湖北省恩施州清江外國語學校2025屆高二生物第一學期期末檢測試題請考生注意：1．請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應位置上，請用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認真閱讀答題紙上的《注意事項》，按規(guī)定答題。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．穩(wěn)態(tài)對于維持正常的生命活動非常重要，如圖為5種魚對水溫和含鹽量的忍受程度。這些魚分別分布在北極海域、熱帶湖泊和全球的是()A.2、1、5 B.5、3、2 C.3、4、2 D.1、2、32．以下圖譜中，甲病致病基因位于核DNA上，乙病致病基因位于線粒體DNA上。下列敘述中錯誤的是（）A.甲病是常染色體的隱性遺傳病 B.Ⅱ7個體的致病基因來自Ⅰ3和Ⅰ4C.Ⅱ8和Ⅱ9的患病后代不會患乙病 D.Ⅱ6和Ⅱ7的后代只患一種病的概率為3．園林工人為使灌木圍成的綠籬長得茂密、整齊，要對綠籬定期修剪，其目的是（）A.抑制側(cè)芽生長 B.抑制其開花結(jié)果C抑制向光性 D.促進側(cè)芽生長4．下列哪種細胞的全能性最容易表達出來（）A.青蛙的上皮細胞 B.胡蘿卜的韌皮部細胞C.大白鼠的肝臟細胞 D.人皮膚生發(fā)層細胞5．食欲肽在所有脊椎動物中普遍存在，是下丘腦的神經(jīng)分泌細胞釋放的多肽。食欲肽作用于下丘腦使動物產(chǎn)生食欲，引發(fā)攝食過程。食欲肽作用于腦干的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)系統(tǒng)神經(jīng)元，使動物保持清醒狀態(tài)。下列敘述正確的是（）A.下丘腦的神經(jīng)分泌細胞釋放食欲肽不需要消耗細胞呼吸產(chǎn)生的能量B.正常情況下，動物體內(nèi)高水平的血糖濃度可能會促進食欲肽的釋放C.食欲肽為脊椎動物具有共同的原始祖先提供了細胞水平的證據(jù)D.腦干網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)系統(tǒng)神經(jīng)元的食欲肽受體異常的動物比健康個體容易入睡6．下列關(guān)于遺傳學發(fā)展史上4個經(jīng)典實驗的敘述，正確的是（）A.孟德爾的單因子雜交實驗證明了遺傳因子位于染色體上B.摩爾根的果蠅伴性遺傳實驗證明了基因自由組合定律C.T2噬菌體侵染細菌實驗證明了DNA是大腸桿菌的遺傳物質(zhì)D.肺炎雙球菌離體轉(zhuǎn)化實驗證明了DNA是肺炎雙球菌的遺傳物質(zhì)7．如圖表示免疫異常引起的某種疾病的發(fā)病機理。下列相關(guān)分析正確的是()A.這是一種自身免疫病，細胞甲為B細胞B.激素乙通過體液定向運到垂體發(fā)揮調(diào)節(jié)作用C.細胞甲的分泌活動越旺盛，激素乙的分泌就越多D.激素丙與抗體具有相同的受體，二者具有競爭性8．（10分）研究小組對某自然保護區(qū)內(nèi)一種留鳥進行連續(xù)觀察研究，在14年間統(tǒng)計其種群增長速率如表所示。據(jù)表分析下列敘述錯誤的是（）年份第2年第4年第6年第8年第10年第12年第14年增長速率0.801.202.003.502.051.200.03A.由表格數(shù)據(jù)可知，14年間該種留鳥種群數(shù)量呈“S”型增長B.第8～14年間增長速率逐年減小，但該種群的年齡結(jié)構(gòu)仍為增長型C.第4年和第12年增長速率相同，說明這兩年該種群的出生率相同D.該種留鳥種群的環(huán)境容納量可能為第8年時種群數(shù)量的兩倍二、非選擇題9．（10分）下圖是三個DNA片段上（依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制性內(nèi)切酶的識別序列與切割位點）和某種質(zhì)粒（質(zhì)粒上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切點是唯一的）示意圖。請回答下列問題：（1）某研究人員經(jīng)BamHⅠ切割得到了目的基因。為了構(gòu)建目的基因表達載體，質(zhì)粒需用_____________進行切割，原因是_____________。將目的基因插入質(zhì)粒中，還需用到_____________酶。（2）目的基因的獲得還可以采用PCR技術(shù)，設計引物時，引物中的堿基序列設計的依據(jù)是_____________和_____________。（3）用單酶切法構(gòu)建目的基因表達載體時，常會遇到目的基因自身環(huán)化和_____________的問題，因此在實踐中，常用雙酶切法。（4）某研究人員利用圖中的質(zhì)粒構(gòu)建了某種目的基因的三個表達載體，如圖。其中不能在宿主細胞中表達目的基因產(chǎn)物的有_____________，不能表達的原因是_____________。10．（14分）下丘腦某區(qū)中存在饑餓敏感神經(jīng)元P，能量缺乏時神經(jīng)元P被激活，從而引起進食行為。科研人員敲除了野生型小鼠神經(jīng)元P中的A基因，對其功能進行研究。（1）敲除野生型小鼠的A基因，使其不能__________出A蛋白，無法執(zhí)行相應的功能，從而制備出實驗小鼠。（2）將野生型小鼠及實驗小鼠飼養(yǎng)在相同且適宜條件下，得到圖1所示結(jié)果。由于實驗小鼠的體重__________野生型，推測A蛋白能夠__________。（3）饑餓時，神經(jīng)元P的突觸前神經(jīng)元能合成一種神經(jīng)遞質(zhì)——谷氨酸，該物質(zhì)以__________方式釋放到突觸間隙，然后作用于__________，使神經(jīng)元P產(chǎn)生__________。研究發(fā)現(xiàn)，饑餓處理后實驗小鼠下丘腦中的谷氨酸含量與野生型小鼠無顯著差異，但進食量減少，推測A蛋白很可能是谷氨酸的__________。（4）為驗證上述推測，科研人員進一步實驗，處理及結(jié)果如圖2所示。依據(jù)__________，可初步判斷上述推測成立。11．（14分）圖甲是幾種限制酶識別序列及切割位點，圖乙為某質(zhì)粒的示意圖，圖丙是一段含有目的基因的DNA片段。請回答下列問題：（1）基因工程中“分子縫合針”是指____________________。（2）利用______________技術(shù)可以實現(xiàn)目的基因在體外大量擴增。（3）基因工程中載體應具備的條件有：___________（答出兩點即可）。（4）用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應選用__________________________兩種限制酶切割，含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能在含____________________的培養(yǎng)基上生存。（5）若要檢測目的基因是否成功導入大腸桿菌，采用的檢測方法是________。（6）若用BamHI酶切的DNA末端與BclI酶切的DNA末端連接，對于該該連接部位，用這兩種酶________（填“都能”“都不能”或“只有一種能”）切開。12．一萬多年前，某地區(qū)有許多湖泊（A、B、C、D），湖泊之間通過縱橫交錯的溪流連結(jié)起來，湖中有不少鳉魚。后來，氣候逐漸干旱，小溪流漸漸消失，形成了若干個獨立的湖泊（如圖1），湖中的魚形態(tài)差異也變得明顯。請分析回答下列問題：（1）溪流消失后，各個湖泊中的鳉魚不再發(fā)生基因交流，原因是存在______________。各個種群通過_______________產(chǎn)生進化的原材料，但這些變異不能決定進化的方向，原因是______________。（2）現(xiàn)在有人將四個湖泊中的一些魚混合養(yǎng)殖，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：A、B兩湖的鳉魚能進行交配且產(chǎn)生后代，但其后代高度不育，A、B兩湖內(nèi)鳉魚的差異體現(xiàn)了______________多樣性；來自C、D兩湖的鳉魚交配，能生育具有正常生殖能力的子代，且子代個體之間存在一定的性狀差異，這體現(xiàn)了______________多樣性。這些多樣性的形成是不同物種之間、生物與環(huán)境之間______________的結(jié)果。（3）C湖泊中的鳉魚某對染色體上有一對等位基因A和a，該種群內(nèi)的個體自由交配。圖2為某段時間內(nèi)種群A基因頻率的變化情況，假設無基因突變，則該種群在______________時間段內(nèi)發(fā)生了進化，在Y3-Y4時間段內(nèi)該種群中Aa的基因型頻率為______________。經(jīng)歷了圖示變化之后，鳉魚是否產(chǎn)生了新物種?______________（填“是”、“否”或“不確定”）。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】分析題圖：1生活在溫度最高，鹽分最低的水域；2生活在鹽度最高，溫度最低的水域；3生活在鹽度最高，溫度范圍較廣的水域；4生活在溫度較低，鹽分較低的水域；5生活的鹽度和溫度范圍較廣，可生活在全球不同水域。【詳解】北極海域的特點是溫度較低，鹽度較高，由分析可知2適合在該水域中生存，熱帶湖泊溫度較高，鹽分較低，由分析可知，1適合生活的該水域中，由圖可知，5在不同溫度和鹽度下都能很好的生長，故5可在全球的水域中生長，綜上分析，A正確，BCD錯誤。故選A?！军c睛】解題的關(guān)鍵是看懂圖示意思，就要學好數(shù)學中的坐標軸的意義，需要同學們能夠各科知識融會貫通。2、D【解析】根據(jù)題意和圖示分析可知：Ⅰ1和Ⅰ2不患甲病，有一個患甲病的女兒Ⅱ5，且致病基因位于核DNA上，因此甲病為常染色體隱性遺傳?。灰也≈虏』蛭挥诰€粒體DNA上，為細胞質(zhì)遺傳，具有母系遺傳的特點。【詳解】A、系譜圖中Ⅰ1和Ⅰ2個體均正常，他們的女兒Ⅱ5患甲病，可推知甲病是常染色體的隱性遺傳病，A正確；B、Ⅱ7個體患甲乙兩種病，其中甲病的致病基因來自Ⅰ3和Ⅰ4，乙病致病基因位于線粒體DNA上，所以Ⅱ7個體的乙病致病基因來自Ⅰ3，所以Ⅱ7個體的致病基因來自Ⅰ3和Ⅰ4，B正確；C、乙病致病基因位于線粒體DNA上，表現(xiàn)為母系遺傳的特點，Ⅱ9不患乙病，所以Ⅱ8和Ⅱ9的患病后代不會患乙病，C正確；D、設甲病的致病基因為a，則Ⅱ6的關(guān)于甲病的基因型為1/3AA或2/3Aa，Ⅱ7的關(guān)于于甲病的基因型為aa，Ⅱ6和Ⅱ7的后代患甲病的概率是2/3×1/2＝1/3，不患甲病的概率是1－1/3＝2/3，由于Ⅱ7患乙病，根據(jù)乙病的特點，可推知Ⅱ6和Ⅱ7的后代一定患乙病，綜合考慮，Ⅱ6和Ⅱ7的后代只患一種病(只患乙病，不患甲病)的概率為2/3×1＝2/3，D錯誤。故選D。3、D【解析】頂端優(yōu)勢是指頂芽優(yōu)先生長，側(cè)芽生長受抑制的現(xiàn)象，原因是頂芽產(chǎn)生的生長素向下運輸?shù)絺?cè)芽的部位積累，使得側(cè)芽部位的生長素濃度高于頂芽的生長素濃度，從而使側(cè)芽生長受到抑制，頂芽生長速度較快?！驹斀狻抗嗄緡傻木G籬長得茂密、整齊，需要對綠籬定期修剪目的是解除頂端優(yōu)勢，促進側(cè)芽生長，D正確，ABC錯誤。故選D。4、B【解析】1、細胞的全能性是指已分化的細胞仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能；2、細胞全能性大小的比較：受精卵＞卵細胞（生殖細胞）＞體細胞；植物細胞＞動物細胞?！驹斀狻考毎磉_出全能性的標志是產(chǎn)生新個體。目前人們還沒有成功地將單個已分化的動物體細胞培育成新個體，但人們已經(jīng)將離體的分化的植物細胞培育成新個體，因此青蛙的上皮細胞、大白鼠的肝臟細胞和人皮膚生發(fā)層細胞的全能性均比胡蘿卜的韌皮部細胞低，胡蘿卜的韌皮部細胞的全能性最容易表達出，B項正確，A、C、D三項均錯誤。故選B。5、D【解析】題意分析，食欲肽是一種神經(jīng)遞質(zhì)，神經(jīng)遞質(zhì)是由突觸前膜以胞吐的方式釋放進入突觸間隙，作用于突觸后膜上的特異性受體，引起下一個神經(jīng)元的興奮或抑制?！驹斀狻緼、下丘腦神經(jīng)細胞分泌食欲肽的方式為胞吐，需要消耗能量，A錯誤；B、食欲肽的作用是產(chǎn)生食欲，據(jù)此推測，正常情況下，動物體內(nèi)高水平的血糖濃度可能會抑制食欲肽的釋放，B錯誤；C、食欲肽在所有脊椎動物中普遍存在，是下丘腦的神經(jīng)分泌細胞釋放的多肽，據(jù)此可知，食欲肽為脊椎動物具有共同的原始祖先提供了分子水平的證據(jù)，C錯誤；D、食欲肽作用于腦干的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)系統(tǒng)神經(jīng)元，使動物保持清醒狀態(tài)，從而不易入睡，據(jù)此可推測，腦干網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)系統(tǒng)神經(jīng)元的食欲肽受體異常的動物體內(nèi)，食欲肽無法發(fā)揮正常的條件作用，因而比健康個體容易入睡，D正確。故選D。6、D【解析】1、肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗包括活體細菌轉(zhuǎn)化實驗和離體細菌轉(zhuǎn)化實驗，其中活體細菌轉(zhuǎn)化實驗證明S型細菌中存在某種“轉(zhuǎn)化因子”，能將R型細菌轉(zhuǎn)化為S型細菌；離體細菌轉(zhuǎn)化實驗證明DNA是遺傳物質(zhì)。2、T2噬菌體侵染細菌的實驗步驟：標記噬菌體→標記的噬菌體與大腸桿菌混合培養(yǎng)→在攪拌器中攪拌，然后離心，檢測上清液和沉淀物中的放射性物質(zhì)。該實驗證明DNA是遺傳物質(zhì)。3、薩頓提出基因在染色體上的假說，摩爾根通過果蠅伴性遺傳實驗證明了基因位于染色體上。【詳解】A、孟德爾的單因子雜交實驗沒有證明遺傳因子位于染色體上，當時人們還沒有認識染色體，A錯誤；B、摩爾根的果蠅伴性遺傳實驗只研究了一對等位基因，不能證明基因自由組合定律，B錯誤；C、T2噬菌體侵染細菌實驗證明了DNA是噬菌體的遺傳物質(zhì)，C錯誤；D、肺炎雙球菌離體轉(zhuǎn)化實驗證明了DNA是轉(zhuǎn)化因子，即DNA是肺炎雙球菌的遺傳物質(zhì)，D正確。故選D。【點睛】本題考查人體對遺傳物質(zhì)的探究歷程，要求考生了解人類對遺傳物質(zhì)的探究歷程，識記不同科學家采用的實驗方法及得出的實驗結(jié)論，能結(jié)合所學的知識準確判斷各選項。7、D【解析】細胞甲能分泌抗體，則細胞甲是漿細胞，A項錯誤；激素通過體液運送到全身各處，不能定向運向靶細胞，但只能特異性地對靶細胞發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，B項錯誤；圖中細胞甲分泌的抗體與甲狀腺細胞上的激素丙促甲狀腺激素受體結(jié)合，導致甲狀腺細胞對激素丙促甲狀腺激素的敏感度降低，從而使激素乙甲狀腺激素分泌量減少，故C項錯誤；據(jù)圖可知，激素丙與抗體具有相同的受體，說明二者具有競爭性，D項正確。8、C【解析】1、自然界的資源和空間總是有限的，當種群密度增大時，種內(nèi)競爭就會加劇，以該種群為食的動物的數(shù)量也會增加，這就使種群的出生率降低，死亡率增高，有時會穩(wěn)定在一定的水平，形成“S”型增長曲線。2、分析表格數(shù)據(jù)，期間增長速率先增大后減小，故種群數(shù)量不是呈現(xiàn)“J”曲線增長的。在第8年左右增長速度最大，之后逐漸變小了，種群數(shù)量呈現(xiàn)“S”曲線增長，在數(shù)量=K值時，出生率等于死亡率。【詳解】A、分析表格數(shù)據(jù)，期間增長速率先增大后減小，說明種群數(shù)量呈現(xiàn)“S”型曲線增長的，A正確；B、第8～14年間增長速率逐年減小但仍然大于0，種群數(shù)量仍在增長，該種群的年齡結(jié)構(gòu)為增長型，B正確；C、第4年和第12年增長速率相同，說明這兩年該種群的出生率和死亡率的差值相同，但出生率不一定相同，C錯誤；D、在第8年左右增長速率最大，對應的種群數(shù)量可能是環(huán)境容納量的一半，該種留鳥種群的環(huán)境容納量可能為第8年時種群數(shù)量的兩倍，D正確。故選C。二、非選擇題9、(1).Sau3AI(2).兩種酶切割后形成的黏性末端相同(3).DNA連接(4).目的基因兩端的堿基序列(5).限制酶識別序列(6).反向接入(7).甲和丙(8).甲中目的基因插入在啟動子的上游，丙中目的基因插入在終止子的下游，兩者的目的基因均不能被轉(zhuǎn)錄【解析】1、“分子手術(shù)刀”--限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”--DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別：E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因（1）啟動子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。（2）終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。常用的標記基因是抗生素基因?！驹斀狻浚?）分析圖解可知，限制酶Sau3AI和BamHI酶切割后形成的黏性末端相同，因此經(jīng)BamHI酶切割得到的目的基因可以與上述表達載體被Sau3AI酶切后的產(chǎn)物連接。將目的基因插入質(zhì)粒中，還需用到DNA連接酶。（2））目的基因的獲得還可以采用PCR技術(shù)，設計引物時，引物中的堿基序列設計的依據(jù)是目的基因兩端的堿基序列和限制酶識別序列。（3）限制酶切割DNA分子后產(chǎn)生的末端有兩種類型，黏性末端或者是平末端，用單酶切法構(gòu)建目的基因表達載體，缺點是容易造成基因或質(zhì)粒自身環(huán)化，基因和質(zhì)粒反向連接，因此在實踐中，常用雙酶切法。（4）在基因表達載體中，啟動子位于目的基因的首端，終止子應位于目的基因的尾端，這樣的基因才能表達。圖中甲中目的基因插入在啟動子的上游，丙中目的基因插入在終止子的下游，兩者的目的基因均不能被轉(zhuǎn)錄，因此兩者都不能在宿主細胞中表達目的基因產(chǎn)物?！军c睛】本題著重考查了基因工程的操作工具，要求考生能夠掌握限制酶的特點，明確不同限制酶切割形成的相同的末端之間能夠連接；識記基因表達載體的組成，明確啟動子和終止子在基因表達中的作用，識記DNA連接酶的種類和功能區(qū)別。10、①.表達②.低于③.影響神經(jīng)元P的激活④.胞吐⑤.突觸后膜⑥.動作電位⑦.受體⑧.正常小鼠正常處理組和實驗小鼠饑餓處理組的P神經(jīng)元的動作電位頻率無明顯差別【解析】據(jù)圖1可知，實驗小鼠體重普遍比野生型小鼠體重低，說明敲除饑餓敏感神經(jīng)元P中的A基因可影響進食行為，進而引起體重下降；圖2中顯示，比較各組的P神經(jīng)元的動作電位頻率，正常小鼠饑餓處理時比正常處理小鼠高，而實驗小鼠正常處理時比正常小鼠正常處理時低，且實驗小鼠饑餓處理時和正常小鼠正常處理時幾乎無差別，說明饑餓處理會引起P神經(jīng)元動作電位頻率增加，而敲除P中的A基因后則會引起P神經(jīng)元動作電位頻率降低。【詳解】（1）敲除野生型小鼠的A基因后，其不能表達出A蛋白，無法執(zhí)行相應的功能，從而制備出實驗小鼠。（2）據(jù)圖1可知，實驗小鼠的體重低于野生型，由于實驗小鼠敲除了神經(jīng)元P中的A基因，而“能量缺乏時神經(jīng)元P被激活，從而引起進食行為”，推測A蛋白能夠影響神經(jīng)元P的激活過程。（3）饑餓時，神經(jīng)元P的突觸前神經(jīng)元能合成一種神經(jīng)遞質(zhì)—谷氨酸，該物質(zhì)以胞吐方式釋放到突觸間隙，然后作用于突觸后膜，使神經(jīng)元P產(chǎn)生動作電位。研究發(fā)現(xiàn)，饑餓處理后實驗小鼠下丘腦中的谷氨酸含量與野生型小鼠無顯著差異，但進食量減少，推測A蛋白很可能是谷氨酸的受體。（4）比較圖2中，正常小鼠正常處理和實驗小鼠饑餓處理的P神經(jīng)元的動作電位頻率無明顯差別，說明“饑餓處理后實驗小鼠下丘腦中的谷氨酸含量與野生型小鼠無顯著差異”的推測成立。【點睛】本題結(jié)合題圖，重點考查學生分析題圖，對實驗數(shù)據(jù)進行處理和分析的能力，本題綜合性比較強，解題時應從曲線圖和柱狀圖的對比分析入手，按照對照實驗的原則處理數(shù)據(jù)，得出結(jié)論。11、①.DNA連接酶②.PCR③.能自我復制；有一個至多個限制酶切割位點；具有標記基因；能在受體細胞中穩(wěn)定存在；不影響宿主細胞的生命活動④.BclⅠ和HindⅢ⑤.氨芐青霉素⑥.DNA分子雜交技術(shù)⑦.都不能【解析】1、分析圖丙：外源DNA上含有限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII和Sau3AI的切割位點，其中限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII的識別序列都能被Sau3kI識別。2、分析圖乙：質(zhì)粒上有限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII三種限制酶的識別序列和切割位點，其中BamHⅠ的切割位點位于兩種抗生素抗性基因上?！驹斀狻浚?）基因工程中“分子縫合針”指的是DNA連接酶，可以催化DNA單鏈之間磷酸二酯鍵的形成。（2）PCR技術(shù)是一項在生物體外復制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)，利用該技術(shù)可以實現(xiàn)目的基因在體外大量擴增。（3）基因工程中載體應具備的條件有：能自我復制；有一個至多個限制酶切割位點；具有標記基因；能在受體細胞中穩(wěn)定存在；不影響宿主細胞的生命活動。（4）選擇的限制酶應在目的基因兩端存在識別位點，但使用BamHⅠ可能破壞質(zhì)粒中的兩種抗性基因，BclI和HindⅢ都只會破壞氨芐青霉素抗性基因，四環(huán)素抗性基因完好，因此只能選BclI和HindⅢ兩種限制酶切割；由于經(jīng)限制酶切割后，氨芐青霉素抗性基因被破壞，故含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存。（5）若要檢測目的基因是否成功導入大腸桿菌，采用的檢測方法是DNA分子雜交技術(shù)：若出現(xiàn)相關(guān)雜交帶，則證明導入成功。（6）根據(jù)