ICS

87.040G51 T/GDTL

抗菌、抗病毒涂料2020-06-28

發(fā)布 2020-08-01

實施

T/GDTL

011—2020本標準依據(jù)

《團體標準化

第1部份：良好行為指南》和

1.1-2009《標準化工作導(dǎo)則

第1部分：標準的結(jié)構(gòu)和編寫》的要求和格式起草。本標準由廣東省涂料行業(yè)協(xié)會提出和歸口。本標準負責(zé)起草單位：廣東省涂料行業(yè)協(xié)會、廣東省微生物研究所本標準參加起草單位：廣東維拓化工股份有限公司、廣東巴德士化工有限公司、立邦涂料（中國）公司。標準主要起草人：陳金愛、黎玉蓮、譚毅、嚴修才、熊紹泊、區(qū)英強、鄒建明、田太陽、黎呈鋒、麥宗毅、黃榮軍、蘇錦明、趙文海、楊孝國、李偉、閆樹德、陳耀祖、劉永龍。本標準首次發(fā)布。T/GDTL

011—20201

范圍價、檢驗規(guī)則、標識和包裝等要求。本標準適用于具有抗菌、抗病毒功能的各種涂料產(chǎn)品。2

規(guī)范性引用文件凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T

漆膜耐霉菌性測定法GB/T

色漆、清漆和色漆與清漆用原材料

取樣GB/T

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T

數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判定GB/T

涂料試樣狀態(tài)調(diào)節(jié)和試驗的溫濕度GB/T

涂料產(chǎn)品包裝標志GB/T

13491

涂料產(chǎn)品包裝通則GB

15258

化學(xué)品安全標簽編寫規(guī)定GB

19258

紫外線殺菌燈GB

19489

實驗室

生物安全通用要求GB/T

抗菌涂料（漆膜）抗菌性測定法和抗菌效果ISO

18184:2019

抗病毒紡織品的測試3

術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1抑菌

抑制細菌、真菌、霉菌等微生物的生長繁殖的作用叫做抑菌。[GB/T

21866-2008,術(shù)語和定義

3.2殺菌

sterilization殺死細菌、真菌、霉菌等微生物營養(yǎng)體和繁殖體的作用叫做殺菌。[GB/T

21866-2008,術(shù)語和定義

3.3抗菌

antibacterial抑菌和殺菌作用的總稱為抗菌。99%95%95%90%T/GDTL

011—2020[GB/T

21866-2008,術(shù)語和定義

3.4病毒

virus只含一種核酸（DNA

或

）、結(jié)構(gòu)區(qū)別與其它有細胞結(jié)構(gòu)的生物（原核及真核生物），營專性細胞內(nèi)寄生，必須在宿主內(nèi)才能生長繁殖的一類特定的微生物。[ISO

術(shù)語和定義

3.5病毒感染滴度

在單位體積的細胞溶解產(chǎn)物或溶液中具有感染性的病毒顆粒數(shù)目。[ISO

18184:2019,術(shù)語和定義

3.6空蝕斑形成單位

PFU

forming

units表示單位體積中感染病毒的濃度單位。[ISO

18184:2019,術(shù)語和定義

3.10]3.7病毒滅活率

經(jīng)過抗病毒處理的樣品與未經(jīng)抗病毒處理的樣品在接種病毒培養(yǎng)后病毒感染滴度差值的百分率3.8抗菌涂料

antibacterialcoating具有抗菌作用的涂料。[GB/T

21866-2008,術(shù)語和定義

3.9抗病毒涂料

具有抗病毒功能的涂料。4

產(chǎn)品分類Ⅱ級。5

要求5.1

抗菌要求產(chǎn)品的抗菌性能應(yīng)符合表

1

的要求。表

表

1

抗菌性能要求

2hH3N290%90%EV71H3N285%85%EV71T/GDTL

011—2020表

1

表

1

抗菌性能要求

(續(xù))產(chǎn)品的抗病毒性能應(yīng)符合表

2

的要求。表

2

表

2

抗病毒性能要求當產(chǎn)品同時具有抗菌和抗病毒功能時，應(yīng)符合表

1

和表

2

的要求。5.4

性能及安全要求5.4.1

標準要求。5.4.2

3

的要求。5.4.3

體造成危害或?qū)Νh(huán)境造成二次污染。

a[(3/1)ECMI/MI(3/1)]15

500

500

(MI)200

(DCOIT)500

750

IPBC1500

ZPT1500

(3-500

50

T/GDTL

011—20205.4.4

用完的抗菌、抗病毒涂料不得在現(xiàn)場處理，避免造成環(huán)境污染。表

3

表

3

生物殺傷劑使用量6.1

實驗室及一般要求6.1.1

抗菌、抗病毒試驗的實驗室應(yīng)符合

GB

19489

規(guī)定的生物安全管理和設(shè)施條件要求。6.1.2

應(yīng)配備試驗人員的防護服、口罩、帽子等防護用品，并由經(jīng)過培訓(xùn)的人員進行試驗。6.1.3

除非另有規(guī)定，在試驗中僅使用確認為分析純的試劑，所用水應(yīng)為符合

水。6.2

抗細菌性能按

GB/T

21866-2008

的規(guī)定進行。6.3

抗細菌耐久性能按

GB/T

21866-2008

的規(guī)定進行。6.4

抗霉菌性能按

GB/T

的規(guī)定進行。6.5

抗霉菌耐久性性能在進行抗霉菌耐久性試驗前，試板應(yīng)進行如下預(yù)處理。試板完全浸泡在盛有

25℃水的玻璃水槽或

h

h。浸泡后試板涂膜表面不應(yīng)有起泡、脫落、開裂等現(xiàn)象。取出后采用

1

支

、波長為

253.7

nm

的符合GB

19258

的紫外燈，紫外燈距離試板

0.8

m～1.0

照射

100

h，經(jīng)預(yù)處理的試板抗霉菌耐久性性能按GB/T

的規(guī)定進行試驗。6.6

抗病毒性能T/GDTL

011—2020按附錄

A

的規(guī)定進行。6.7

抗病毒耐久性能按附錄

A

的規(guī)定進行。7

檢驗規(guī)則7.1

檢驗分類產(chǎn)品檢驗分出廠檢驗和型式檢驗。7.1.1

出廠檢驗項目按相關(guān)涂料產(chǎn)品執(zhí)行標準中規(guī)定的出廠檢驗項目進行。7.1.2

型式檢驗項目包括本標準中抗菌、抗病毒或兼具抗菌和抗病毒功能所對應(yīng)的全部技術(shù)要求。7.1.3

在正常生產(chǎn)情況下，每年至少進行一次型式檢驗。7.1.4

在下列情況之一時，應(yīng)隨時進行型式檢驗：——新產(chǎn)品最初定型時；——生產(chǎn)配方、工藝及原材料有較大改變時；——停產(chǎn)三個月后又恢復(fù)生產(chǎn)時。7.2

檢驗結(jié)果的判定7.2.1

檢驗結(jié)果的判定按

8170

中修約值比較法進行。7.2.2

1

級時，該抗菌涂料應(yīng)判定為Ⅱ級。7.2.3

級時，該抗病毒涂料應(yīng)判定為Ⅱ級。7.2.4

性能結(jié)果或抗病毒性能結(jié)果中有

1

項僅達到Ⅱ級時，該抗菌抗病毒涂料應(yīng)判定為Ⅱ級。7.2.5

應(yīng)檢項目的檢驗結(jié)果均達到本標準要求時，該試驗樣品為符合本標準要求。8

標志、包裝和貯存8.1

標志8.1.1

按

9750

的規(guī)定進行。8.1.2

產(chǎn)品中使用的生物殺傷劑應(yīng)按

GB

15258

的規(guī)定進行有危害性標識。8.1.3

標志或說明書應(yīng)明確施工狀態(tài)下的施工配比、施工要求。8.1.4

活率以及耐久性技術(shù)指標。8.1.5

按本標準檢驗合格的產(chǎn)品可在包裝標志上明示。8.2

包裝按

13491

包裝要求的規(guī)定進行。T/GDTL

011—20208.3

貯存存條件下，自產(chǎn)品生產(chǎn)之日起，包裝完好的產(chǎn)品保質(zhì)期應(yīng)不少于

6

個月,并在包裝標志上明示。T/GDTL

011—2020附錄

A（規(guī)范性附錄）抗病毒涂料的試驗方法A.1

主要設(shè)備A.1.1

高壓滅菌鍋：溫度

121℃±2℃，壓力

103kPa±5kPa。A.1.2

干熱滅菌箱：溫度

160

℃±2

℃和

180℃℃。A.1.3

天平：,精度

0.01g；精度

0.1mg。A.1.4

水浴鍋：溫度

37

℃±2

℃，50

℃±2

℃或

℃

℃。A.1.5

CO2培養(yǎng)箱：5%

2、溫度

34

℃

℃和

37

℃±2

℃。A.1.6

冰箱：溫度

2

℃～8

℃、-20

℃

℃和

℃±2

℃。A.1.7

PH

計：配玻璃電極。A.1.8

離心機：溫度

4

℃±2

℃，

g。A.1.9

培養(yǎng)箱：保持溫度

25

℃±2

℃,34

℃±2

℃或

37

℃

℃.A.1.10

玻璃和/或塑料吸管：50

mL±0.5

mL；25

mL±0.25

mL；10

；5

mL。微量吸管：刻度小于體積的

。A.1.11

過濾膜：孔徑

μm。A.1.12

倒置顯微鏡A.1.13

液氮罐A.1.14

培養(yǎng)容器A.1.15

A.1.16

6

試驗的

孔板。A.1.17

微生物試驗用的渦旋器、鑷子、量筒、燒瓶、試管、燒杯、離心管等。A.2

主要試劑及材料列配方制備試劑，也可以按照所操作的病毒及宿主的情況自行購買適用的等效商品化試劑。A.2.1

符合

GB/T

6682

規(guī)定的三級水。A.2.2

最低必須培養(yǎng)基：

培養(yǎng)基。A.2.3

7.5%碳酸氫鈉溶液75

g

碳酸氫鈉,加水

1000

。A.2.4

福爾馬林溶液37%甲醛溶液

mL,加水

900

mL。A.2.5

亞甲藍溶液，用于細胞染色。水

mL，亞甲藍

0.375

g,

1

mol/L

氫氧化鈉溶液

6.25

溶解并混合均勻。A.2.6

滅活胎牛血清：A.2.6.1

將滅活胎牛血清置于溫度低于℃的冰箱保存，使用前將冰凍的滅活胎牛血清置于

37℃水浴中直至解凍。A.2.7.1

水

800mL,硫酸卡那霉素

60最低必需（eagle

s）培養(yǎng)基

9.53g。T/GDTL

011—2020A.2.7.1

水

800mL,硫酸卡那霉素

60最低必需（eagle

s）培養(yǎng)基

9.53g。A.2.6.2

如果需要自行進行胎牛血清滅活，應(yīng)遵守水浴調(diào)至

℃，30

至滅活原則。A.2.7

生長培養(yǎng)基,A.2.7.2

溶解并混合均勻再加水至

,然后添加

碳酸氫鈉溶液和

熱滅活胎牛血清。A.2.8

細胞培養(yǎng)維持液（維持介質(zhì)）水

800mL,硫酸卡那霉素

mg,最低必需（EMEM）培養(yǎng)基

g，溶解并混合均勻加水至

，混合液使用孔徑

μm

過濾膜過濾,然后添加

15mL

的

碳酸氫鈉溶液。A.2.9

雙倍濃度維持培養(yǎng)基水

800mL,硫酸卡那霉素

mg,最低必需培養(yǎng)基

g,溶解并混合均勻加水至

mL，混合液使用孔徑

過濾膜過濾。A.2.10 mol/L

磷酸緩沖液

PBS（-）氯化鈉

8g,氯化鉀

0.2g,十二水合磷酸氫二鈉

g,磷酸二氫鉀

0.2g,溶解并混合均勻加水定容至1000。在高壓鍋滅菌，溫度（121±2）℃，壓力（103±5）kPa

保持

15。A.2.11

牛胰蛋白酶

溶液（-）A.2.11.1

取

磷酸緩沖液

（-）

2

h，混合液使用孔徑

μm

過濾膜過濾，過濾后未使用的分裝在試管保存于-A.2.11.2

磷酸緩沖液

（-）

A.2.11.1）保存在-

37℃水浴中直至解凍。A.2.12

胰蛋白酶

溶液0.01mol/L

磷酸緩沖液

（-）1000mL

2.5g

g

B2，EDTA，溶解充分并混合?；旌弦菏褂每讖?/p>

過濾膜過濾,保存在-置于

A.2.13

DEAE-葡聚糖溶液DEAE-葡聚糖

20g

加水

mL

μm

過濾膜過濾。A.2.14

瓊脂培養(yǎng)基用于蝕斑試驗，在使用前混合

A

液和

B

液。A.2.14.1

A

溶液A.2.14.1.1雙倍濃度維持培養(yǎng)基

DEAE-葡聚糖溶液

mL;

7.5%碳酸氫鈉溶液

mL

混合均勻。A.2.14.1.2

3

牛胰蛋白酶

PBS

溶液（-）。上述

或

A.2.14.1.2

A.2.14.2

B

溶液細胞培養(yǎng)瓊脂

加水

mL,

kPa，15

min。上述溶液在水浴中保持～60)℃至使用。A.2.14.3 使用前等比混合

A

B

溶液（體積比

1:1）。A.2.15

SCDLP

培養(yǎng)基水

mL，酪蛋白胨

g，大豆蛋白胨

，氯化鈉

，磷酸氫二鉀

，葡萄糖

2.5g，卵磷脂

鈉或鹽酸調(diào)節(jié)溶液至

PH

為

7.0±0.2

121℃，壓力

，min。A.3

試驗準備H3N2EV

71MDCK

Vero

EMEM

EMEM

將低溫儲存的宿主細胞置

37

75cm

細胞培養(yǎng)瓶里加入將低溫儲存的宿主細胞置

37

75cm

細胞培養(yǎng)瓶里加入

20

細胞生長培A.3.1從低溫保存中復(fù)蘇宿主細胞2養(yǎng)基（A.2.7），再加入解凍的宿主細胞。將培養(yǎng)瓶置于

CO2培養(yǎng)箱中，37℃培養(yǎng)

24

h。使用顯微鏡觀察細胞，如證實增殖再進行下一步，如沒有增殖則繼續(xù)培養(yǎng)。A.3.2

宿主細胞的傳代培養(yǎng)A.3.2.1

確認

A.3.1.1

宿主細胞生長到

以上后，棄掉培養(yǎng)瓶舊培養(yǎng)基,添加

5

mLPBS

溶液（A.2.11）

2

A.2.11

CO2

375±1）

5

mL

A.2.8散細胞，此過程應(yīng)避免細胞損傷。A.3.2.2

1

A.3.2.1A.2.820

mL。將培養(yǎng)瓶置于

CO2培養(yǎng)箱中，37

℃培養(yǎng)，視細胞生長情況可傳代或換液。A.3.3

細胞培養(yǎng)作感染病毒滴定度測定

6

孔板,

CO2培養(yǎng)箱中，在

℃中培養(yǎng)

18h～，待細胞長滿后即可進行下一步試驗。A.3.4

測試病毒的準備A.3.4.1

病毒株和宿主細胞本標準使用的病毒、宿主細胞和介質(zhì)見表

A.1.依據(jù)使用要求，可增加選用其他商定病毒作檢驗病毒。表

A.1

本標準使用的病毒、宿主細胞和介質(zhì)表

A.1

本標準使用的病毒、宿主細胞和介質(zhì)A.2.8

或

50/mL)～

或

50/mL)

1

A.3.4.2.1

移除已培養(yǎng)好單層細胞的培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，使用新鮮的細胞維持培養(yǎng)基（A.2.8）清洗培養(yǎng)細胞表面

2

次。A.3.4.2.2

373 4稀釋后的流感病毒置培養(yǎng)好的細胞表面（A3.4.2.1），并將其置于

34℃中

CO2培養(yǎng)箱中保持

1

h毒吸附細胞，之后在細胞瓶內(nèi)加入含

30

μL

胰蛋白酶（）的維持培養(yǎng)基（A.2.8）

mL胞瓶置于

2培養(yǎng)箱中，在

34

℃中培養(yǎng)

1

d～3

d

使病毒增殖。A.3.4.2.3

4

℃，1000

,離心

15

。離心后取上清液，即為流感病毒混懸液。分裝后存儲在℃低溫冰箱中。A.3.4.2.4

測定病毒滴度是否大于10

PFU/mL(或50/mL),如滴度小于

或TCID50/mL)，則從A.3.4.2.4

測定病毒滴度是否大于10

PFU/mL(或50/mL),如滴度小于

或TCID50/mL)，則從A.2.8

PFU/mL(或

50/mL)～

或

50/mL)

1

mLA.3.4.3.4

測定病毒滴度是否大于

10

或

50/mL),

10

PFU/mL(或

TCID/mL)，則7 737檢測用的病毒懸液，若不立即使用，可暫存于2℃～8℃冰箱。A.3.4.3

EV71

病毒A.3.4.3.1

移除已培養(yǎng)好單層細胞的培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，使用新鮮的細胞維持培養(yǎng)基（A.2.8）清洗培養(yǎng)細胞表面

2

次。A.3.4.3.2

373 4稀釋后的流感病毒至培養(yǎng)好的細胞表面（A3.4.2.1），并將其置于

37℃中

CO2培養(yǎng)箱中保持

1

hA.2.8

CO2

37℃中培養(yǎng)

1

d～3d

使病毒增殖。A.3.4.3.3

EV71

A.3.4.2.2

4℃，1000

離心

15

min。離心后取上清液，即為

病毒混懸液。分裝后存儲在℃低溫冰箱中。7 7從頭開始重新制備。使用前，將冷凍的病毒放入

37℃水浴，使其迅速解凍。解凍后稀釋至合適滴度，即為檢測用的病毒懸液，若不立即使用，可暫存于

2℃～8℃冰箱。A.3.5

試板制備A.3.5.1

產(chǎn)品按

GB/T

3186

的規(guī)定進行取樣，也可按商定的方法取樣。取樣量根據(jù)試驗需要而定。A.3.5.2

按產(chǎn)品明示的配比或稀釋比例，按規(guī)定的配比或稀釋攪勻后制板，如產(chǎn)品未明示稀釋比例時，攪拌均勻后制板。若產(chǎn)品明示了稀釋比例范圍時，應(yīng)取其中間值。A.3.5.3

除另有商定外，制備抗病毒試板（C

樣）底材為不銹鋼片、馬口鐵片或鋁片，抗病毒涂料施涂

污等。以木材為底材的試板，要求漆膜覆蓋整塊試板。試板涂刷后按

規(guī)定的條件干燥

7d。試板尺寸為

50mm。A.3.5.4

按

A.3.5.3

B

樣）,B

物質(zhì)和必要溶劑，不含任何抗病毒劑、抗菌劑、防霉劑、防腐劑等添加助劑物質(zhì)。試板尺寸為

50mm。

A.3.5.5

在試驗前所有試板均需要進行滅菌處理，一般可采用紫外照射

30

的方式。A.4

試驗程序A.4.1

預(yù)試驗抑制效果。A.4.1.1

細胞毒性試驗104～6）×10

4～6）×10

PFU/mL（或

50

9

25℃放置

min用維持培養(yǎng)基將病毒懸液濃度調(diào)整在1×10

或～5×10

PFU/mL(或之間取空白對照試板（B樣）及抗病毒試板（C樣）各3片，放在培養(yǎng)皿中，加入10

mLSCDLP肉湯或其他板并進行培養(yǎng)觀察，觀察細胞有無病變。若未觀察到細胞毒性，繼續(xù)下一步驟。若觀察到有細胞毒性，則需酌情更改、修改培養(yǎng)基配方或增加中和劑的使用量。若采用10

中和劑回收洗脫有困難，則可增加中和劑溶液用量。若中和劑的配方修改、更改或增加，則在后續(xù)試驗中應(yīng)使用相同的洗脫液或中和劑。A.4.1.2

驗證細胞對病毒的敏感性和洗脫液終止殺病毒的性能A.4.1.2.1

試驗步驟B

C

3

mLSCDLP

肉湯或其

5

mLSCDLP

3

5

μL

制備好的濃度4測試陰性對照、空白對照試板（B

樣）及抗病毒試板（C

樣）的洗脫回收液中病毒的滴度。A.4.1.2.2

試驗有效性的條件BC滿足式（1）和式（2）的要求：|Sn

-

Su|

≤

……………(1)|Sn

-

St|

≤

……………(2)其中：Sn—3個SCDLP肉湯培養(yǎng)基陰性對照回收的平均病毒滴度對數(shù)值，單位為（50）；Su—3個空白對照試板（B樣）回收的平均病毒滴度對數(shù)值，單位為PFU/mL（50）；St—3個抗病毒試板（C樣）回收的平均病毒滴度對數(shù)值，單位為PFU/mL（50/mL）。若以上結(jié)果超過0.5，中和劑的配方應(yīng)該酌情修改或更改，或增加中和劑的量。若中和劑的配方修改或更改，或增加用量，則在正式試驗中應(yīng)用使用相同的中和劑。A.4.2

正式試驗A.4.2.1

試樣準備B樣）6C樣）3面朝上。A.4.2.2

試樣接種按照檢測病毒的制備步驟，制備試驗用病毒。試驗前，將冷凍的病毒置37℃水浴，使其迅速融化。7 7作接種液，若接種液不立即使用，可暫存于4℃冰箱。11T/GDTL

011—2020用移液管吸取

mL40

mm×40mm薄膜蓋于接種好的病毒蓋上薄膜后，蓋上培養(yǎng)皿蓋。

mL

A.4.2.3

接種后試樣的培養(yǎng)除特別說明外，接種后的試板，在（）℃、相對濕度不小于的條件下培養(yǎng)2

h。各方也可以協(xié)商采用不超過24

h的其它培養(yǎng)時間，并在報告中注明。A.4.2.4

病毒的洗脫回收A.4.2.4.1

接種后，立即對已接種的

3

片空白對照試板（B

樣）進行病毒回收。在各培養(yǎng)皿中加入

mLSCDLP

度測定。測定方法見

?？梢允褂闷渌幕厥障疵摲椒??；厥辗椒ǖ淖兏赡軙绊懰鶞y得的抗病毒活性結(jié)果，應(yīng)充分證實其有效性A.4.2.4.2

A.4.2.4.1

處理

3

B

3

C

然后立即對試樣上的病毒滴度進行測定。A.4.3

感染病毒滴度測試（蝕斑法）A.4.3.1

操作步驟A.4.3.1.1

在

6

孔細胞培養(yǎng)板的每個孔內(nèi)培養(yǎng)單層細胞（A.3.3），并用顯微鏡觀察細胞的生長狀態(tài)。當觀察到長滿的單層細胞時，棄掉舊的培養(yǎng)基。使用細胞維持培養(yǎng)基（A.2.8）清洗細胞表面

2

次。A.4.3.1.2

洗脫液原液及每個梯度的稀釋液均接種

2

孔用于測試，接種量

。如果原液接種到第一個

2

2

孔接種

2

A.2.8陰性對照。A.4.3.1.3

將接種后的

6

孔板置于表

A.2

所列溫度的

CO2

1h隔～A.2.8）加到

6

孔板上，清洗表面，然后棄掉多余的培養(yǎng)基。A.4.3.1.4

加入

A.2.14

左右讓瓊脂培養(yǎng)基凝固。待瓊脂培養(yǎng)基凝固后，倒置細胞板，放入

5%

2培養(yǎng)箱中，流感病毒于

34℃培養(yǎng)

4d～7d，腸道病毒于

℃培養(yǎng)

2

d～3

d

A.2.4）

1h

3mL

min

對細胞染色。染色完畢，棄掉亞甲基藍溶液（A.2.5），用水沖洗一下。確認細胞染色。計算斑的數(shù)量(白色斑點)。A.4.3.1.5

計數(shù)蝕斑的數(shù)量（白色斑點），取兩個孔的平均值。蝕斑試驗示例見圖

A.1。12EV713437

1/101/1001/10001/10nC1C2C3C4CNT/GDTL

011—2020圖

A.1

蝕斑試驗示例表

A.2

CO2表

A.2

CO2培養(yǎng)箱條件A.4.3.2.1

60

個以內(nèi),60

個時，空斑的邊界將不清晰）?？瞻叩臄?shù)量以每個稀釋度上兩個數(shù)據(jù)的平均值計。A.4.3.2.2

對