第第頁掃描電鏡制樣方法｜5種常用的生物樣品干燥方法掃描電鏡制樣方法｜5種常用的生物樣品干燥方法干燥是掃描電鏡生物樣品制備中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，假如處理不好，會直接影響到察看的清楚度與準(zhǔn)確度。要想制備出好的掃描電鏡生物樣品，需要在干燥過程中盡可能減少由于水分蒸發(fā)而引起的樣品表面形貌的形變，且必需確保干燥。大多數(shù)動植物容易發(fā)生明顯的塌陷和變形。因此，需要針對不同的生物樣品來選擇合適的干燥方法。掃描電鏡生物樣品制備常用干燥方法01自然干燥法自然干燥法是指樣品中的水分在大氣中自然蒸發(fā)，或樣品經(jīng)脫水處理后脫水劑自然揮發(fā)而干燥的方法。對干種子、果殼、某些干花粉、昆蟲標(biāo)本等來說，自然干燥法是一個簡易應(yīng)用有效的方法，雖然在自然干燥過程中，樣品體積有所收縮，但卻保存了樣品的基本形態(tài)。適用于外表堅硬的樣品，如外表有殼的昆蟲，木材等。自然風(fēng)干飛納掃描電鏡直接察看螨蟲02烘干干燥法烘干干燥法是將要研究的樣品用烘干箱烘干，一般溫度掌控在80℃以下，烘干程度以含水量在5%以下為好。此方法的干燥速度較快，但水分蒸發(fā)時可能造成樣品變形或斷裂。適用于不易變形且耐熱的樣品，譬如淀粉粒、孢子粉等。烘干的花粉噴金后直接可以用二次電子察看03臨界點干燥法臨界點干燥法是利用物質(zhì)在臨界狀態(tài)下，液體和氣體的密度相等，氣液界面消失，液體的表面張力系數(shù)為零。臨界點干燥法之所以始終被視為制作生物醫(yī)學(xué)掃描樣品可靠的干燥方法，是由于此法能除去液體表面張力的作用，干燥出的樣品能較大程度地保管其自然形態(tài)。04冷凍干燥法冷凍干燥法是將含水樣品放入低溫環(huán)境中冷凍，或使用溶劑將樣品中的水逐級替換后冷凍，然后抽真空升華。它是利用低不冷不熱真空，使樣品中的水分或溶劑直接升華，以實現(xiàn)干燥樣品的目的。冷凍干燥過程不經(jīng)過液相階段，因而避開了氣相和液相之間表面張力對樣品的損傷。05真空干燥法真空干燥法指的是將經(jīng)脫水（多用梯度脫水）的樣品置于真空容器中進行干燥的方法。真空干燥法選用高熔點的有機溶劑（叔丁醇、乙腈、六甲基二硅胺烷、正丁醇等）作升華介質(zhì)，既保存了冷凍干燥法的優(yōu)點，又不用對樣品進行冷凍處理，無冷凍損傷，且操作簡單。適用于全部生物樣品，特別是細菌、細胞等微小樣品。經(jīng)過梯度脫水真空干燥的桿菌可以輕松獲得高倍圖像小結(jié)干燥方法在不絕改進，但還是只能把由干燥引起的樣品變形掌控在肯定的范圍內(nèi)。上述5種干燥方法各有優(yōu)缺點，且各有適用的生物樣品種類。我們在選擇生物樣品干燥的方法時，盡量選擇能保持樣品表面真實結(jié)構(gòu)的方法，在保證掃描電鏡狀態(tài)下，盡量還原樣品表面細節(jié)。對于生物樣品，飛納電鏡低真空模式可以直接察看一些生物樣品，如新鮮植物葉片，昆蟲等。察看葉子氣孔，高亮度的CeB6燈絲可以在低曝光時間下快速拍照，獲得高質(zhì)量圖像，避開了長時間曝光導(dǎo)致氣孔關(guān)閉以及長時間抽真空導(dǎo)致葉片失水收縮。飛納電鏡低真空下察看葉子氣孔另外，飛納電鏡的專用控溫樣品杯可以掌控樣品溫度，進而轉(zhuǎn)變樣品四周的濕度，最大限度地降低電子束和真空度對樣品的損壞。適用于一些含水較高的水凝膠，蛋