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紫外分光光度法測(cè)定苯甲酸一實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)運(yùn)用標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法求樣品含量掌握752型紫外分光光度計(jì)的使用方法1精選完整ppt課件二實(shí)驗(yàn)原理在堿性條件下,苯甲酸形成苯甲酸鹽,對(duì)紫外光有選擇性吸收,其吸收光譜的最大吸收波長在225nm??刹捎米贤夥止夤舛扔?jì)測(cè)定物質(zhì)在紫外光區(qū)的吸收光譜并進(jìn)行定量分析。2精選完整ppt課件三實(shí)驗(yàn)步驟1.苯甲酸吸收曲線的繪制吸取苯甲酸貯備液4.00ml,放入50ml容量瓶中,用0.01mol/L的NaOH溶液定容,搖勻得標(biāo)準(zhǔn)苯甲酸溶液S(此溶液1ml含8μg苯甲酸)。測(cè)量條件參比液:0.01mol/L的NaOH溶液;測(cè)量波長:210、215、218、220、222、224、225、226、228、230、235、240nm。以波長為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制苯甲酸的紫外吸收曲線。3精選完整ppt課件2.標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法測(cè)定樣品液苯甲酸的含量取10.00ml樣品液,放入50ml容量瓶中,用0.01mol/L的NaOH溶液定容,搖勻得稀釋好的樣品液X。在上述曲線中找出最大吸收波長,以此作測(cè)定波長。以0.01mol/L的NaOH溶液為參比液。在完全相同的條件下測(cè)出稀釋好的樣品液X的吸光度值。3、按下式計(jì)算樣品液中苯甲酸的濃度:
4精選完整ppt課件四、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與結(jié)果1.苯甲酸吸收曲線的繪制2.標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法測(cè)定樣品液苯甲酸的含量λ(nm)210215218220222224225226228230235240A
AsAxCsCx5精選完整ppt課件五、結(jié)果與討論結(jié)果如何?是否符合預(yù)期?分析失敗的原因:儀器因素?溶液因素?人為因素?環(huán)境因素?6精選完整ppt課件紫外分光光度計(jì)的使用方法1.打開電源,預(yù)熱20分鐘2.按MODE鍵設(shè)為吸光度方式
顯示器顯示“---nm,----Abs”3.設(shè)定波長,如220nm
顯示器顯示“220nm,----Abs”4.打開樣品室蓋,將參比液比色皿和待測(cè)液比色皿放入樣品室蓋上樣品室蓋5.將參比液比色皿拉入光路中,按100%T鍵調(diào)零
調(diào)零完成時(shí)顯示器顯示“220nm,0.000Abs”6.將待測(cè)溶液拉入光路中,直接讀數(shù)注意:每改變波長,必須重新調(diào)零注意倒溶液時(shí)遠(yuǎn)離儀器,避免濺濕儀器7精選完整ppt課件比色皿使用注意事項(xiàng)1、拿取比色皿時(shí),只能用手指接觸毛玻璃面,避免接觸光學(xué)面,注意保護(hù),防止摔破。
2、盛裝溶液時(shí),高度為比色皿的2/3處即可,光學(xué)面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然后再用擦鏡紙擦拭。3、不可隨時(shí)調(diào)換參比用的比色皿和承載樣品比色皿,也就是說參比比色皿應(yīng)該固定。
4、使用比色皿時(shí),還應(yīng)特別注意通光方向。一般比色皿的毛玻璃面上都刻有箭頭,或在透光面上蝕刻有標(biāo)記,以供使用者辨認(rèn)通光方向。
5、不能把裝有溶液的比色皿放在儀器上以防止濺濕儀器。
6、比色皿在使用后,應(yīng)立即用水沖洗干凈,收好。8精選完整ppt課件實(shí)驗(yàn)課要求穿白大褂,帶筆記本記錄數(shù)據(jù)嚴(yán)肅認(rèn)真操作實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁大聲喧嘩實(shí)驗(yàn)前后把儀器清洗干凈并放回原位置試劑瓶用完后放回原位置;講臺(tái)上的試劑瓶不能拿走;注意避免滴管和瓶蓋的交叉污染桌面保持整潔,小心避免損壞儀器每次做完實(shí)驗(yàn)簽名,值日生打掃干凈,經(jīng)老師檢查通過后才能離開實(shí)驗(yàn)報(bào)告下次課前交9精選
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