎn)化和散失?！驹斀狻緼、環(huán)境容納量是指在環(huán)境條件不受破壞的情況下，一定空間中所能維持的種群最大數(shù)量，A錯誤；B、調(diào)查土壤小動物類群豐富度用取樣器取樣法進行采集和調(diào)查，而標志重捕法是用來調(diào)查活動能力強、活動范圍大的動物的種群密度，B錯誤；C、草本植物相對于苔蘚更高大，在相同位置下，草本植物對陽光的競爭力強于苔蘚。草本植物與苔蘚處于同一位置時，草本植物會遮蔽陽光，使得苔蘚獲得的能量減少，進而數(shù)量減少，C錯誤；D、生態(tài)系統(tǒng)的能量流動包含能量的輸入、傳遞、轉(zhuǎn)化和散失，D正確。故選D。6、B【解析】

分析題圖：圖示表示能量流經(jīng)某生態(tài)系統(tǒng)第二營養(yǎng)級的示意圖，其中A表示該營養(yǎng)級攝入的能量；B表示該營養(yǎng)級同化的能量；C表示用于生長、發(fā)育和繁殖的能量；D表示呼吸作用中以熱能的形式散失的能量；E表示糞便中的能量?！驹斀狻緼、圖中B表示該營養(yǎng)級同化的能量，即第二營養(yǎng)級同化的能量是80J/cm2?a，A錯誤；

B、圖中B表示該營養(yǎng)級同化的能量，即第二營養(yǎng)級同化的能量是80J/cm2?a，按能量最高傳遞效率20%計算，第一營養(yǎng)級同化的能量至少為80÷20%=400J/cm2?a，B正確；

C、由于第三營養(yǎng)級能量只知道攝入量，不知道同化量，不能計算能量由第二營養(yǎng)級到第三營養(yǎng)級的傳遞效率，C錯誤；

D、B表示該營養(yǎng)級同化的能量，C表示用于生長、發(fā)育和繁殖的能量，放養(yǎng)自身呼吸消耗較多，畜牧業(yè)中，圈養(yǎng)與放養(yǎng)相比，可提高圖中C/B的比值，D錯誤。

故選B。二、綜合題：本大題共4小題7、氧和[H]促進ATP的生成單株干重紅光藍光或紅光紅光或藍光促進了番茄幼苗的生長，而綠光或黃光不利于番茄幼苗的生長【解析】

1.光合作用包括光反應(yīng)和暗反應(yīng)兩個階段。光反應(yīng)發(fā)生場所在葉綠體的類囊體薄膜上，色素吸收光能、傳遞光能，將一部分光能用于水的光解生成[H]和氧氣，另一部分光能用于合成ATP。暗反應(yīng)發(fā)生場所是葉綠體基質(zhì)，首先發(fā)生二氧化碳的固定，即二氧化碳和五碳化合物結(jié)合形成兩分子的三碳化合物，三碳化合物利用光反應(yīng)產(chǎn)生的[H]和ATP被還原。2.真正光合速率=凈光合速率+呼吸速率。當植物同時進行光合作用和呼吸作用時：①呼吸作用大于或等于光合作用，凈光合速率等于或小于零，植物不能生長。②光合作用大于呼吸作用，凈光合速率大于零，植物能正常生長?！驹斀狻浚?）葉綠體中光合色素吸收的光能有兩方面用途：一是將水分解成氧和[H]；二是用于ATP的形成，這些反應(yīng)進行的場所是葉綠體中的類囊體薄膜上。（2）凈光合速率指光合作用產(chǎn)生的糖類減去呼吸作用消耗的糖類（即凈光合作用產(chǎn)生的糖類）的速率。光合作用通過吸收二氧化碳固定成有機物，增加單株干重。凈光合速率越大，在相同時間內(nèi)植株質(zhì)量增加越多，所以比較單株干重最能直觀反映幼苗凈光合速率大小。根據(jù)以上分析可知，凈光合速率與植株干重有關(guān)，觀察圖表可以發(fā)現(xiàn)，紅光條件下凈光合速率最高，可推測對蕃茄幼苗光合作用最有效的光是紅光。觀察圖表可以發(fā)現(xiàn)，藍光和紅光照射下，壯苗指數(shù)較高，故為達到壯苗目的，應(yīng)該在幼苗期增加藍光或紅光照射較好。（3）分析表中數(shù)據(jù)可知：與對照組相比，紅光或藍光有利于植株干重的形成和壯苗指數(shù)較高，促進了番茄幼苗的生長，而綠光或黃光單株干重、壯苗指數(shù)均低于對照組，不利于番茄幼苗的生長。本題以探究不同光質(zhì)對蕃茄幼苗生長的影響為背景，考查光合作用的知識點，要求學(xué)生掌握光合作用的過程及其物質(zhì)變化，識記光反應(yīng)中物質(zhì)具體發(fā)生的變化情況，理解凈光合速率的含義和表示方法，能夠結(jié)合表中數(shù)據(jù)進行分析獲取有效信息，結(jié)合所學(xué)的光合作用的知識點得出實驗的結(jié)論，這是該題考查的重點。8、PstⅠ和HindⅢ限制酶SmaⅠ酶切位點位于白細胞介素基因中部，使用它會造成目的基因斷裂反轉(zhuǎn)錄引物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化T-DNA硫鏈絲菌素抗原—抗體雜交【解析】

分析題圖，圖示表示人的白細胞介素基因表達載體的構(gòu)建過程，載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點，所以切割載體和目的基因時用限制酶PstⅠ和HindⅢ，再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組載體。獲取目的基因的方法包括從基因文庫中獲取、cDNA文庫法、供體細胞的DNA中直接分離基因（鳥槍法）。農(nóng)桿菌通過侵染植物傷口進入細胞后，可將Ti質(zhì)粒的T-DNA插入到植物基因組中。【詳解】（1）載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點，使用限制酶SmaI則會破壞目的基因；（2）目的基因的獲取可以采用cDNA文庫法（即逆轉(zhuǎn)錄法），指以某生物成熟mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄而成的cDNA序列的重組DNA群體，采用PCR技術(shù)大量擴增，需提供Taq酶和引物等；（3）將目的基因?qū)胫参锛毎２捎棉r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，利用的是Ti質(zhì)粒上的T-DNA；（4）構(gòu)建好的表達載體含有硫鏈絲菌素的抗性基因，因此可以在培養(yǎng)基中添加硫鏈絲菌素進行篩選，為檢測目的基因是否順利表達，可以通過抗原-抗體雜交技術(shù)。解答本題的關(guān)鍵是分析題圖中的限制酶切割位點，明確目的基因和質(zhì)粒都有PstⅠ和HindⅢ的切割位點，從而可以用于構(gòu)建基因表達載體，其他的酶切位點則會破壞目的基因或抗性基因。9、X染色體隱性遺傳常染色體隱性遺傳aaXBXB/aaXBXbAaXbYAaXBXbAaXbY84

【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：分析乙?。河捎冖?和Ⅱ2個體不患乙病，而Ⅲ1患乙病，所以乙病為隱性遺傳病，又由于Ⅲ1患乙病，而父親不患乙病，故乙病為常染色體隱性遺傳病（用A、a表示）。分析甲病：Ⅱ3與Ⅱ4沒有甲病而兒子Ⅲ7患甲病，說明甲病為隱性遺傳病，又由于題干信息判斷甲、乙病中“其中一個為伴性遺傳病”，故甲病為伴X隱性遺傳?。ㄓ肂、b表示）?！驹斀狻浚?）根據(jù)該遺傳系譜圖分析，由于Ⅱ1和Ⅱ2個體不患乙病，而Ⅲ1患乙病，所以乙病為為常染色體隱性遺傳病，Ⅱ3與Ⅱ4沒有甲病而兒子Ⅲ7患甲病，說明甲病為隱性遺傳病，又由于題干信息判斷甲、乙病中“其中一個為伴性遺傳病”，故甲病為伴X隱性遺傳??；（2）I3患乙病不患甲病，其基因型為aaXBXB/aaXBXb，Ⅱ2患甲病不患乙病，其女兒患乙病，則Ⅱ2基因型為AaXbY，Ⅱ3為正常女性，其女兒患乙病，兒子患甲病，所以Ⅱ3的基因型為AaXBXb、Ⅲ7為患甲病男性，由于父親Ⅱ4為患乙病男性（aaXBY），則Ⅲ7基因型為AaXbY；（3）Ⅱ3與Ⅱ4（AaXBXb×aaXBY）的后代中理論上共有2×4＝8種基因型和2×2

＝4

種表現(xiàn)型；（4）假設(shè)Ⅱ1為甲病的攜帶者，有一個患乙病的女兒，則Ⅱ1基因型為AaXBXb，Ⅱ1與Ⅱ2（AaXBXb×AaXbY）再生一個同時患兩種病男孩的概率為×＝；（5）Ⅱ3與Ⅱ4（AaXBXb×aaXBY）共有XB、Xb、XB基因，其中基因b的頻率為，后代個體中基因b的頻率同樣為。本題考查遺傳病方式的判斷、概率的計算、基因的自由組合定律等相關(guān)知識，熟悉遺傳系譜圖準確判斷遺傳病的遺傳方式是快速答題的關(guān)鍵。10、mRNABamHⅠ和PstⅠ質(zhì)粒自身的黏性末端連接或目的基因與質(zhì)粒反向連接氨芐青霉素植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物細胞的全能性b、a、d、e抗灰霉菌基因沒有表達（或丟失等）【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）逆轉(zhuǎn)錄過程需要從供體細胞內(nèi)提取出的mRNA為模板，以脫氧核苷酸為原料合成cDNA。（2）構(gòu)建重組DNA分子時選用的限制酶要不破壞目的基因，所以不能用EcoRI，同時盡量防止質(zhì)粒自身的黏性末端連接或目的基因與質(zhì)粒反向連接，所以最好選用兩種限制酶，即BamHⅠ和PstⅠ。（3）根據(jù)限制酶的切割位點，由于使用BamHⅠ和PstⅠ會破壞抗四環(huán)素標記基因，但抗氨芐青霉素的標記基因是完整的所以只能用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選含重組質(zhì)粒的單菌落。（4）得到轉(zhuǎn)基因