環(huán)氧乙烷滅菌作者介紹周榮青2004年進入醫(yī)療器械行業(yè)，從事質量管理、滅菌技術、產品注冊相關的工作。行業(yè)覆蓋無菌器械、有源儀器、IVD試劑。曾服務于Amsino醫(yī)療，GE醫(yī)療，雅培醫(yī)療，科森科技，希森美康等企業(yè)。環(huán)氧乙烷滅菌屬于化學滅菌法，是主流的滅菌方法之一。本文從滅菌原理、作用要素、適宜材料、確認方法、滅菌過程定義做簡單介紹。一、滅菌原理環(huán)氧乙烷與蛋白質分子上的巰基(-SH)、氨基(-NH2)、羥基(-OH)和羧基(-COOH)以及核酸分子上的亞氨基(-NH-)發(fā)生反應，導致蛋白質失去反應基團，阻礙了蛋白質的正常生化反應和新陳代謝，從而達到滅菌效果。二、滅菌作用要素影響環(huán)氧乙烷消毒作用的因素很多，但主要是溫度、相對濕度、時間、環(huán)氧乙烷濃度、壓力。1.溫度的影響在一定的范圍內，隨著溫度的升高，環(huán)氧乙烷的殺菌作用加強。但是，當溫度高到一定程度，環(huán)氧乙烷的殺菌作用發(fā)揮到最大，升高溫度，殺菌作用也不會增強。研究表明，在濕度≥35% RH的條件下，40℃以下升高溫度，環(huán)氧乙烷殺菌作用加強明顯，40℃~54℃之間，升高溫度，影響變小。54℃以上升高溫度，基本上不增強環(huán)氧乙烷的殺菌作用。2.濕度的影響環(huán)氧乙烷需要溶解于水才能向微生物穿透，而它與微生物蛋白質的烷基化反應更是需要適當?shù)乃鳛榻橘|。因此，當水份低于臨界水平（一般認為是濕度35%）時，環(huán)氧乙烷難以發(fā)揮滅菌作用。但是，如果水份太多，勢必造成環(huán)氧乙烷被稀釋和水解，從而減慢其滅菌過程。環(huán)氧乙烷的消毒作用與消毒物品的相對濕度是密切相關的。研究表明，用小容器對小物品進行滅菌時，以35~50%RH的濕度為宜。對大件物品，則60~80%RH的相對濕度為宜。3.時間的影響時間的影響總是伴隨著一定的濃度、溫度和濕度而言的。在一定的條件下，時間越長，環(huán)氧乙烷的滅菌效果越好。4.濃度的影響在一定濃度的范圍內,增加環(huán)氧乙烷濃度,可提高消毒作用,縮短消毒時間,但濃度增加到一定程度時,這種作用就會明顯降低。研究過程發(fā)現(xiàn)抵抗環(huán)氧乙烷最強的枯草桿菌黑色變種芽胞，在400mg/L的環(huán)氧乙烷濃度以下，濃度影響明顯，400mg/L濃度以上，濃度的效果下降。所以，滅菌的環(huán)氧乙烷濃度不能低于400mg/L。常用的環(huán)氧乙烷濃度是400mg/L~1000mg/L。5.壓力的影響隨著壓力的變化，滅菌蒸汽的穿透性會有變化，蒸氣壓不同滅菌效果不同，所以會有工藝中加藥后增加氮氣加入（分子運動加?。?。預真空度的大小決定殘留空氣的多少，而殘留空氣可直接影響環(huán)氧乙烷氣體、熱量、濕氣到達被滅菌物品的內部，所以滅菌過程前的預真空度對滅菌效果影響巨大。6.滅菌系統(tǒng)常見的滅菌系統(tǒng)圖片如下：三、適用于環(huán)氧乙烷滅菌的材料研究表明，絕大部分材料均適用于該滅菌方法。但下面這部分材料并不太適合該滅菌方法。聚丙烯酸酯（如：有機玻璃）經過多次滅菌后，材料的拉伸性能會降低。聚碳酸酯（PC）在多次滅菌后，材料會變脆、應力開裂，且拉伸性能降低。苯乙烯丙烯晴聚合物（SAN）多次滅菌后可能會變脆和降低拉伸性能。多次滅菌后表面可能會破裂和應力開裂。四、確認方法1.相對抗力確認的最主要目的，是要從微生物學角度證明過程的滅菌能力。因此，重要環(huán)節(jié)是制備和選擇挑戰(zhàn)器械的具體形式，一般三種形式：（a）以產品本身作為微生物挑戰(zhàn)的負載；（b）內部挑戰(zhàn)器械，將生物指示物布放在產品結構中最難滅菌的位置；（c）外部挑戰(zhàn)器械，將生物指示物布放于外箱上。應證明上述三者之間的相對抗性，結果應為內部過程挑戰(zhàn)器械≥產品本身負載，外部挑戰(zhàn)器械用亦可。第三方滅菌公司通常出于日常運營效率考慮，如在常規(guī)滅菌操作中，需要拆開客戶的產品包裝用于放置和取出內部挑戰(zhàn)器械，既增加了滅菌作業(yè)員的工作量，也造成客戶產品的潛在污染風險，使用外部挑戰(zhàn)器械變成了大家的選擇。當使用外部挑戰(zhàn)器械時，同時需證明內部挑戰(zhàn)器械和外部挑戰(zhàn)器械之間的抗性關系。1.1生物指示物的合適性證明（a）生物負載法對產品上的微生物總數(shù)和生物指示物的生物負載進行測試，比較數(shù)量和抗性。數(shù)量：比較生物指示物的孢子計數(shù)值，產品上的生物負載值；抗性：比較菌種間的抗性差異。環(huán)氧乙烷滅菌中用到的生物指示物是萎縮芽孢桿菌，其抗性強于絕大多數(shù)微生物，有充分的文獻記載。（b）無菌測試法在暴露于同一個短周期后，分別對產品、內部挑戰(zhàn)器械的無菌測試。產品應無菌，內部挑戰(zhàn)器械應出現(xiàn)部分陽性。1.2內部挑戰(zhàn)器械與外部挑戰(zhàn)器械的相對抗力在暴露于同一個短周期后，比較相對抗性即可。一般通過計算D值，D值越大，抗性越強。外部挑戰(zhàn)器械的D值應大于內部挑戰(zhàn)器械。應盡量避免出現(xiàn)外部挑戰(zhàn)器械抗性略弱于內部挑戰(zhàn)器械的情形。雖然標準認為等同，但大部分國家的監(jiān)管機構并不接受這種結果。2.環(huán)氧乙烷殘留產品滅菌后，會有一定程度的環(huán)氧乙烷和二氯乙醇的殘留。我國一次性使用醫(yī)療器械的環(huán)氧乙烷殘留量不得超過10μg/g。歐美國家采用mg/device的限度接受標準。殘留控制的最主要手段上加熱解析。確認時需要滅菌解析的條件。聚合材材具有較強的環(huán)氧乙烷吸附能力，解吸附時間在很大程度上取決所吸附氣體的量。氣體的分壓或濃度越高,吸附的量就越多,即Cp=SP.Cp為氣體在聚合材料中達到平衡的濃度(cm”/em”);p為氣體的分壓(kg/emZ);S為吸附系數(shù)。一般情況下S決定于分壓與溫度。聚合材料對某種氣體的吸附能力取決于聚合材料與氣體的極性關系,聚合材料高分子的柔韌性及其包裝的緊密度。下圖為加熱解析室。3.處理組對每種產品分別進行滅菌確認是不現(xiàn)實也不經濟的。常用的做法是將產品分成處理組或產品族，選擇組中的代表性產品進行確認。產品族是指結構和包裝相似的一系列產品。處理組是指可以用同一套滅菌工藝的產品或產品族。五、常見的過程定義1.預處理