免疫學(xué)應(yīng)用

免疫學(xué)治療與預(yù)防：熟悉人工免疫的種類；掌握人工自動(dòng)免疫的概念和主要生物制品；掌握人工被動(dòng)免疫的概念和主要生物制品；了解人工自動(dòng)免疫應(yīng)注意的事項(xiàng)。免疫學(xué)診斷：抗原抗體反應(yīng)的原理、特點(diǎn)及種類(凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng))，熟悉常用血清學(xué)試驗(yàn)(直接凝集、瓊脂擴(kuò)散、ELISA)的原理和結(jié)果判定；了解細(xì)胞免疫功能檢測(cè)方法。

第一節(jié)免疫學(xué)防治

應(yīng)用免疫制劑或免疫調(diào)節(jié)劑來(lái)調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能,預(yù)防和治療疾病

人工免疫：人為的給機(jī)體輸入抗原使機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答或直接輸入特異性抗體或免疫細(xì)胞等制品，使機(jī)體獲得特異性免疫力的方法。自動(dòng)免疫被動(dòng)免疫過(guò)繼免疫一、人工自動(dòng)免疫法：人工接種方法給機(jī)體輸入疫苗或類毒素等抗原性生物制品，刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答、從而預(yù)防感染的措施。疫苗——應(yīng)用微生物制備的具有免疫原性的物質(zhì)。包括滅活疫苗（死疫苗）和減毒活疫苗。類毒素——將細(xì)菌毒素用甲醛減毒后制備的具有免疫原性的物質(zhì)。如白喉、破傷風(fēng)類毒素。新型疫苗:亞單位疫苗、合成疫苗、基因工程疫苗比較點(diǎn)死疫苗活疫苗死疫苗與活疫苗的比較制劑特點(diǎn)死,強(qiáng)毒株活,無(wú)/弱毒株劑量較大較小次數(shù)2~3次1次保存易不易，4。C免疫效果較低較高數(shù)月~2年3~5年甚至更長(zhǎng)

常用的生物制品（一）

死傷寒、副傷寒菌苗、霍亂菌苗疫流腦菌苗、百日咳菌苗苗鉤體疫苗、狂犬病疫苗流乙腦疫苗、斑疹傷寒疫苗

類破傷風(fēng)類毒素、白喉類毒素毒肉毒類毒素、霍亂類毒素素

性質(zhì)種類名稱活卡介苗（BCG）、鼠疫菌苗疫炭疽菌苗、布氏菌苗、脊灰疫苗苗麻疹疫苗、流感疫苗人工自動(dòng)免疫10免疫學(xué)的臨床應(yīng)用外毒素、類毒素與抗毒素外毒素0.3%~0.4%甲醛類毒素免疫血清：血清蛋白（Ag）抗毒素（Ab）多次免疫馬（相應(yīng)細(xì)菌）外毒素中和雙重性預(yù)防接種應(yīng)注意的問(wèn)題對(duì)象途徑劑量次數(shù)間隔復(fù)種接種反應(yīng)禁忌癥按說(shuō)明書(shū)規(guī)定進(jìn)行注意生物制品是否變質(zhì)或失效疫苗的應(yīng)用1、抗感染2、抗腫瘤3、計(jì)劃生育4、防止免疫病理?yè)p傷

二、人工被動(dòng)免疫治療:給機(jī)體輸入含有特異性抗體的免疫血清，把現(xiàn)成的免疫力輸給機(jī)體的方法。是以抗體為基礎(chǔ)的免疫療法。見(jiàn)效快，持續(xù)短1、抗毒素：用于治療和緊急預(yù)防外毒素所致的疾病，如白喉抗毒素、破傷風(fēng)抗毒素。2、胎盤（丙種）球蛋白：用于被動(dòng)預(yù)防傳染病、治療丙種球蛋白缺乏癥。來(lái)源受限，有傳播疾病可能。

常用的生物制品（二）

其丙種球蛋白抗菌血清、抗病毒血清抗Rh球蛋白他特異性人免疫球蛋白性質(zhì)種類名稱抗破傷風(fēng)抗毒素白喉抗毒素毒肉毒抗毒素霍亂類毒素素人工被動(dòng)免疫

過(guò)繼淋巴細(xì)胞、轉(zhuǎn)移因子、腺素免疫劑淋巴因子、免疫核糖核酸免疫細(xì)菌脂多糖、多聚核苷酸

增強(qiáng)劑卡介苗、TNF、IFN等三、過(guò)繼療法：細(xì)胞為基礎(chǔ)的免疫治療1、骨髓移植（1）自體骨髓移植（2）異體骨髓移植（3）臍血干細(xì)胞移植2、免疫效應(yīng)細(xì)胞（1）同種淋巴細(xì)胞被動(dòng)轉(zhuǎn)移：注意配型（2）自體免疫效應(yīng)細(xì)胞過(guò)繼免疫療法LAK（lymphokineactivatedkillercells）細(xì)胞—

淋巴因子活化的殺傷細(xì)胞。是將外周血淋巴細(xì)胞在體外經(jīng)過(guò)IL-2培養(yǎng)后誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種的殺傷細(xì)胞，具有更強(qiáng)的殺瘤特性。其殺傷腫瘤細(xì)胞不需抗原致敏且無(wú)MHC限制性。主要為NK細(xì)胞TIL(tumorinfiltratinglymphocytes)細(xì)胞——腫瘤侵潤(rùn)淋巴細(xì)胞。是從實(shí)體瘤組織中分離得到的,經(jīng)體外IL-2培養(yǎng)后獲得比LAK細(xì)胞更強(qiáng)的殺傷活性。四、人工免疫的比較項(xiàng)目人工自動(dòng)人工被動(dòng)過(guò)繼免疫

輸入物質(zhì)抗原抗體致敏淋巴細(xì)胞出現(xiàn)時(shí)間1~4周后立即生效較快維持時(shí)間數(shù)月~數(shù)年2~3周不確定用途多用于預(yù)防多用于治療多用于治療或緊急預(yù)防第二節(jié)免疫學(xué)診斷

抗原抗體反應(yīng)的應(yīng)用原則1、測(cè)定抗原

（已知）

（未知）

抗體+相應(yīng)抗原（診斷血清）（被檢標(biāo)本）2、測(cè)定抗體

（已知）（未知）

抗原

+相應(yīng)抗體（診斷菌液）（被檢血清）——鑒定細(xì)菌、診斷疾病可見(jiàn)現(xiàn)象——診斷疾病、免疫力測(cè)定可見(jiàn)現(xiàn)象抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)1.特異性

疾病預(yù)防、診斷、治療的依據(jù)第二階段：非特異性，反應(yīng)慢需電解質(zhì)參與，表現(xiàn)為凝集、沉淀、細(xì)胞溶解等現(xiàn)象。4.反應(yīng)分兩個(gè)階段

第一階段：特異性結(jié)合，反應(yīng)快不需電解質(zhì)參與，無(wú)可見(jiàn)現(xiàn)象3.可見(jiàn)性：需要一定的分子比例2.可逆性

分子表面結(jié)合非共價(jià)鍵結(jié)合抗原抗體比例與其形成復(fù)合物大小的關(guān)系抗原過(guò)剩抗體過(guò)剩比例適當(dāng)凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)抗原抗體反應(yīng)的種類1.凝集反應(yīng)（agglutination）

顆粒性抗原(紅細(xì)胞、細(xì)菌、乳膠顆粒等)與抗體特異性結(jié)合,形成肉眼可見(jiàn)的凝集塊(1)直接凝集(directagglutination)

玻片凝集：查抗原—定性、簡(jiǎn)便、快速試管凝集：查抗體—定量（效價(jià)或滴度）

(2)間接凝集（indirectagglutination）

可溶性抗原包被在乳膠顆粒(乳膠凝集試驗(yàn))或紅細(xì)胞(間接血凝試驗(yàn))表面,與相應(yīng)抗體混合出現(xiàn)的凝集現(xiàn)象。乳膠顆粒紅細(xì)胞間接凝集直接凝集(3)間接血凝抑制試驗(yàn)抗原抗體致敏顆粒2.沉淀反應(yīng)（precipitation）(1)單向免疫擴(kuò)散（singleimmunodiffusion）沉淀環(huán)環(huán)直徑與抗原含量成正相關(guān)

可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，形成不溶性免疫復(fù)合物，出現(xiàn)不透明沉淀物。多在半固體瓊脂凝膠上進(jìn)行，形成白色沉淀?？贵w混于瓊脂凝膠中制板用途：檢測(cè)體液中各類Ig、補(bǔ)體各成分的濃度等(2)雙向免疫擴(kuò)散（douleimmunodiffusion）：常用于抗原或抗體的定性檢測(cè)、組成和兩種抗原相關(guān)性分析。一致部分一致不一致，有多種成分用途：鑒定、檢測(cè)血清Ig、AFP、HBsAg等

用標(biāo)記物標(biāo)記抗體或抗原進(jìn)行抗原抗體反應(yīng),借以提高免疫學(xué)診斷的敏感性3.免疫標(biāo)記技術(shù)免疫熒光檢測(cè)法放射免疫檢測(cè)法酶免疫檢測(cè)法直接熒光法間接熒光法免疫熒光技術(shù)

熒光素-Ag+相應(yīng)Ab→Ag*-Ab熒光顯微鏡下觀察熒光已知特異性抗體(Ab)吸附于固相載體，洗滌加被檢抗原(Ag)液，洗滌

加已知酶標(biāo)記特異性抗體

(Ab*)，洗滌

加酶的底物，經(jīng)酶催化產(chǎn)生有色產(chǎn)物終止反應(yīng)，酶標(biāo)儀測(cè)定雙抗夾心法（測(cè)抗原）（2）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzymelinkedimmuno-sorbentassay,ELISA)：酶-Ag+相應(yīng)Ab→Ag*-Ab，加酶底物,終止反應(yīng)，酶標(biāo)儀測(cè)定或肉眼觀察放射免疫檢測(cè)法（RIA）：同位素-Ag+相應(yīng)Ab→Ag*-Ab,測(cè)定放射性或顯影，靈敏度達(dá)pg水平。(3)同位素標(biāo)記技術(shù)細(xì)胞免疫功能檢測(cè)1.T細(xì)胞總數(shù)測(cè)定（1）E花環(huán)試驗(yàn)（2）T細(xì)胞特異性抗原檢測(cè)

(熒光抗體染色)2.T細(xì)胞亞群測(cè)定3.淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)1、有絲分裂原

植物血凝素（PHA）刀豆蛋白A（ConA）等2、（T淋巴細(xì)胞）轉(zhuǎn)化后形態(tài)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)未轉(zhuǎn)化淋巴細(xì)胞過(guò)渡型淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化后淋巴細(xì)胞TE花環(huán)試驗(yàn)（-）綿羊紅細(xì)胞（SRBC）E花環(huán)試驗(yàn)（+）正常值：0.60~0.80TTE花環(huán)試驗(yàn)體內(nèi)免疫細(xì)胞功能檢測(cè)一、體液免疫檢測(cè)1、I型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn)

（青霉素過(guò)敏反應(yīng)等）2、中和反應(yīng)皮膚試驗(yàn)

（毒