恒溫水浴鍋技能訓練2組培常用儀器設備的使用恒溫水浴鍋技能目標1．清楚組織培養(yǎng)常用儀器設備的原理2．熟練使用組織培養(yǎng)常用的儀器設備訓練前準備組織培養(yǎng)實驗室；高壓滅菌鍋、超凈工作臺等常用儀器設備及相關試劑、用品等。1.精密pH計(PHS-3C型)的使用圖1-12精密pH計(PHS-3C型)(1)構造與工作原理精密pH圖1-12精密pH計(PHS-3C型)(2)操作步驟①開機前準備A.電極梗旋入電極插座，調(diào)節(jié)電極夾到適當位置；B.復合電極夾在電極夾上，拉下電極前端的電極套；C.用蒸水清洗電極，清洗后用濾紙吸干。②開機A.電源線插入電源插座；B.按下電源開關，電源接通后，預熱30min后進行標定。③標定儀器使用前先要標定。如果儀器連續(xù)使用則每天要標定1次。A.在測量電極插座處撥去短路插座；B.在測量電極插座處插上復合電極；C.把選擇開關旋鈕調(diào)到pH檔；D.調(diào)節(jié)溫度補償旋鈕，使旋鈕白線對準溶液溫度值；E.把斜率調(diào)節(jié)旋鈕順時針旋到底（即調(diào)到100%位置）；F.把清洗過的電極插入pH6.86的緩沖溶液中；G.調(diào)節(jié)定位調(diào)節(jié)旋，使儀器顯示讀數(shù)與該緩沖溶液當時溫定下降時的pH值相一致（如用混合磷酸定位溫度為10℃時，pH6.92）；H.用蒸餾水清洗過的電極，再插入pH4.00（或pH9.18）的標準溶液中，調(diào)節(jié)斜率旋鈕使儀器顯示讀數(shù)與該緩沖溶液中當時溫度下的PH值一致；I.重復（6）～（8）直至不用再調(diào)節(jié)定位或斜率兩個調(diào)節(jié)旋鈕為止，標定完成。④測量pH值經(jīng)標定過的儀器，即可用來測定被測溶液。被測溶液與標定溶液溫度相同與否，其測量步驟也有所不同。A.被測溶液與定位溶液溫度相同時，測量步驟如下：

用蒸餾水清洗電極頭部，再用被測溶液清洗1次；

把電極浸入被測溶液中，用玻璃棒攪拌溶液使溶液均勻，在顯示屏上讀出溶液的pH值。B.被測溶液和定位溶液溫度不相同時，在電極清洗后，要用溫度計測出被測溶液的溫度值，調(diào)節(jié)“溫度”調(diào)節(jié)旋鈕，使白線對準被測溶液的溫度值，然后再實際測定溶液的pH值。圖1-13超凈工作臺2.超凈工作臺的使用圖1-13超凈工作臺(1)構造與工作原理超凈工作臺有水平風和垂直風、單人和雙人之分，主要由三相電機、鼓風機、初過濾器和超過濾器、擋板、工作臺面等幾部分構成（圖2-10）。通過電機帶動，鼓風機將空氣通過特制的微孔泡沫塑料片層疊合組成的“超級濾清器”后吹送出來，形成連續(xù)不斷的無塵無菌的超凈空氣層流(除去了大于0.3μm的塵埃、真菌和幼苗孢子等)，在工作臺面制造無菌區(qū)，這足以防止附近空氣可能襲擾而引起的污染，20～30m/min的風速也不會妨礙采用酒精燈對器械的灼燒滅菌。(2)操作步驟①接通電源；②打開臺內(nèi)紫外燈殺菌30min；③30min后關紫外燈，打開風機20min；④打開照明燈，準備接種。(3)超凈工作臺使用時的注意事項①新安裝的或長期未使用的超凈工作臺，使用前必須對超凈工作臺和周圍環(huán)境使用超凈真空吸塵器或不產(chǎn)生纖維的工具，認真進行清潔工作。②工作臺面上不要存放不必要的物品，以保持工作區(qū)內(nèi)的潔凈氣流，不受干擾。③禁止在工作臺面上記錄，工作時應須盡量避免作明顯擾亂氣流的動作。④定期(一般為2個月)用熱球式風速儀測量工作區(qū)風速，如發(fā)現(xiàn)不符合技術要求，則可調(diào)大風機的供電電壓。⑤在工作臺右側有5A外接電源插座，可供使用。圖1-14便攜式壓力滅菌鍋3.便攜式壓力滅菌鍋的使用圖1-14便攜式壓力滅菌鍋(1)構造與工作原理便攜式壓力滅菌器由鍋體、內(nèi)鍋、電熱管、擱簾、鍋蓋、壓力表、橡膠密封墊、放氣閥、安全閥等構成(圖2-11)。其工作原理是利用所產(chǎn)生的高壓濕熱水蒸汽(溫度為121～123℃，壓力為0.10～0.15Mpa)(2)操作步驟①加水裝鍋打開鍋蓋，加入清水，至超過鍋底擱簾1cm左右，然后放上內(nèi)鍋，裝入滅菌物物品，蓋上鍋蓋，對角線擰緊螺栓。②通電升壓，排冷空氣接通電源，使滅菌器開始工作。當壓力0.05MPa時，打開放氣閥，排放冷氣，待指針回零后(根據(jù)具體情況，可反復2～3次排放冷氣)，關閉放氣閥，使滅菌器升壓。③保壓當壓力達到0.10MPa時，開始計時，使鍋內(nèi)蒸汽壓力保持0.10～0.15MPa的范圍，維持15～30min的滅菌時間。④降壓排汽：滅菌結束后斷開電源，讓鍋內(nèi)壓力自然下降。當指針歸零后打開放汽閥，排放余汽。⑤出鍋冷卻：當壓力表指針為零時，打開放氣閥，手戴隔熱手套，開鍋取瓶。用周轉(zhuǎn)筐運至接種室或冷卻室，待培養(yǎng)基冷卻凝固后方可使用。(3)使用和維護時的注意事項①裝鍋時，不要裝得太滿，并且嚴禁堵塞安全閥的出氣孔，必須留出空位保證其空氣暢通。②滅菌液體時，應采用耐熱玻璃瓶灌裝，并且液體以不超過3/4體積為好，切勿使用未打孔的橡膠或軟木塞。③長期使用壓力鍋，若壓力表的指示不正確或不能回復零位，應及時檢修。平時注意定期與標準壓力表相對照，若不正常，應換上新表。④平時應將設備保持清潔和干燥，方可延長使用年限，橡膠密封墊使用日久會老化，應定期更換。⑤安全閥應定期檢查其可靠性，工作壓力超過0.165兆帕時需要更換合格的安全閥。4.HZS-H超級恒溫水浴振蕩器的使用(1)構造與工作原理恒溫水浴振蕩器主要由水浴槽和控制面板兩部分構成(圖2-12)。水浴槽上有密封蓋，槽內(nèi)裝水；控制面板可設定溫度和轉(zhuǎn)速，根據(jù)培養(yǎng)材料的不同，設定相應的水溫和轉(zhuǎn)速為，從而實現(xiàn)離體材料的液體培養(yǎng)。圖1-15恒溫水浴振蕩器(2)操作步驟圖1-15恒溫水浴振蕩器①加水：檢查儀器背面的放水膠堵是否安好在水箱內(nèi)加不少于20立升的蒸餾水；②接通電源：將三芯插頭插入電源插座．并將機器背面的“斷路器”置“通”的位置；③開啟右下角“加熱”開關．此時儀表應能顯示出箱內(nèi)的溫度值。④溫度設定：按“參數(shù)選擇”健至儀表顯示設定值（表盤右側“設定”處發(fā)光管亮）時，用鑼絲刀調(diào)節(jié)“溫度設定”鈕至所需的溫度，設定過程即告結束，儀器開始升溫。⑤振蕩調(diào)節(jié)：將”速度調(diào)節(jié)”扭至最小位置，開啟右下角旋轉(zhuǎn)開關．儀器開始振蕩。按下“參數(shù)選擇”健至儀表顯示“轉(zhuǎn)速”（表盤上“轉(zhuǎn)速”發(fā)光管亮）時，調(diào)節(jié)“速度調(diào)節(jié)”鈕，使儀器達到所需要的轉(zhuǎn)速。⑥儀表參數(shù)顯示的順序是：每按一次“參數(shù)選擇”鍵，儀表按“溫度－轉(zhuǎn)速－設定－溫度”的順序周而復始的變化。不論儀表顯示哪一個參數(shù)，控溫的調(diào)節(jié)系統(tǒng)都在正常進行。(3)設備使用與維護時的注意事項①本儀器應使用蒸餾水，長期不用時應將水放掉。水箱內(nèi)如使用自來水，則要經(jīng)常清潔箱內(nèi)的水垢。②本儀器表面應經(jīng)常擦拭，以保持清潔。操作時應避開議表控制箱的側面，以免將水滴入機內(nèi)，損壞設備。③儀器必須先加水后通電。④開機時“速度調(diào)節(jié)”應調(diào)至最小位置。⑤箱內(nèi)要及時補充水量，以免燒干損壞設備。5.電子分析天平的使用圖1-16電子分析天平圖1-16電子分析天平日本島津進口電子分析天平主要由天平機體、稱重艙、天平盤、鍵板（包括4個鍵）、液晶顯示屏等構成(圖2-13)。國產(chǎn)分析天平與此類似。(2)操作步驟①調(diào)平天平放穩(wěn)后，轉(zhuǎn)動腳螺旋，使水平氣泡在水平指示的紅環(huán)內(nèi)；②自檢在空載下，天平內(nèi)部進行自檢，顯示屏上相繼顯示CHE3→0，CAL4LINKWord.Document.8"C:\\MyDocuments\\2002－2003學年第二學期：植物組織培養(yǎng)幻燈片\\組織培養(yǎng)實踐指導：2003年4月7日\\組織培養(yǎng)實習指導2003年4月.doc""OLE_LINK1"\a\r→0，CAL，END，CAL，OFF；③全顯示按“ON／OFF”鍵，液晶屏進入全顯示態(tài)；④這時再按“ON／OFF’鍵，液晶屏進入預熱狀態(tài)，有綠色指示燈顯示。平時可放置在這個狀態(tài)。當再啟動“ON／OFF”鍵，又進入全顯示狀態(tài)；⑤清零按Tare鍵，液晶屏顯示“0”⑥去皮重清零將硫酸紙放在天平盤上，再按Tare鍵清零，液晶屏再顯示“0”⑦稱樣品將藥品放在硫酸紙上，至液晶屏左側穩(wěn)定標志“→”出現(xiàn)，讀數(shù)即為樣品重量。小數(shù)點前為克單位。如1.234即為1.234克(3)設備使用與維護時的注意事項①天平為精密儀器，使用時雙手、樣品、容器及硫酸紙一定要潔凈干燥，切勿將藥品直接放到天平盤上。②不要把水、金屬弄到天平盤上。③天平嚴禁靠近磁性物體。④天平使用時，不要撞擊天平所在桌面，要關上附近的窗戶，以防氣流影響稱重。⑤天平必須進入預熱態(tài)方可斷電。技能訓練時的注意事項1.消除儀器設備的安全隱患，培養(yǎng)學生安全意識，要求學生正確操作和安全使用儀器設備。2.受實驗室空間、儀器設備臺數(shù)和教學時間的限制，應分組交替訓練。訓練與考核建議1．教師集中介紹儀器設備的構造、原理、使用方法及注意事項后，學生分組交替練習，教師加強組織與協(xié)調(diào)。2．技能訓練側重儀器設備和器械用具的使用。3．考核旨在提高組培常用儀器設備的熟練使用程度，為后續(xù)的組培操作奠定基礎?？己酥攸c側重操作的規(guī)范性和熟練程度。考